常见细胞染色试剂简介
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制
实验室常用染料性能介绍及常用药品试剂和培养基的配制一、实验室常用染料性能介绍1.苏木精：苏木精是一种常用的组织染料，其主要成分是吡啶类化合物。
苏木精具有很好的亲水性，对细胞核染色效果好，特别适用于观察细胞的核结构和形态。
2.基本蓝1：基本蓝1是一种亲水性染料，也是常用的组织染料。
它能与细胞内核酸结合，使细胞核显色。
基本蓝1在显微镜下观察时呈现出暗蓝色，有良好的穿透性，可以用来观察细胞的核仁、蛋白质沉积等。
3.伊红：伊红是一种细胞染色常用的酸碱指示剂。
它在碱性条件下呈红色，在酸性条件下呈黄色，可以用来染色观察细胞的酸性和碱性成分。
4.甲磺酸伊地洛尔：甲磺酸伊地洛尔是一种常用的荧光染料，可以与细胞膜结合，形成荧光标记的细胞，用于细胞增殖、迁移等研究。
在实验室中，还有很多常用的药品试剂和培养基需要配制。
下面介绍一些常见的配制方法：1.X溶液的配制：X溶液通常是用于细胞培养的培养基中的一种添加剂。
具体的配制方法是将X溶液的粉末称取适量加入适量的去离子水中，搅拌均匀即可。
X溶液可以用于抗菌、抗霉等作用。
2.磷酸缓冲盐水的配制：磷酸缓冲盐水经常用于细胞培养中的一种缓冲液。
配制磷酸缓冲盐水需要称取适量的氢磷酸盐和二氢磷酸盐加入适量的去离子水中，搅拌均匀并调节pH值即可。
3.阿霉素的配制：阿霉素是一种常用的抗生素，常用于细胞培养中的抗菌作用。
阿霉素的配制需要将相应的阿霉素粉末加入适量的溶剂中，搅拌均匀形成阿霉素溶液。
4.LB培养基的配制：LB培养基是著名的富含营养成分的培养基，常用于大肠杆菌等细菌的培养。
LB培养基的配制需要称取适量的草莓粉末、酵母粉末、纯化骨粉和氯化钠加入适量的去离子水中，通过高压灭菌形成LB培养基。
以上仅为常用染料性能介绍及部分常用药品试剂和培养基的配制方法，实验室中还有很多其他药品试剂和培养基需要进行配制或选购，要根据实际需要进行选择和使用。
组织和细胞的染色原理
组织和细胞的染色原理组织和细胞的染色原理染色是一种在生物学和医学领域常用的实验技术，用于通过染色剂与细胞或组织中的不同结构或成分发生特异性的化学反应，从而使其可见或更易观察。
基于染色原理，可以对组织和细胞进行显微观察、形态学分析、细胞生物学研究以及疾病诊断等。
染色原理涉及到染色剂的选择，以及染色剂与细胞或组织中的目标结构或成分之间发生的染色反应。
下面将介绍常见的染色剂和染色原理。
1. 基本染色剂常见的基本染色剂包括伊红、酸性伊红、甲基绿、吉姆萃安蓝等。
这些染色剂一般带有阳离子结构，可以与细胞或组织中的阴离子成分（如DNA、RNA）发生静电作用而染色。
2. 酶标染色酶标染色是一种常用于免疫组化、分子生物学和生物化学研究等领域的染色方法。
其原理是将目标分子与一种酶结合，然后加入特定的底物与酶发生反应，产生显色物质，从而形成染色。
3. 免疫组化染色免疫组化染色是一种用于检测或定位细胞或组织中特定蛋白质的方法。
其原理是利用抗体的特异性与待检测的蛋白质结合，并通过特定的染色反应可视化抗体-抗原复合物。
常用的免疫组化染色方法包括免疫组织化学染色（IHC）和免疫荧光染色等。
4. 核染色核染色是一种常用于细胞生物学和病理学研究的染色方法，用于染色细胞核并观察核的形态特征。
常见的核染色剂包括伊红、甲基绿、苏木精和伊红溴化物等。
这些染色剂可以与DNA分子发生专一性结合，形成核染色物质。
5. 细胞器染色细胞器染色是一种常用于区分并可视化细胞器结构的染色方法。
例如，荧光卤素染料可以选择性地染色细胞器如内质网、线粒体、溶酶体等。
这些染色物质与细胞器的特定成分结合，使其在显微镜下可见。
6. 组织切片染色组织切片染色是在组织学研究中常用的方法，用于观察组织中不同类型细胞和结构的分布和形态特征。
常见的组织切片染色方法包括常规组织切片染色、特殊染色和免疫组织化学染色等。
总结：组织和细胞的染色原理基于染色剂与细胞或组织中目标结构或成分之间的化学反应。
生物学常用染色液汇总
生物学常用染色液汇总在生物学研究和实验中，常常需要使用染色液来观察和分析细胞和组织的结构和功能。
染色液可用于染色细胞核、细胞膜、细胞器、染色蛋白质等。
下面是一些生物学常用的染色液：1.血液染色液：常用的血液染色液有嗜酸性染色液、嗜碱性染色液和中性染色液。
嗜酸性染色液一般用于染色细胞核和染色体，如淡紫色的伊红染色液；嗜碱性染色液一般用于染色细胞质和细胞器，如紫色的甲基蓝染色液；中性染色液则可以同时染色细胞核和细胞质，如黑褐色的赛红染色液。
2.组织切片染色液：常用的组织切片染色液有赛红染色液、伊红染色液、溴甲蓝染色液等。
赛红染色液可染色细胞核和胞质，适用于观察组织细胞的形态和结构；伊红染色液主要染色细胞核和染色体，适用于观察细胞分裂过程和遗传物质的分布；溴甲蓝染色液可染色细胞膜和细胞器，适用于观察细胞内结构和分子分布。
3.核酸染色液：常用的核酸染色液有伊红染色液、乙酰胆碱酯酶染色液等。
伊红染色液可染色DNA和RNA，适用于观察细胞核的形态和结构；乙酰胆碱酯酶染色液可染色DNA片段或蛋白质-DNA复合物，适用于观察转录因子的结合情况和基因表达。
4.蛋白质染色液：常用的蛋白质染色液有银染色液、共染色液等。
