生物化学技术原理总复习
生物化学复习资料
生物化学复习资料生物化学是研究生物体内各种化学成分及其相互关系的一门学科。
它是生物学和化学两门学科的交叉领域,通过对生物体内的化学物质进行分析和研究,揭示生命现象的基本原理和机制。
以下是关于生物化学的复习资料,希望能够帮助同学们温故知新。
一、生物大分子的结构与功能1. 蛋白质:蛋白质是生物体内最重要的物质之一,由氨基酸组成,具有结构和功能多样性。
了解蛋白质的结构层次(一级结构、二级结构、三级结构和四级结构)、功能和分类是生物化学的基础。
例如,酶是一类重要的蛋白质,它可以催化生物体内的化学反应。
2. 核酸:核酸是构成生物体遗传信息的基本单位,包括DNA和RNA。
DNA是遗传信息的存储介质,RNA参与蛋白质的合成。
了解核酸的结构、功能和生物合成是理解遗传信息传递的关键。
3. 多糖:多糖是一类碳水化合物,由单糖分子通过糖苷键结合而成。
多糖在生物体内具有能量储存和结构支持的功能。
了解多糖的种类、结构和生物功能对于了解生物体内的能量代谢和细胞结构具有重要意义。
二、代谢与能量1. 代谢途径:代谢是生物体内的化学反应过程,包括物质的合成、降解和转化。
了解代谢途径(如糖酵解、脂肪酸合成、氨基酸代谢等)和相关酶的作用是理解生物体内化学反应的基本原理。
2. 能量产生与转化:生物体内的能量主要来自ATP(三磷酸腺苷)的合成和分解。
了解ATP的结构、合成途径和参与的能量转化过程是理解生物体内能量代谢的关键。
三、酶的性质与调节1. 酶的性质:酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,具有高度的专一性和催化效率。
了解酶的底物特异性、酶促反应的速率和酶的催化机制是理解酶学的基础。
2. 酶的调节:生物体内的酶活性可以通过多种方式进行调节,如底物浓度、温度、pH值的变化以及酶的共价修饰等。
了解酶的调节机制对研究生物体内代谢的调控具有重要意义。
四、生物体内的信号传导1. 细胞膜受体:细胞膜受体是生物体内信号传导的重要组成部分,包括离子通道和酶联受体等。
生物化学复习题及答案
生物化学复习题及答案生物化学是研究生命体内化学过程和物质转化的科学,它涉及到细胞内各种生物分子的结构、功能和代谢途径。
以下是一些生物化学的复习题及答案,供学习者参考。
题目1:简述酶的催化机制。
答案:酶是生物体内具有催化作用的蛋白质,其催化机制通常涉及酶的活性部位与底物的结合。
酶降低反应的活化能,从而加速反应速率。
酶的活性部位通常具有与底物相匹配的形状,使得底物能够精确地与酶结合,形成酶-底物复合物。
在复合物形成后,底物分子发生化学变化,生成产物,随后产物从酶的活性部位释放,酶恢复其原始状态,准备进行下一轮催化。
题目2:解释DNA复制的保真性。
答案:DNA复制的保真性指的是复制过程中新合成的DNA链与模板链的高度一致性。
这种高保真性主要依赖于DNA聚合酶的高度选择性,它能够识别并正确地将互补的核苷酸与模板链配对。
此外,DNA聚合酶还具有校对功能,能够检测并纠正配对错误,从而确保复制过程的准确性。
题目3:描述细胞呼吸过程中的能量转换。
答案:细胞呼吸是细胞内将有机物质氧化分解,释放能量的过程。
这个过程主要分为三个阶段:糖酵解、克雷布斯循环(柠檬酸循环)和电子传递链。
在糖酵解阶段,葡萄糖分解为丙酮酸,释放少量能量。
在克雷布斯循环中,丙酮酸进一步氧化,产生更多的高能电子和二氧化碳。
最后,在电子传递链中,这些高能电子通过一系列氧化还原反应传递,最终将电子传递给氧气,形成水,同时释放大量能量。
这些能量部分以ATP的形式储存,供细胞使用。
题目4:简述蛋白质合成的基本原理。
答案:蛋白质合成主要在细胞质中的核糖体上进行,这个过程称为翻译。
首先,mRNA携带遗传信息从细胞核转移到核糖体。
核糖体识别mRNA上的起始密码子,然后tRNA携带相应的氨基酸与mRNA上的密码子配对。
核糖体沿着mRNA移动,逐个添加氨基酸,形成多肽链。
当遇到终止密码子时,蛋白质合成结束,新合成的多肽链随后折叠成其特定的三维结构,形成具有生物活性的蛋白质。
生物化学知识点总结复习
C、葡萄糖激酶 D、丙酮酸激酶
02
03
一分子乙酰CoA彻底氧化可产生 ( )ATP
01
A、10个 B、12
02
C、15 D、12.5
03
蛋白质的基本结构单位是下列哪个: ( )
酶被底物饱和程度的常数
