土壤微生物的分离-课件
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土壤微生物的分离
3 材料与方法
3.1 实验器材
3.1.1 土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。 3.1.2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃
薯培养基（上次实验成果） 3.1.3 无菌生理盐水。 3.1.4 其它物品： 无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻
璃涂棒，无菌报纸，药勺，10％酚溶液。
3.2 方法（A.稀释涂布平板法）
3.2.1 制备土壤稀释液
依次0.5mL，注意更换枪尖 振荡20 min
各管4.5mL无菌水 10-4、10-5、10-6；各平板0.1mL 取土壤过程中怎样减少杂菌污染?
三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?
3.2.2 倒平板 将培养基加热熔化，冷至55－60℃，(在高氏1号培养基中加入 10%酚数滴)，(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为 30ug/mL，)混匀后倒入平板。
3.2 方法（B.稀释倒平板法）
取样 （0.1mL)
倒平板
（45℃，12mL，旋动) 教师示范
倒置培养
3.2 方法（C.平板划线分离法）
倒平板
划线 （教师示范）
倒置培养
ENDFra Baidu bibliotek
（操作方法，教师示范）
每平板12 mL
3.2.3 涂布 标记浓度 取菌液 0.1mL
玻璃涂棒灭菌
涂布
静置5－10min
3.2.3 培养 细菌
37℃培养箱
倒置培养24-48h
放线菌 霉菌
28℃培养箱
倒置培养3-5天
3.2.4 平板菌落计数
选取平板上长有50－200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量， 同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度 计算的数据也不应相差太大。
3 材料与方法
3.1 实验器材
3.1.1 土壤样品：按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。 3.1.2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，高氏一号培养基，马铃
薯培养基（上次实验成果） 3.1.3 无菌生理盐水。 3.1.4 其它物品： 无菌培养皿，无菌吸管，洗耳球，无菌玻
璃涂棒，无菌报纸，药勺，10％酚溶液。
3.2 方法（A.稀释涂布平板法）
3.2.1 制备土壤稀释液
依次0.5mL，注意更换枪尖 振荡20 min
各管4.5mL无菌水 10-4、10-5、10-6；各平板0.1mL 取土壤过程中怎样减少杂菌污染?
三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?
3.2.2 倒平板 将培养基加热熔化，冷至55－60℃，(在高氏1号培养基中加入 10%酚数滴)，(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为 30ug/mL，)混匀后倒入平板。
3.2 方法（B.稀释倒平板法）
取样 （0.1mL)
倒平板
（45℃，12mL，旋动) 教师示范
倒置培养
3.2 方法（C.平板划线分离法）
倒平板
划线 （教师示范）
倒置培养
ENDFra Baidu bibliotek
（操作方法，教师示范）
每平板12 mL
3.2.3 涂布 标记浓度 取菌液 0.1mL
玻璃涂棒灭菌
涂布
静置5－10min
3.2.3 培养 细菌
37℃培养箱
倒置培养24-48h
放线菌 霉菌
28℃培养箱
倒置培养3-5天
3.2.4 平板菌落计数
选取平板上长有50－200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量， 同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大，且不同稀释度 计算的数据也不应相差太大。