银染色液可用于染色蛋白质条带，适用于蛋白质电泳分析；共染色液则可以同时染色蛋白质和核酸，适用于口腔上皮细胞的核蛋白检测和分析。
5.细胞膜染色液：常用的细胞膜染色液有吖啶橙染色液、荧光素DAPI染色液等。
吖啶橙染色液可染色细胞膜，适用于观察细胞膜的形态和分布；荧光素DAPI染色液可染色细胞核和细胞膜，适用于观察细胞形态和细胞数量。
6.细胞器染色液：常用的细胞器染色液有细胞色素染色液、酶染色液等。
细胞色素染色液可染色细胞色素，适用于观察细胞呼吸作用；酶染色液可染色特定酶的活性，适用于观察细胞器功能和代谢情况。
总的来说，不同的染色液在生物学研究中有不同的应用，可以通过染色观察细胞和组织的形态、结构和功能，帮助揭示生物学现象的机制和过程。
细胞染色剂
1、斐林试剂配制：1）甲液质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
2、班氏尿糖定性试剂配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。
称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。
把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。
用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成，故加入柠檬酸钠。
柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂，它能与铜离子形成可溶性络盐）。
使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。
3、双缩脲试剂配制：A液：质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100mlB液：质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml使用时，先加A液，后加B液作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
4、苏丹Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）。
作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。
能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用：观察成熟植物细胞质分离时用。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用，用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液：Hematoxylin-Eosin（HE）染色液是一种经典的组织染色方法，常用于病理学研究和诊断。
配方如下：- Hematoxylin染色液：将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中，加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水，最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液：将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液：将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液：Giemsa染色液用于染色细胞，特别是白细胞，常用于血液学和微生物学研究。
配方如下：- Giemsa染色液：将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂：用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下：- Thioglycollate培养基：将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中，加热至溶解。
- Dithiothreitol（DTT）溶液：将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中，用10 mL离心管分装，-20℃保存。
4. Bradford试剂：用于蛋白质的浓度测定，常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下：- Coomassie Brilliant Blue G-250：将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中，加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂：用于胶片的显影，常用于分子生物学实验。