酶的稳定性的常数
米氏常数Km是一个可以用来度量( )。
02
01
03
04
05
具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其化学本质是( )。
01
A、蛋白质B、RNA C、DNAD、酶
02
下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是( )。
A、三羧酸循环B、氧化磷酸化C、脂肪酸β氧化D、糖酵解作用
01
GTP B.ATP C.磷酸肌酸
02
D.3-磷酸甘油醛 E.1,3-二磷酸甘油酸
03
白化症的根本原因之一是由于先天性缺乏( ):
A.酪氨酸转氨酶 B.苯丙氨酸羟化酶 C.酪氨酸酶
D.尿黑酸氧化酶 E.对羟苯丙氨酸氧化酶
04
催化逆转录过程的酶主要是( )
01
DNA依赖的DNA聚合酶
壹
贰
大多数蛋白质中的含氮量( ) A. 6% B. 16% C. 23% D. 10%
1
关于tRNA的哪一条是错误的
2
A.氨基酸的运载工具 B.都有反密码子 C.对氨基酸有高度特异性
3
D.一种tRNA可携带不同的氨基酸 E.分子中含有稀有碱基多
Vmax降低,Km不变
Vmax降低,Km降低
Байду номын сангаас
Vmax不变,Km降低
《生物化学》知识点总结
生物化学复习题第一章绪论1. 名词解释生物化学:生物化学指利用化学的原理和方法,从份子水平研究生物体的化学组成,及其在体内的代谢转变规律,从而阐明生命现象本质的一门科学。
其研究内容包括①生物体的化学组成,生物份子的结构、性质及功能②生物份子的分解与合成,反应过程中的能量变化③生物信息份子的合成及其调控,即遗传信息的贮存、传递和表达。
生物化学主要从份子水平上探索和解释生长、发育、遗传、记忆与思维等复杂生命现象的本质2. 问答题(1)生物化学的发展史分为哪几个阶段?生物化学的发展主要包括三个阶段:①静态生物化学阶段 (20 世纪之前):是生物化学发展的萌芽阶段,其主要工作是分析和研究生物体的组成成份以及生物体的排泄物和分泌物②动态生物化学阶段(20 世纪初至20 世纪中叶):是生物化学蓬勃发展的阶段,这一时期人们基本弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径③功能生物化学阶段(20 世纪中叶以后):这一阶段的主要研究工作是探讨各种生物大份子的结构与其功能之间的关系。
(2)组成生物体的元素有多少种?第一类元素和第二类元素各包含哪些元素?组成生物体的元素共28 种第一类元素包括C、H、O、N 四中元素,是组成生命体的最基本元素。
第二类元素包括S 、P 、Cl、Ca、Na、Mg,加之C、H、O、N 是组成生命体的基本元素。
第二章蛋白质1. 名词解释(1)蛋白质:蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相连形成的高份子含氮化合物(2)氨基酸等电点:当氨基酸溶液在某一定pH 时,是某特定氨基酸份子上所带的正负电荷相等,称为两性离子,在电场中既不向阳极也不向阴极挪移,此时溶液的pH 即为该氨基酸的等电点(3) 蛋白质等电点:当蛋白质溶液处于某一pH 时,蛋白质解离形成正负离子的趋势相等,即称为兼性离子,净电荷为0,此时溶液的pH 称为蛋白质的等电点(4) N 端与 C 端:N 端(也称N 末端)指多肽链中含有游离α-氨基的一端, C 端(也称C 末端)指多肽链中含有α-羧基的一端(5)肽与肽键:肽键是由一个氨基酸的α -羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而形成的化学键,许多氨基酸以肽键形成的氨基酸链称为肽(6)氨基酸残基:肽链中的氨基酸不具有完整的氨基酸结构,每一个氨基酸的残存部份称为氨基酸残基(7)肽单元(肽单位):多肽链中从一个α -碳原子到相邻α-碳原子之间的结构,具有以下三个基本特征①肽单位是一个刚性的平面结构②肽平面中的羰基与氧大多处于相反位置③α-碳和-NH 间的化学键与α-碳和羰基碳间的化学键是单键,可自由旋转(8)结构域:多肽链的二级或者超二级结构基础上进一步绕蜿蜒叠而形成的相对独立的三维实体称为结构域。
生物化学总复习
