酸骆驼奶中酵母菌的分离与鉴定

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伊犁地区发酵酸马乳优良酵母菌的筛选及其发酵性能研究

伊犁地区发酵酸马乳优良酵母菌的筛选及其发酵性能研究

伊犁地区发酵酸马乳优良酵母菌的筛选及其发酵性能研究目录一、内容简述 (2)1. 研究背景和意义 (3)2. 研究目的和任务 (4)3. 研究现状和发展趋势 (5)二、材料与方法 (6)1. 实验材料 (7)1.1 酸马乳样本 (8)1.2 培养基及试剂 (9)2. 实验方法 (10)2.1 酵母菌的筛选与分离 (11)2.2 酵母菌的鉴定与纯化培养 (12)2.3 酵母菌发酵性能研究 (13)三、伊犁地区发酵酸马乳酵母菌的筛选 (14)1. 酵母菌的初步筛选 (16)2. 酵母菌的分离与纯化 (16)3. 酵母菌的鉴定及分类 (17)四、酵母菌发酵性能研究 (18)1. 酵母菌的生长曲线测定 (19)2. 酵母菌的产酸性能研究 (20)3. 酵母菌的产乙醇性能研究 (22)4. 酵母菌的耐糖性能研究 (22)五、优良酵母菌的筛选及发酵性能评价 (23)1. 优良酵母菌的筛选标准 (24)2. 优良酵母菌的确定及发酵性能评价 (24)六、讨论与分析 (26)1. 伊犁地区发酵酸马乳酵母菌的多样性分析 (27)2. 酵母菌发酵性能与菌株特性的关系分析 (28)3. 优良酵母菌在实际应用中的潜力分析 (29)七、结论与建议 (30)1. 研究结论 (30)2. 研究创新点 (31)3. 对未来研究的建议与展望 (32)一、内容简述本研究旨在伊犁地区发掘并筛选出优良品质的酵母菌株,并通过系统性分析,研究其发酵性能,以期为开发优质的酸马乳产品提供理论和实践指导。

研究团队针对伊犁地区的自然环境,从多个牧场采集样本,运用微生物培养技术和分子生物学方法,对所采集样品中酵母菌群落进行全面的筛选与鉴定。

通过一系列的生长条件测试,如温度、pH、糖源浓度等,确定最适生长条件下的酵母菌株,进一步探究这些酵母菌株对马乳的酸化速度、产酸能力以及乳态维生素等产物的影响。

采用不同酵母菌株进行酸马乳的生物发酵实验,比较发酵前后的马乳理化特征变化,包括酸度变化、香气形成、乳凝效果以及口感改善等方面。

传统酸面团中细菌与酵母菌的分离与鉴定

传统酸面团中细菌与酵母菌的分离与鉴定

传统酸面团中细菌与酵母菌的分离与鉴定刘同杰1,李云1,吴诗榕1,金乐天1,2,张国华1,杨浣漪1,何国庆1(1.浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江省食品微生物技术重点实验室,浙江大学馥莉食品研究院,浙江杭州 310058)(2.朝鲜韩德秀平壤轻工业大学,朝鲜平壤)摘要:为进一步描述我国传统面食发酵剂的理化性质和菌落组成,收集了北方地区6份发酵剂样品,测定了其酸度和菌落总数,并对分离、纯化、初筛后得到的75株细菌和60株酵母菌进行了测序鉴定。

结果显示,样品pH值范围为3.73~5.46,总滴定酸度为8.3~19.8 mL;乳酸菌和酵母菌的计数结果分别为8.35±0.07~9.75±0.12 Log cfu/g,6.31±0.22~8.68±0.04 Log cfu/g。

鉴定出包括短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和旧金山乳杆菌(Lactobacillus sanfranciscensis)在内的乳酸菌8种;酵母菌4种,其中优势菌为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae);其他细菌6种,主要为解淀粉芽孢杆菌(B. amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)和醋杆菌。

结果表明,我国传统面食发酵剂菌相复杂,以酵母菌和乳酸菌为主,还包括芽孢杆菌、醋酸杆菌在内的多种其他细菌,甚至可能含有致病菌。

通过比较细菌和酵母在不同酸面团样品中的分布,发现不同来源样品的微生物种类组成存在差异。

关键词:酸面团;菌相分析;16S/26S rDNA测序;生物多样性;系统发育树文章篇号:1673-9078(2014)9-114-120 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.09.020 Isolation and Identification of Bacteria and Yeast from ChineseT raditional SourdoughLIU T ong-jie1, LI Yun1, WU Shi-rong1, JIN Le-tian1,2, ZHANG Guo-hua1, YANG Huan-yi1, HE Guo-qing1(1.College of Biosystems Engineering and Food Science of Zhejiang University, Zhejiang provincial key laboratory ofFood Microbiology, Fuli Institute of Food Science of Zhejiang University, Hangzhou 310058, China)(2.DPRK Han Dexiu Pyongyang University of light industry, Pyongyang, DPRK)Abstract: In this study, the physicochemical properties and microbial profile of traditionally fermented sourdough for Chinese steamed bread were examined. Six samples of sourdough were collected from northern China. Acidity and colony counts were measured. After isolation, purification, and preliminary screening, 75 strains of bacteria and 60 strains of yeasts were obtained and identified by DNA sequencing. The pH was between 3.73 and 5.46 and total titratable acid (TTA) values ranged from 8.3 to 19.8 mL. In all the samples, the number oflactic acid bacteria (LAB) and yeasts ranged from 8.35±0.07 to 9.75±0.12 Log cfu/g and 6.31±0.22 to 8.68±0.04 Log cfu/g, respectively. Eight LAB species, including Lactobacillus brevis, L. plantarum, and L. sanfranciscensis, and six other bacterial species, including Bacillusamyloliquefaciens, Bacilluslicheniformis, and three species of Acetobacter, were identified. Among the four identified yeasts, the dominant species was Saccharomyces cerevisiae. The results indicate that Chinese traditional starter cultures for flour-based food are complex bacterial floras dominated by LAB and yeast, in addition to several other microorganisms, including Bacillus spp., Acetobacter spp., and evenpathogenic bacteria. Differences in microbial species compositions among LAB and yeasts in samples from different areas were identified by comparing species distributions in different sourdough samples.Key words: sourdough; elucidation of microbial flora structure; 16S/26S rDNA sequencing; biodiversity; phylogenetic tree我国传统的面食发酵剂类似于西方发酵面包用的酸面团,在我国一般被称为“老面”、“酵子”、“面收稿日期:2014-04-17基金项目:国家自然科学基金资助项目(31371826)作者简介:刘同杰(1989-),男,在读博士,研究方向:传统发酵食品通讯作者:何国庆(1957-),男,博士,教授,研究方向:食品生物技术及发酵工程肥”等[1],具有悠久的使用历史。

