发酵工程综合实验报告

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发酵工程实习报告

发酵工程实习报告

发酵工程实习报告实习报告:发酵工程实习一、实习目的和意义发酵工程是生物工程中非常重要的一个分支,主要研究微生物在发酵过程中的生长、代谢和产物生成等问题,广泛应用于食品、医药、生物能源等领域。

通过实习,旨在让学生深入了解发酵工程的基本理论及其实际应用,提高学生的实践能力和创新能力。

二、实习内容和过程在本次发酵工程实习中,我们主要开展了以下几方面的工作:1.发酵基础知识学习:通过课堂教学和讲座,学习了发酵工程的基本原理,包括微生物的生长动力学、发酵过程中的糖代谢和产物生成等内容。

同时,还学习了发酵反应器的结构和工艺参数的选择等基本知识。

2.实验操作技能培训:通过实际操作,学习了发酵过程中的一些基本操作技能,如细菌的培养与传代、发酵反应器的搭建与运行等。

通过反复演练,我们掌握了操作流程,并提高了实验技能的熟练度。

3.发酵过程监测与控制:学习了发酵过程中的微生物生长曲线的绘制和计算,并了解了发酵过程中的气体产量和溶氧量的监测与控制方法。

通过实验操作,我们了解了不同工艺参数对发酵过程的影响,以及如何通过调控工艺参数来优化发酵过程。

4.产物提取和分析:学习了发酵产物的提取和分离技术,包括离心、过滤、浓缩等方法,以及产物的质量分析方法,如色谱法、质谱法等。

通过实验操作,我们掌握了一些常用的产物提取和分析技术,并学会了分析数据和提出改进方案。

三、实习成果和收获通过本次发酵工程实习,我取得了以下一些成果和收获:1.理论知识的提高:通过课堂学习和实验操作,我对发酵工程的基本理论有了更深入的了解,掌握了一些重要的发酵工艺参数的选择和调控方法。

2.实践能力的提升:通过实际操作,我掌握了一些发酵工程操作技能,如微生物的培养与传代、发酵反应器的搭建与运行等,并提高了实验技能的熟练度。

3.创新能力的培养:在实验过程中,我积极思考和尝试一些改进措施,提出了一些改进方案,并在实践中不断进行调整和完善,培养了一定的创新能力。

四、存在的问题和改进方案在实习过程中,我也发现了自己存在的一些问题,主要包括实验操作的熟练度还不够、对实验结果的分析和解读能力有待提高等。

发酵工程教学实习报告

发酵工程教学实习报告

发酵工程教学实习报告一、实习背景与目的作为一名生物技术专业的学生,我对发酵工程领域充满好奇,并希望通过实践操作深入了解该领域的技术及应用。

此次发酵工程教学实习,旨在让我们掌握发酵过程的基本原理,熟悉发酵设备的使用,以及提高我们在发酵工程领域的实际操作能力。

二、实习内容与过程1. 实习前的准备在实习开始前,我们参加了为期一周的发酵工程理论课程学习,掌握了发酵过程的基本原理、发酵设备的构造及操作方法。

同时,我们还学习了发酵过程中的参数调控、生产效益评估等方面的知识。

2. 实习过程实习过程中,我们参观了发酵工程实验室和生产车间,亲身参与了发酵实验和生产操作。

具体内容包括:(1)实验室发酵实验:我们学习了酵母细胞的活化、培养、繁殖等过程,掌握了发酵液的制备方法。

同时,我们还进行了发酵条件的优化实验,探讨了不同因素对发酵效果的影响。

(2)生产车间实习:我们参观了啤酒、酱油、醋等传统发酵产品的生产工艺流程,了解了现代化发酵生产线的工作原理和操作方法。

在实习过程中,我们还学习了生产车间的卫生管理、质量控制等方面的知识。

3. 实习成果通过实习,我们完成了以下成果:(1)掌握了发酵过程的基本原理和发酵设备的操作方法;(2)学会了实验室发酵实验的操作技巧,并完成了相关实验报告;(3)了解了生产车间的工作流程,参与了部分生产操作,并撰写了实习日志。

三、实习收获与反思1. 实习收获通过此次实习,我对发酵工程领域有了更深入的了解,提高了实际操作能力。

我认识到,发酵工程不仅仅是实验室研究,更是实打实的生产实践。

在生产过程中,我们需要充分考虑发酵条件、设备性能、生产成本等多个因素,以实现高效、稳定的发酵生产。

2. 实习反思在实习过程中,我发现自己在理论知识运用到实际操作中还存在一定差距。

今后,我将继续努力学习发酵工程相关知识,提高自己的综合素质,为将来的工作打下坚实基础。

四、总结此次发酵工程教学实习,让我在理论知识与实践操作方面都取得了较大进步。

发酵工程实训报告

发酵工程实训报告

发酵工程实训报告
本次实训是在发酵工程实验室进行的。

本次实训主要是学习发酵工程的基本操作和实验,了解不同类型的发酵,掌握大型发酵罐防污染的方法等。

实验过程:
1.选择合适的发酵菌种,本次我们选择的是酵母菌。

2.添加培养基,调节pH值、温度和氧气含量。

在实验室中,我们首先将适合酵母的培养基添加到发酵罐内,然后调整pH值到适当的水平,提供适宜的温度和氧气含量。

3.添加发酵菌种。

在调节好基本环境后,我们将酵母菌均匀地撒在上面,尽量使其分散均匀,利于发酵。

在发酵过程中,我们会定期观察发酵罐内的微生物生长状态,进行必要的调整。

4.实验的待定时间。

根据不同的发酵类型,我们要设置不同的时间。

发酵时间通常较长,一般需要数天,甚至数周的时间才能见到效果。

5.采样。

重要数据的检测取决于经常对样品进行采样和测试,以便我们能够跟踪酵母的生长状态。

6.结束实验。

最后,达到我们所需要的发酵效果后,我们可以选择停止实验,或经过处理之后将样品保存与使用。

实验中我们学到了很多,包括成熟的发酵罐操作,及时的护理,以及全程的消毒等,这些都是成功的发酵过程所必须具备的技能。

总结:通过本次实验,我们更加深入地认识到发酵技术在生产中的重要性。

只有掌握了相关知识和操作方法,才能在实际工作中做到精益求精,为提高产品质量和企业效益做出贡献。

发酵工程实训报告

发酵工程实训报告

发酵工程实训报告一、引言1.1 任务概述发酵工程是一种将微生物作为催化剂制备生物活性产物的生物技术。

本报告将介绍发酵工程实训项目的目标及其重要性。

1.2 实训背景发酵工程实训是化学工程专业的重要实践环节,通过该实训能使学生掌握发酵工程的基本原理、操作技能和工程应用。

二、实训目标2.1 理论目标1.掌握发酵工程的基本原理,包括微生物的培养、发酵过程的控制和产物提取等;2.了解发酵工程在生产过程中的应用领域和发展趋势。

2.2 实践目标1.学会操作发酵罐等实验设备,进行微生物的培养和发酵过程的控制;2.实施发酵工程实验,提取和分析产物。

三、实验步骤3.1 实验准备1.准备发酵罐、培养基等实验设备和试剂;2.消毒实验器材,保证实验环境的无菌。

3.2 微生物培养1.预处理微生物菌种,将其接种到培养基中;2.对微生物进行发酵前的预处理,如调整培养基的pH值等。

3.3 发酵过程控制1.设置发酵罐的温度、搅拌速度、通气量等参数,控制发酵过程;2.对发酵罐中的培养基进行采样,监测微生物的生长情况和产物的积累。

3.4 产物提取和分析1.收集发酵产物,进行提取和分离;2.使用各种分析方法对产物进行定性和定量分析。

四、实验结果及讨论4.1 微生物的生长情况与产物积累1.监测微生物在发酵过程中的生长曲线,分析生长速率和最大生长浓度;2.分析产物的积累情况,探讨发酵条件对产物类型和产量的影响。

