水体污染的毒性试验课件
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暂养12天 驯养7天
1升水/g鱼
驯养用水与试验用水要一致
鱼的死亡率不能超过10%
三、试验条件
1.试验容器和容积 容器：玻璃 大小按2—3升水/g 鱼 容器高度：30—35cm 试验液的深度应尽可能保持一致，且不能 小于15cm 例如：直径25—35cm，高30—50cm的圆玻璃缸 长31cm，宽24cm，高35cm的标本缸 容积30升以上的大白瓷桶
（3）流水式试验
（4）现场试验
项目八 鱼类急性毒性试验
二、试验鱼选择、收集和驯养 1.试验鱼的选择 （1）当地水体中生活的种类； （2）对污染物比较敏感； （3）能在实验条件下饲养，来源丰富，个体 健康。 鲤鱼、鲫鱼、金鱼
2. 实验鱼的大小和数目 要求：同批、同种、同龄 大小一致，在7厘米以下（金鱼3厘米） 数目：每浓度组7-10尾 2—3升水/g鱼 3. 实验鱼的驯养
毒物下所产生的可观察的生物效应。
测试项目
生长情况（体长和体重） 存活时间 幼体产生数量
孵化过程
畸变的类型和百分比
试验时间
藻类和原生动物：几小时---几天 小无脊椎动物：几星期 大型无脊椎动物和鱼类：几个 月—几年
3.生物积累试验：
生物积累：指某些毒物的浓度在生物组 织内可积累到比周围水体的毒物浓度高 出许多倍。 生物浓缩： 生物直接从水Fra Baidu bibliotek摄取 毒物 生物放大：生物通过食物连摄 取毒物
(1) 确定正式试验的浓度范围；
（2）初步观察鱼的中毒表现和选择观
察指标；
（3）检验规定的试验条件是否合适。
浓度范围要大些，如1000、100、10、1、0.lmg/L
5尾/浓度 48－96h 找出最高的全存活浓度和最低的全死亡浓度
2. 试验浓度的选择 根据预备试验选择出的浓度范围，中间按等 比级数或等对数间距插入3—5个中间浓度。 浓度的单位：mg/L、百分比
）2
24h死亡率LC50＝5.2% 96h死亡率LC50＝4.4%
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
试验鱼死亡百分数
（2）概率单位目测法
a. 将浓度换算成对数浓度，死亡率换算成概率单 位，死亡率为100%和0时不列入计算
b. 依据上述资料绘制点图，纵轴为概率单位，横 轴为浓度对数
b K ( xy) x y K x 2 ( x )
2
K x ( x)
2
2
K--浓度的组数（死亡率为0和100%的浓度不计在内）
y=－1.6901+10.5607x
50%死亡率的概率单位y=5,代入上式得：x＝0.6335
LC50＝4.30
LC50
的95%可信限=1g-1（x±
水体污染的毒性试验
毒性试验：在适当控制的条件下，把受试生物放
在不同浓度的已知或未知读物内，观察记录生物 的各种反应。
1.急性毒性试验：测定一种毒物在不同浓度时，
24h、48h、96h小时期间的相对致死性。
LC50：某毒物在限定时间内使50%的受试生物个体
死亡的浓度
2.慢性毒性试验：水生生物长时间暴露在低浓度
确定环境因子（如DO、pH、水温、硬度等）对水生生物是 否适宜，以及他们对化学物质毒性的影响 为制定水质基准提供科学依据
2s 2N
×1.96）
1 S= b
2. 结果评价
N--供试的动物总数（死亡率为0和 100%的组不计在内）
96h LC50（mg/L） 毒性分级
<1 极高毒
1～10 高毒
10～100 中毒
>100 低毒
3.编写报告
六、鱼类急性毒性试验结果的应用
(一) 安全浓度的推导
安全浓度:就是在污染物的持续作用下，鱼类可以正常存活、 生长、繁殖的最高毒物浓度
在全生活周期的慢性毒性试验中对生物不产生影响的浓度。
24hLC50 0.3 安全浓度= (24hLC50 / 48hLC50 ) 3
48hLC50 0.3 安全浓度= (24hLC50 / 48hLC50 ) 2
安全浓度=96LC50×（0.1～0.01）
不易分解的取0.01～ 0.05；容易分解的取 0.05～0.1
(二) 实际应用
推算出废水的允许排放量和排放速率
作为废水处理效果的鉴定指标