酸驼乳发酵乳酸菌菌株的筛选及其发酵特性研究

酸驼乳发酵乳酸菌菌株的筛选及其发酵特性研究
r n F o o d S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y
2 0 1 6 , V o 1 . 3 2 , N o . 9
酸驼乳发酵乳酸菌菌株 的筛选及其发酵特性研究
熊磊’ ,赵建新 ’ ,范大 明’ ,刘小鸣’ ,闰博 文’ ,王 丽云’ ,陈卫 。 。 ,张灏 ’
关键词 :发酵乳;酸度;感官品质 文章篇号 : 1 6 7 3 . 9 0 7 8 ( 2 0 1 6 ) 9 . 8 4 . 8 9 DO I : 1 0 . 1 3 9 8 2 / j . m f s t . 1 6 7 3 ・ 9 0 7 8 . 2 0 1 6 . 9 . 0 1 3
t h r e e s r t a i n s o f l a c t o b a c i l l i( L a c t o b a c i l l u s h e l v e t i c u s , L a c t o b a c i l l u s p l a n t r u m ,a n d L a c t o b a c i l l u s ̄ e i f n )a nd t w o s t a r ns i o f P e d i o c o c c u s
( 1 . 江南大学食品学院,食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡 2 1 4 1 2 2 ) ( 2 . 北京工商大学,食品营养与人类健康北京高 精 尖创新中心,北京 1 0 0 0 4 8 )
摘要 :对新疆 自然发酵骆驼乳 中乳酸菌菌群进行分 离鉴定得到五株 乳酸菌,其 中乳杆菌 3株分别为瑞士乳杆菌 ( L a c t o b a c i l l u s h e l v e t i c u s ) 、植物乳杆菌 ( L a c t o b a c i l l u s p l a n t r u m) 和开菲尔乳杆菌 ( L a c t o b a c i l l u s k e  ̄ r i ) ,片球菌 2株分别为乳酸片球菌 ( P e d i o c o c c u s a c i d i l a c t i c i )戊糖 片球菌 ( P e d i o c o c c u s p e n t o s a c e u s ) 。分离鉴定出的五株乳酸菌在培养基中生长 良好 ,其活菌数在培 养 1 6 h后能达到 1 0 C F U / mL 。将传统 酸奶发酵剂接种于骆驼乳 中并于 4 2℃条件下培养,发现其在骆驼乳中能较好地产酸,其添加量在 O . 1 %时最适。 将筛选到的乳酸菌制备成生产发酵剂与传统酸奶发酵剂复配,得到瑞士乳杆 菌组的复配效果最佳 ,具有最优的产 酸效果,在经过 6h 发酵后 p H值降到 4 . 5左右,酸度达到 8 5 o T,且制备的发酵骆驼乳具有最好的感官品质 ,其感官评分明显 高于其他 菌株 复配进行 发酵 的骆驼乳产品。 因此 ,可将 O . 1 %传 统酸奶发酵剂与 筛选到的瑞士乳杆菌制备的生产发酵剂复配应用于酸驼乳发酵。

酸驼乳发酵机理及生产工艺探讨

酸驼乳发酵机理及生产工艺探讨

酸驼乳发酵机理及生产工艺探讨李新玲;徐敏;陆东林;叶东东;王丽【摘要】This article investigate the microorganism, special flavor and other fields of 12 natural fermentation Shubat which selected from herdsman in Dabancheng, Urumqi. The dominant lactic acid bacteria and yeast strains isolated from natural fermentation Shubat were applied for the product test of Shubat after identiifcation, the product we obtained can be stored over 60 days at 2~6℃ and better than natural fermentation Shubat product in quality and special lfavor. The technological process of industrial production of Shubat was established, and some suggestions about the index of product standard were given in this article.%对新疆乌鲁木齐市达坂城区牧民自酿的12个自然发酵酸驼乳样品进行微生物、风味等方面研究。

把从自然发酵酸驼乳中分离出的优势乳酸菌、酵母菌菌株经鉴定应用到酸驼乳产品开发试验中,得到在2~6℃下保质期60天、质量和风味优于自然发酵酸驼乳的产品。

确定工业化生产酸驼乳的工艺流程,并提出产品标准指标的建议。

【期刊名称】《中国乳业》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】3页(P64-66)【关键词】自然发酵酸驼乳;菌种分离鉴定;产品开发;生产工艺;质量控制【作者】李新玲;徐敏;陆东林;叶东东;王丽【作者单位】新疆天润生物科技股份有限公司;新疆乌鲁木齐市动物疾病预防与诊断中心; 新疆乌鲁木齐市奶业协会;新疆乌鲁木齐市奶业协会;新疆维吾尔自治区奶业办公室;新疆天润生物科技股份有限公司【正文语种】中文酸驼乳,哈萨克语为“Shubat”,是以新鲜骆驼乳为原料利用天然发酵剂和传统发酵技术酿制而成的一种饮品。

酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵3(DOC)

酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵3(DOC)

酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵吴英玲 10197020 10生物创新班摘要:酵母菌喜欢酸性环境,可利用乳酸豆芽葡萄糖培养基富集培养酵母菌,然后在YPG培养基上用划线法分离纯化出酵母菌。

将分离的酵母菌转接于YPG斜面培养基上培养,待长好后置于冰箱内4 ℃下保存。

用TTC显色剂及杜氏小管观察法筛选出发酵能力高的酵母菌。

并通过菌落形态、细胞形态、生化分析及分子生物学手段进行微生物鉴定。

采用PVA-海藻酸钠固定化技术固定酵母细胞进行酒精发酵。

关键词:酵母菌分离鉴定固定化酒精发酵Abstract: Yeast like acid environment, the use of lactic acid glucose medium enrichment culture yeast, bean sprouts and purification by marking method on the YPG culture medium of yeast will transfer separation of the yeast in the YPG cant medium cultivation, staying long placed in the refrigerator after use the TTC chromogenic agent, save and duchenne tubular observation screen high fermentationability by colony morphology of yeast cell morphological and biochemical analysis and molecular biology means to identify the microorganisms using PVA - sodium alginate immobilized technology fixed yeast cells for ethanol fermentation。

驼奶中乳酸菌的分离鉴定

驼奶中乳酸菌的分离鉴定

分析检测驼奶中乳酸菌的分离鉴定任冬艳,李 磊,李翠平,孙洁宇,韩毅峰,闫继彪(内蒙古普泽生物制品有限责任公司,内蒙古呼和浩特 010080)摘 要:采用传统纯培养方法对内蒙古阿拉善地区的驼奶进行乳酸菌的分离纯化,运用16S rRNA测序技术对其种属进行鉴定。

结果表明,经16S rRNA基因序列分析,将分离到的7株乳酸菌鉴定为3个属,4个种,分别为3株Lactococcus lactis,2株Enterococcus gilvus,1株Lactobacillus paracasei,1株Leuconostoc mesenteroides。

其中,Lactococcus lactis为样品的优势菌种。

关键词:乳酸菌;多样性;16S rRNA基因序列分析;驼奶Isolation and Identification of Lactic Acid Bacteria fromCamel MilkREN Dongyan, LI Lei, LI Cuiping, SUN Jieyu, HAN Yifeng, YAN Jibiao (Inner Mongolia Puze Biological Products Limited liability Company, Hohhot 010080, China)Abstract: In this study, a camel milk collected from Alxa area of Inner Mongolia were isolated and purified lactic acid bacteria by traditional pure culture method. The 16S rRNA sequence analysis and phylogenetic evolutionary relationship were used to identify the species. The results showed that 7 strains of lactobacillus isolated were identified as 3 genera and 4 species by 16S rRNA gene sequence analysis. 7 isolates were identified to 3 strains of Lactococcus lactis, 2 strains of Enterococcus gilvus, 1 strains of Lactobacillus paracasei, 1 strains of Leuconostoc mesenteroides, Lactococcus lactis is the dominant species.Keywords: lactic acid bacteria; diversity; 16S rRNA gene sequencing; camel milk骆驼是我国西北和华北荒漠、半荒漠地区的重要畜种资源之一,也是这一地区草原畜牧业的重要组成部分。

新疆传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌的分子生物学鉴定

新疆传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌的分子生物学鉴定

Pl a n t a r u m( AT C C 1 4 9 1 7 ) 的相 似 率 分 别 为 1 0 0 、 9 9 . 8 7 %、 9 9 . 8 和9 9 . 7 4 。 结 论 1 0号 乳 酸 菌 菌 种 经 分 子 生
物学鉴定为 L a c t o b a c i l l u s p e n t o s u s( J C M 1 5 5 8 ) 。 关 键 词 :发 酵 驼 乳 ;乳 酸 菌 ;1 6 S r D NA; 分 子 鉴 定 中图分类号 : R 3 7 8 . 9 9 文 献标 识 码 : A 文章 编 号 : 1 0 0 9 — 5 5 5 1 ( 2 0 1 4 ) 0 2 — 0 1 5 5 — 0 5
摘 要 : 目 的 对 新 疆 阿 勒 泰 牧 区 哈 萨 克 传 统 发 酵 驼 乳 中分 离 出 的 一 株 乳 酸 菌 进 行 分 子 生 物 学 鉴 定 。 方 法 采用 D NA 提 取 、 P C R 扩增 、 1 6 S r D NA 产 物 测 序 和 数 据 分 析 对 该 菌 株进 行 系 统 发 育 分 析 鉴 定 。 结 果 1 6 S r D—
第3 7卷
第 2期
新 疆 医 科 大 学 学 报
J o u r n a l o f Xi n j i a n g Me d i c a l Un i v e r s i t y
Vo 1 . 3 7 No . 2
Fe b. 201 4
2 0 1 4年 2月
新疆传 统发 酵驼 乳中分离 出的一株 乳酸菌的 分子生物学鉴定
I n s t i t u t e o f Ag r i c u l t u r a l R e s o u r c e s a n d Re g i o n a l Pl a n n i n g,C AAS,