4.2 发酵过程的控制效果1.分析不同参数设置对发酵过程的影响,如温度、pH值等;2.讨论控制参数对产物质量的影响。

五、实训总结与展望5.1 实训总结1.实践中掌握了发酵工程的基本原理和操作技能;2.加深了对发酵工程在生产过程中的应用意义的理解。

5.2 实训展望1.进一步研究发酵工程在生物医药、环境保护等领域的应用;2.探索新的发酵工程实训项目,提升学生的实践能力。

六、参考文献在报告末尾列出参考文献,包括相关教材、期刊论文等。

以上是本实训报告的基本框架和内容安排,通过实际操作和分析,我们将全面、详细、完整地讨论了发酵工程实训的任务主题。

发酵工程综合实验报告(3篇)

发酵工程综合实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵工程的基本原理和操作方法;2. 掌握微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术;3. 提高实验操作能力和数据分析能力。

二、实验原理发酵工程是一门研究微生物发酵过程及其应用的科学。

通过发酵工程,可以利用微生物的代谢活动生产出各种有用的产品,如食品、医药、化工产品等。

本实验主要涉及微生物的培养、分离、鉴定及发酵条件优化等实验技术。

三、实验材料与仪器1. 材料:土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等;2. 仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、电子天平、pH计、发酵罐、酒精灯、试管、培养皿等。

四、实验方法1. 微生物分离与纯化(1)土壤样品的采集与处理:在校园内采集土壤样品,将土壤样品过筛,去除杂质,备用;(2)牛肉膏蛋白胨培养基的制备:按照实验要求,称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂,加入适量的水,搅拌均匀,煮沸10分钟,待冷却后加入琼脂,搅拌均匀,倒入培养皿中,待凝固;(3)土壤样品的接种:将处理好的土壤样品稀释,取适量涂布在牛肉膏蛋白胨培养基上,置于恒温培养箱中培养;(4)分离纯化:观察菌落特征,挑选单菌落进行纯化,重复以上步骤,直至获得纯化菌株。

2. 微生物鉴定(1)观察菌落特征:观察纯化菌株在牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落特征,如菌落大小、形状、颜色、边缘等;(2)显微镜观察:将纯化菌株进行涂片、染色,在显微镜下观察菌体形态、染色特性等;(3)生化试验:进行糖发酵试验、氧化酶试验、淀粉酶试验等,鉴定菌株的生理生化特性。

3. 发酵条件优化(1)发酵培养基的制备:根据实验要求,称取葡萄糖、酵母提取物、氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等试剂,加入适量的水,搅拌均匀,煮沸10分钟,待冷却后加入琼脂,搅拌均匀,倒入发酵罐中;(2)发酵条件优化:通过改变发酵温度、pH值、接种量、发酵时间等条件,观察发酵产物的产量和品质,确定最佳发酵条件。

发酵综合实验 实验报告

发酵综合实验 实验报告

目录摘要.................................... 错误!未定义书签。

1 引言 (4)2材料与方法 ............................ 错误!未定义书签。

3 结果与讨论............................ 错误!未定义书签。

4 总结.................................. 错误!未定义书签。

5 心得体会.............................. 错误!未定义书签。

参考文献................................ 错误!未定义书签。

蛋白酶的发酵工艺研究摘要中性蛋白酶是最早被发现并广泛应用于工业化生产的蛋白酶制剂,可用于皮革脱毛、软化、畜禽血液蛋白质水解、果酒、啤酒和饮料的澄清以及医学治疗等应用领域中。

本文对一株产中性蛋白酶枯草芽孢杆菌(AS1.398)的发酵条件进行了研究,考察不同因素条件下对产酶的影响。

通过摇瓶培养研究碳源浓度,不同接种量对蛋白酶产量的影响。

利用酪蛋白培养基的平板实验观察蛋白酶的性质。

利用发酵罐培养观察时间对产酶的影响.结果表明:豆饼粉3.0g/100ml,玉米粉4.0g/100ml,麸皮粉2.5g/100ml,磷酸氢二钠0.4g/100ml,磷酸二氢钾0.03g/100ml,pH 7.2-7.4为最适宜培养基组分。

并且发酵罐培养的产酶活性高于摇瓶培养。

关键词:中性蛋白酶;枯草芽孢杆菌;摇瓶培养;发酵罐The Fermentation Process Research of Protease Abstract Neutral protease is the first to be discovered and widely used in industrial production of the protease preparation ,which can be used for leather hair removal, softening, animal blood protein hydrolysis, wine, beer and beverage clarification, and in applications such as medical treatment.The fermentation conditions of a Bacillus Subtilis (AS1.398) which can produce neutral protease were studied in this paper. Under the condition of different factors to examine the influence of enzyme production.This study discussed concentration of carbon source, different inoculum on protease yield by shake flask. Casein petri dishes has been used in the observation of the nature of the protease. Fermentation tanks culture was used for observing time's effection on the production of enzymes. the results showed that soybean meal 3.0g/100ml, corn flour 4.0g/100ml,wheat bran powder 2.5g/100ml,disodium hydrogen phosphate 0.4g/100ml,potassium dihydrogen phosphate 0.03g/100ml, pH 7.2-7.4 was the most appropriate medium composition. Enzyme production activity of Fermentation tanks culture was higher than shaking culture. Keywords: Neutral protease;Bacillus subtilis;Shaking culture;Fermentation1 引言1.1 自然界中有大量产泌外蛋白酶微生物,其中以微生物的产酶活性最优。

