《实验诊断学》骨髓细胞形态学检查
合集下载
实验诊断学骨髓细胞学检查
细胞名称
巨 原始巨核细胞
核
幼稚巨核细胞 细
颗粒巨核细胞 胞
产板巨核细胞 系
裸
核
%
4.20 58.30 37.50 1个
1. 骨髓增生明显活跃，粒红比例倒置。
2. 红系增生明显活跃占 54.5%，以中晚幼阶段为主。幼红细胞
胞体较小、边缘不整齐，胞质量少、偏蓝。核浆发育失衡呈
核老浆幼状。成熟红细胞体积较小、中央淡染区明显扩大，
——〔传单、局部淋巴瘤〕 4．骨髓象有变化,而血象无变化
——〔多发性骨髓瘤、戈谢病〕 5．骨髓象细胞难以识别,而血象细胞易识别
——〔白血病、血液寄生虫上、海交淋通大巴学瘤医学〕院
骨髓检查报告方式：
1.独立性和肯定性结论 2.符合性诊断 3.须依赖细胞化学染色的诊断 4.疑似性诊断 5.简明报告特征所见而不下结论 6.血液病治疗后复查报告a.有效 b.无效
上海交通大学医学院
骨髓检查的临床意义
粒细胞系 增多- 原粒、 早幼粒、 中幼粒、 晚幼粒和杆状核
急
急性
M2、
性 白
早幼
慢性
血
白血
粒细
病 等
病
胞白
血病
等
慢性粒 细胞白 血 病、 类 白、 中毒等
减少- 再障、粒缺、急性造血停滞等。 上海交通大学医学院
红细胞系 增多 -
原红和早幼红、
急性红血病、急 性红白血病
涂片、染色。
检测结果分析与报告方式：
结合临床分析
上海交通大学医学院
增生极度减低 增生明显活泼
增生活泼
增生减低 增生极度活泼
上海交通大学医学院
骨髓象与血象结合分析 1．骨髓象相似，而血象有区别
骨髓细胞形态学检查
细胞发育规律
• 细胞核
o 染色质：
• 由细致疏松逐渐变为粗糙密集，最后紧缩成块，着色由浅变深，随DNA含量 增加而逐渐变为深紫色。
o 核位置：
• 红细胞系胞核位置居中，核四周均有胞浆。 • 粒细胞、单核细胞及浆细胞的核常偏位。 • 淋巴细胞胞核常一侧着边。
细胞发育规律
• 细胞核
o 核膜：由不明显到明显 o 核仁：由清晰到模糊不清最 后消失
• 细胞质
细胞发育规律
o 量：一般由少到多 。淋巴细胞变化不大。
o 染色：红、粒及巨核细胞系细胞浆着色多由深蓝色或浅蓝色而 变为浅红色，红细胞最终变为桔红色。
o 颗粒：从无到有 ，由非特异性颗粒到特异性颗粒 。如原始粒一
般无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼粒以后各阶 段细胞嗜天青颗粒基本消失而代之以大量特异性颗粒。红细胞 系胞浆中不含颗粒。
细胞发育规律
• 细胞核
o 大小：由大变小，巨核细胞则相反。 o 细胞核核形：
• 幼红细胞胞核始终呈圆形，最后脱核而消失。 • 各系白细胞原始阶段胞核均呈圆形或椭圆形，随着细胞成熟，核的一侧逐渐 凹陷，最后形成分叶状； • 单核细胞则由圆形变为不规则形； • 淋巴细胞及浆细胞系核形保持不变。 • 巨核细胞胞核逐渐增大并分叶，分叶不规则堆叠成为一巨大的核。
骨髓细胞形态学检查
细胞发育规律
• 细胞体积与外形
o 大小：
• 通常从原始到成熟，胞体由大逐渐变小 。 • 巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。
o 外形：
• 红细胞系始终呈圆形； • 粒细胞及淋巴细胞系则保持圆形或椭圆形；
• 单核细胞系由圆形或椭圆形变为不规则形；
• 巨核细胞系由圆形变为明显不规则形。
骨髓细胞形态学实验诊断 室内质量控制指南
骨髓细胞形态学实验诊断室内质量控制指南日期:2015-12-24 12:01:03 来源:中华检验医学网点击:307 次骨髓细胞形态学实验诊断室内质量控制指南骨髓细胞形态学实验诊断室内质量控制指南目录1.从事骨髓细胞形态学实验诊断的基本条件2.检验申请控制程序3.标本采集及取材状态评价4.标本的运输与处理5.标本镜检分析6. 报告审核与发放7. 标本的保存和归档8.骨髓细胞形态学实验诊断的相关制度一、从事骨髓细胞形态学实验诊断的基本条件骨髓细胞形态学实验诊断是血液系统疾病实验诊断的基础，也是血液病诊断的最常用手段。
血液细胞形态学报告质量的优劣，直接关系到血液病的诊治。
目前，开展骨髓细胞形态学实验诊断的单位有三等甲级到二等乙级等不同层次的医院，为了确保骨髓细胞形态学实验诊断的质量，重庆市血液病实验诊断质控中心建议开展单位应具备以下基本条件：1.开展实验室为国家、省、市卫生局批准的医疗机构设置的临床实验室。
2.从事本项工作的实验室应配置相应的仪器设备，使用合格的试剂。
三甲医院应配备研究级显微镜和图文报告分析系统。
3.实验室至少应配备2人或以上检验人员。
4.检验人员资质具备医学检验资格证书或执业医师资格证书的从业人员4.1 报告人员（检验者）：符合国家相关规定，具备医学检验资格证书的检验技师及检验医师4.2 审核人员：符合国家相关规定，具备医学检验资格证书，从事本专业工作5年以上的检验技师及检验医师4.3检验人员的培训考核从事本检验项目的初级技术人员，应参加本质控中心所举办的专项技术培训，并通过考核，取得骨髓细胞形态学实验诊断的培训合格证。
二、检验申请控制程序1．目的提供足够的信息以识别患者和经授权的申请者2．适用范围适用于重庆本市具有执业医师资格证的临床医师。
3．职责检验专业技术人员进行监督指导，同时向临床医师提供相关检验项目信息。
4．程序4.1 患者标识及相关临床资料包括患者ID号、住院号、科别、姓名、性别、年龄等，患者的病史，是否有骨髓穿刺的适应症或禁忌症，身体状况是否能承受等。