配方如下：-显影溶液A：将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B：将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中，用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液：用于细胞或组织的裂解，提取蛋白质或RNA，常用于生物化学和分子生物学实验。
生物实验中常用的化学试剂
中学生物实验中常用的化学试剂临洮玉井职专黎伟730502一、常用的染色剂1．苏丹III染色剂：它是一种弱酸性染料，红色粉末，易溶于脂肪和酒精（溶解度0.15%），使用时取0.01克苏丹III、加90%的酒精5毫升溶解，并加甘油5毫升，即成为苏丹III。
该试剂遇到脂肪反映产生橘黄色，木栓层、角质层也能染色。
2．苏丹IV染色剂：该物质和苏丹III相似，使用时取该物质0.1克溶解于100毫升的氯仿中，即成为苏丹III染色剂，该试剂遇到脂肪产生红色。
3、龙胆紫染色液；它是由结晶紫和甲基紫混合而成的碱性染料，它能使细胞核中的染色体（染色质）染成紫色。
4．醋酸洋红液：取45毫升的冰醋酸，加蒸馏水55毫升，再加入洋红1克，搅拌均匀，加入一颗生绣的铁钉，煮沸10分钟，冷却过滤，成为常用的醋酸洋红液，储存在棕色瓶中。
5．二苯胺试剂：主要用于DNA鉴定，使用时取二苯胺0.8克，溶解于180毫升的冰醋酸中，再加入8毫升的过氯酸，使用前加入1.6%的乙醛0.8毫升，溶液为无色，该试剂遇DNA产生紫色反应。
6．番红：是从藏红花中提取出来的一种天然染料，染色时先将木质化的组织切成片，浸于50%的酒精中，再用1%的番红染色，70%的酒精脱色木质化的细胞壁染成红色。
7．间苯二酚：在酸性环境中间苯二酚可使木质化的细胞壁染成红色，配制液为5%的水溶液，染色后易退色，适合做临时装片的染色剂。
8．苯胺蓝：使用时配制成9%的酒精溶液，苯胺蓝把纤维细胞壁染成蓝色（未着色的部分为淡蓝色）。
9．固绿：主要用于纤维素细胞壁的染色，固绿呈现绿色，使用时与番红配合使用。
染色的方法是先用番红染色30分钟，75% 酒精脱色，纤维素细胞染成红色，再用固绿染色，最后使细胞壁呈绿色，其他部分呈红色。
10．碘——氯化锌：该染色剂能把细胞壁染成蓝紫色；配制方法：20克氯化锌、6.5克黄化钾、1.3克、碘1.5克水混合而成，该试剂储存在避光处。
11．碘——碘化钾：配制方法是取3克KI溶于5毫升蒸馏水中，再加入1克碘，置于棕色瓶中保存；染色时将配制的原液稀释，碘——碘化钾能将细胞质染成黄色，使淀粉染成蓝色。
常用细胞膜染料
常用细胞膜染料细胞膜染料是一种用于研究和观察细胞膜结构和功能的重要工具。
它们能够通过与细胞膜中的特定成分相互作用，使细胞膜在显微镜下可见，从而帮助科学家们深入了解细胞膜的组成和功能。
下面将介绍一些常用的细胞膜染料及其应用。
1. 荧光假单胞菌素（Fluorescently Labeled Lectins）荧光假单胞菌素是一种由植物或动物产生的蛋白质，它们能够与细胞膜表面的特定糖基团结合。
通过将荧光标记的假单胞菌素与细胞膜接触，可以观察到细胞膜上特定糖基团的分布情况。
这种染料广泛应用于细胞膜糖基团的研究，例如糖基化程度的变化、糖基团的定位等。
2. 荧光磷脂（Fluorescent Phospholipids）荧光磷脂是一种具有荧光标记的磷脂类物质，它能够与细胞膜中的脂质分子结合。
通过将荧光磷脂添加到细胞培养基中，细胞会主动摄取这些染料，从而使细胞膜在显微镜下呈现出荧光信号。
这种染料常用于研究细胞膜的形态变化、脂质分布以及脂质内部的运动等。
同时，荧光磷脂还可以用于观察细胞膜与其他细胞结构的相互作用。
3. 荧光染料（Fluorescent Dyes）荧光染料是一类可以发射荧光的有机化合物，它们可以与细胞膜中的特定成分相互作用，从而使细胞膜在显微镜下呈现出荧光信号。
这些染料广泛应用于细胞膜的可视化研究，例如观察细胞膜的形态、结构和运动。
常见的荧光染料有荧光蛋白（如GFP）、蓝色溴化乙锭（DAPI）等。
4. 荧光脂质双层（Fluorescent Lipid Bilayers）荧光脂质双层是一种由荧光磷脂构建的人工膜结构，它们可以模拟细胞膜的组成和结构。
通过将荧光脂质双层引入实验体系中，科学家们可以研究细胞膜的多种功能，如透过性、蛋白质通道的活性等。
同时，荧光脂质双层还可以用于筛选和测试新型药物的作用机制。
5. 荧光蛋白（Fluorescent Proteins）荧光蛋白是一种由特定基因编码的蛋白质，它能够发射荧光。
常见细胞核荧光染料
细胞核常用荧光染料有：吖啶橙（Acridine Orange，AO）、溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）和碘化丙啶（Propidium Iodide，PI），DAPI、Hoechst染料、EthD III、7-AAD、RedDot1、2 等等。
透膜的染料如下：AO：具有膜通透性，能透过细胞膜，将核DNA和RNA分别染成绿色和红色，因此使细胞核呈绿色或黄绿色荧光。
EB：一种高度灵敏的荧光染色剂，在标准302nm处激发出橙红色信号。
DAPI：蓝色一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，其与DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，而与单链DNA结合无荧光的增强。
DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高于EB和PI，荧光强度比Hoechst低，但光稳定性高于Hoechst。
Hoechst染料：蓝色一类在显微观察中标记DNA的荧光染料，最常见的两种是Hoechst33342和Hoechst33258。
这两种染料都在紫外350nm处被激发，在461nm处最大发射光附近发射青/蓝色荧光。
与DAPI相比，Hoechst33342加有乙基，具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，并且细胞毒性更小。
RedDot 1染料：红色，超强的细胞核选择性，其光谱相似于Draq?5 和Draq?7。
RedDot?染料可被几种常见的激光激发并可在远红外区激发荧光。
RedDot? 的红色近红外荧光有效的与其他常用荧光探针区分开来。
不透膜的染料，如下：PI：不同通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。
PI作为红色荧光复染剂首选，PI经常与Calcein-AM或者FDA等荧光探针合用，区分死/活细胞。
EthD III、7-AAD、RedDot 2：不能透过细胞膜，但能将坏死细胞区分开来；更适合凋亡坏死实验的检测；细胞核荧光染料（PI DAPI Hoechst33342）细胞核荧光染料PI碘化丙啶（简称PI）是一种常用的细胞核荧光染色剂。
细胞染色方法大全
Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst 有hoechest33342和hoechst33258两种hoechsts33258，hoechst33342二者区别不大，但是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些，所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色，而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测.碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料(红色），它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红.用PI单一染色观测培养细胞，只能表示细胞的坏死情况，而不是凋亡（当然晚期凋亡PI亦可着色）。
但是如果您只是想知道细胞的死亡情况，而不是仔细区分坏死或凋亡，那么PI单一染色也可以。
但是如果您一定要认定细胞的凋亡，那么PI单一染色显然不够！annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变.其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲和力特异性结合.这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态.Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
Annexin V用FITC标记发绿色荧光；如果用PE标记就发红色荧光。
JC-1染色JC-1是一种阳离子染料，可以在线粒体内聚集，低浓度时主要以单体(monomer)存在，发射光以绿光(～525nm)为主；而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation)，发射光以红光(-590nm)为主。
生物常用染色剂
4、苏丹Ⅲ
配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中
作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）。
作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）
作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
13、二苯胺
配制：称取1.5g二苯胺，溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。临用前，在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液。
作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色。
14、NaOH：用于吸收CO2（验证光合作用需要CO2）或改变溶液的pH,
15、Ca(OH)2：鉴定CO2（验证呼吸作用产生CO2）。
16、NaHCO3：提供CO2等。
1、斐林试剂
配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml
2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml
临用时将甲、乙液等量混合
作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
作用：（1）用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察；
（质被细菌污染情况。
是活体染色剂。
9、丙酮
是有机溶剂，在叶绿体中色素提取时，用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代，不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热
常用染色剂
1、斐林试剂配制：1）甲液质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用：鉴定还原性糖：C6H12O6（即葡萄糖）、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
2、班氏尿糖定性试剂还原性糖配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。
称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。
把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。
用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成，故加入柠檬酸钠。
柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂，它能与铜离子形成可溶性络盐）。
使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。
3、双缩脲试剂配制：A液：质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100mlB液：质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml使用时，先加A液，后加B液作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
4、苏丹Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）。
作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。
能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用：观察成熟植物细胞质壁分离时用。
实验十二常用血细胞化学染色
实验十二常用血细胞化学染色Cytochemistry stain for blood cells一、过氧化物酶染色染色原理粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有髓过氧化物酶(myeloperoxidase, POX或MPO),能将底物H202分解，产生新生态氧，新生态氧可氧化四甲基联苯胶成联苯胺蓝。
联苯胺蓝自我脱氢氧化形成棕色的四甲基苯酿二胺，后者与亚硝基铁氧化纳结合，再进一步氧化形成稳定的蓝色颗粒，沉淀于细胞质内酶所在的部位。
试剂器材1．1%TMB(3,5,31,5f一四甲基联苯胶)乙醇溶液:0.1g TMB溶于100mL88%乙醇溶液中，置棕色瓶内，冰箱保存。
2．亚硝基铁氧化锅饱和溶液在少量蒸馏水中加入亚硝基铁氰晶体，至不再溶解为止，置棕色瓶内，冰箱保存。
3．1%过氧化氢溶液取30%H2021mL加入蒸馆水29mL。
4．稀过氧化氢溶液1%H2021滴，加10 mL蒸馏水稀释(新鲜配制)。
5．瑞氏(Wright)染色液。
6．新鲜涂片(骨髓或血片)、染色架、洗耳球、光学显微镜等。
操作步骤1．取0.1%TMB乙醇溶液1mL，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μL，溶液呈淡棕黄色，染色液应临用前配制。
2．在新鲜干燥的血片或骨髓涂片上，加0.1%TMB一亚硝基铁氰化钠饱和溶液0.5mL，放置lmin，再加稀H202溶液0.7mL，吹匀，染色6min。
3．自来水冲洗，待干，用瑞氏染液复染15~20 min。
4．自来水冲洗，待干，用油镜镜检。
注意事顶1．血涂片或骨髓涂片应新鲜制作，涂片应厚薄适宜。
2．TMB配制在85%~88%的乙醇溶液中染色效果较好，勿用90%~95%乙醇，否则细胞表面蛋白质很快凝固，妨碍试剂向胞内渗入而导致染色效果差。
3．H202需新鲜配制，其浓度与加入量不能随意更改。
涂片中粒细胞看不见阳性颗粒，红细胞呈棕色或绿色，即表示H202过浓。
若H202加于血片上不产生气泡，则示无效。
4．染色液pH应为5.5。
生物学--生物染色剂
生物染色剂斐林试剂：检测可溶性还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖），沸水浴加热，出现砖红色沉淀。
苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ：检测脂肪，苏丹Ⅲ遇到脂肪出现橘黄色，苏丹Ⅳ遇到脂肪出现红色。