生物化学总复习题型一、判断题,10分二、选择题,10分三、英文缩写符号中文含义,5分四、填空题,35-43分五、名词解释,6个,18分六、叙述题,3-4题,23-30分各种题型复习一、判断题第一章核酸化学1.tRNA的二级结构是倒L型。
(×)2.DNA分子中的G和C的含量愈高,其熔点(Tm)值愈大。
(√)3.Tm值高的DNA,其(A+T)百分含量也高。
(×)4.如果DNA一条链的碱基顺序是CTGGAC,则互补链的碱基序列为GACCTG。
(×)5.在tRNA分子中,除四种基本碱基(A,G,C,U)外,还含有稀有碱基。
(√)6.一种生物所有体细胞的DNA,其碱基组成均是相同的,这个碱基组成可作为该类生物种的特征。
(√)7.真核mRNA分子5’末端有一个Poly A结构。
(×)8.真核mRNA分子3'末端有一个Poly A结构。
(√)9.DNA是遗传物质,而RNA则不是。
(×)10.DNA双螺旋结构中,由氢键连接的碱基对形成一种近似平面的结构。
(√)11.RNA的分子组成中,通常A不等于U,G不等于C。
(√)第二章蛋白质化学1.三肽Ala-Asp-Gly也可以写作H2N-Ala-Asp-Gly-COOH。
(√)2.三肽Ala-Asp-Gly也可以写作HOOC-Ala-Asp-Gly-NH2。
(×)3.常见的蛋白质氨基酸除了甘氨酸是非手性分子之外,其余19种均为手性分子,且相对构型都是D-型的。
(×)4.常见的蛋白质氨基酸都是α-伯胺基酸。
(×)5.变性导致蛋白质分子无法形成功能构象。
(√)6.一氨基一羧基氨基酸的pI为中性,因为-COOH和-NH3+的解离度相等。
(×)7.构型的改变必须有旧的共价健的破坏和新的共价键的形成,而构象的改变则不发生此变化。
(√)8.生物体内只有蛋白质才含有氨基酸。
(×)9.所有的蛋白质都具有一、二、三、四级结构。
生物化学复习题及问题详解
《生物化学》复习一、名词解释:1.两性离子:指在同一氨基酸分子上即含有可解离出氢离子的基团,又含有能结合氢离子的基团,这样的离子兼性离子或偶极离子。
2.结构域:指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。
3.超二级结构:指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。
4.盐析:在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。
5.盐溶:在蛋白质溶液中加入少量中性盐使蛋白质溶解度增加的现象。
6. 退火:加热变性DNA溶液缓慢冷却到适当的低温,则两条互补链可重新配对而恢复到原来的双螺旋结构的现象。
7.DNA的熔解温度:DNA加热变性过程中,紫外吸收值达最大吸收值一半时所对应的温度。
8.核酸的变性:在某些理化因素作用下,DNA双螺旋区氢键断裂,空间结构破坏,形成单链无规则线团状态的过程;9.减色效应:复性DNA由于双螺旋的重新形成,在260nm处的紫外吸收值降低的现象。
10.增色效应:变性DNA由于碱基对失去重叠,在260nm处的紫外吸收值增加的现象11.米氏常数(Km值):酶反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。
12.活性中心: 酶分子中直接与底物分子结合,并催化底物化学反应的部位。
13.酶的比活力:是指每毫克酶蛋白所含的活力单位数,有时也用每克酶制剂或每毫升所有的活力单位。
14.生物氧化:有机物质在生物体活细胞氧化分解,同时释放能量的过程。
15.氧化磷酸化:是代物质氧化脱氢经呼吸链传递给氧生成水,同时伴有ATP磷酸化生成ATP的过程。
16. 氨基酸的等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示17.呼吸链:代物上的氢原子被脱氢酶激活脱落后,经过一系列的传递体,最后传递给激活的氧分子而生成水的全部体系。
18.底物水平磷酸化:底物在脱氢脱水的过程中是分子化学能重新分布和排列生成高能化合物,高能化合物与ADP磷酸化想偶联生成ATP的方式。
生物化学原理教学(杨荣武)生化-期末复习
考试题型:一、填空;二、是非题;三、选择题;四、名词解释;五、问答题每章简要:一、生物氧化基本概念,与非生物氧化比较呼吸链;概念、组成、类型、传递顺序、抑制剂。