可以利用鱼类毒性试验作为指标，检查地面水源是否已受污 染
作为判定水质卫生标准的一项指标
找出水体污染的主要污染源和主要污染物 测定和评价化学物质和工业废水的毒性 测定不同种类的水生生物对某一化学物质的相对敏感性 测定几种化学物质对某一种所试生物的相对毒性
每个浓度做3个平行
CK
CK死亡率小于10%时，实验才被承认。
3. 试验液的配制方法 母液 丙酮、吐温
溶剂CK:助溶剂含量应为试验组使用助溶剂的最高浓度， 且不得超过 100mg/L或0.1mL/L
4. 正式试验
CK
1.0
3.2
5.6
7.5
10.0
低
试验开始后的3h、6h观察记录中毒症状 在24h、48h、72h和96h记录死亡鱼数
c. 顺着各点的分布趋势用直尺作出一条最接近各点的 直线 d. 从纵轴概率单位为“5”处引一条水平线与直 线相交，再从交点做垂线与横轴相交，即可 LC50的对数值，此值的反对数就是LC50
(3)直线回归法
y＝a+bx
a
2 x y x ( xy)
x--浓度的对数; y--死亡率转换成的概率单位
生物积累
生物积累的试验方法：
（1）用浓缩因子测定生物浓缩 BCF=平衡时的组织浓度/水中浓度 生物半衰期：生物组织内毒物的浓度下降到 它的一半所需的时间。 （2）用放射性同位素标记法测定生物放大 例如：藻类 蚤 鱼
项目八
鱼类急性毒性试验
一、试验方法
（1）静水式试验 （2）更新式静水试验（换水试验）
2. DO：不能低于4mg/L 3. 水温：21～25℃ 4.光照: 12—16h 5. 试验用水:未污染的自然的河水或湖水，需 过滤去悬浮物，或用标准稀释水 。如用自来 水，要暴气。
水的硬度: 19～250mg/L (以CaCO3计) ； pH： 6.0—8.5
四、试验步骤
1. 预备试验
目的:
高
5. 极限试验
可以进行浓度为100mg/L的极限试验。如极 限试验结果表明LC50>100mg/L。可直接给出 试验结果及评价：LC50>100mg/L，属于低毒。
五、数据处理与报告
1. LC50计算
（1）直线内插法
对数浓度
（1）直线内插法
废水 10 百分 6 率浓 度（
5 4 对数 尺度 3
1升水/g鱼
驯养用水与试验用水要一致
鱼的死亡率不能超过10%
三、试验条件
1.试验容器和容积 容器：玻璃 大小按2—3升水/g 鱼 容器高度：30—35cm 试验液的深度应尽可能保持一致，且不能 小于15cm 例如：直径25—35cm，高30—50cm的圆玻璃缸 长31cm，宽24cm，高35cm的标本缸 容积30升以上的大白瓷桶
（3）流水式试验
（4）现场试验
项目八 鱼类急性毒性试验
二、试验鱼选择、收集和驯养 1.试验鱼的选择 （1）当地水体中生活的种类； （2）对污染物比较敏感； （3）能在实验条件下饲养，来源丰富，个体 健康。 鲤鱼、鲫鱼、金鱼
2. 实验鱼的大小和数目 要求：同批、同种、同龄 大小一致，在7厘米以下（金鱼3厘米） 数目：每浓度组7-10尾 2—3升水/g鱼 3. 实验鱼的驯养
毒物下所产生的可观察的生物效应。
测试项目
生长情况（体长和体重） 存活时间 幼体产生数量
孵化过程
畸变的类型和百分比
试验时间
藻类和原生动物：几小时---几天 小无脊椎动物：几星期 大型无脊椎动物和鱼类：几个 月—几年
3.生物积累试验：
生物积累：指某些毒物的浓度在生物组 织内可积累到比周围水体的毒物浓度高 出许多倍。 生物浓缩： 生物直接从水Fra Baidu bibliotek摄取 毒物 生物放大：生物通过食物连摄 取毒物
(1) 确定正式试验的浓度范围；
（2）初步观察鱼的中毒表现和选择观
察指标；
（3）检验规定的试验条件是否合适。
浓度范围要大些，如1000、100、10、1、0.lmg/L
5尾/浓度 48－96h 找出最高的全存活浓度和最低的全死亡浓度
2. 试验浓度的选择 根据预备试验选择出的浓度范围，中间按等 比级数或等对数间距插入3—5个中间浓度。 浓度的单位：mg/L、百分比
）2
24h死亡率LC50＝5.2% 96h死亡率LC50＝4.4%
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