双缩脲试剂：检测蛋白质，出现紫色甲基绿：检测DNA在细胞中分布，遇到DNA出现绿色。
吡罗红：检测RNA在细胞中分布，遇到RNA出现红色。
二苯胺：检测DNA的存在，DNA遇到二苯胺，水浴加热出现蓝色。
健那绿：检测细胞中的线粒体，线粒体遇到健那绿呈现蓝绿色。
碘液：检测淀粉，淀粉遇到碘液出现蓝色。
澄清石灰水：检测CO2，二氧化碳可以使澄清的石灰水变浑浊。
溴麝香草酚蓝水溶液：检测二氧化碳，二氧化碳可以使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝色变成绿色再变成黄色。
重铬酸钾溶液：检测酒精，可以在酸性条件下与酒精发生反应出现灰绿色。
龙胆紫或者醋酸洋红：检测细胞核中的染色质，可以将染色质染成深色。
高中生物学重要的酶（部分）限制性核酸内切酶：将DNA分子的双链骨架切割，一种限制性核酸内切酶识别一种序列，而且从特定的位点切割。
限制性核酸内切酶破坏DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。
DNA连接酶：将被限制酶切割的双链DNA片断连接起来。
DNA连接酶连接DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。
DNA聚合酶：在DNA复制的时候需要，将单个脱氧核苷酸一个一个的连接起来，DNA聚合酶连接DNA骨架上的磷酸二酯键。
解旋酶：将DNA的双螺旋解开，解旋酶破坏的是氢键。
（也可以用高温解旋）RNA聚合酶：催化DNA转录为mRNA分子。
胰蛋白酶：将动物细胞间隙的蛋白质水解，使组织分散成游离细胞。
逆转录酶：催化RNA逆转录形成DNA分子。
生物染色剂高中几种染色剂的使用原理、使用方法归纳1。
甲基绿和吡罗红：实验原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.利用甲基绿,吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布.试剂及配制方法（1）试剂质量分数为0.9%的NaCl溶液，质量分数为8%的盐酸，乙酸钠，乙酸，蒸馏水，吡罗红甲基绿混装粉。
常见染色剂
检验痰液中的弹性组织
密封保存
医药紫药水
番红染液
染色导管
0.2%考马斯亮蓝R250
紫色粉末，微溶于热水和醇，不溶于冷水
蛋白质染色
凝胶电泳
植物细胞骨架的观察
密封保存
0.2%考马斯亮蓝G250
溶于醇和热水，微溶于冷水
甲基绿—哌洛宁染液
核染色剂
细菌染色
细胞核分离与鉴定
密封保存
不可久置
0.2%（或1%）詹纳斯绿B染液（janus green）
碱性复红
褐球固氮菌荚膜染色
复红（酸性）
绿色金属光泽的深红色
检定游离氯，结缔组织染色
姬姆萨染色液（giemsa）
沙眼衣原体的4种不同类型包含体；肺炎支原体
动物精母细胞减数分裂染色体制片与观察
乳酸石炭酸棉蓝染色液
霉菌菌丝和孢子均可染成蓝色
1%瑞氏染色液
对原生质的染色有区别嗜中性、碱性、酸性部分的作用
血液的染色
染色剂名称
化学性质
作用
典型实验
备注
碘－碘化钾
遇淀粉变蓝色
对细胞内淀粉的检验
细胞内后含物质的测定
苏丹Ⅲ
红棕色粉末，溶于氯仿、冰乙酸，稍溶于乙醚、醇、丙酮、石油醚、不挥发油、热甘油和挥发油、不溶于水
对细胞内脂肪及类似物质的检验
细胞内后含物质的测定
密封保存
4％铁矾
色譜分析试剂
胞间连丝观察
0.5％苏木精
氧化苏木精
品红的盐酸盐
1％醋酸洋红
蝗虫精巢的压片法观察动物精母细胞减数分裂染色体
密封避光保存
洋红（胭脂红）
鲜红色片状，能溶于硼砂液，其碱性溶液为深红色，部分溶于热水，不溶于冷水或稀酸
高一生物染色试剂知识点
高一生物染色试剂知识点生物是一门研究生命现象和规律的学科，而染色试剂在生物实验中起着至关重要的作用。
染色试剂是将细胞和组织中复杂的生化物质染成可见的颜色，从而能够观察、研究其结构和功能。
本文将介绍高一生物中常用的染色试剂，帮助同学们更好地理解生物实验中的染色技术。
1. 伊红染色试剂伊红染色试剂是一种酸性染料，常用于观察细胞的形态和结构。
它能染亮细胞核和胞浆，使细胞形状清晰可见。
在生物实验中，我们可以将伊红染色试剂应用于根尖细胞染色实验，以观察细胞的有丝分裂现象，进而了解细胞生长和分裂的过程。
2. 嗜乙酸伊红染色试剂嗜乙酸伊红染色试剂是一种碱性染料，常用于染色体的观察。
它能够特异染色染色体，使其清晰可见。
通过染色体的观察，我们可以研究染色体的数量、结构和性状等遗传信息，从而了解基因的传递和变异规律。
3. 维氏染色试剂维氏染色试剂是一种复杂的复合染料，主要用于染色细菌。
它能够染亮细菌的形态和结构，使其在显微镜下更加清晰可见。
通过观察染色后的细菌形态，我们可以判断细菌的类型、数量和分布情况，从而进行相关的研究。
4. 甲苯胺蓝染色试剂甲苯胺蓝染色试剂是一种碱性染料，常用于染色生物薄片。
它能够染亮细胞核和细胞质，使细胞结构清晰可见。
通过甲苯胺蓝染色，我们可以观察细胞的数量、形状和结构特征，从而研究细胞的功能和变异情况。
5. 阿鲁金蓝染色试剂阿鲁金蓝染色试剂是一种酸性染料，常用于观察细胞色素和细胞器。
它能够染亮线粒体和叶绿体等细胞器，使其在显微镜下更加显著。