发酵工程实验报告总结

发酵工程实验报告总结

发酵工程实验报告总结发酵工程实验是一项非常重要且广泛应用的实验,通过实验,我们可以了解到发酵过程中的微生物生长和代谢规律,提高发酵过程的效率和产物质量。

本次实验主要涉及到发酵过程中的控制变量,发酵过程中微生物的生长和代谢规律的研究以及发酵过程中产物的分析等内容。

通过本次实验,我了解到了发酵过程中的一些基本原理和技术,对发酵工程有了更加深入的认识。

在实验中,我们首先进行了菌种的培养和优选。

通过实验,我们了解到菌种的选择和培养过程对发酵过程中的微生物生长和产物质量具有重要的影响。

通过对不同菌种的筛选和培养条件的优化,我们可以选择到合适的菌种,并使其生长状况良好,提高发酵过程的效率。

在实验中,我们还进行了发酵过程的控制变量的研究。

通过对发酵过程中温度、pH值、氧气供应等因素的控制,我们可以调节微生物的生长速度和产物的合成效率。

实验结果表明,控制变量对发酵过程中的微生物生长和产物质量具有明显的影响。

因此,合理地控制发酵过程中的各项参数是提高发酵效率和产物质量的关键。

在实验中,我们还对发酵过程中微生物的生长和代谢规律进行了研究。

通过对微生物数量、生物量、细胞代谢产物等指标的测定和分析,我们可以了解到微生物在不同生长阶段的代谢特点和变化规律。

实验结果表明,微生物生长和代谢过程中有明显的生长阶段和代谢阶段的变化,我们可以根据这些变化规律来调节发酵过程中的控制变量,提高发酵效率。

最后,在实验中,我们还对发酵过程中产物的分析进行了研究。

通过对发酵产物的组成、含量、纯度等指标的分析和测定,我们可以评估发酵过程的效果和产物质量。

实验结果表明,发酵产物的组成和含量与微生物的生长和代谢过程密切相关,通过调节好发酵过程中的控制变量和选择合适的菌种,我们可以获得高质量的发酵产物。

综上所述,发酵工程实验是一项非常重要和有意义的实验,通过实验,我们可以了解到发酵过程中的微生物生长和代谢规律,探索调节发酵过程的控制变量以提高发酵效率和产物质量的方法。

呼吸发酵工程实验报告

呼吸发酵工程实验报告

实验日期: 2023年X月X日 - X月X日实验地点:生物工程实验室实验人员: [你的姓名]一、实验目的1. 理解呼吸发酵的基本原理和过程。

2. 掌握呼吸发酵工程中微生物的培养和发酵技术。

3. 学习分析发酵过程中微生物的生长、代谢和产物形成。

4. 优化发酵条件,提高发酵效率。

二、实验原理呼吸发酵是微生物利用有机物作为碳源和能源,通过呼吸作用产生能量和代谢产物的过程。

根据微生物对氧的需求,呼吸发酵可分为好氧发酵和厌氧发酵。

本实验主要研究好氧发酵,即在有氧条件下,微生物通过有氧呼吸产生能量。

三、实验材料与仪器材料:- 菌种:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)- 培养基:葡萄糖酵母膏培养基- 实验试剂:NaOH、HCl、葡萄糖标准溶液等- 其他:锥形瓶、发酵罐、温度计、pH计、分光光度计等仪器:- 恒温水浴锅- 摇床- 移液器- 烧杯- 试管- 酒精灯- 烧杯架四、实验步骤1. 菌种活化:将菌种接种于葡萄糖酵母膏培养基中,在30℃下培养24小时。

2. 种子培养:将活化后的菌种按一定比例接种于新鲜培养基中,在30℃、200 rpm的摇床上培养4小时。

3. 发酵:将种子培养液按一定比例接入发酵罐中,控制温度、pH值、溶解氧等条件,进行发酵实验。

4. 发酵过程监测:定时取样,测定菌体浓度、葡萄糖浓度、pH值、溶解氧等参数。

5. 发酵终点判定:当葡萄糖浓度降至一定程度,且菌体浓度不再增加时,认为发酵达到终点。

6. 产物分析:采用分光光度计测定发酵液中的酒精含量。

五、实验结果与分析1. 菌体生长曲线:通过测定发酵过程中菌体浓度变化,绘制菌体生长曲线,观察菌体生长规律。

2. 底物消耗曲线:通过测定发酵过程中葡萄糖浓度变化,绘制底物消耗曲线,分析发酵过程中葡萄糖的利用情况。

3. 产物形成曲线:通过测定发酵过程中酒精含量变化,绘制产物形成曲线,分析发酵过程中酒精的生成规律。

4. 发酵条件优化:通过调整发酵过程中的温度、pH值、溶解氧等条件,优化发酵过程,提高发酵效率。

发酵工程综合实验报告 (1)

发酵工程综合实验报告 (1)

《发酵工程综合实验》实验报告实验题目:蛋白酶产生菌的分离筛选与培养优化姓名学号院系专业生物技术年级 13级任课教师2015年 12 月 25 日1 实验目的1、学习从土壤样品中分离筛选蛋白酶产生菌的基本技术及测定蛋白酶活力的方法。

2、掌握富集、平板稀释涂布法、平板划线培养法分离筛选蛋白酶产生菌的基本原理。

3、掌握蛋白酶产生菌培养优化的原理与方法。

4、熟悉用正交实验优化发酵培养基的方法。

5、了解蛋白酶产生菌生产的实际意义。

2 实验原理蛋白酶产生菌的分离筛选:在土壤中有许多细菌和霉菌能产生蛋白酶,本实验将土壤样品悬液稀释进行划线分离得到可能含有目的菌株的菌落,将其接种到酪蛋白平板上进行培养,根据酪蛋白平板的水解圈作初筛。

将初筛的蛋白酶产生菌接入产酶培养基进行培养,测定蛋白酶的活力,最终筛选到产蛋白酶的目的菌。

蛋白酶活力测定原理:蛋白质或多肽在275nm波段处具有最大吸收值,利用蛋白酶同酪蛋白底物反应前后在三氯乙酸中可溶物的紫外吸收增值,可表示蛋白酶活力高低。

蛋白酶产生菌的培养优化:本实验采用正交实验进行目的菌株的培养优化方案。

正交实验是利用已经设计好的表格“正交表”来安排、实验并进行数据分析的一种方法。

数据处理可采用直观分析法(极差分析法),通过对每一因素的平均极差来分析问题。

3 实验材料3.1 实验试剂葡萄糖、乳糖、蔗糖、蛋白胨、尿素、酪氨酸、酵母膏、碳酸钠、琼脂粉、牛肉膏、硫酸铵、硫氨酸、三氯乙酸、氯化钙、氯化钠、MgSO4、KH2PO4、K2HPO4、3.2 实验设备250ml三角瓶、150ml三角瓶、10ml移液管、1ml吸头、酒精灯、大烧杯、试管、量筒、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱、恒温振荡培养箱、分光光度计、电炉、水浴锅、离心机、漏斗、滤纸、培养皿。

4 实验步骤(一)配制所需培养基及灭菌1、按照以下配方配制所需的培养基(1)、牛肉膏蛋白胨培养基(分离培养基)200mL:牛肉膏 0.5g、蛋白胨 1g、NaCl 0.5g、琼脂 1.5g、水 100ml、pH 7.2。

发酵工程制药实验报告(3篇)