试验鱼死亡百分数
（2）概率单位目测法
a. 将浓度换算成对数浓度，死亡率换算成概率单 位，死亡率为100%和0时不列入计算
b. 依据上述资料绘制点图，纵轴为概率单位，横 轴为浓度对数
b K ( xy) x y K x 2 ( x )
2
K x ( x)
2
2
K--浓度的组数（死亡率为0和100%的浓度不计在内）
y=－1.6901+10.5607x
50%死亡率的概率单位y=5,代入上式得：x＝0.6335
LC50＝4.30
LC50
的95%可信限=1g-1（x±
水体污染的毒性试验
毒性试验：在适当控制的条件下，把受试生物放
在不同浓度的已知或未知读物内，观察记录生物 的各种反应。
1.急性毒性试验：测定一种毒物在不同浓度时，
24h、48h、96h小时期间的相对致死性。
LC50：某毒物在限定时间内使50%的受试生物个体
死亡的浓度
2.慢性毒性试验：水生生物长时间暴露在低浓度
确定环境因子（如DO、pH、水温、硬度等）对水生生物是 否适宜，以及他们对化学物质毒性的影响 为制定水质基准提供科学依据
2s 2N
×1.96）
1 S= b
2. 结果评价
N--供试的动物总数（死亡率为0和 100%的组不计在内）
96h LC50（mg/L） 毒性分级
<1 极高毒
1～10 高毒
10～100 中毒
>100 低毒
3.编写报告
六、鱼类急性毒性试验结果的应用
(一) 安全浓度的推导
安全浓度:就是在污染物的持续作用下，鱼类可以正常存活、 生长、繁殖的最高毒物浓度
在全生活周期的慢性毒性试验中对生物不产生影响的浓度。
24hLC50 0.3 安全浓度= (24hLC50 / 48hLC50 ) 3
48hLC50 0.3 安全浓度= (24hLC50 / 48hLC50 ) 2
安全浓度=96LC50×（0.1～0.01）
不易分解的取0.01～ 0.05；容易分解的取 0.05～0.1
(二) 实际应用
推算出废水的允许排放量和排放速率
作为废水处理效果的鉴定指标
可以利用鱼类毒性试验作为指标，检查地面水源是否已受污 染
作为判定水质卫生标准的一项指标
找出水体污染的主要污染源和主要污染物 测定和评价化学物质和工业废水的毒性 测定不同种类的水生生物对某一化学物质的相对敏感性 测定几种化学物质对某一种所试生物的相对毒性
每个浓度做3个平行
CK
CK死亡率小于10%时，实验才被承认。
3. 试验液的配制方法 母液 丙酮、吐温
溶剂CK:助溶剂含量应为试验组使用助溶剂的最高浓度， 且不得超过 100mg/L或0.1mL/L
4. 正式试验
CK
1.0
3.2
5.6
7.5
10.0
低
试验开始后的3h、6h观察记录中毒症状 在24h、48h、72h和96h记录死亡鱼数
c. 顺着各点的分布趋势用直尺作出一条最接近各点的 直线 d. 从纵轴概率单位为“5”处引一条水平线与直 线相交，再从交点做垂线与横轴相交，即可 LC50的对数值，此值的反对数就是LC50
(3)直线回归法
y＝a+bx
a
2 x y x ( xy)
x--浓度的对数; y--死亡率转换成的概率单位
生物积累
生物积累的试验方法：
（1）用浓缩因子测定生物浓缩 BCF=平衡时的组织浓度/水中浓度 生物半衰期：生物组织内毒物的浓度下降到 它的一半所需的时间。 （2）用放射性同位素标记法测定生物放大 例如：藻类 蚤 鱼
项目八
鱼类急性毒性试验
一、试验方法
（1）静水式试验 （2）更新式静水试验（换水试验）
2. DO：不能低于4mg/L 3. 水温：21～25℃ 4.光照: 12—16h 5. 试验用水:未污染的自然的河水或湖水，需 过滤去悬浮物，或用标准稀释水 。如用自来 水，要暴气。
水的硬度: 19～250mg/L (以CaCO3计) ； pH： 6.0—8.5
四、试验步骤
1. 预备试验
目的:
高
5. 极限试验
可以进行浓度为100mg/L的极限试验。如极 限试验结果表明LC50>100mg/L。可直接给出 试验结果及评价：LC50>100mg/L，属于低毒。
五、数据处理与报告
1. LC50计算
（1）直线内插法
对数浓度
（1）直线内插法
废水 10 百分 6 率浓 度（
5 4 对数 尺度 3