氧化磷酸化; 概念、机制、解偶联剂二、代谢总论基本概念; 代谢、代谢途径、代谢物,分解代谢、合成代谢、代谢组、代谢组学三、糖酵解糖的消化; 淀粉的酶水解糖酵解全部反应、三步限速步骤、特异性抑制剂、两步底物磷酸化反应。
能量产生、生理意义、丙酮酸去向。
四、TCA 循环乙酰CoA 的形成, TCA 循环化学途径、能量产生,功能和调节。
乙醛酸循环五、磷酸戊糖途径发生部位、氧化相反应、功能六、糖异生概念、发生部位、与糖酵解比较、底物、几步重要反应、生理意义七、光合作用概念,总反应式光反应;两大光系统的组成(中心色素,电子受体与供体,功能),光合磷酸化以及与氧化磷酸化的比较。
暗反应;光反应与暗反应的比较, C3 途径重要的反应, 酶和中间物八、糖原代谢糖原降解;相关酶;糖原磷酸化酶………糖原合成;相关酶,糖原合成酶,UDP-Glc, 需要引物, 糖原素……调节九、脂肪酸代谢脂肪酸的分解代谢;β-氧化, α-氧化,ω-氧化酮体脂肪酸的合成代谢十、胆固醇代谢胆固醇合成;前体、部位、重要的中间物、HMG-CoA 还原酶运输; 血浆脂蛋白、LDL 、HDL十一、磷脂和糖脂代谢甘油磷脂的酶水解十二、蛋白质降解及氨基酸代谢胞内蛋白质的降解;依赖于ATP 的降解途径氨基酸的分解代谢;氨基的去除,铵离子的命运,尿素循环生物固氮十三、核苷酸代谢核苷酸的合成;嘌呤核苷酸、嘧啶核苷酸的合成,从头合成和补救途径。
脱氧核苷酸的合成调节核苷酸的分解;嘌呤和嘧啶的分解主要相关疾病第一章:生物氧化一、概念1、生物氧化:糖类、脂肪、蛋白质等有机物质在细胞中进行氧化分解生成CO2和H2O 并释放出能量的过程称为生物氧化。
其实质是需氧细胞在呼吸代谢过程中所进行的一系列氧化还原反应过程。
2、呼吸链:由一系列传递体构成的链状复合体称为电子传递体系(ETS),因为其功能和呼吸作用直接相关,亦称为呼吸链。
生物化学 复习资料
生物化学复习资料生物化学复习资料生物化学是研究生物体内化学成分及其相互作用的科学。
它涉及到许多重要的生物分子,如蛋白质、核酸、碳水化合物和脂质,以及与它们相关的代谢途径和能量转化。
在这篇文章中,我们将探讨一些生物化学的重要概念和知识点,以帮助你复习这门学科。
1. 蛋白质:蛋白质是生物体内最重要的分子之一,它们由氨基酸组成。
氨基酸是一种含有氨基和羧基的有机分子,它们通过肽键连接在一起形成多肽链,进而形成蛋白质。
蛋白质在生物体内担任多种功能,包括酶催化、结构支持和信号传导等。
2. 核酸:核酸是生物体内存储和传递遗传信息的分子。
它们由核苷酸组成,核苷酸由糖分子、碱基和磷酸组成。
DNA是一种双链核酸,它包含了生物体的遗传信息。
RNA是一种单链核酸,它在蛋白质合成中起着重要的作用。
3. 碳水化合物:碳水化合物是生物体内最常见的有机分子之一,它们由碳、氢和氧原子组成。
碳水化合物可分为单糖、双糖和多糖三种类型。
单糖包括葡萄糖和果糖,它们是生物体内能量的重要来源。
多糖包括淀粉和纤维素,它们在能量存储和结构支持方面起着重要的作用。
4. 脂质:脂质是生物体内的另一类重要有机分子,它们主要由碳、氢和氧原子组成。
脂质可分为甘油三酯、磷脂和固醇三种类型。
甘油三酯是脂肪的主要组成部分,它们在能量存储和绝缘保护方面起着重要的作用。
磷脂是细胞膜的主要组成部分,它们在细胞结构和信号传导中起着重要的作用。
固醇包括胆固醇和激素,它们在细胞膜的稳定性和调节生理功能方面起着重要的作用。
5. 代谢途径:代谢途径是生物体内化学反应的连续序列,用于合成和分解生物分子以及能量转化。
其中最重要的代谢途径包括糖酵解、脂肪酸氧化和氧化磷酸化。
糖酵解是将葡萄糖分解为乳酸或乙酸,并产生少量ATP的过程。
脂肪酸氧化是将脂肪酸分解为乙酰辅酶A,并产生大量ATP的过程。
氧化磷酸化是将ATP合成反应与氧化还原反应相结合,产生大量ATP的过程。
6. 能量转化:能量转化是生物体内能量的转化和利用过程。
生物化学复习资料重点
生物化学复习资料重点生物化学是生物学中的一门基础学科,它主要研究生物分子及其在细胞中的结构、功能、代谢、调控等方面的基本规律。
因此,对于学习生物化学的学生来说,必须留心掌握一些重点复习资料。
本文将针对这一问题进行一些讨论。
1.氨基酸和蛋白质的结构与功能氨基酸是蛋白质的基本组成单元,而蛋白质则是生物体内最重要的大分子有机化合物之一。
因此,学生需要深入了解氨基酸和蛋白质的结构与功能。
氨基酸的结构包含氮基、羧基、侧链分别连接在中央的碳原子上。
侧链的化学性质、结构和分布情况等是决定蛋白质分子结构和功能的重要因素。