发酵工程制药实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵工程制药的基本原理和过程;2. 掌握微生物发酵生产药物的方法;3. 熟悉发酵过程中主要参数的检测和控制;4. 提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理发酵工程制药是指利用微生物的代谢能力,通过发酵过程生产具有药用价值的生物活性物质。

发酵过程包括菌种选育、培养基配制、种子扩大培养、发酵过程、分离纯化等环节。

三、实验材料与仪器1. 材料与试剂:葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨、琼脂、硫酸铵、磷酸二氢钾、氢氧化钠、盐酸、氯化钠等;2. 仪器与设备:发酵罐、摇床、超净工作台、高压灭菌锅、电子天平、pH计、分光光度计、离心机、无菌操作工具等。

四、实验步骤1. 菌种选育:从土壤样品中分离筛选得到一株能够产生抗生素的微生物,经过纯化、鉴定和保存;2. 培养基配制:根据微生物生长需求,配制适宜的培养基;3. 种子扩大培养:将纯化后的菌种接种到试管斜面培养基上,置于恒温培养箱中培养;4. 发酵过程:将活化后的种子液接种到发酵罐中,控制发酵温度、pH值、溶氧量等参数,进行发酵;5. 发酵过程监测:定期检测发酵液的pH值、溶氧量、菌体浓度等参数,确保发酵过程顺利进行;6. 分离纯化:发酵结束后,对发酵液进行分离纯化,得到目标产物;7. 数据分析:对实验数据进行统计分析,得出实验结果。

五、实验结果与分析1. 菌种选育:成功分离筛选得到一株能够产生抗生素的微生物,经过鉴定为链霉菌属;2. 培养基配制:根据微生物生长需求,配制了适宜的培养基;3. 种子扩大培养:菌种在试管斜面培养基上生长良好,菌落形态典型;4. 发酵过程:发酵过程中,发酵液的pH值、溶氧量、菌体浓度等参数均在适宜范围内,发酵过程顺利进行;5. 分离纯化:发酵液经过分离纯化,得到目标产物;6. 数据分析:通过实验数据统计分析,得出以下结论:(1)该菌株在发酵过程中,发酵液的pH值、溶氧量、菌体浓度等参数均在适宜范围内;(2)发酵液中的目标产物含量达到预期水平;(3)分离纯化过程中,目标产物纯度较高。

发酵工程实验的实验报告

发酵工程实验的实验报告

一、实验目的1. 了解发酵工程的基本原理和操作方法。

2. 掌握发酵过程中菌种培养、培养基配制、发酵条件控制等基本技能。

3. 熟悉发酵过程中产物生成的监测方法。

二、实验原理发酵工程是指利用微生物的代谢活动,将生物质资源转化为人类所需产品的一门综合性工程技术。

本实验以谷氨酸棒杆菌为研究对象,通过摇瓶发酵的方式,探究其在适宜条件下对葡萄糖的转化率及谷氨酸的生成情况。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:摇床、锥形瓶(250ml)、移液管、pH计、生物传感仪、分析天平、发酵培养基、葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等。

2. 试剂:葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等。

四、实验步骤1. 培养基配制:按照实验要求,称取葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、苯甲酸钠、EDTA钠、氯化钠等试剂,加入适量的去离子水,充分溶解后,调节pH至7.0,定容至1000ml。

2. 菌种活化:从菌种保藏管中取出谷氨酸棒杆菌,接种于装有适量培养基的锥形瓶中,置于摇床上,37℃恒温培养24小时。

3. 接种:将活化后的菌种以1%的接种量接种于新鲜培养基中,置于摇床上,37℃恒温培养。

4. 发酵过程监测:每隔2小时取样,测定还原糖含量、谷氨酸含量、pH值等指标。

5. 数据处理与分析:将实验数据绘制成曲线,分析发酵过程中还原糖消耗、谷氨酸生成、pH值变化等规律。

五、实验结果与分析1. 还原糖消耗曲线:在发酵过程中,还原糖含量逐渐降低,表明谷氨酸棒杆菌在消耗葡萄糖的同时,产生谷氨酸。

2. 谷氨酸生成曲线:在发酵过程中,谷氨酸含量逐渐升高,表明谷氨酸棒杆菌在适宜条件下能够高效地将葡萄糖转化为谷氨酸。

3. pH值变化曲线:在发酵过程中,pH值逐渐下降,表明谷氨酸棒杆菌在代谢过程中产生酸性物质。

六、实验结论1. 本实验成功实现了谷氨酸棒杆菌的摇瓶发酵,为谷氨酸生产提供了实验依据。

发酵工程实验报告

发酵工程实验报告

发酵工程试验报告年级专业姓名学号试验题目微生物工程试验〔一组〕一、试验目的1.娴熟把握无菌操作技术,了解生物发酵过程中种子的扩培过程;2.把握小型发酵罐管路消毒、空消、实消、菌种培育等技术;3.学习把握小型发酵罐接种、取样操作系统;4.学习使用糖度仪,把握血球计数板法;5.把握两种生长曲线的测定方法:干重法和血球计数板法,绘制生物基质的相关曲线。

二、试验原理发酵罐,是进展液体发酵的专用设备。

发酵罐配备掌握系统,它主要是对发酵过程中的各种参数如温度、pH、溶解氧、搅拌速度、空气流量、补料、泡沫水公平进展设定、显示、记录以及对这些参数进展反响调整掌握。

为了解发酵过程中菌体的生长及对培育基的利用状况,需在发酵过程中定时地取样测定,包括对菌体进展计数、测定不同时期的干重以及糖度的变化。

干重,是指细胞除去全部自由水后的重量,为80℃下烘干肯定时间后的恒重,即失水后的质量。

可用离心或过滤法测定。

一般干重为湿重的 10-20%。

在离心法中,将肯定体积待测培育液倒入离心管中,设定肯定的离心时间和转速,进展离心,并用清水离心洗涤 1-5 次,进展枯燥。

枯燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干,或承受红外线烘干,也可在80℃或40℃下真空枯燥,枯燥后称重。

血球计数板法,血球计数板是一种有特别构造刻度和厚度的厚玻璃片,玻片上有四条沟和两条嵴,中心有一短横沟和两个平台,两嵴的表比两平台的外表高 0.1mm,每个平台上刻有不同规格的格网,中心 0.1mm 面积上刻有400 个小方格。