骨髓细胞形态学检查
有一定危险性） 胫骨粗隆（2岁以下小儿）
造血干细胞的功能特点
造血干细胞是造血组织中一类目前尚无 形态学特征描述的功能细胞。特点有：
1。具有高度自我更新的能力，可维持干 细胞数量的恒定。
2。具有多向分化的能力，即可向各系列 祖细胞分化，然后增殖分化为各系血细 胞。
生成阶段：干细胞，祖细胞，各系列原 始幼稚细胞阶段，然后继续分化成熟。
再生障碍性贫血（AA）慢性型
血象：红细胞、血红蛋白、网织红细胞、 白细胞、血小板均减少（均较急性型轻）
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改 变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓 功能或病理状况，不能反映骨髓的全面 状况。
某些疾病的诊断除骨髓细胞学改变外， 尚需了解骨髓组织结构的变化等。此外 ，骨髓干抽等情况须结合骨髓活检进行 病理学检查。
常用取材部位
髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高，
细胞核
大小：由大到小（巨核细胞例外）
核型：红细胞核圆形，逐渐缩小消失，淋巴细 胞始终圆形，粒细胞由圆形变为分叶状，浆细 胞始终呈圆形，单核细胞核变为不规则型，巨 核细胞核增大并分叶不规则。
核位置：红细胞希始终居中，粒、单核、浆细 胞、巨核细胞常偏位，淋巴细胞核一侧着边， 仅一边有胞质。
检查结果的分析
1. 骨髓增生程度：分增生极度活跃，增 生明显活跃，增生活跃，增生减低，增 生明显减低。
2. 骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细 胞的比例。一般符合正常参考值。
骨髓增生程度的临床意义
增生极度活跃：反映骨髓造血功能亢进 ，常见于白血病。
增生明显活跃：反映骨髓造血功能旺盛 ，见于各种增生性贫血，白血病、骨髓 增殖性疾病等，以及正常儿童及青年的 骨髓象。
造血干细胞的功能特点
造血干细胞是造血组织中一类目前尚无 形态学特征描述的功能细胞。特点有：
1。具有高度自我更新的能力，可维持干 细胞数量的恒定。
2。具有多向分化的能力，即可向各系列 祖细胞分化，然后增殖分化为各系血细 胞。
生成阶段：干细胞，祖细胞，各系列原 始幼稚细胞阶段，然后继续分化成熟。
再生障碍性贫血（AA）慢性型
血象：红细胞、血红蛋白、网织红细胞、 白细胞、血小板均减少（均较急性型轻）
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改 变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓 功能或病理状况，不能反映骨髓的全面 状况。
某些疾病的诊断除骨髓细胞学改变外， 尚需了解骨髓组织结构的变化等。此外 ，骨髓干抽等情况须结合骨髓活检进行 病理学检查。
常用取材部位
髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高，
细胞核
大小：由大到小（巨核细胞例外）
核型：红细胞核圆形，逐渐缩小消失，淋巴细 胞始终圆形，粒细胞由圆形变为分叶状，浆细 胞始终呈圆形，单核细胞核变为不规则型，巨 核细胞核增大并分叶不规则。
核位置：红细胞希始终居中，粒、单核、浆细 胞、巨核细胞常偏位，淋巴细胞核一侧着边， 仅一边有胞质。
检查结果的分析
1. 骨髓增生程度：分增生极度活跃，增 生明显活跃，增生活跃，增生减低，增 生明显减低。
2. 骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细 胞的比例。一般符合正常参考值。
骨髓增生程度的临床意义
增生极度活跃：反映骨髓造血功能亢进 ，常见于白血病。
增生明显活跃：反映骨髓造血功能旺盛 ，见于各种增生性贫血，白血病、骨髓 增殖性疾病等，以及正常儿童及青年的 骨髓象。
骨髓细胞形态学检查
小淋巴细胞：呈圆形或椭圆形，直径6～10um。胞核圆形或椭圆形，或有切迹，核着边，染色质粗糙致密呈大块状，染深紫红色。胞质量极少，仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质，有时几乎不见而似裸核，一般无颗粒。
3、淋巴细胞系统 原淋（Lymphoblast） 幼淋（prolymphocyte） 淋巴（lymphocyte） 大淋巴细胞 小淋巴细胞
嗜酸性杆状核粒细胞：细胞呈圆形，直径10～15um。胞核狭长，弯曲呈带状，两端钝圆。核染色质粗糙呈块状，染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒
嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11～16um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15um。胞核与上述细胞相似，但轮廓不清，染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒，颗粒也可覆盖在细胞核上。
骨髓穿刺的适应证 骨髓穿刺的禁忌证 骨髓穿刺检查的临床意义 骨髓穿刺部位的选择、注意事项