蛋白质分子在生物体内具有多种功能,如酶催化作用、运输、抗原性、调节等。
2.酶和酶促反应酶是生物体内最重要的催化剂,可以加速生物化学反应的速率。
学生需要了解酶的性质、分类、活性位点、催化机理等方面的知识。
在酶促反应方面,学生需要了解酶与底物的结合方式、反应物与产物的转化关系等问题。
同时,生物体内的酶促反应还涉及到许多相关的调节机制,学生需要深入了解这些调节机制的原理和作用。
3.生物膜的结构与功能生物膜是生物体内细胞的界面结构,它在细胞内外起着分隔单元、维持稳定、运输和信息传递等重要功能。
学生需要掌握生物膜的组成、结构和功能等方面的知识。
生物膜主要由磷脂双层、蛋白质和糖类等组成,其中磷脂双层起着屏障和选择通道等作用。
同时,膜蛋白在细胞膜的粘合、检测、传输等方面发挥着重要的作用。
学生还需要了解生物膜内外物质传递的机制和影响因素等方面的知识。
4.核酸的结构与功能核酸是生物体内负责储存和传递遗传信息的大分子有机化合物,其中DNA是基因物质的主要组成成分。
学生需要了解核酸的组成、结构和功能等方面的知识。
DNA分子的结构包括碱基对、磷酸骨架和螺旋结构等,它在生物体内的作用是存储、传递和维护遗传信息。
RNA是DNA信息的复制、转录和翻译过程中的直接参与者,主要包括mRNA、tRNA和rRNA等。
在这些方面,学生需要系统地了解核酸分子的结构、特性和功能等。
生物化学总复习题
一,概念题(每题2分,共14分)糖有氧氧化脂肪酸β-氧化鸟氨酸循环酮体限制性内切酶中心法则联合脱氨基氮的正平衡糖异生 DNA的变性共价调节Tm值核糖体引发体冈崎片断二,填空题(每空1分,共50分)1.糖酵解有步脱氢反应和步底物磷酸化反应。
2.18C的饱和脂肪酸经次β氧化生成个FADH2个NADH和个ATP。
3. 真核细胞mRNA 端有帽子结构。
5. 糖原分解的关键酶是。
琥珀酸脱氢酶的辅酶是。
6. 丙酮酸转变成磷酸烯醇式丙酮酸时共消耗了个ATP。
7.三羧酸循环中有步脱羧反应,步脱氢反应,步底物磷酸化反应。
8. 氮的总平衡是指机体摄入的氮量排出的氮量。
9.LDL是由向运输胆固醇。
丙酮酸脱氢酶系含,,酶和种辅酶。
10. 脂肪酸合成时所需的NADPH 来自和。
11.饥饿时大脑可以用代替糖的需要。
12.降低血糖的激素是,其主要作用是。
13.PRPP的中文是。
hnRNA的中文是。
11.糖代谢为脂肪合成提供,,和。
12.主要的生物氧化途径是和。
13.原核生物蛋白质合成起始氨基酸是,携带起始氨基酸的tRNA反密码子是。
琥珀酸脱氢酶的辅酶是。
14.奇数碳原子脂肪酸代谢的可以进入三羧酸循环。
15.丙酮酸脱氢酶含,,酶。
16.脂肪酸合成时所需的NADPH 来自和。
17.酮体在合成而在分解。
18.酪氨酸转变成和再生成糖和酮体。
19.脂肪酸合成的原件是。
20.HDL在形成,主要运输。
甘油先转变成再进入糖代谢途径。
磷酸戊糖途径不可逆的部分是由酶催化。
21.磷酸葡萄糖脱氢酶的受体是。
谷氨酸脱氢反应中的氢的受体是。
22.嘌呤在人体内的最终分解产物是。
23.肝肾以外的组织由于没有酶而无法直接补充血糖。
糖原分解的关键酶是。
24.LDL是由向运输胆固醇。
25.糖代谢的3个交汇点是,和。
26.RNA聚合酶是由和组成。
27.磷酸戊糖途径生成和。
28.IMP是和的前体。
PRPP是由合成的。
29.尿素由个氨和个二氧化碳合成。
30.柠檬酸乙酰辅酶A羧化酶的活性。
生物化学复习资料
生物化学复习资料生物化学复习资料生物化学是生物学和化学的交叉学科,研究生物体内的化学成分、结构和功能,以及生物体内的化学反应和代谢过程。
对于学习生物化学的学生来说,复习资料是非常重要的辅助工具。
本文将为大家提供一些生物化学复习资料,帮助大家更好地掌握这门学科。
一、基础知识回顾1. 生物大分子:生物大分子是生物体内的重要组成部分,包括蛋白质、核酸、多糖和脂质。
复习时,可以重点关注它们的结构和功能,以及与生物体内其他分子的相互作用。
2. 酶:酶是生物体内的催化剂,可以加速化学反应的进行。
复习时,可以重点关注酶的分类、酶的活性调节机制以及酶与底物之间的相互作用。
3. 代谢途径:代谢途径是生物体内化学反应的网络,包括糖代谢、脂肪代谢和蛋白质代谢等。
复习时,可以重点关注每个代谢途径的关键酶和反应,以及这些代谢途径的调节机制。