通过显微镜观看,统计肯定大格内微生物的数量,即可算出1 毫升菌液中所含的菌体数。

微生物生长曲线,是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标,培育时间为横坐标画得的曲线。

一般说,微生物(细菌)重量的变化比个数的变化更能在本质上反响诞生长的过程。

曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。

三、试验材料及器材1.菌种酵母菌〔saccharomyces〕2.药品蛋白胨、葡萄糖NH4Cl、酵母浸粉、蒸馏水、种子液、无菌蒸馏水、泡敌3.培育基种子培育基发酵培育基4.仪器设备摇床 1 台;超净工作台 6 台;电炉 2 个;在位机械搅拌式发酵罐 4 台;三角烧瓶;小试管;酒精棉球假设干;工业用酒精一瓶;离心机1台;振荡器 6 台;烘箱 1 台;显微镜 3 台玻璃棒 12 个;50ml 量筒 6 个;500ml 量筒 6 个;100ml 烧杯 6 个;500ml 烧杯6 个;250ml 三角烧瓶 2 个;500ml 三角烧瓶 6 个;接种环 6个;酒精灯 6 个;棉线、纱布、报纸假设干;天平 6 个;蒸馏水瓶 6 个;擦镜纸假设干;滤纸假设干;离心管假设干;血球计数板 6 个;试管架12;棉线手套 4 双等四、试验步骤(一) 菌种的扩培1.菌种的活化〔已预备〕〔1〕将酵母菌接种于种子培育液中,摇瓶培育, 180rpm,28℃,48h 。

发酵工程实验报告总结与反思

发酵工程实验报告总结与反思

发酵工程实验报告总结与反思引言发酵工程是一门同时涉及生物学、化学、工程学等多学科交叉的学科,其应用广泛,涵盖食品、制药、能源等领域。

本次实验是在发酵工程方面的基础实验,旨在通过观察和控制微生物在拟合法罐中的发酵过程,了解并掌握发酵工程的基本原理和操作要点。

实验目的1. 通过观察发酵曲线,了解发酵过程中的生物学特征;2. 掌握发酵工程中常用的微生物菌种培养技术;3. 学会调控发酵条件,提高发酵效率。

实验过程本次实验选取酵母菌作为发酵微生物,使用琼脂平板培养菌株,获得单菌种。

然后将菌株接种到小规模发酵罐中,控制发酵温度、pH值和通气速率,观察发酵过程中的生物学特征。

最后,利用收获的数据绘制发酵曲线,并进行数据分析。

实验结果通过本次实验,我们获得了以下结果:1. 发酵过程中,酵母菌的生长呈现指数增长的趋势;2. 正确的温度、pH值和通气速率的控制,对于发酵效果至关重要;3. 根据发酵曲线的变化,可以预测发酵过程中的产物生成和生物质积累。

实验总结本次实验是我们在发酵工程方面的第一次实践,通过实际操作和数据分析,我们对发酵过程中的一些基本概念和操作方法有了初步了解。

同时,也发现了一些问题和改进的空间。

首先,我们在控制条件方面存在一定的不足。

尽管我们设定了标准的温度、pH值和通气速率,但在实际操作中,由于设备的限制和人为操作的不准确性,我们的控制精度并不高,这可能对发酵过程的结果产生了一定的影响。

因此,今后的实验中,我们应该更加认真地对待实验操作过程,提高操作的准确性。

其次,我们在数据分析方面还有待提高。

虽然我们成功绘制了发酵曲线,并通过曲线分析发现了一些规律,但我们对于数据的解读还不够深入。

今后在实验数据的处理和分析上,我们应该加强对实验结果的理解和解读能力,更好地调整和控制发酵过程,以达到更好的效果。

最后,本次实验中我们只以酵母菌为例进行了发酵实验,但发酵工程涉及到多种微生物和产物,因此今后我们应该在实验中考虑更多的微生物菌种和产物类型,以更好地了解发酵工程的广泛应用。

发酵实习报告

发酵实习报告

发酵实习报告篇一:发酵工程实习报告食品发酵工程实习报告班级:食品09-3 学号:姓名:贺新丽一、实习地点:北京市燕京啤酒厂,重点学习参观啤酒生产工艺流水线。

中国最大的污水处理厂——北京高碑店污水处理厂。

北京市红星二锅头或牛栏山二锅头酒厂。

食品加工实验室进行品酒训练。

二、实习时间:5月2日——参观北京燕京啤酒厂5月3日——北京高碑店污水处理厂5月4日——北京市红星二锅头或牛栏山二锅头酒厂5月9日——林业楼食品加工实验室进行品酒训练三、实习内容:1. 燕京啤酒厂参观实习:(1)现代啤酒酿造:啤酒是人类最古老的酒精饮料,是水和茶之后世界上消耗量排名第三的饮料。

啤酒于二十世纪初传入中国,属外来酒种。

啤酒是根据英语Beer译成中文“啤”,称其为“啤酒”,沿用至今。

啤酒以大麦芽﹑酒花﹑水为主要原料﹐经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。

现在国际上的啤酒大部分均添加辅助原料。

有的国家规定辅助原料的用量总计不超过麦芽用量的50%。

在德国,除出口啤酒外,德国国内销售啤酒一概不使用辅助原料。

是以优质大麦芽为主要原料,啤酒花为香料,经过制麦芽、糖化、发酵等工序制成的富含营养物质和二氧化碳的酿造酒,是世界上产量最大的酒种。

啤酒的起源与谷物的起源密切相关。

人类使用谷物制造酒类饮料已有8000多年的历史。

已知最古老的酒类文献﹐是公元前6000年左右巴比伦人用黏土板雕刻的献祭用啤酒制作法。

公元前4000年美索不达米亚地区已有用大麦﹑小麦﹑蜂蜜制作的16种啤酒。

公元前3000年起开始使用苦味剂。

公元前18世纪﹐古巴比伦国王汉穆拉比(Hammurapi﹖~公元前1750)颁布的法典中﹐已有关于啤酒的详细记载。

公元前1300年左右﹐埃及的啤酒作为国家管理下的优秀产业得到高度发展。

拿破仑的埃及远征军在埃及发现的罗塞塔石碑上的象形文字表明﹐在公元前196年左右当地已盛行啤酒酒宴。

啤酒的酿造技术是由埃及通过希腊传到西欧的。

1881年﹐E.汉森发明了酵母纯粹培养法﹐使啤酒酿造科学得到飞跃的进步﹐由神秘化﹑经验主义走向科学化。

发酵工程实验报告酸奶(3篇)