新疆传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌的分子生物学鉴定

新疆传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌的分子生物学鉴定

新疆传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌的分子生物学鉴定拉提帕·艾尔肯;唐雪;新华·那比【摘要】Objective To identify one Lactic Acid Bacteria isolated from Xinjiang traditional fermented camel milk in molecular biologicallevel.Methods The strain was identified and analysed based on the data from DNA extraction,PCR amplification and 16S rDNA sequence analysis and phylogenetic analysis.Re-sults The rate of similarity of 16S rDNA sequencing in the strain with Lactobacillus pentosus (JCM1558T ),Lactobacillus plantarum subsp .Argentoratensis (DKO 22T ),Lactobacillus paraplantarum (DSM 10667T )and Lactobacillus plantarum subsp .Plantarum (ATCC 14917 T)reached 100%,99.87%, 99.8% and 99.74% after comparing with that in Eztaxon database,rpoA,conservative gene NCBI database for sequence alignment,sequence of lactic acid bacteria strains fermented in camel milk and reported lacto-bacillus strains 16 s rDNA,rpoA,pheS sequence using MEGA 5.2 software for phylogenetic analysis.Con-clusion The strains of 10 identified by molecular biological way is Lactobacillus pentosus (JCM 1558T).%目的:对新疆阿勒泰牧区哈萨克传统发酵驼乳中分离出的一株乳酸菌进行分子生物学鉴定。

酸奶中常见真菌的分离、鉴定与快速检测

酸奶中常见真菌的分离、鉴定与快速检测

酸奶中常见真菌的分离、鉴定与快速检测杜莹S潘佩平S李敏2,李瑶2,范晓军2*(1.山西省生物研究所,山西太原030006;2.太原理工大学化学化工学院,山西太原030024)摘要:该研究首先对导致酸奶腐败变质的微生物进行分离、鉴定,鉴定结果显示红酵母和根霉菌是最常见的酸奶污染真菌种类。

通 过速冻研磨的DNA提取方法获取酸奶中真菌总DN A,在比较了各微生物的检测DNA条形码后,确定了内部转录间隔区(ITS)和大亚 基序列CLSU)这两个基因序列在酵母菌和霉菌的分子检测上均呈现较好的扩增效率,在此基础上建立了红酵母和根霉菌的荧光定 量PCR标准检测曲线,形成了一套乳制品中真菌的快速检测体系,将酸奶中污染真菌的检测时间缩短至5 h。

关键词:酸奶;酵母;霉菌;DNA条形码;快速检测中图分类号:TS262.2 文章编号:0254-5071 (2018)04-0057-04 doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2018.04.011 Isolation, identification and rapid detection o f common fungi in yogurtD U Y ing1, PA N Peiping1, LI M in2, LI Y ao2, FA N X iaojun2*(l.B io lo g y Institute o f S hanxi,Taiyuan 030006, China; 2.C ollege o f C hem istry and Chem ical Engineering,Taiyuan U niversity o f Technology, Taiyuan 030024, China)Abstract: Microbes that caused yogurt deterioration were isolated and identified, and the results showed that Rhodotorula sp. and Rhizopus sp. were the common fungi that caused yogurt deterioration. Using DNA extraction way o f quick freezing grinding, the total DNA o f the fungus in yogurt was obtained, after comparing the various microbial detection o f DNA barcode, gene sequence internal transcribed spacer (ITS) and large subunit sequences (LSU) showed good amplification efficiency in the molecular detection o f yeast and mould, on this basis, the standard detection curve based on real­time PCR method of Rhodotorula sp. and Rhizopus sp. was established. Finally, a rapid detection system for fungi in dairy products was formed, which reduced the detection time o f contaminated fungi in yogurt to 5 h.Key words:yeast; mould; DNA barcode; rapid detection乳制品是一种营养丰富,容易被人体消化吸收的天然 食品,随着人们生活水平的提高,相关产品已经成为生活 中常见的健康食品。

骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究

骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究

骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究管志荣;朱研;童志霞;党彦宁;蒋慧【期刊名称】《畜牧与饲料科学》【年(卷),期】2014(000)007【摘要】Alhagi sparsifolia silage was diluted and coated to obtain single bacteria. And single bacteria were purified on PDA medium to obtain three stains of Gram positive bacteria. And the colony morphological identification, physiological and biological properties and ITS(ITS1+5.8S+ITS2)sequencing homology analysis were made on the positive bacteria. The results showed that one strain of red single colony was round or oval,and its centre was ridgy. This stain was able to utilize varied of carbon sources (sucrose, D-galactose, etc.) and two kinds of nitrogen sources [(NH4)2SO4 and L-glutamic acid]. But this strain wasn′t able to utilize KNO3. The whole sequence length of 5.8S rDNA was 616 bp. The homology between this strain and Rhodotorula mucilaginosa ATCC4054(NCBI accession number:KC881069)was 99.8%by DNA Star Software. So this strain was identified as Rhodotorula mucilaginosa.%用青贮骆驼刺进行倍比稀释、涂布获得单菌落,单菌落在PDA培养基上划线纯化,获得3株革兰氏阳性菌,经菌落形态特征鉴定、生理生化特征鉴定及ITS(ITS1+5.8S+ITS2)序列同源性分析,结果表明:其中1株菌红色单菌落的细胞形态呈圆形或椭圆形且中央隆起,能够利用蔗糖、D-半乳糖等多种碳源和(NH4)2SO4、L-谷氨酸2种氮源,不利用KNO3,5.8S rDNA测序的序列全长616 bp,采用DNA Star软件分析序列与胶红酵母标准菌株ATCC 4054(NCBI登录号:KC881069)的5.8S rDNA基因序列同源性为99.8%,确定其为胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)。

骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究

骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究
( Rh o d o t o r u l a mu c i l a g i n o s a ) 。
关键词 : 胶红酵母 ; 分 离 鉴定 ; 生理生化特 ; 5 . 8 S r D N A; 骆 驼 刺 中图分类号 : S 8 1 6 文献标识码 : A 文 章顺 序 编 号 : 1 6 7 2 — 5 1 9 0 ( 2 0 1 4 ) 0 7 — 0 0 2 5 — 0 3
St u dy o n t he I s o l a t i o n ,I de nt i ic f a t i o n a n d Cha r a c t e r i s t i c s o f Rh o d o t o r ul a mu c i l a gi no s a i n
畜牧 与饲 料 科 学
A n i m a l Hu s b a n d r y nd a F e e d S c i e n c e
骆驼刺青贮中胶红酵母菌分离鉴定和菌株特性研究
管志 荣 , 朱 研 , 童 志 霞 , 党彦 宁 , 蒋 慧 1 , 2
( 1 . 塔 里 木大 学 动 物科 技 学 院 , 新疆 阿拉 尔 8 4 3 3 0 0 ; 2 . 塔 里木 畜 牧科 技 兵 团 重点 实 验 室 . 新疆 阿拉 尔 8 4 3 3 0 0 )
Hu s b a n d r y S c i e n c e a n d T e c h n o l o y g i n X i  ̄i a n g P r o d u c t i o n &C o n s t r u c t i o n C o r p s , A l a r 8 4 3 3 0 0 , C h i n a ) A b s t r a c t : l h a g i s p a r s i f o l i a s i l a g e w a s d i l u t e d a n d c o a t e d t o o b t a i n s i n g l e b a c t e r i a . A n d s i n g l e b a c t e r i a w e r e p u i r i f e d o n P D A

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定

新疆自然发酵酸马奶中酵母菌的分离鉴定祝春梅;姚新奎;孟军;王建文;刘志安;刘佳;李智军;马军;任海帆【摘要】从自然发酵酸马奶中分离出25株酵母菌,并对酵母菌进行传统形态学、生理生化特性鉴定.鉴定结果为:12株为克鲁维酵母属Kluyveromyces(8株为马克思克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus,4株为乳酸克鲁维酵母Kluyveromyces lactis)、1株为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、1株为白地霉Galactomyces geotrichum,其他菌株无法推断出.再利用5.8S rDNA序列同源性分析,对25株酵母菌进行分子生物学鉴定,同时对1、2、18、25、27、28号菌株进行系统发育树分析.鉴定结果为:10株单孢酿酒酵母Kazachstania unispora、8株马克思克鲁维酵母K.marxianus、4株乳酸克鲁维酵母ctis、1株酿酒酵母S.cerevisiae、1株白地霉G.geotrichum、菌株27疑似新种.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2013(039)004【总页数】6页(P42-47)【关键词】酸马奶;酵母菌;分离鉴定;分子生物学鉴定【作者】祝春梅;姚新奎;孟军;王建文;刘志安;刘佳;李智军;马军;任海帆【作者单位】新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052;新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐,830052【正文语种】中文自然发酵酸马奶中的微生物极为丰富,主要有益微生物由乳酸菌和酵母菌两大部分组成。

新疆传统发酵酸驼乳优势菌种短乳杆菌高密度培养技术

新疆传统发酵酸驼乳优势菌种短乳杆菌高密度培养技术
因子 的交互作用及其最佳 水平范 围,高密 度发酵培养 的培养 基优 化配方为 :乳清 粉6 0 g / L、蔗糖 l 8 L、胰 蛋 白胨
1 3 . 0 2 g / L、玉米浆 1 3 0 mL / L 、C a C O3 3 . 2 9 g / L 。
关键词 :传统发酵酸驼乳 ;短乳杆 菌;高密度培养 ;响应 曲面法
1 3 . 0 2 g / L t y p t o n e .1 3 0 mL/ L t o m s t e e p l i q u o r , a n d 3 . 2 9 g m Ca CO3 .
f o mu r l a t i o n f o r h i g h - d e n s i y t c u l t i v a t i o n o f t h e s t r a i n wa s f o u n d t o b e c o mp o s e d o f 6 0 g / L wh e y p o wd e r ,1 8 g / L s u c r o s e ,
1 7 8 2 o 1 6 , V o 1 . 3 7 , N o . 2 3
食 品 科 学
※生物工程 术
沙吉坦穆 ・ 克依斯尔 ,古丽皮艳 ・ 托乎提,努丽艳 ・ 阿不都米力克, 日 孜万古力 ・ 艾山,努尔古丽 ・ 热合曼
( 新疆 师范大学生命科学 学院,新疆 乌鲁木齐 摘 8 3 0 0 5 4 ) 要 :以分离 自传统发酵酸驼乳 中的优势 菌种 短乳杆 菌作为材料 ,通 过单因素试验,确定微囊化短乳杆菌的最佳
l i q u i d ・ c o r e mi c r o c a p s u l e s o f L a c t o b a c i l l u s b r e v i s M3 — 3 a s a d o mi n a n t s t r a i n i s o l a t e d f r o m Xi n j i i a n g t r a d i t i o n a l f e me r n t e d

酸马奶中酵母菌5_8SrDNA及ITS的基因序列分析

酸马奶中酵母菌5_8SrDNA及ITS的基因序列分析

酸马奶中酵母菌5.8S rDNA 及ITS 的基因序列分析苟荣1,姚新奎1,李红1,谭晓海2,努尔巴哈提2,马江飞2,刘珩1,玉山江1,叶再华1,陈阳1,潘晓东1(1.新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐 830052;2.新疆伊犁昭苏马场,新疆昭苏 835602)摘 要:实验将两株从酸马奶中分离提纯的酵母菌,提取单菌株基因组DNA,用一对真菌通用引物ITS1和ITS4PCR 扩增它们的5.8S rRNA 和ITS 基因,连接入pMD19-T 载体,克隆鉴定后,测定序列,将测得的序列与GenBank 数据库的序列进行同源性分析,并建立系统进化树。

