高龄孕产妇无创DNA产前诊断的应用

高龄孕产妇无创DNA产前诊断的应用

摘要目的:对高龄孕妇采用无创DNA产前检测技术（NIPT）检测胎儿染色体，研

究NIPT技术对诊断胎儿染色体非整倍体的意义。方法:选取618名高龄孕妇进行

无创DNA产前检测。采用高通量测序技术对孕妇外周血中胎儿游离DNA进行检测，对染色体异常的孕妇进行羊膜腔穿刺手术。对羊水细胞进行培养后，进行G

显带染色体核型分析比较分析NIPT检测结果和核型分析结果。结果:在618名高

龄孕妇中，有18名孕妇检测异常，具体为：6名孕妇21-三体高风险，2名孕妇

13-三体高风险，10名孕妇性染色体异常（5名47，XXY/XXX;2名45，XO；3名47，XYY）。其中16名孕妇进行羊水穿刺检查，染色体检查结果为：6名21-三体，1名13-三体，4名47，XXY/XXX；3名47，XYY，2名孕妇羊水穿刺结果正常。对

检测结果进行比较后可知：NIPT技术对21-三体检出率为100％，而对13-三体检

出率为50％；在性染色体非整倍体检测中，NIPT技术对核型为47，XXY/XXX的检出率为100％，而对核型为45，XO的检出率却很低。结论:对高龄孕妇采用NIPT

技术检测胎儿染色体，能有效检测出21-三体及性染色体数目增加，但对13-三体

及性染色体数目减少的检出率较低；且对NIPT检测结果异常的孕妇需要进行羊膜腔穿刺手术，避免孕妇流产。

关键词：高龄孕妇；无创DNA；产前诊断；染色体核型

由于国家调整了计划生育政策，在全面放开二孩后高龄孕妇的数量不断增加。高龄孕妇的卵子质量较低，导致胎儿容易产生染色体异常。因此，医护人员应对

高龄孕妇进行产前诊断引起足够的重视。目前，传统的产前诊断方法已不能满足

孕妇及其家属的需求，无创DNA产前诊断技术具有安全、简便、检出率高等特点，逐渐成为高龄孕妇产前诊断的主要方法[1]。本次研究对在我院进行NIPT的618

名高龄孕妇的临床资料进行总结，将NIPT检测结果和羊水穿刺结果进行比较，旨在研究NIPT技术对高龄孕妇产前诊断的临床意义。

1.资料与方法

1.1临床资料

选取2018年9月-201年12月在我院接受治疗的618名高龄孕妇，年龄为

35-45岁，平均年龄为38.69±2.81岁，怀孕周期为12-24周。所有孕妇均知晓本

次研究内容，且自愿配合，并签署了知情同意书。

1.2研究方法

（1）、采集血样：抽取孕妇10ml外周血，充分混匀后在4℃下低温保存，

并在6h内进行血浆分离。

（2）、提取游离DNA：采用血浆游离DNA提取试剂盒法提取经水浴解冻的

血浆中的游离DNA。

（3）、制备文库和测序：补平游离DNA缺口，并对部分部位进行磷酸化和

去磷酸化，然后使用连接酶连接标签和接头，以形成标准文库。利用高通量测序

技术对游离DNA进行分析。

（4）、数据分析：比较测序所得的DNA序列与人的参考基因组，计算染色

体Z值，并检测胎儿染色体非整倍体异常。Z值在-3.0~3.0间为阴性，Z值＞3.0

为三体高风险，Z值＜3.0为单体高风险。对检测结果为阴性的孕妇进行其他产前

检查，其余孕妇则需进行羊膜腔穿刺手术以确保检测准确。

（5）、染色体制备：经羊膜腔穿刺后，用22号穿刺针抽取羊水，抽取的前

2ml废弃，然后抽取30ml羊水分装于3个试管并送往实验室培养、收获、制片，

并进行G显带。

（6）、染色体核型分析：在G显带后，记录产生的异常染色体结构和数目

异常，选择其中的5个进行分析，且至少对2个进行核型分析。

1.3统计学分析

研究数据用SPSS20.0统计学软件进行分析，组间资料采用x2检验。P<0.05,

差异具有统计学意义。

2.结果

2.1比较不同年龄的孕妇NIPT的检测结果。根据检测结果可知，618名高龄

孕妇中有18名孕妇检测结果异常，具体为：6名21-三体，2名13-三体，2名45，XO，3名47，XYY，5名47，XXY/XXX，检出率为2.91％。在年龄段为35-40岁的

孕妇中，21-三体的发病率为11.11％，13-三体的发病率为11.11％，性染色体异

常的发病率为55.56％；在年龄段为40-45的孕妇中，21-三体的发病率为22.22％，显著高于在年龄段为35-40岁的孕妇中的发病率，而13-三体和性染色体异常的发病率均明显低于年龄段为35-40岁的孕妇，P＞0.05。具体描述如表1。

表1.不同年龄段的孕妇NIPT检测结果的比较

2.2比较高龄孕妇NIPT检测结果与羊水细胞核型分析结果。对检测结果进行比较

后可知，NIPT技术对21-三体、47，XYY、47,XXY/XXX的检出率为100％，而对

13-三体的检出率为50％。具体描述如表2。

表2.高龄孕妇NIPT检测结果与羊水核型分析结果的比较

3.讨论

随着二孩全面开放，高龄孕妇的数量明显增加。高龄孕妇较年轻孕妇更容易

生育染色体异常胎儿，因此，对高龄孕妇的产前诊断方法不应局限于传统的产前

诊断方法。无创DNA产前检测技术（NIPT）通过抽取孕妇的外周血，利用高通量

测序技术检测孕妇血浆内的胎儿游离DNA片段，以检测胎儿患染色体非整倍体疾病的概率[2]。目前，由于NIPT技术具有安全性较高、准确性高、无创性等优点，与传统的产前诊断技术更容易被高龄孕妇接受。

本次研究选取618名孕妇进行NIPT检测，对检测出染色体异常的孕妇进行羊

膜腔穿刺手术，研究结果显示：NIPT技术对21-三体和核型为47，XXY/XXX的检

出率为100％，而对核型为45，XO的检出率却很低。

综上所述，对高龄孕妇采用无创DNA产前诊断方法检测胎儿染色体非整倍体，能够准确检测出21-三体、47，XXX、XXY、XYY，且安全简便、检测时间长、有效，值得优先选择其为高龄孕妇作产前检测。

参考文献

[1]彭红梅,张浔,宋清源,等.无创基因检测在高龄孕妇产前筛查中的应用价值[J].

现代诊断与治疗,2019(9):1463-1465.

[2]刘晓霞.高龄孕妇孕中期胎儿DNA无创产前筛查对妊娠结局的预测价值[J].

中国医师杂志,2018,20(12):1903-1905.