二、实验技术回顾1. 分离技术:在生物化学实验中,分离技术是非常重要的一环。
复习时,可以回顾凝胶电泳、层析技术和离心技术等常用的分离技术,了解它们的原理和应用。
2. 光谱技术:光谱技术在生物化学研究中有广泛的应用,包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱和核磁共振光谱等。
复习时,可以回顾这些光谱技术的原理和解读方法。
3. 基因工程技术:基因工程技术是生物化学领域的前沿技术之一,可以用于改造和利用生物体内的基因。
复习时,可以回顾基因工程技术的基本原理和常用的实验方法。
三、应用领域探讨1. 药物研发:生物化学在药物研发中起着重要的作用。
复习时,可以了解药物的发现和设计过程,以及生物化学在药物研发中的应用。
2. 食品工业:生物化学在食品工业中也有广泛的应用,包括食品的加工、储存和保鲜等。
复习时,可以了解食品工业中常用的生物化学技术和方法。
3. 疾病诊断:生物化学在疾病诊断中有重要的应用,例如生物标志物的检测和分析。
复习时,可以了解生物标志物的种类和检测方法,以及它们在疾病诊断中的应用。
四、案例分析为了更好地理解生物化学的理论知识和实验技术,可以通过案例分析来加深对生物化学的理解。
生物化学总复习题(1)
一,名词解释ribozyme 别构效应二,问答1,密码子兼并性,从密码子推出各种反密码子。
2,蛋白质胶体在溶液中稳定的原因。
3, 5-氟尿嘧啶的抑制机制。
4,脂肪酸通过细胞膜(线粒体膜)的转运方式5, 14C标记的Glucose在糖酵解和TCA循环中的降解顺序三,计算1, EMP途径中某一个酶的突变导致产生ATP的变化2,利用米氏方程推导竞争性抑制公式一.名词解释米氏常数(Km)磷酸戊糖途径调节子酶辅助因子 cori循环与巴斯德效应滚动环复制二.结构式TPCK 尼克酰胺 GC配对 IP3三.填空1, 蔗糖是否为还原糖-----。
2,糖苷键的两种类型-----和-----。
3,DNA的一条链序列为GTCAATG,那么另一条链的序列为-----。
4,-----常数表征酶的催化效率。
5,ρ因子的催化活性是-----和-----。
6,常见的遗传缺陷病有-----,-----,-----,-----;常见的放射性标记的同位素是-----,-----,-----,-----。
7,DNA复制过程中动物是以-----为能源,E. Coli 以-----为能源。
8,生物体中产能最多的生化反应过程是-----。
9,-----发现TCA循环,-----发现化学渗透学说。
10,真核生物rRNA拼接过程中左端的拼接点顺序为-----右端为-----,切除-----结构。
11,生长激素是由-----产生的。
12,E.Coli DNA Pol I 经酶切,得到大小片段,其中大片段具有-----酶活性和-----酶活性,小片段具有-----酶活性。
13,必需脂肪酸有-----和-----。
四.回答1,作动力学曲线区分酶的可逆性抑制与不可逆抑制?2,比较ATP与ppi在磷酸键及生物学功能方面的异同。
3,真核生物至少需要31种tRNA才能识别61种密码子,而线粒体中tRNA只有22种,为什么?4,阐明衰减子对操纵子的调控。
5,糖酵解和糖异生过程中涉及的不可逆反应和限速步骤。
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5.硫酸铵盐析
6.羟基磷灰石柱层析 7.PAGE
0.048
0.016 0.012
3367
3133 3100
71.7
200.0 255.0
102.0
286.0 365.0
17
15 15
比活力 = 活力单位数/毫克蛋白 纯化倍数 = 每步的比活力/粗抽提液的比活力 收得率 = 每步的总活力/粗抽提液总活力×100%
紫外光谱法
A.测定核酸含量
构成核酸的碱基组分是分光法测定核酸含量的依据。 在测定过程中,DNA或RNA溶液浓度的增加或降低, 会使其在波长260nm的消光值(A260) 随之增加或降低, 二者之间成正比关系。
用A260/A280比值可确定DNA和RNA的纯度:
纯DNA比值为1.8 纯RNA的比值为2.0 当比值小于1.8/2.0时,样品污染了蛋白质或酚类物质 > 1.8/2.0 时,表明有RNA污染或有异硫氰酸残存
第三节 细胞的破碎
1、研磨法
一、机械破碎 二、溶胀和自溶 三、化学处理