通过阿鲁金蓝染色，我们可以了解细胞的代谢活动和能量转化过程，从而研究细胞的功能和机制。
染色试剂在生物实验中具有不可替代的作用。
它们不仅能够帮助我们观察细胞和组织的形态结构，还能够探索生命的奥秘。
因此，对于高一生物学习来说，掌握染色试剂的相关知识是非常重要的。
除了常用的染色试剂外，还有许多其他的染色试剂可以在生物实验中应用。
比如，格里姆纳染色试剂、那瓦染色试剂、偏碱性洛伊斯染色试剂等等。
细胞染色方法大全
Hoechst染色:hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色、Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其她荧光的观察效果、hoechst有hoechest33342与hoechst33258两种hoechsts33258,hoechst33342二者区别不大,但就是hoechst33342对细胞的毒性作用更小一些,所以一般来说hoechsts33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色！染色步骤PI (Propidium Iodide碘化丙啶)染色:就是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测、碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)就是一种核酸染料(红色),它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞与坏死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红、用PI单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不就是凋亡(当然晚期凋亡PI亦可着色)。
但就是如果您只就是想知道细胞的死亡情况,而不就是仔细区分坏死或凋亡,那么PI单一染色也可以。
但就是如果您一定要认定细胞的凋亡,那么PI单一染色显然不够！annexin-v染色细胞凋亡早期,细胞膜标志发生改变、其中,磷脂酰丝氨酸(Annexin-V,PS)外翻,Annexin-V 在Ca+存在的条件下与其高亲与力特异性结合、这样,Annexin-v 染色阳性,表示细胞处于早期凋亡状态、Annexin-V结合不同的荧光抗体,就可以利用流式细胞仪、荧光显微镜以及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞凋亡的发生。
Annexin V用FITC标记发绿色荧光;如果用PE标记就发红色荧光。
JC-1染色JC-1就是一种阳离子染料,可以在线粒体内聚集,低浓度时主要以单体(monomer)存在,发射光以绿光(～525nm)为主;而在高浓度时则可以形成多聚体(aggregation),发射光以红光(-590nm)为主。
常见细胞染色试剂简介
常见细胞染色试剂简介1、酸性品红（Acid fuchsin）酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红（Congo red）刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速3、甲基蓝（Methyl blue）甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿（Fast green）固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5．苯胺蓝（Aniline blue）是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解于水，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。
常用70％酒精中的饱和溶液。
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常见细胞染色试剂简介
1、酸性品红（Acid fuchsin）酸性品红是酸性染料，呈红色粉末状，能容于水，略溶于酒精（0.3%）。
是良好的细胞制染色剂，在动物制片上应用很广，在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
它跟甲基绿同染，能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中，可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用，所以染色过度，易在自来水中褪色。
2、刚果红（Congo red）刚果红是酸性染料，呈枣红色粉末状，能溶于水喝酒精，遇酸呈蓝色。
它能作染料，也用作指示剂。
它在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由于它能溶于水和酒精，所以洗涤和脱水处理要迅速