结合系统发育树及5.8S rDNA 和ITS 的序列分析结果,将菌株J14和S33判定为Kluyveromyces marx ianus (马克斯克鲁维酵母)。

酸马奶中传统的酵母菌分类主要依靠形态学和生理生化等鉴定方法,实验首次利用5.8S rRNA 和ITS 基因扩增和测序的分子生物学方法对其进行鉴定。

关键词:酸马奶;酵母菌;5.8S rDNA;ITS;同源性;系统发育树中图分类号:S879.1 文献标识码:A 文章编号:1001-4330(2008)05-0868-07Sequence Analysis on 5.8S rDNA and ITS of Yeast from KoumissGOU Rong 1,YAO Xin-kui 1,LI Hong 1,TAN Xiao-hai 2,Nuerbahati 2,MA Jiang-fei 2,LI U Heng 1,Yushanjiang 1,YE Zai-hua 1,CHEN Yang 1,PAN Xiao-dong1(1.College o f Animal Science,Xinjiang Agricultural University ,Urumqi 830052,China;2.Xinjiang Zhaosu Stud,Zhaosu Xinjiang 835602,China)Abstract:The main purpose of the experiment was to extract genome DNA from the two yeast strains that were isolated from koumiss,and to a mplify 5.85rRNA and I TS gene by use of a pair of primers,namely,I TS and I TS4,then connect with the pRNA vector.Agter cloning,the sequence determination was conducted.Scientists made homologous analysis on the obtained sequence and the sequence of GenBank data base and system evolutionary tree was bined with analysis of the phylogenetic tree and partial sequences of 5.8S rDNA and I TS,J14and S33was classified as Kluyveromyces marxianus.The innovation stress in this experiment is that:the traditional yeast taxology in koum iss mainly depends on morphological,physio -biochemistry and other identification methods.In this experiment the 5.85rRNA and ITS genes were firstly determined with molecular biological method.Key words:koumiss;yeast;5.8S rDNA;ITS;homology;phylogenetic dendrogram酸马奶(Koumiss)是以新鲜马奶为原料,加入乳酸菌和酵母菌等微生物的天然发酵剂,自然发酵形成的一种酸性低乙醇含量的乳饮品,是我国蒙古族、哈萨克族和柯尔克孜族等少数民族地区的传统乳制品[1~3]。

酵母菌的分离及鉴定

酵母菌的分离及鉴定

酵母菌的分离及鉴定西北师范大学学报(自然科学版)第33卷1997年第2期56JournalofNorthwestNormalUniversity(NaturalScience)Vol133 1997No12酵母菌的分离及鉴定3冯克宽王明谊曾家豫(西北师范大学生物系兰州730070)第一作者简介冯克宽,男,58岁.1959,为纤维素酶及乳酸菌.中图法分类号Q939摘要952021、Sy942021、Sy942021的酵母菌株,:克洛克酵母属(Kloeckeasp.)、假丝酵母属(Candida)的热带假丝酵母(Tropicaeis)、类酵母属(Saccharomycodes)的中国类酵母(sinensis).关键词酵母菌分离鉴定热带假丝酵母酵母菌(yeasts)广泛分布于自然界,与人类有着密切关系.人们在日常生活中早就将酵母菌应用于制造酒类饮料,以及用来生产乙醇、甘露醇、有机酸和甘油等〔1〕,近年来由于生产和科学技术的迅速发展,酵母菌的应用愈来愈显得广泛.随着世界人口的增加,解决人类的食物和能量问题已成为关键性问题,酵母因蛋白质含量高可以用来制造食用酵母和饲料酵母,因而其资源开发潜力很大,国外十分重视这一方面的开发和利用,如前苏联利用各类不同废物发酵生产单细胞蛋白(SCP),年产可达120万t,而我国需要量虽大,但生产量远远赶不上生产实际的需要,因此不断筛选SCP产生菌也就成为生产中的关键问题〔1〕.笔者对吐鲁番土样中所筛选的3株酵母菌,通过形态、生理生化特征鉴定,确定到种,以进一步研究其应用价值.1 材料与方法〔2〕1.1 材料新疆吐鲁番和火焰山附近土样.1.2 培养基(1)麦芽汁培养基;(2)葡萄糖酵母膏蛋白胨培养基;(3)Mcclary培养基;(4)玉米粉培养基;(5)糖发酵基础培养基;(6)同化碳源基础培养基;(7)同化乙醇基础培养基;(8)同化氮源基础培养基;(9)杨梅苷培养基;(10)产类淀粉培养基;(11)产酯培养基;(12)无维生素基础培养基;(13)尿素分解培养基;(14)需维生素培养基;(15)高渗培养基;(16)明胶培养基;(17)石蕊3甘肃省自然科学基金资助课题收稿日期:1996-12-16。

阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究

阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究

食品研究与开发F ood Research And Development圆园20年8月第41卷第16期DOI :10.12161/j.issn.1005-6521.2020.18.031基金项目:国家自然科学基金项目(31560443);内蒙古自治区科技成果转化项目(CGZ2018122);内蒙古自然科学基金项目(2017MS0306)作者简介:FAHAD Shah (1995—),男,在读硕士研究生,研究方向:食品微生物。

*通信作者阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究FAHAD Shah 1,徐鸿洋1,智超2,宫海萌1,张和平1,赵国芬1,*(1.内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010011;2.江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122)摘要:以采自内蒙古阿拉善地区的传统发酵阿拉善双峰驼酸驼乳为材料,采用乳酸细菌培养基(MRS )对其中的乳酸菌进行初分离,经平板划线法纯化后,借助16SrDNA 的序列分析法进行分子鉴定,并对其耐酸性、产酸能力、最适pH 值及耐盐性等性质进行研究。