2、组织捣碎器法 3、超声波法: 4、压榨法: 5、冻融法
四、生物酶降解
第五节 浓 缩
常用的浓缩方法有下面几种:
沉淀法 吸附法 超过滤法 透析法 减压蒸馏法 冰冻干燥法 超速离心法
浓缩样品时应注意:
保护样品的生物活性,因此除了减压蒸馏浓缩法 外,其余的浓缩方法均应在4℃进行(除例外); 操作过程中要保持样品有相对高的回收率;
基团和亲水基团之间比例的差异),通过改变溶液的某 些性质(如pH、极性、离子强度、金属离子等),能 使抽提液中有效成分的溶解度发生变化而沉淀。
可通过选择适当的抽提溶剂使欲分离的有效成分最 大溶解,而杂质最小溶解;或者相反。从而达到分 离的目的。
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二、蛋白质沉淀法
生物大分子物质的制备
第一节 材料的选择与处理
一、材料的选择
1. 生物材料
一般可以分为两大类: 天然生物材料:一般是指在自然界易采集的、目的 物含量较高的生物个体、器官或组织。 人工生物材料:又分为三种: 新品种材料,组织培
养材料,生物产品与生物制品材料。
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有效成分
11.分配系数(K)
指某一组分在固定相与流动相中含量的比值。 常用K表示。
K = Cs/Cm
Cs: 固定相中的浓度 Cm: 流动相中的浓度。
K为热力学常数:与组分性质、固定相性质、流动相
性质及温度有关。实验条件固定,K仅与组分性质有关, 是层析中分离纯化物质的主要依据。
12. 迁移率(或比移值) :
表1-7 L-门冬酰胺酶的纯化
步骤 1.粗抽提液 2.氯化锰处理 3.冰冻融解 4.DEAE-纤维素层析 总蛋白 /g 30 7.64 5.58 0.113 总活力 /u 21000 15017 14872 5025 比活力 u/mg 0.7 2.0 2.7 44.5 纯化倍数 1 2.8 3.8 63.5 收得率 % 100 72 71 24
生物化学技术原理及应用
总复习
考试题型
一、填空题(每空0.5分,共10分)
二、选择题(每题1分,共10分)
三 、判断正误(每题1分,共10分)
四、名词解释(每题3分,共12分) 五、简答题(每题6分,共24分) 六、实验分析及设计题(3小题,共34分)
生物化学研究技术方法
生物化学研究技术:
– 分离技术
4.操作容量(或交换容量)
即在特定条件下,某种成分与基质反应达到平 衡时,存在于基质上的饱和容量;
一般以每克(或毫升)基质结合某种成分的毫摩尔 数或毫克数来表示。( mmol/g, mg/g, mmol/ml, mg/ml )
其数值越大,表明基质对该成分的结合力越强。
床体积(Vt)
床体积是指膨胀后的基质在层析柱中所占有的体积( Vt )。 Vt是基质的外水体积(V0)和内水体积(Vi)以及自身体积(Vg) 的总和,即: Vt = V0 + Vi + Vg 外水体积(V0) :指基质颗粒之间体积的总和 内水体积(Vi ) :指基质颗粒内部体积的总和 基质体积(Vg) :指基质自身所具有的体积 都随床体积和基质性质变化而变化 洗脱体积(Ve):洗脱体积是指某一成分从柱顶部到底部 的洗脱液中出现浓度达到最大值时的流动相体积。
样品,会导致样品体积大量增加。
– 透析法:使用透析袋,通过透析作用改变蛋白质
溶液中的盐浓度。该法较温和,分级效果好;但 仅用于精确、样品体积小的试验中。
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(4) 脱盐
常用的脱盐方法:凝胶过滤法、透析法。 透析法脱盐的原理是分子扩散运动。 其具体操作是:
把待脱盐溶液装入有一定孔径的透析袋, 扎紧袋口(袋内留有适当空间,以免引起透析袋 胀裂),漂在水或适当的透析液中,要防止透析 液从袋口进入。
第三章 吸附层析
吸附层析(adsorption chromatography) 又称色层法或色谱法。
3.层析
以基质为固定相(柱状或薄层状), 以液体或气体为流动相, 有效成分和杂质在这两个相中连续多次地进行 分配、吸附或交换作用, 最终使混合物得到分离的过程。
指在一定条件下,某一组分在相同时间内,在
固定相中移动的距离与流动相中移动距离之比值 (R f )。
Rf = 在固定相中移动的距离 在流动相中移动的距离
