血清抗体效价的测定
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实验报告
10.选择波长630nm,将酶标板置于载板台上,开始扫描,测定OD值。
结果如下所示:
思考题:
1.查阅资料,了解共有哪些类型的ELISA实验,以及本实验中所用ELISA属于哪一类?答:本实验中所用ELISA属于间接法ELISA。
①直接ELISA
原理:将抗原与固相载体连接,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
加酶标抗体进行孵育。
固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。
彻底洗涤未结合的酶标抗体。
此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
加底物反应。
直接法主要用于测定抗原。
②间接法ELISA
原理:将抗原与固相载体相连结,形成固相抗原。
洗涤除去未结合的抗原及杂质。
加入特异性一抗与固相抗原相结合,形成固相抗原抗体复合物。
经洗涤后,加酶标二抗。
固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合,从而间接地标记上酶。
洗涤后,加底物显色。
③双抗夹心法ELISA
原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。
将特异。