发酵工程实验报告酸奶(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解酸奶加工的基本原理和制作方法。

2. 掌握酸奶发酵过程中乳酸菌的代谢过程。

3. 通过实验,提高对发酵工程的认识和操作技能。

二、实验原理酸奶是以鲜奶为原料,经乳酸菌发酵而成的一种乳制品。

在发酵过程中,乳酸菌将乳糖转化为乳酸,使酸奶具有独特的口感和风味。

同时,乳酸菌的代谢产物还能提高酸奶的营养价值。

三、实验器材1. 原料:鲜奶、白糖、乳酸菌发酵剂。

2. 仪器:发酵瓶、温度计、计时器、烧杯、电子秤、量筒、无菌操作台、酒精灯、无菌棉签等。

四、实验步骤1. 准备工作:将鲜奶、白糖、乳酸菌发酵剂分别称量,备用。

2. 消毒:将发酵瓶、烧杯、量筒等实验器材用酒精灯火焰消毒。

3. 配制发酵液:将称量好的白糖加入鲜奶中,搅拌均匀。

4. 接种:将乳酸菌发酵剂按照一定比例加入发酵液中,搅拌均匀。

5. 装瓶:将发酵液装入发酵瓶中,封口。

6. 发酵:将发酵瓶置于恒温箱中,设定温度为40-45℃,发酵时间为4-6小时。

7. 冷却:发酵结束后,将发酵瓶取出,置于室温下冷却至室温。

8. 品尝与评定:品尝酸奶,从口感、色泽、香气等方面进行评定。

五、实验结果与分析1. 酸奶的口感:发酵好的酸奶口感酸甜适中,具有浓郁的乳酸菌香气。

2. 酸奶的色泽:酸奶呈乳白色或微黄色,色泽均匀。

3. 酸奶的香气:酸奶具有独特的乳酸菌香气,令人陶醉。

4. 酸奶的营养价值:酸奶富含蛋白质、钙、维生素等营养成分,具有很高的营养价值。

六、实验结论通过本次实验,我们成功制作了酸奶,了解了酸奶加工的基本原理和制作方法。

在实验过程中,我们掌握了乳酸菌的代谢过程,提高了对发酵工程的认识和操作技能。

七、实验反思1. 在实验过程中,应注意操作规范,确保实验结果的准确性。

2. 实验过程中,要关注乳酸菌的生长和代谢过程,适时调整发酵条件。

3. 实验结束后,对实验结果进行综合分析,总结实验经验。

八、拓展实验1. 探究不同温度、不同时间对酸奶发酵的影响。

发酵工程综合实验报告

发酵工程综合实验报告

发酵工程综合实验报告实验题目蛋白酶的发酵工艺研究院系名称 生物与食品工程学院学院:生物与食品工程学院2015年 7月 31日学生姓名 杨益坤学 号 2012214114专业班级 生物技术12-1班 指导教师 杨 柳目录标题错误!未定义书签。

摘要错误!未定义书签。

关键词21.引言22.材料与方法32.1材料32.1.1菌种32.1.2试剂32.1.3培养基42.1.4实验仪器42.2方法42.2.1蛋白酶酶活测定42.2.2总可溶性糖测定52.2.3枯草芽孢杆菌发酵实验62.2.4发酵罐实验62.2.5蛋白酶性质实验73.结果与分析73.1透明圈观察73.2标准曲线83.2.1酪氨酸标准曲线83.2.2葡萄糖标准曲线93.3不同装液量摇瓶发酵实验93.4小型发酵罐发酵实验113.5蛋白酶性质研究123.5.1最适pH测定及pH影响酶稳定性的研究123.5.2最适温度测定及p温度影响酶稳定性的研究133.6小结154.致165.参考文献17蛋白酶的发酵工艺研究Study on Protease Fermentation Conditions摘要:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)能够产生大量的蛋白酶,是进行蛋白酶研究的良好材料。

本次实验目的在于学习蛋白酶的定性定量测定方法,考察营养及环境对酶生产的影响,以及熟悉小型发酵罐的使用。

我们控制装液量为唯一变量,测定酶活及总糖变化,最终确定最佳装液量条件为60ml。

在此基础上,我们进一步确定了最适温度为40℃,最适pH为5。

我们挑选透明圈较大的菌落在小型发酵罐进行发酵,定时取样测定酶活与总糖,绘制发酵曲线,从而了解菌体生长情况。

Abstract:Bacillus subtilis can produce much protease and can be a good meterial for research about protease.The purposes of this experiment are learning how to measure protease qualitatively and quantificationly,investigating how the nutrition and environment influence the output of protease,and trying to be familiar with small-sized fermentation cylinder.We controlled fluid volume as the only variable quantity,measured enzyme activity and total sugar quantity,finally confirmed that the best fluid colume condition is 60ml.On this basis,we moved forward a single step to conclude that the best temperature is 40℃ and the best pH is 5.We chose the bacterial colony with bigger transparent circle to ferment in the small-sized fermentation cylinder,measured enzyme actity and total sugar quantity at regular time,then drew the fermentation curve,consequently we could know how was the situation of the growing bacterium.关键词:枯草芽孢杆菌,蛋白酶,酶活,总糖,装液量Keywords:Bacillus subtilis,protease,enzyme actiivity,total sugar quantity,fluid volume1.引言蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。

发酵工程实习报告

发酵工程实习报告

发酵工程实习报告生物技术092 xxx 2011年10月11日,在老师的带领下,我们参观了位于焦作市的健康元生物制品有限公司。

现将此次实习总结如下:1.实习目的这次实习是在完成相关基础课程的学习后所进行的实践环节。

通过到工厂生产环节的实习和观摩,我们进一步巩固加深课堂所学过的理论知识,将理论和生产实践结合,使我们对发酵企业有一个初步的了解。

2.实习内容2.1实习单位简介焦作健康元生物制品有限公司是由健康元药业集团股份有限公司及香港天诚实业有限公司共同投资成立,注册资本金5亿元。

公司占地面积565.74亩,于2005年11月份开始动工兴建。

作为“健康元药业集团股份有限公司”原料药战略的重要组成部分,焦作健康元生物制品有限公司总投资14亿元,总建筑面积6.5万平方米,主要生产医药抗生素——头孢类药品的母核:7-氨基头孢烷酸(简称7-ACA),年生产能力为2000吨。

2.2认识实习内容在健康元生物制品有限公司的厂区,我们按照从上游到下游的顺序依次参观了产品制作的发酵环节、过滤提取环节、精炼环节。

在参观发酵环节中,我们参观了摆满大大小小发酵罐的生产区和大型电脑控制室。

生产区的发酵罐十分高大,动辄就是几十升的容积。

在控制室中,除了控制台上的电脑外,还立着一块两米多高,十几米长的大型电子显示板,显示板上各个发酵罐的状态看得一清二楚,加料、排气、消毒等步骤全部有电脑控制,很是先进。

发酵液的过滤是依靠各种膜系统,通过层层膜过滤,将其逐层净化。

发酵液中有效成分的提取是依靠一种树脂,这种树脂只能特异性吸附其中的那种有效成分,有效成分同过范德华力与树脂紧密结合,经过树脂吸附后,再经过洗脱环节,有效成分就被提取出来了。

提取出的有效成分中还含有色素,需要在经过脱色素环节进一步精炼。

经历了这几个环节后,我们就基本上得到了想要的东西。

3.实习体会作为一名生物技术专业的本科生,我对发酵、药品相关领域怀有好奇,而这次认识实习让我比较全面的了解了这些生物制品行业的发展情况,熟悉了相关生物制品的生产工艺、销售网络、工艺设备等专业知识,这为以后的专业学习都奠定了一定的基础.通过实习,我也感受到了当今生物产业的广阔前景,坚定了专业信心,在以后的理论学习中,我将更好地把实习所学的知识与理论知识结合起来,争取早日掌握扎实的专业技能! 精品文档word文档可以编辑!谢谢下载!。

生物实验报告单发酵(3篇)