R f ≤1。
K增加,Rf减少;反之, K减少,Rf增加。
正相色谱与反相色谱
正相色谱(normal phase partition chromatography,NPC)
在尽可能短的时间内完成;
样品的分子量与方法及工具要匹配。
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第六节 纯化方案的设计与评价
纯化方案: 是指在纯化某一物质过程中,将几种分离方法 (如沉淀法、离子交换层析、葡聚糖凝胶过滤等)有
机地互补联合、灵活应用的总称。
纯化方案的评价方法
对纯化过程中每一步收集到的溶液要进行:
沉淀、吸附、膜分离(过滤、透析等)、离心、层析、电泳等
– 分析检测技术
电泳、层析、质谱、光谱、电化学技术、分子标记等
– 分子生物学研究技术
基因重组、分子杂交、PCR与反转录、核酸测序、免疫技术、 生物芯片等等
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生物大分子物质的制备
第一章 生命大分子物质的制备
生命大分子物质
是指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。而有 效成分以外的其他物质则统称杂质。 有效成分在材料中存在的特点
有效成分的含量一般较少
如胰脏中胰岛素的含量小于其鲜重的百万分之一。
有效成分稳定性较差
大多数对酸、碱、高温和高浓度有机溶剂等因子较敏感,易 被微生物分解变质。
选用的材料不同,有效成分的含量就不同
通常是指:动物、植物和微生物在进行新陈代谢时所 产生的蛋白质(包括酶)和核酸等有机化合物的总称。
生物大分子物质在生物体内具有各种生理活 性,这些活性的产生与其结构有着密切关系, 因此,分离此类物质不能用一般的化学分离方 法,而是采用比较特殊的生化分离方法。
生物大分子物质的制备
生物大分子的制备
1. 生物材料的选择 2. 细胞的破碎 3. 生物分子的抽提 4. 生物分子的浓缩 5. 有效成分纯度和性质分析
分级效果好(有的一步分级沉淀就可除去75%以上杂蛋白) 有稳定蛋白质结构的作用
将硫酸铵盐析的蛋白质臵低温下保存一年,其性质没有变化
价格低廉,废液可以肥田
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硫酸铵盐析
– 固体法:使用固体硫酸铵,适用于大体积样品
– 饱和溶液法:较固体法温和,但不适用于大体积
生物大分子物质的制备
制备方法的选择– 生物来自分子制备方法的选择是以生物大分子的理
化性质为依据的。
生物大分子的理化性质与分离纯化方法的选择
理化性质 分子大小和形态 溶解度 电荷差异 生物功能专一性 分离及纯化方法 差速离心、超滤、分子筛、透析 盐析、萃取、分配层析、结晶 电泳、等电聚焦、离子交换层析 亲和层析
在吸附层析中,使用的固定相基质是颗粒状的吸附剂。 在吸附剂的表面存在着许多随机分布的吸附位点;
吸附位点通过范德华力(中性分子彼此距离非常近时, 产生的一种微弱电磁引力)和静电引力与蛋白质和核 酸等生物分子结合; 其结合力的大小与各种生物分子的结构和吸附剂的性 质有密切关系。
常用的吸附剂
极性的:羟基磷灰石、硅胶、氧化铝、 人造沸石等 非极性的:活性炭等
指固定相的极性高于流动相的极性,因此,在这种 层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子 移动的速度快,先从柱中流出来。 反相色谱( reversed phase partition chromatography,RPC )
是指固定相的极性低于流动相的极性,在这种层析 过程中,极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而 先从柱中流出。 一般来说,分离纯化极性大的分子(带电离子等)采用 正相色谱(或正相柱),而分离纯化极性小的有机分子 (有机酸、醇、酚等)多采用反相色谱(或反相柱)。
最佳加样量与踏板理论
踏板理论是把整个层析柱长 ( L )比喻为蒸馏塔,在某一段 柱长范围内溶质在固定相和流动 相之间达到平衡,这一段柱长便 相当于一个理论踏板的高度(H), 踏板理论数(N)便表示柱内溶 质谱带的分布。
样品高度H
柱长 L
柱长 L 踏板理论数N = 样品高度H
第一节 吸附柱层析
基本原理