复习内容
禁忌症
严重出血倾向者
适应证
血液系统疾病的诊断、分型、疗效观察及预后判断 某些感染性疾病的辅助诊断 判断恶性疾病的骨髓转移 协助诊断某些代谢性疾病
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓功能或病理状况，不能反映骨髓的全面状况。
Obvious proliferation
10:1
Leukemia, hyperplastic anemia
Active proliferation
20:1
Normal BM, some anemia
Hypoplasia
50:1
some hypoplastic anemia
3、淋巴细胞系统 原淋（Lymphoblast） 幼淋（prolymphocyte） 淋巴（lymphocyte） 大淋巴细胞 小淋巴细胞
嗜酸性杆状核粒细胞：细胞呈圆形，直径10～15um。胞核狭长，弯曲呈带状，两端钝圆。核染色质粗糙呈块状，染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒
嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11～16um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15um。胞核与上述细胞相似，但轮廓不清，染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒，颗粒也可覆盖在细胞核上。
骨髓穿刺的适应证 骨髓穿刺的禁忌证 骨髓穿刺检查的临床意义 骨髓穿刺部位的选择、注意事项
复习内容
禁忌症
严重出血倾向者
适应证
血液系统疾病的诊断、分型、疗效观察及预后判断 某些感染性疾病的辅助诊断 判断恶性疾病的骨髓转移 协助诊断某些代谢性疾病
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓功能或病理状况，不能反映骨髓的全面状况。
Obvious proliferation
10:1
Leukemia, hyperplastic anemia
Active proliferation
20:1
Normal BM, some anemia
Hypoplasia
50:1
some hypoplastic anemia
骨髓细胞形态学检查ppt课件
成熟红细胞 成熟红细胞是呈粉红色，中央稍浅，大小近似相等无核的细胞
检查结果的分析
1. 骨髓增生程度：分增生极度活跃，增 生明显活跃，增生活跃，增生减低，增 生明显减低。 2. 骨髓中各系列细胞及其各发育阶段细 胞的比例。一般符合正常参考值。
骨髓增生程度的临床意义
增生极度活跃：反映骨髓造血功能亢进 ，常见于白血病。
核膜：由不明显变明显。 核仁：由清晰可见到消失。
细胞质
量：由少到多。 颗粒：有无到有。 空泡：有无到有（浆细胞）。 着色：红细胞、粒细胞、巨核细胞由嗜 碱性到嗜酸性，由蓝到红。淋巴细胞呈 天蓝色，单细胞呈灰蓝色。浆细胞由浅 灰蓝色变为深蓝色。
骨髓涂片的制作、染色
骨髓细胞学检查的内容和方法
低倍镜检查： 观察骨髓标本的取材和涂片制作是否满 意。 判断骨髓增生程度。以有核细胞的量来 反映。一般低倍镜观察有核细胞与成熟 红细胞之间的比例，正常为1：20。 观察巨核细胞。 注意有无异常细胞。
常用取材部位
髂后上棘（较易掌握分寸） 髂前上棘（较易掌握分寸） 胸骨（对向心性病变阳性率高，
有一定危险性） 胫骨粗隆（2岁以下小儿）
造血干细胞的功能特点
造血干细胞是造血组织中一类目前尚无 形态学特征描述的功能细胞。特点有： 1。具有高度自我更新的能力，可维持干 细胞数量的恒定。 2。具有多向分化的能力，即可向各系列 祖细胞分化，然后增殖分化为各系血细 胞。 生成阶段：干细胞，祖细胞，各系列原 始幼稚细胞阶段，然后继续分化成熟。
原始红细胞
胞体: 直径15-20μm
胞核: 圆形,居中或稍偏于一旁,约占细胞的4/5,紫红 色,染色质颗粒状,核仁明显
核仁: 1-2个,大小不均,模糊或清楚,染浅兰色
胞浆: 量少,或有部分胞浆呈伪足状,深兰色且厚,近核 处不见色浅区
《实验诊断学》骨髓细胞形态学检查PPT课件
多发性骨髓瘤
骨髓转移癌
霍奇金病 R-S细胞 NHL骨髓浸润
戈谢（ Gancher ）病 尼曼-匹克病 疟疾 黑热病
⒉辅助诊断某些造血系统疾病 骨髓造血功能改变为主 溶血性贫血(HA) 血小板减少性紫癜 骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增殖性疾病(MPD) 真性红细胞增多症(PV) 原发性血小板增多症(ET)
为0.1－0.2ml ?多部位穿刺：可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
?抽取时病人有短暂的疼感 ?骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ?涂片检查有骨髓特有的细胞 ?含大量幼稚细胞，杆状核多于分叶核
干抽
?概念：是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
?原因： ?原发性和继发性骨髓纤维化症 ?骨髓极度增生 ?骨髓增生减低 ?肿瘤骨髓浸润