生物实验报告单发酵(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解发酵的基本原理和过程。

2. 掌握不同发酵条件下产物生成的规律。

3. 熟悉发酵实验的操作步骤及注意事项。

4. 分析实验结果,探讨发酵过程中可能的影响因素。

二、实验原理发酵是指微生物在无氧或低氧条件下,利用有机物作为碳源和能源,产生代谢产物的过程。

常见的发酵类型包括酒精发酵、乳酸发酵、醋酸发酵等。

本实验以酒精发酵为例,通过观察酵母菌在葡萄糖溶液中的生长、代谢过程,了解发酵现象。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:锥形瓶(250ml)、移液管、pH计、酒精计、温度计、无菌操作台、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。

2. 试剂:葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨、蒸馏水、苯酚红指示剂、NaOH溶液、乙醇、酒精计等。

四、实验步骤1. 准备实验材料:将葡萄糖、酵母膏、胰蛋白胨溶解于蒸馏水中,制成培养基。

2. 接种:将酵母菌接种于培养基中,置于恒温培养箱中培养。

3. 观察生长曲线:定期取样,测定菌液的光密度(OD值),绘制生长曲线。

4. 测定酒精含量:定期取样,测定菌液中的酒精含量,绘制酒精生成曲线。

5. 分析实验结果:观察菌体生长情况,分析发酵过程中产物生成的规律。

五、实验结果与分析1. 菌体生长曲线:实验结果显示,酵母菌在葡萄糖溶液中生长迅速,培养初期菌体数量呈指数增长,随后进入稳定期。

2. 酒精生成曲线:实验结果显示,随着菌体数量的增加,酒精含量逐渐上升,至发酵后期达到峰值。

3. pH值变化:实验过程中,培养基的pH值逐渐下降,说明酵母菌在发酵过程中产生酸性代谢产物。

六、讨论1. 影响发酵的因素:发酵过程中,温度、pH值、营养物质、氧气等条件对发酵效果有显著影响。

本实验中,温度控制在28-30℃,pH值控制在4.5-5.5,有利于酵母菌的生长和酒精生成。

2. 发酵产物的应用:发酵产生的酒精可以用于饮料、燃料、化工等领域。

此外,发酵过程中产生的其他代谢产物,如酵母抽提物、有机酸等,也具有广泛的应用前景。

发酵实验报告范本

发酵实验报告范本

一、实验目的1. 了解发酵的基本原理和过程。

2. 掌握发酵实验的基本操作步骤。

3. 通过实验,观察并记录发酵过程中产生的现象。

4. 分析发酵过程中可能发生的变化,并得出结论。

二、实验原理发酵是一种微生物利用有机物质进行代谢的过程,产生能量和有用的代谢产物。

在无氧条件下,微生物通过发酵作用将有机物质转化为酒精、二氧化碳和水等物质。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 酵母粉- 白糖- 澄清石灰水- 重铬酸钾溶液- 40℃温水- 锥形瓶- 小气球- Y形管- 大烧杯- 温度计- 试管- 比色板- 小烧杯- 玻璃棒2. 实验仪器:- 电热恒温水浴锅- 移液管- pH计- 生物传感仪- 分析天平四、实验步骤1. 准备实验材料,将40℃温水倒入锥形瓶中。

2. 加入一大勺白糖和适量干酵母,搅拌均匀。

3. 将锥形瓶放在大烧杯中水浴保温,保持温度在30-40℃左右。

4. 观察酵母菌培养液是否有气泡产生,并塞上橡胶塞。

5. 观察一段时间后,气球逐渐膨胀,说明酵母菌开始进行无氧呼吸,产生酒精和二氧化碳。

6. 将夹子打开,挤压气球,使瓶内产生的气体通过胶管导入试管内的澄清石灰水中。

7. 观察澄清石灰水是否变浑浊,以判断气体中是否含有二氧化碳。

8. 将产生的气体收集在试管中,加入重铬酸钾溶液,观察溶液颜色变化,以判断气体中是否含有酒精。

9. 定期记录实验过程中出现的现象,如气泡产生速度、气球膨胀程度、澄清石灰水变浑浊时间、重铬酸钾溶液颜色变化等。

五、实验结果与分析1. 在实验过程中,观察到酵母菌培养液产生气泡,气球逐渐膨胀,说明酵母菌开始进行无氧呼吸,产生酒精和二氧化碳。

2. 澄清石灰水变浑浊,说明气体中含有二氧化碳。

3. 重铬酸钾溶液颜色由橙色变为灰绿色,说明气体中含有酒精。

六、结论通过本次实验,我们成功观察到了酵母菌在无氧条件下进行发酵的过程,并验证了发酵过程中产生酒精和二氧化碳的现象。

实验结果表明,酵母菌在适宜的温度和条件下,能够将有机物质转化为酒精和二氧化碳,为发酵工业提供了理论基础和实践经验。

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发酵工程综合实验报告实验题目蛋白酶的发酵工艺研究院系名称 生物与食品工程学院学院:生物与食品工程学院2015年 7月 31日学生姓名 杨益坤学 号 2012214114专业班级 生物技术12-1班 指导教师 杨 柳目录标题错误!未定义书签。

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关键词21.引言22.材料与方法32.1材料32.1.1菌种32.1.2试剂32.1.3培养基42.1.4实验仪器42.2方法42.2.1蛋白酶酶活测定42.2.2总可溶性糖测定52.2.3枯草芽孢杆菌发酵实验62.2.4发酵罐实验62.2.5蛋白酶性质实验73.结果与分析73.1透明圈观察73.2标准曲线83.2.1酪氨酸标准曲线83.2.2葡萄糖标准曲线93.3不同装液量摇瓶发酵实验93.4小型发酵罐发酵实验113.5蛋白酶性质研究123.5.1最适pH测定及pH影响酶稳定性的研究123.5.2最适温度测定及p温度影响酶稳定性的研究133.6小结154.致165.参考文献17蛋白酶的发酵工艺研究Study on Protease Fermentation Conditions摘要:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)能够产生大量的蛋白酶,是进行蛋白酶研究的良好材料。

本次实验目的在于学习蛋白酶的定性定量测定方法,考察营养及环境对酶生产的影响,以及熟悉小型发酵罐的使用。

我们控制装液量为唯一变量,测定酶活及总糖变化,最终确定最佳装液量条件为60ml。

在此基础上,我们进一步确定了最适温度为40℃,最适pH为5。

我们挑选透明圈较大的菌落在小型发酵罐进行发酵,定时取样测定酶活与总糖,绘制发酵曲线,从而了解菌体生长情况。

Abstract:Bacillus subtilis can produce much protease and can be a good meterial for research about protease.The purposes of this experiment are learning how to measure protease qualitatively and quantificationly,investigating how the nutrition and environment influence the output of protease,and trying to be familiar with small-sized fermentation cylinder.We controlled fluid volume as the only variable quantity,measured enzyme activity and total sugar quantity,finally confirmed that the best fluid colume condition is 60ml.On this basis,we moved forward a single step to conclude that the best temperature is 40℃ and the best pH is 5.We chose the bacterial colony with bigger transparent circle to ferment in the small-sized fermentation cylinder,measured enzyme actity and total sugar quantity at regular time,then drew the fermentation curve,consequently we could know how was the situation of the growing bacterium.关键词:枯草芽孢杆菌,蛋白酶,酶活,总糖,装液量Keywords:Bacillus subtilis,protease,enzyme actiivity,total sugar quantity,fluid volume1.引言蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。