3、甲基蓝（Methyl blue）甲基蓝是弱酸性染料，能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
它跟伊红合用能染神经细胞，也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化，因此用它染色后不能长久保存。
4、固绿（Fast green）固绿是酸性染料，能溶于水（溶解度为4%）和酒精（溶解度为9%）。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂，在染细胞和植物组织上应用极广。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5．苯胺蓝（Aniline blue）是一种混合酸性染料，平常所用很难有一定的标准。
此染料一般很难溶于水，也不易溶于酒精（1.5％）。
植物制片中可与番红合用，作为组织染色；也可作藻类植物染色。
因为这种染料的成分很不一致，染色效果不易掌握。
6、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）苏丹Ⅲ是弱酸性染料，不溶解于水，呈红色粉末状，易溶于脂肪和酒精（溶解度为0.15%）。
常用70％酒精中的饱和溶液。
苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。
7、苏丹Ⅳ（Sudan Ⅳ）苏丹Ⅳ是弱酸性染料，也是很好的染脂肪染料，现在多用以代替苏丹Ⅲ，可染树脂、乳汁管、蜡质以及角质等结构，也可使叶绿体染成暗红色。
s8、伊红（Eosin）这类染料种类很多。
常用的伊红Y，是酸性染料，呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状，溶于水（15摄氏度是溶解度达44%）和酒精（溶于无水酒精的溶解度为2%）。
伊红在动物制片中广泛应用，是很好的细胞质染料，常用作苏木精的衬染剂。
9、碱性品（复）红（Basic fuchsin）碱性品红是碱性染料，呈暗红色粉末或结晶状，能溶于水（溶解度1%）和酒精（溶解度8%）。
碱性品红在生物学制片中用途很广，可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。
在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁，又作为原球藻、轮藻的整体染色。
在细菌学制片中，长用来鉴别结核杆菌。
在尔根氏响应中用作组织化学试剂，已核查脱氧核糖核酸。
10、结晶紫（Crystal violet）结晶紫是碱性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度
8.75%）。
结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。
它是细胞核染色常用的，用来显示染色体的中心体，并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。
凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时，用它能得到良好的结果。
用番红和结晶紫作染色体的二重染色，染色体染成红色，纺锤丝染成紫色，所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。
用结晶紫染纤毛，效果也很好。
用结晶紫染色的切片，缺点是不易长久储存。
11、龙胆紫（Gentian violet）龙胆紫是混合的碱性染料，主要是结晶紫和甲基紫的混合物。
在必要是，龙胆紫能跟结晶紫互相替用。
医药上用的紫药水，主要成分是甲基紫，需要时能代替龙胆紫和结晶紫
12、中性红（Neutral red）中性红是弱碱性染料，呈红色粉末状，能溶于水（溶解度4%）和酒精（溶解度1.8%）。
它的碱性溶液中呈现黄色，在强碱性溶液中呈蓝色，而在弱酸性溶液中呈红色，所以能用作指示剂。
中性红无毒，常做活体染色的染料，用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。
陈久的中性红水溶液，用作显示尼尔体的常用染料。
13、番红（Safranin）番红是碱性染料，能溶于水和酒精。
番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料，能染细胞核、染色体和植物蛋白质，示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织，还能染孢子囊。
14、亚甲蓝或美蓝（Methylene blue）亚甲蓝或美蓝是碱性染料，呈蓝色粉末状，能溶于水（溶解度9.5%）和酒精（溶解度6%）。
亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料，其优点是染色不会过深。
15、甲基绿（methyl green）甲基绿是碱性染料。
它是绿色粉末状，能溶于水（溶解度8%）和酒精（溶解度3%）。
甲基绿是最有价值的细胞和染色剂，细胞学上常用来染染色质，跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。