?无异常细胞及寄生虫?正常骨髓象应具备的条件?有核细胞增生活跃?各系各阶段细胞所占有核细胞的比例大致在正常参考范围?各系各阶段细胞形态上无明显异常?无特殊病理细胞及血液寄生虫贫血anemia增生性贫血hyperproliferativeanemia??溶血性贫血hemolyticanemia??缺铁性贫血irondeficiencyanemia??失血后贫血posthemorrhagicanemia??巨幼细胞性贫血megaloblasticanemia增生低下性贫血hypoproliferativeanemia??再生障碍性贫血aplasticanemia增生性贫血再再障白血病leukemia急性非淋巴细胞白血病amlfabclassificationwhoclassification急性淋巴细胞白血病allfagotauerbodiesaplchronicmyelocyticleukemia白血病的免疫学分型和细胞遗传学分析?急性白血病的免疫学分型?急性白血病的细胞遗传学分型骨髓活检?骨髓活检的临床意义?正确判断血细胞减少患者骨髓增生程度及其病因?判断骨髓的铁储存?对某些疾病及化疗后骨髓抑制程度有明确诊断意义?可发现骨髓穿刺检查不易发现的病理性变化?对各种急慢性白血病和骨髓增生异常综合征有确诊化疗效果判断及判定预后的意义?可诊断慢性骨髓增生性疾病?可明确干抽的原因?骨髓活检适应症?多次骨髓穿刺取材失败?血象显示全血细胞减少?某些贫血原因不明的发热脾或淋巴结肿大骨髓涂片检查不能确诊者?需要进行骨髓抽取物涂片检查的所有血液病某些内科病恶性肿瘤和骨病患者方法简介
骨髓细胞形态学检测
骨髓细胞形态学检测
骨髓细胞形态学检测
第1页
目标和要求
了解骨髓细胞形态学特征和分类比值 了解骨髓细胞学检验临床意义，掌握骨髓细胞
形态学检验适应症、骨髓增生程度分级和血细 胞发育规律 了解贫血、白血病等常见血液病血象和骨髓象 特点
骨髓细胞形态学检测
第2页
骨髓检验临床应用
造血系统疾病
骨髓细胞学检验是诊疗造血系统疾病最有价 值检验方法 造血系统疾病诊疗 造血系统疾病疗效分析和预后预计
骨髓细胞形态学检测
第11页
细胞发育规律
细胞质
量：普通由少到多 。淋巴细胞改变不大。 染色：红、粒及巨核细胞系细胞浆着色多由深蓝色或浅蓝
色而变为浅红色，红细胞最终变为桔红色。 颗粒：从无到有 ，由非特异性颗粒到特异性颗粒 。如原
始粒普通无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼 粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基础消失而代之以大量特异 性颗粒。红细胞系胞浆中不含颗粒。
细胞发育规律
细胞核
核膜：由不显著到显著 核仁：由清楚到含糊不清最
终消失 原始阶段都有核仁 早幼阶段核仁含糊不清或
消失 中幼阶段多无核仁
骨髓细胞形态学检测
第15页
二、血细胞正常形态学特征
骨髓细胞形态学检测
第16页
红细胞系统
原始红细胞：
0~1.5 % ,15~22 m 圆形或有伪足突出 核浆百分比大 核仁 1~5 个，边界不清 核膜清楚，核周淡染区 浆呈深蓝，不含颗粒
细胞仍嗜碱） 特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无→少→多
骨髓细胞形态学检测
第9页
骨髓细胞形态学检测
第10页
细胞发育规律
细胞体积与外形
大小： 通常从原始到成熟，胞体由大逐步变小 。 巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。
骨髓细胞形态学检测
第1页
目标和要求
了解骨髓细胞形态学特征和分类比值 了解骨髓细胞学检验临床意义，掌握骨髓细胞
形态学检验适应症、骨髓增生程度分级和血细 胞发育规律 了解贫血、白血病等常见血液病血象和骨髓象 特点
骨髓细胞形态学检测
第2页
骨髓检验临床应用
造血系统疾病
骨髓细胞学检验是诊疗造血系统疾病最有价 值检验方法 造血系统疾病诊疗 造血系统疾病疗效分析和预后预计
骨髓细胞形态学检测
第11页
细胞发育规律
细胞质
量：普通由少到多 。淋巴细胞改变不大。 染色：红、粒及巨核细胞系细胞浆着色多由深蓝色或浅蓝
色而变为浅红色，红细胞最终变为桔红色。 颗粒：从无到有 ，由非特异性颗粒到特异性颗粒 。如原
始粒普通无颗粒，早幼粒出现非特异性嗜天青颗粒，中幼 粒以后各阶段细胞嗜天青颗粒基础消失而代之以大量特异 性颗粒。红细胞系胞浆中不含颗粒。
细胞发育规律
细胞核
核膜：由不显著到显著 核仁：由清楚到含糊不清最
终消失 原始阶段都有核仁 早幼阶段核仁含糊不清或
消失 中幼阶段多无核仁
骨髓细胞形态学检测
第15页
二、血细胞正常形态学特征
骨髓细胞形态学检测
第16页
红细胞系统
原始红细胞：
0~1.5 % ,15~22 m 圆形或有伪足突出 核浆百分比大 核仁 1~5 个，边界不清 核膜清楚，核周淡染区 浆呈深蓝，不含颗粒
细胞仍嗜碱） 特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无→少→多
骨髓细胞形态学检测
第9页
骨髓细胞形态学检测
第10页
细胞发育规律
细胞体积与外形
大小： 通常从原始到成熟，胞体由大逐步变小 。 巨核细胞相反，细胞越成熟，胞体越大。
诊断学实验课件：实验四骨髓细胞学检查
