生物化学实验指导

《生物化学》实验指导

实验室规则

一、实验目的

生物化学是医学教育中的一门实践性较强的基础学科。实验教学是过程的重要组成部分，是理论教学的延伸和补充。实验目的是：

1、初步学会生物化学实验的基本操作技能及实验研究的基本方法。

2、熟悉生物化学实验原理，了解一些临床生化检验项目。

3、培养严肃认真的工作方法、实事求是的科学态度、团结协作的工作作风

和观察分析、思考、独立解决问题的能力。

二、实验基本要求

实验教学包括实验前准备、实验操作、整理实验结果、书写实验报告等环节，为了提高实验效果，实现实验目的，要求学生必须做到以下几点。

（一）实验前

1、仔细阅读实验指导，了解实验目的和要求，充分理解实验原理，熟悉实

验步骤、操作程序和注意事项。

2、预测实验各个步骤可能得到的结果，对预期实验结果能做出合理的解释。

3、注意和估计实验中可能发生的误差，并制定防止误差的措施。

（二）实验时

1、保持实验室肃静，不能进行与实验无关的活动。

2、在教师或实验技术人员的指导下，熟悉仪器的构造、性能及操作规程。

3、实验器材摆放整齐，有条不紊、装置正确。

4、按照实验步骤，严肃认真的循序操作，不能随意更动。

5、爱护公物，注意节省实验器材和药品。注意安全，严防触电、火灾、酸

碱灼伤及中毒事故的发生。

6、仔细、耐心地观察实验田中出现的现象，随时客观的记录实验结果，以

免发生错误或遗漏。实验条件应始终保持一致，如有变动,应加文字说明。（三）实验后

1、整理实验结果，书写实验报告，按时交给指导教师评阅。

2、整理实验仪器和清洗玻璃仪器，关闭仪器、设备和电源。清点实验器材，

办理借还手续。

3、做好实验室清洁卫生工作，关闭水、气阀门，切断电源，关闭门窗，确

保安全。

实验一生化实验基本操作

一、实验目的

通过基本操作训练，学会熟练进行进行玻璃仪器洗涤；吸量管使用；溶液的混合；离心机使用；７２１型分光光度仪使用。

二、实验用品

烧杯、试管；吸量管、移液管；旋涡混合（振荡）器、玻璃棒；离心机使用；７２１型分光光度仪

三、实验内容及步骤

（一）玻璃仪器的洗涤

在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。洁净的玻璃仪器内壁应十分明亮光洁，无水珠附着在玻壁上。

（二）吸量管的使用

1．刻度吸量管的正确使用方法

用右手拇指和中指夹住管身，将吸量管的尖端伸入试液深处，左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制试液的泄放。吸液后应尽量使吸量管保持垂直，使右眼与刻度等高，稍微轻抬食指或轻轻转动吸量管，使试液面缓慢降落，至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。然后将吸量管插到需加试剂的容器中，让尖端与容器内壁靠紧，松开食指让液体流出。液体流完后再等15秒钟，捻动一下吸量管后移去（如需吹的吸量管，则吹出尖端的液体后再捻转一下吸量管移去）。

2．定量吸液器的使用方法(微量加样器)：

1)选择适当的吸液器：吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要轻轻旋紧一下，以保证结合严密。

2)持法：右手四指（除大拇指外）并拢握住吸液器外壳（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在吸液器的按钮上。

3)取样(吸液)：用大拇指按下按钮到第一停止点，以排出一定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，徐徐松开大拇指，让按钮慢慢自行复原，取样即告完成。

4)排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上，用大拇指慢慢地将按钮按下到第一停止点，停留1秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适当延长）。然后再把按钮按到第二停止点上，让吸嘴沿管壁向上滑动。当吸嘴尖与容器壁或溶液离开时，方可释放按钮，使其恢复到

初始位置。

5)吸液器用后应及时取下吸嘴。将吸嘴用自来水冲洗后浸入盛水的容器内（以防干涸），待实验结束后集中仔细清洗。

（三）溶液混匀

1．混匀的方法

1)使盛器作离心运动。

2)左手持试管上端，用右手指轻击试管下半部，使管内溶液作旋转运动。

3)利用旋涡混合（振荡）器混匀。

4)不得已时可用干燥清洁的玻璃棒搅匀。

（四）离心机使用

1．TGL-20M台式离心机使用方法操作程序：

1）把离心机放置于平面桌或平面台上，四只橡胶机脚应坚实接触平面，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平稳。

2）打开门盖，将离心管放入转子体内，离心管必须成偶数对称放入（离心管试液应称量加入），注意把转子体上螺钉旋紧，并重新检查试管是否对称放入、螺钉是否旋紧。3）关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关紧。

4）插上电源插座，按下电源开关。

5）设置转子号、转速、温度、时间：

（五）分光光度仪使用721型

1）721分光光度计使用前应预热20分钟，做样之前应对比色皿成套性进行校正，减小测量误差。

2）波长选择置于所要分析物相对应的波长值，

3）打开比色皿盖进行调零调整面板0旋钮进行零点调整。

4）将空白放入比色皿盒后盖上比色皿盖，调整100旋钮进行100%调整。

5）然后逐一拉出样品进行比色分析。

四、实验报告与内容（略）

五、注意事项

（一）使用刻度吸量管的注意事项：

1)选择适当规格的吸量管：吸量管的最大容积应等于或略大于所需容积（ml数）。

2)仔细看清吸量管的刻度情况：刻度是否包括吸量管尖端的液体？读数方向是从上而