结果表明,分离纯化出3株疑似优势乳酸菌,分别为乳杆菌属的Lactobacillus plantarum strain KC28、Lactobacillus plantarum strain K25和Lactobacillus sp.D1501。

3株菌均为革兰氏阳性,耐酸性较好,产酸性能适中;最适培养pH 值为6.5。

关键词:酸驼乳;乳酸菌;传统发酵;耐酸性;耐盐性Separation ,Identification ,Acid-Resistent and Halotolerant Characterization ofLactic acid bacteria from Shubat of Alashan Bactrian CamelFAHAD Shah 1,XU Hong-yang 1,ZHI Chao 2,GONG Hai-meng 1,ZHANG He-ping 1,ZHAO Guo-fen 1,*(1.Life Sciences College ,Inner Mongolia Agricultural University ,Hohhot 010011,Inner Mongolia ,China ;2.College of Chemical &Material Engineering ,Jiangnan University ,Wuxi 214122,Jiangsu ,China )Abstract :In this study the traditional fermentational shubat of Alashan bactrian camel in Inner Mongolia wasused as an example ,the Lactic acid bacterias were initially separated using the MRS medium ,further purified by flat scribing and identified by 16SrDNA sequence analysis.Then ,their acid resistance ,acid productionability ,optimum pH value and halotolerance etc.were studied.The results showed that separated and purified three suspected dominant Lactic acid bacterias which divided into Lactobacillus and were Lactobacillus plantarum strain KC28,Lactobacillus plantarum strain K25and Lactobacillus sp.D1501,respectively.All 3strains were gram-positive that possessed good acid resistance ,moderate acid production performance and halotolerance.The optimum pH value were 6.5.Key words :shubat ;Lactic acid bacteria ;traditional fermentation ;acid-resistence ;halotolerance引文格式:FAHAD Shah ,徐鸿洋,智超,等.阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究[J].食品研究与开发,2020,41(18):189-194FAHAD Shah ,XU Hongyang ,ZHI Chao ,et al.Separation ,Identification ,Acid-Resistent and Halotolerant Characterization ofLactic acid bacteria from Shubat of Alashan Bactrian Camel[J].Food Research and Development ,2020,41(18):189-194驼奶营养成分丰富[1-3],有一定的保健功效,在糖尿病、肺结核、肝炎、贫血、食物过敏反应和消化道疾病等的治疗中有改善作用[4-6]。

传统发酵酸驼乳中乳酸菌的分离及鉴定

传统发酵酸驼乳中乳酸菌的分离及鉴定
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酸骆驼奶中酵母菌的分离与鉴定

酸骆驼奶中酵母菌的分离与鉴定

酸骆驼奶中酵母菌的分离与鉴定
邓时莉;吴跃华
【期刊名称】《科技创新与应用》
【年(卷),期】2013(000)024
【摘要】酸骆驼奶是一种营养价值很高的具有浓厚民族特色的保健饮品。

本文以酸骆驼奶中酵母菌为研究对象,通过对其中的酵母菌扩大培养并且分离出较纯的菌株进行鉴定。

【总页数】1页(P35-35)
【作者】邓时莉;吴跃华
【作者单位】新疆石河子大学,新疆石河子 832000;新疆石河子职业技术学院,新疆石河子 832000
【正文语种】中文
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酸骆驼奶中酵母菌的分离与鉴定
酸骆驼奶是一种营养价值很高的具有浓厚民族特色的保健饮品。

本文以酸骆驼奶中酵母菌为研究对象,通过对其中的酵母菌扩大培养并且分离出较纯的菌株进行鉴定。

标签:酸骆驼奶;酵母菌;分离鉴定
1 引言
作为一种高品质的乳饮料,酸骆驼奶有着悠久的历史,我国的哈萨克族和蒙古族等民族在远古时代就有制作和饮用骆驼奶的习惯。

酸骆驼奶中营养丰富,更加适合于人体代谢。

传统的酸骆驼奶的制作方法,使其中的微生物得到了很好的保存,尤其是酵母菌的自然特性,使得酵母菌在乳制品中发挥着极其重要的作用。

自然发酵骆驼奶中含有大量的酵母菌,它与骆驼奶的生物活性和医疗保健作用密切相关,不仅能抵抗发酵过程中有害菌的污染,而且在代谢过程中能够产生抗菌物质并促进微生物B1、B2、B12等的合成。

2 试验材料
2.1 试验原料
酸骆驼奶10ml、酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、琼脂粉、牛肉膏、氯化钠、玉米粉、干麦芽酚、干酵母粉。

2.2 培养基
YEPD培养基、硝酸盐还原试验培养基、Gorodkowa琼脂培养基、醋酸盐琼脂培养基、玉米粉琼脂培养基
2.3 试验仪器
生化恒温培养箱、超净工作台、灭菌锅、冰箱、电子分析天平、热空气消毒箱、双频数控超声波清洗器。

3 试验方法
菌种活化→扩大培养→初次扩培→二次扩培→收获→收集菌体→形态学鉴定→繁殖方式的观察→生化鉴定→收集数据
3.1 扩大培养
所使用的培养基为YEPD液体培养基,酵母粉5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,
蒸馏水500mL,调至Ph 6.0(NaoH)。

取在零摄氏度冰箱中保存的菌液2ml加入到500mlYEPD液体培养基中活化12h,将2ml活化的菌液再加入到100ml YEPD 液体培养基中培养24h,最后将20ml菌液加入到500ml YEPD培养基中进行扩大培养。

3.2 收集菌体
配置YEPD固体培养基,即酵母粉5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,蒸馏水500mL,琼脂粉10g调至Ph6.0(NaoH),并且在高压蒸汽灭菌锅121摄氏度下灭菌20min,然后将培养基倾倒到10支试管中并形成斜面。