2.在A端、B端凹面中央分别滴A型和B型标准血 清各一滴。
3. 消毒耳垂或指端后，用消毒采血针刺破皮肤， 分别用竹签刮取1-2滴血，使其分别与A型和B型 标准血清充分混匀。放置1-2min后，用肉眼观察 有无凝集现象，肉眼不易分辨者用低倍显微镜观 察。
4. 根据有无凝集现象判定血型。 23
（二）试管法
12
骨髓检验的步骤及正常骨髓象
低倍镜： 1. 标本取材、涂片、染色是否满意。 2.判断骨髓增生度* 3.观察巨核细胞：正常人7-35个（涂片
为1.5×3cm2）。 4.注意尾部有无异常细胞。
13
骨髓增生度
RBC：有核细胞
病因
增生极度活跃 1：1
白血病
增生明显活跃 10：1 增生性贫血、白血病
27凝集程度观察较多小凝集颗粒周围有较多的游离红细胞弱凝集肉眼几乎看不到凝块显微镜下可见一些凝集颗粒混合凝集外观既有明显的凝集块又有很多未凝集的游离红细胞红细胞无凝集均匀分布28血型红细胞上抗原血清中抗体abab29abo血型的鉴定
实验四
骨髓细胞学检测 ABO血型测定 交叉配血 出血时间测定 束臂试验
35
交叉配血
是在输血前必做的试验。 供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉配
血），受血者红细胞与供血者血清反应（次侧 交叉配血），观察两者是否出现凝集。 目的：检查受血者与供血者是否存在血型抗原 与抗体不合情况。
36
交叉配血试验
37
操作步骤
1.患者标本准备（静脉血）
（1）分离血清,标记为PS。 （2）配制2%-4%患者红细胞生理盐水悬液，
增生活跃
20：1
正常人、某些贫血
增生减低
50：1
再障（慢）
增生极度减低200：1
3. 消毒耳垂或指端后，用消毒采血针刺破皮肤， 分别用竹签刮取1-2滴血，使其分别与A型和B型 标准血清充分混匀。放置1-2min后，用肉眼观察 有无凝集现象，肉眼不易分辨者用低倍显微镜观 察。
4. 根据有无凝集现象判定血型。 23
（二）试管法
12
骨髓检验的步骤及正常骨髓象
低倍镜： 1. 标本取材、涂片、染色是否满意。 2.判断骨髓增生度* 3.观察巨核细胞：正常人7-35个（涂片
为1.5×3cm2）。 4.注意尾部有无异常细胞。
13
骨髓增生度
RBC：有核细胞
病因
增生极度活跃 1：1
白血病
增生明显活跃 10：1 增生性贫血、白血病
27凝集程度观察较多小凝集颗粒周围有较多的游离红细胞弱凝集肉眼几乎看不到凝块显微镜下可见一些凝集颗粒混合凝集外观既有明显的凝集块又有很多未凝集的游离红细胞红细胞无凝集均匀分布28血型红细胞上抗原血清中抗体abab29abo血型的鉴定
实验四
骨髓细胞学检测 ABO血型测定 交叉配血 出血时间测定 束臂试验
35
交叉配血
是在输血前必做的试验。 供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉配
血），受血者红细胞与供血者血清反应（次侧 交叉配血），观察两者是否出现凝集。 目的：检查受血者与供血者是否存在血型抗原 与抗体不合情况。
36
交叉配血试验
37
操作步骤
1.患者标本准备（静脉血）
（1）分离血清,标记为PS。 （2）配制2%-4%患者红细胞生理盐水悬液，
增生活跃
20：1
正常人、某些贫血
增生减低
50：1
再障（慢）
增生极度减低200：1
实验诊断学课件-骨髓的细胞学检查
原始浆细胞 胞体：直径14-18μ 胞核：较大，约占细胞2/3，圆或椭圆形，常偏于一侧；染色质细致、呈 颗粒状，均匀分散或呈细网状。 核仁：2-5个，淡蓝色，不显著。 胞浆：较其它原始细胞为多，深蓝而不透明，近核处着色较浅，无颗粒， 偶可见到空泡。
幼浆细胞：直径12-16μ；核圆或椭圆形，占细胞1/2左右，位于细胞 中央或偏于一侧，染色质较原始阶段粗而密，开始有浓集现象。核 仁1-2个，不清晰。胞浆深蓝色或呈多染性，近核部分常有呈半月状 的淡染区，偶尔可见到有空泡。
缺点
1.造血组织的天然结构已遭破坏，无法 判断红髓、黄髓比例
2.若抽吸过猛，导致血窦血的稀释
3.若遇“干抽”不能分析
1.有核细胞群集，不易区分原、幼细胞的类型 2.难以观察细胞内的微细结构 3.细胞化学染色结果难以量化
3. 骨髓涂片的显微镜检查
(1)低倍镜检查
1) 观察制片质量（包括取材、制片及染色）好片应符合下列条 件：
血细胞发育形态演变规律要点
胞体： 胞核:
形态 染色质 色 核仁: 胞质: 量 色 颗粒
原始 大 大 圆 疏松细致 淡紫色 可见 少 深蓝 无 非特异性
成熟 小 小
不规则（或消失） 紧密粗糙 深紫色
消失 多
浅蓝或灰（红） 有
特异性
胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小
（巨核细胞系除外）
成熟红细胞
早期红细胞
浆细胞：直径8-15μ；核较小，占细胞的1/2以下，多偏于一侧，偶可 见双核；染色质粗密、聚集成堆、常染成紫丁香色、不均匀，在近 核处一边常伸出半月状淡染区；浆中偶见有空泡或有泡沫感。
原始巨核细胞 胞体：15-30μm，圆形或椭圆形 胞核：圆形或椭圆形，有凹陷，折叠，染色质暗深紫红色，粗大 颗粒，排列紧密 核仁：1-2个 胞浆：量少，深蓝色，无颗粒。
《骨髓细胞形态学检查实验课》课件讲义
骨髓细胞形态学检查实验课
骨2
髓
形
态
学 检
骨髓血细胞检查适应症
查