按其降解多肽的方式分成肽酶和端肽酶两类。

前者可把大分子量的多肽链从中间切断,形成分子量较小的朊和胨;后者又可分为羧肽酶和氨肽酶,它们分别从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐一将肽链水解生成氨基酸。

皮革工业的脱毛和软化已大量利用蛋白酶,既节省时间,又改善劳动卫生条件。

蛋白酶还可用于蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清。

临床上可作药用,如用胃蛋白酶治疗消化不良,用酸性蛋白酶治疗支气管炎,用惮性蛋白酶治疗脉管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶对外科化脓性创口的净化及胸腔间浆膜粘连的治疗。

加酶洗衣粉是洗涤剂中的新产品,含碱性蛋白酶,能去除衣物上的血渍和蛋白污物,但使用时注意不要接触皮肤,以免损伤皮肤表面的蛋白质,引起皮疹、湿疹等过敏现象。

催化蛋白质水解的酶类。

种类很多,重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等【1】。

蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键,如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。

蛋白酶分布广,主要存在于人和动物消化道中,在植物和微生物中含量丰富【2】。

由于动植物资源有限,工业上生产蛋白酶制剂主要利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物发酵制备。

蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物脏、植物茎叶、果实和微生物中【3】。

在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。

此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。

目前在焙烤工业中使用的蛋白酶有霉菌蛋白酶、细菌蛋白酶和植物蛋白酶。

面包生产中应用蛋白酶能改变面筋性能,其作用形式和面包调制时力的作用及还原剂的化学反应不同。

蛋白酶的作用不是破坏二硫键,而是断开形成面筋的三维网状结构。

蛋白酶在面包生产中的作用主要表现在面团发酵过程中。

由于蛋白酶的作用,使面粉中的蛋白质降解为肽、氨基酸,以供给酵母碳源,促进发酵。

随着蛋白酶制剂应用研究的不断深入,人们逐渐发现了蛋白酶在动物营养上的独特作用,蛋白酶也因此受到了越来越多的关注【4】。

但目前无论是对蛋白酶的基础研究还是应用研究都还存在很多不足,需要加强以下方面的工作:①筛选和培育产蛋白酶含量高的微生物菌种,并且这些菌所产的蛋白酶必须稳定性好,适合在饲料工业中应用;②研究不同pH值特性的蛋白酶(酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶)在动物消化道的相互作用;③研制具有多种用途(如既可补充动物源酶不足又可降解抗营养因子)的复合蛋白酶;④根据不同的日粮类型和动物生长阶段,开发专用的蛋白酶产品;⑤加强蛋白酶在生长和成年动物上的应用研究;⑥研究蛋白酶对动物源酶和饲料中其它外源酶的影响【5】。

本次实验目的在于学习蛋白酶的定性定量测定方法,考察营养及环境对酶生产的影响,以及熟悉小型发酵罐的使用。

最终确定最佳装液量条件为60ml。

在此基础上,我们进一步确定了最适温度为40℃,最适pH=5。

此次试验能够帮助我们了解蛋白酶的性质,确定酶的最适条件,熟悉小型发酵罐的操作工艺流程。

2.材料与方法2.1 材料2.1.1 菌种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)2.1.2 试剂(1)生理盐水:称取0.85gNaCl,用蒸馏水定容至100ml,即为0.85%生理盐水, 121℃灭菌20min。

(2)福林试剂(Folin试剂):使用时加2倍蒸馏水稀释,即成已稀释的福林试剂。

(3)0.4mol/L碳酸钠溶液: 称取无水碳酸钠42.4g,用蒸馏水定容至1000mL。

(4)0.4mol/L三氯乙酸(T C A)溶液: 称取三氯乙酸65.4g,用蒸馏水定容至1000mL。

(5)pH 7.2磷酸盐缓冲液:称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,用蒸馏水定容至1000mL,即成0.2mol溶液(A液)。

称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)71.63g,定容至1000mL,即成0.2mol溶液(B液)。

取A 液28mL 和B 液72mL,再用蒸馏水稀释1倍,即成0.1mol /L pH 7.2的磷酸盐缓冲液。

(6)2%酪蛋白溶液: 准确称取干酪素2g, 称准至0.002g,加入0.1mol/L氢氧化钠10mL,在水浴中加热使溶解(必要时用小火加热煮沸),然后用pH 7.2磷酸盐缓冲液定容至100mL即成。

配制后应及时使用或放入冰箱保存,否则极易繁殖细菌,引起变质。

(7)100μg/mL酪氨酸溶液: 精确称取在105℃烘箱中烘至恒重的酪氨酸0.1000g, 逐步加入6mL 1mol/L盐酸使溶解,用0.2N盐酸定容至100mL,其浓度为1000μg/mL,再吸取此液10mL,以0.21mol/L盐酸定容至100mL, 即配成100μg/mL的酪氨酸溶液。

此溶液配成后也应及时使用或放入冰箱保存,以免繁殖细菌而变质。

(8)蒽酮试剂:取2g蒽酮溶解到80%H2SO4中,以80%H2SO4定容到1000ml,当日配制使用。

(9)标准葡萄糖溶液(0.1mg/mL):100mg葡萄糖溶解到蒸馏水中,定容到1000ml 备用。

2.1.3 培养基(1)牛肉膏蛋白胨培养基(g/100ml):牛肉膏0.5,蛋白胨1,氯化钠0.5,pH 7.0-7.2 ,121℃灭菌20min 。

(2)酪蛋白培养基(g/100ml):牛肉膏0.5,蛋白胨1.0,氯化钠0.5, 奶粉5,琼脂2, pH 7.2-7.4,121℃灭菌20min 。

(3)细菌种子培养基1: 牛肉膏蛋白胨培养基。

(4)细菌基本液体发酵培养基(g/100ml):豆饼粉3.0,玉米粉4.0,麸皮粉2.5,磷酸氢二钠0.4,磷酸二氢钾 0.03,pH 7.2-7.4,121℃灭菌20min 。

(5)PDA酪蛋白培养基(100ml):马铃薯汁(20%)100ml,奶粉5g,琼脂粉2g,自然pH,121℃灭菌20min。

2.1.4 实验仪器试管,烧杯,移液管,锥形瓶,胶头滴管,100ml容量瓶,移液枪,恒温振荡箱,恒温培养箱,培养皿,水浴锅,分光光度计,离心机,离心管,比色皿等。

2.2 方法2.2.1 蛋白酶酶活测定(福林-酚法)原理:福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色(钼蓝和钨蓝混合物),由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等),可使蛋白质及其水解产物呈上述反应。

因此可利用此原理测定蛋白酶活力。

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