将扩大培养的菌液在无菌实验室中接种到试管斜面上,放在29.5摄氏度的恒温箱中培养24h。

将样品用平板稀释法在沙堡弱氏培养基上于25℃培养1~3d。

挑取疑似酵母菌的单菌落,美蓝染色后做显微镜检查,确认为酵母菌的接种到沙堡弱氏斜面培养基上,纯化2~3次,置于4℃冰箱中保存。

3.3 实验方案
3.3.1 形态学鉴定(菌落形态、细胞形态、菌丝生成)
将被检菌用平板稀释法在沙堡弱氏培养基上20~25℃培养1~3d,选择单个菌落观察其颜色、形状、透明、光滑、湿润和边缘整齐等特征。

而后将被检菌接种到沙堡弱氏斜面培养基上,25℃培养24h。

美蓝染色后进行显微镜检查,观察被检菌的繁殖方式是出芽生殖或者分裂生殖。

3.3.2 酵母菌的生化鉴定
(1)不同生长条件对菌株的影响
过程:把菌种接种在相同的YEPD液体培养基上,并分装成不同的试管当中,放在不同温度的培养箱中进行培养,1号恒温箱温度为4℃,2号恒温箱温度为29℃,3号恒温箱温度为39℃,培养1~2d,取出并且观察酵母菌在试管中的生长情况;把菌种接种在不同PH和酒精度的液体培养基上,并分装成不同的试管当中,将几支试管同时置于29℃恒温箱中培养1~2d,取出并且观察酵母菌在试管中的生长情况。

(2)硝酸盐的还原实验
过程:将被检菌的生长旺盛的酵母菌接种在硝酸盐培养基中,25℃下培养1~7d,滴加甲、乙混合液(1:1),每5mL培养液加混合液0.1mL后,观察结果,呈现红色为阳性,若无红色出现,应进一步检查,向上述试验管中加少许锌粉,若出现红色,表示硝酸盐仍存在,为阴性反应(硝酸盐在醋酸的存在下,锌粉将其还原成亚硝酸盐,进一步形成芳基肼紫红色化合物);若不产生红色,表示硝酸盐已被还原为氨和氮,仍为阳性反应。

(注:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g 溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。

乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸
溶液100mL中。

使用方法:接种后在36±1℃培养1~4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果。

硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色。


(3)类淀粉物质生成实验
过程:将酵母菌接种到含有一种糖或一种多烃糖醇的液体培养集中,待生长以后,取一滴卢戈氏碘液滴入该试管中,然后把培养基和酵母菌一起摇动。

如果呈现蓝色,紫色或者是绿色表示该实验结果是阳性的。

卢戈氏碘液是5g碘、10g 碘化钾加水到100ml配制而成的,先用10ml水将碘和碘化钾溶解,然后再将其余的水加入摇匀。

应用时,该溶液还需再以1:5的比例稀释。

(4)糖类发酵实验
过程:本实验需要使用杜氏管,即一支约150mm×12mm的大试管中间套有一支约50mm×6mm的小试管。

在0.6%酵母浸汁中加入葡萄糖,使糖浓度达到2%,再将其分装于含杜氏管的试管中(注意使杜氏管中没有气泡)。

在115℃高压灭菌15min后,将生长旺盛的菌种接入发酵管中,25℃培养,每天观察结果。

(5)碳源同化实验
过程:将液体培养基分装在数支试管中,每支试管中的培养基是等量的。

该培养基除了用不含碳源的作为阴性对照外,都含有一种试验基质。

为了接种,试验用酵母菌适合生长的培养基上,如麦芽汁-酵母膏-葡萄糖-蛋白胨琼脂,并把生长活泼的培养物悬浮在含氮源的培养基内。

为保持培养结果稳定,通常做法就是使试管倾斜,通过暴露最大的表面来增加通气量,而且每天用手振动它,也可以放到要床上进行振动。

通常用肉眼来判别菌的生长,把阴性反应管和阳性反应管作为对照。

4 试验结果
将纯化出来的菌种进行活化培养,稀释涂布,培养48h后,观察其菌落形态,并挑取单菌落进行革兰氏染色,观察其菌体形态可以看出,此酵母菌为革兰氏阳性菌,其形态特征表现为形状轻微不规则,圆形末端的菌,通常单个,成对,小簇存在。

菌落为不规则型,圆形凸起,光滑,边缘整齐,菌落颜色为白色或乳白色。

菌细胞1-9号中:1、2号菌,椭圆形,有假菌丝形成,子囊内有圆形或椭圆形的子囊无掷孢子。

葡萄糖发酵阳性,硝酸盐还原反应阴性、类淀粉物质的生成试验阴性或阳性。

形态学、生化特性符合酵母属特性,归为酵母属。

7号菌细胞为芽殖,不形成菌丝,子囊内有1~4个孢子。

葡萄糖发酵阳性,硝酸盐还原、类淀粉物质的生成试验阴性。

形态学、生化特性符合有孢圆酵母属特性,归为有孢圆酵母属。

3、4、8、9号菌细胞均腊肠形。

4株菌均无有性生殖,有菌丝形成,葡萄糖发酵阳性,硝酸盐还原、类淀粉物质的生成试验阴性。

形态学、生化特性符合克勒克酵母属特性,归为克勒克酵母属。

参考文献
[1]哈斯苏荣.酸马奶及其医学价值[J].中国中药杂志,2003,28(1).
[2]周传云,聂明,万佳蓉.古老而新型的发酵奶:开菲尔[J].食品机械,2003(5).
[3]王庭柱,高学军,丛玉婷,范晓男.发酵乳球菌菌株的分离鉴定[J].食品科学,2007,43(7).
吴跃华,男,就读于新疆石河子职业技术学院。

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