患者多次检查外周血有异常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 查明恶性肿瘤有无转移 对血液病进行诊断、鉴别诊断和疗效观察
骨3
髓
形
态
学 检
骨髓血细胞检查禁忌症
查
1.凝血因子严重缺乏的出血性疾病，如血友 病。
2.穿刺部位有炎症或畸形。 3.晚期妊娠的孕妇。
骨1
髓5
形 态 学
(一)粒细胞系统
检
查
粒细胞系统在正常骨髓约占45%-70%，分 为原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、 晚幼粒细胞、杆状核粒细胞、分叶核粒细 胞。
骨1
髓6
形 态 学
1、原始粒细胞（0-2%）
检
查
原始粒细胞I型：
大小：10～20 um，圆或不规则圆
形；
胞浆：量少，染均匀透明或不透明的淡
骨1
髓3
形 态 学
☆ ☆ ☆有核细胞分类
检
查
➢ 选择满意的片膜段，观察200个有核细
胞，按细胞的种类、发育阶段分别计
数，并计算它们各自的百分率。
骨1
髓4
干细胞
形
态
学
检
原粒
查
早幼粒 中幼粒 晚幼粒
祖细胞 原红
巨核系 单核系 淋巴系 浆细胞系
早幼红
中幼红 晚幼红
骨髓中血细胞根据细胞发育阶段分为 原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞三个阶段
均匀
核上
骨2
髓1
形 态 学
4、晚幼粒细胞
检
查 大小：10～16um；
胞浆：量较多，因含特异性颗粒的不同，被分为中性晚幼粒细胞、嗜酸性
骨2
髓
形
态
学 检
骨髓血细胞检查适应症
查
患者多次检查外周血有异常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 查明恶性肿瘤有无转移 对血液病进行诊断、鉴别诊断和疗效观察
骨3
髓
形
态
学 检
骨髓血细胞检查禁忌症
查
1.凝血因子严重缺乏的出血性疾病，如血友 病。
2.穿刺部位有炎症或畸形。 3.晚期妊娠的孕妇。
骨1
髓5
形 态 学
(一)粒细胞系统
检
查
粒细胞系统在正常骨髓约占45%-70%，分 为原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、 晚幼粒细胞、杆状核粒细胞、分叶核粒细 胞。
骨1
髓6
形 态 学
1、原始粒细胞（0-2%）
检
查
原始粒细胞I型：
大小：10～20 um，圆或不规则圆
形；
胞浆：量少，染均匀透明或不透明的淡
骨1
髓3
形 态 学
☆ ☆ ☆有核细胞分类
检
查
➢ 选择满意的片膜段，观察200个有核细
胞，按细胞的种类、发育阶段分别计
数，并计算它们各自的百分率。
骨1
髓4
干细胞
形
态
学
检
原粒
查
早幼粒 中幼粒 晚幼粒
祖细胞 原红
巨核系 单核系 淋巴系 浆细胞系
早幼红
中幼红 晚幼红
骨髓中血细胞根据细胞发育阶段分为 原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞三个阶段
均匀
核上
骨2
髓1
形 态 学
4、晚幼粒细胞
检
查 大小：10～16um；
胞浆：量较多，因含特异性颗粒的不同，被分为中性晚幼粒细胞、嗜酸性
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
⒈白细胞分类计数 ⒉成熟红细胞形态有无异常 ⒊略估血小板形态与数量 ⒋注意有无寄生虫疟原虫
四.血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学 为基础，根据化学反应的原理应 用骨髓涂片进行固定，化学反应 显色，复染等程序染色光学显微 镜下观察
㈠过氧化物酶染色（ Peroxidase POX）
Peroxidase( POX ) Staining
骨髓涂片和染色注意事项
➢ 载玻片要洁净；推端要光滑 ➢ 推玻片与载玻片呈约30度角 ➢ 骨髓抽取后要立即涂片,推制骨髓片约8张左右
送检 ➢ 涂片一般不用抗凝剂 ➢ 涂片时要保留片尾和边缘 ➢ 涂片制成后，快速摇动或扇干，不可火烤 ➢ 染色太浅－干燥后重染，若太深－干燥后－滴
数滴甲醇－稍停片刻－冲洗
为0.1－0.2ml ➢多部位穿刺：可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
➢抽取时病人有短暂的疼感 ➢骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ➢涂片检查有骨髓特有的细胞 ➢含大量幼稚细胞，杆状核多于分叶核
干抽
❖概念：是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
❖原因： ➢原发性和继发性骨髓纤维化症 ➢骨髓极度增生 ➢骨髓增生减低 ➢肿瘤骨髓浸润
骨髓细胞形态学检查 Xiaoyan Zhang
概念
骨髓象检查是用细胞形态学检查的方法 来观察骨髓中细胞的数量和质量的变化， 借以了解骨髓的造血功能，对疾病的诊 断、疗效观察、预后的判断等都具有重 大价值。
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病
恶性组织细胞增生症 海兰组织细胞增生症
Rubricyte （中幼红细胞） 8-12 u Nucleus no nucleoli with clumpy chromatin Cytoplasm moderate amount gray-blue with pink-tan
Metarubricyte （晚幼红细胞） 8-10 u
Nucleus round and pycnotic
round with fine chromatin and 2-5 nucleoli
Cytoplasm scanty and deep blue
Prorubricyte （早幼红细胞） 10-15u Nucleus 2-4 nucleoli with thickened chromatin Cytoplasm small amount and blue
Cytoplasm pink-tan with blue tinge
晚幼红细胞脱核
原粒细胞
早幼粒细胞
中幼粒细胞
晚幼粒细胞
杆状核中性粒细胞
分叶核中性粒细胞
标本的采集
骨髓取材的部位和方法 ➢部位：胸骨、棘突、髂骨等处
➢方法：多用穿刺法吸取
标本采集的质量保证
➢穿刺必须严格无菌 ➢吸取骨髓液的动作要缓慢：首次吸取量
多发性骨髓瘤
骨髓转移癌
霍奇金病R-S细胞 NHL骨髓浸润
戈谢（Gancher）病 尼曼-匹克病 疟疾
黑热病
⒉辅助诊断某些造血系统疾病
骨髓造血功能改变为主
溶血性贫血(HA) 血小板减少性紫癜
骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增殖性疾病(MPD)
真性红细胞增多症(PV) 原发性血小板增多症(ET)
⒊鉴别诊断
●核染色质：由细致疏松变粗糙密集， 着色由浅变深
●核膜：由不明显到明显 ●核仁：从有到无 （3）细胞浆 ●量：由少到多 ●颜色：由深蓝变浅、变为红色
（成熟红细胞） ●颗粒：从无到有，从非特异性到特异性 （4）胞核与胞浆之比 一般由大变小
Rubriblast （原红细胞） 10-19 u
Nucleus -
原因不明发热、淋巴结、脾或肝 肿大，骨痛或关节痛
PB异形淋巴细胞、类白血病反应、 嗜酸细胞增多症
适应症
➢确诊某些造血系统疾病 ➢协助诊断部分血液系统疾病 ➢提高某些疾病的诊断率 ➢患者多次检查外周血异常；有不明原因
的肝脾淋巴结肿大
禁忌症
➢由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病如 血友病
➢晚期妊娠的孕妇作骨髓穿刺术应慎重 ➢局部皮肤有弥漫化脓性炎症或局部骨髓
增 生 减 低 1:35-70
1:50
0.5-1
CAA
增生明显减低 1:100-300 1:200
<0.5
AAA
⒊观察巨核细胞
数量：低倍镜 成熟程度：油镜 产血小板功能 形态
4aucher细胞 Niemann-Pick细胞
（二）油浸镜检查
㈡油镜下检查
有核细胞计数、分类 粒、红比值（myeloid:erythroid）
M：E＝2～4：1
粒红比例改变的临床意义
• 正常：见于①正常骨髓象；②粒红两系平行增 多如红白血病，平行减少如再生障碍性贫血； ③粒红两系基本不变化的造血系统疾病如多发 性骨髓瘤、骨髓转移瘤、特发性血小板减少性 紫癜。
• 增高：①粒细胞系增多，如急慢性粒细胞白血 病、急性化脓菌感染、中性粒细胞性类白血病 反应；②红细胞系减少，如纯红细胞性再生障 碍性贫血
粒红比例改变的临床意义
• 减低：①粒细胞系减少，如粒细胞缺乏 症；②红细胞系增多，如增生性贫血、 红细胞增多症。
观察细胞形态：异常细胞，寄生虫 粒系总数各阶段比例 红系总数各阶段比例 淋巴细胞系统各阶段比例、总数 注意单核细胞总数比例 浆细胞总数、比例 巨核细胞计数、分类
㈢Blood Smear
三.骨髓细胞形态学检查的方法和内容 ㈠低倍镜检查 ⒈确定骨髓标本取材和涂片满意？
⒉观察骨髓增生度
骨髓增生程度分级
有核细胞：成熟红细胞 有核细胞% 常见原因
增生极度活跃 1:0.5-2
1:1
>50
白血病
增生明显活跃 1:5-12
1:10
>10 白血病,增贫
增 生 活 跃 1:16-32
1:20
1-10 正常,各种贫血
炎
血细胞生成 发 育规律 正常形态学特征
㈠血细胞的生成 造血干细胞的分化及增殖示意图
（1）细胞大小及外形 ●大小：由大逐渐变小（巨核细胞相反） ●外形：由圆形变为不规则形 （红细胞始终呈圆形）
（2）细胞核 ●大小：由大变小（巨核细胞相反） ●核形：由圆变为分叶状或不规则形 （成熟红细胞无核） ●核位置：居中或偏位
四.血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学 为基础，根据化学反应的原理应 用骨髓涂片进行固定，化学反应 显色，复染等程序染色光学显微 镜下观察
㈠过氧化物酶染色（ Peroxidase POX）
Peroxidase( POX ) Staining
骨髓涂片和染色注意事项
➢ 载玻片要洁净；推端要光滑 ➢ 推玻片与载玻片呈约30度角 ➢ 骨髓抽取后要立即涂片,推制骨髓片约8张左右
送检 ➢ 涂片一般不用抗凝剂 ➢ 涂片时要保留片尾和边缘 ➢ 涂片制成后，快速摇动或扇干，不可火烤 ➢ 染色太浅－干燥后重染，若太深－干燥后－滴
数滴甲醇－稍停片刻－冲洗
为0.1－0.2ml ➢多部位穿刺：可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
➢抽取时病人有短暂的疼感 ➢骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ➢涂片检查有骨髓特有的细胞 ➢含大量幼稚细胞，杆状核多于分叶核
干抽
❖概念：是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
❖原因： ➢原发性和继发性骨髓纤维化症 ➢骨髓极度增生 ➢骨髓增生减低 ➢肿瘤骨髓浸润
骨髓细胞形态学检查 Xiaoyan Zhang
概念
骨髓象检查是用细胞形态学检查的方法 来观察骨髓中细胞的数量和质量的变化， 借以了解骨髓的造血功能，对疾病的诊 断、疗效观察、预后的判断等都具有重 大价值。
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病
恶性组织细胞增生症 海兰组织细胞增生症
Rubricyte （中幼红细胞） 8-12 u Nucleus no nucleoli with clumpy chromatin Cytoplasm moderate amount gray-blue with pink-tan
Metarubricyte （晚幼红细胞） 8-10 u
Nucleus round and pycnotic
round with fine chromatin and 2-5 nucleoli
Cytoplasm scanty and deep blue
Prorubricyte （早幼红细胞） 10-15u Nucleus 2-4 nucleoli with thickened chromatin Cytoplasm small amount and blue
Cytoplasm pink-tan with blue tinge
晚幼红细胞脱核
原粒细胞
早幼粒细胞
中幼粒细胞
晚幼粒细胞
杆状核中性粒细胞
分叶核中性粒细胞
标本的采集
骨髓取材的部位和方法 ➢部位：胸骨、棘突、髂骨等处
➢方法：多用穿刺法吸取
标本采集的质量保证
➢穿刺必须严格无菌 ➢吸取骨髓液的动作要缓慢：首次吸取量
多发性骨髓瘤
骨髓转移癌
霍奇金病R-S细胞 NHL骨髓浸润
戈谢（Gancher）病 尼曼-匹克病 疟疾
黑热病
⒉辅助诊断某些造血系统疾病
骨髓造血功能改变为主
溶血性贫血(HA) 血小板减少性紫癜
骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增殖性疾病(MPD)
真性红细胞增多症(PV) 原发性血小板增多症(ET)
⒊鉴别诊断
●核染色质：由细致疏松变粗糙密集， 着色由浅变深
●核膜：由不明显到明显 ●核仁：从有到无 （3）细胞浆 ●量：由少到多 ●颜色：由深蓝变浅、变为红色
（成熟红细胞） ●颗粒：从无到有，从非特异性到特异性 （4）胞核与胞浆之比 一般由大变小
Rubriblast （原红细胞） 10-19 u
Nucleus -
原因不明发热、淋巴结、脾或肝 肿大，骨痛或关节痛
PB异形淋巴细胞、类白血病反应、 嗜酸细胞增多症
适应症
➢确诊某些造血系统疾病 ➢协助诊断部分血液系统疾病 ➢提高某些疾病的诊断率 ➢患者多次检查外周血异常；有不明原因
的肝脾淋巴结肿大
禁忌症
➢由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病如 血友病
➢晚期妊娠的孕妇作骨髓穿刺术应慎重 ➢局部皮肤有弥漫化脓性炎症或局部骨髓
增 生 减 低 1:35-70
1:50
0.5-1
CAA
增生明显减低 1:100-300 1:200
<0.5
AAA
⒊观察巨核细胞
数量：低倍镜 成熟程度：油镜 产血小板功能 形态
4aucher细胞 Niemann-Pick细胞
（二）油浸镜检查
㈡油镜下检查
有核细胞计数、分类 粒、红比值（myeloid:erythroid）
M：E＝2～4：1
粒红比例改变的临床意义
• 正常：见于①正常骨髓象；②粒红两系平行增 多如红白血病，平行减少如再生障碍性贫血； ③粒红两系基本不变化的造血系统疾病如多发 性骨髓瘤、骨髓转移瘤、特发性血小板减少性 紫癜。
• 增高：①粒细胞系增多，如急慢性粒细胞白血 病、急性化脓菌感染、中性粒细胞性类白血病 反应；②红细胞系减少，如纯红细胞性再生障 碍性贫血
粒红比例改变的临床意义
• 减低：①粒细胞系减少，如粒细胞缺乏 症；②红细胞系增多，如增生性贫血、 红细胞增多症。
观察细胞形态：异常细胞，寄生虫 粒系总数各阶段比例 红系总数各阶段比例 淋巴细胞系统各阶段比例、总数 注意单核细胞总数比例 浆细胞总数、比例 巨核细胞计数、分类
㈢Blood Smear
三.骨髓细胞形态学检查的方法和内容 ㈠低倍镜检查 ⒈确定骨髓标本取材和涂片满意？
⒉观察骨髓增生度
骨髓增生程度分级
有核细胞：成熟红细胞 有核细胞% 常见原因
增生极度活跃 1:0.5-2
1:1
>50
白血病
增生明显活跃 1:5-12
1:10
>10 白血病,增贫
增 生 活 跃 1:16-32
1:20
1-10 正常,各种贫血
炎
血细胞生成 发 育规律 正常形态学特征
㈠血细胞的生成 造血干细胞的分化及增殖示意图
（1）细胞大小及外形 ●大小：由大逐渐变小（巨核细胞相反） ●外形：由圆形变为不规则形 （红细胞始终呈圆形）
（2）细胞核 ●大小：由大变小（巨核细胞相反） ●核形：由圆变为分叶状或不规则形 （成熟红细胞无核） ●核位置：居中或偏位