血糖(Glu)的测定—干扰预试验及实验.ppt
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干扰试验-血糖（Glu）的测定 （葡萄糖氧化酶法）
1. 评价实验
• 准确度的评价：方法比较试验、回收试验和干扰
试验。
• 精密度的评价：批内重复性试验、日内重复性试
验、日间重复性试验、患者样本的平行双份测定。
2、原理
• 用来衡量测定方法准确度，用于测定某物质加到样品中产
生的系统误差。在加入一定浓度干扰物的条件下，形成恒 定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而变化。 。 干扰物浓度不同，误差的大小也不同 干扰试验即用于检验某方法的特异性，也用于检测干扰物 质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。
（GOD：葡萄糖氧化酶）
H2O2+4-AAP+酚 POD 2H2+红色醌类化合物
（4-AAP： 4氨基氨替比林） （POD：过氧化物酶）
二、样品制备
干扰样品
血清
基础血清（ml） 0.9
样品Ⅰ (ml) 0.9
样品Ⅱ (ml) 0.9
样品Ⅲ （ml） 0.9
维生素C -
0.1(750mg/L) 0.1(500mg/L) 0.1(250mg/L)
蒸馏水 0.1 -
三、测定方法
1、加样
试剂
校准（S） 空白（B） 基础样品 干扰管1 2
பைடு நூலகம்
校 准 液 （ml） 0.03
—
—
——
蒸 馏 水（ml） —
0.03 —
——
基础样品 （ml） —
— 0.03
——
干扰样品1（ml） — 干扰样品2（ml） — 干扰样品3（ml） — 工作试剂 （ml） 3.0
其中：Cs=5.55 mmol/L
As
干扰物加入量 =
干扰物浓度
干扰物溶液量（ ml） 血清量（ ml） 干扰量溶液量（
ml ）
干扰值（mmol/L）= 干扰样品测定值-基础样品测定值
干扰率（%）= 干扰值/基础值×100
⑵干扰试验的数据处理：
样品（ml） GLU测得值(mmol/L) 干扰物值加入量(mmol/L) 干扰值(mmol/L) 干扰率(%)
• 如要区别是干扰还是方法的特异性差，可
用干扰物的纯溶液作为样本测定，如仍形 成干扰值，则属侯选方法的特异性差。
• 采用维生素C作为GOD-POP法测定血糖的干扰物质，当干扰
物的浓度达到一定量时，将对相应的实验产生干扰。 维生素C可以和GOD反应生成的H2O2发生还原反应，影 响H2O2参与第二步POD的反应，从而降低显色反应，产 生分析误差。
3、葡萄糖测定原理
β-D-葡萄糖+O2+H2O GOD D-葡萄糖酸+H2O2
—
— 0.03 —
—
—
— 0.03
—
—
—
—
3.0 3.0
3.0 3.0
各管充分混匀置37水浴10分钟后室温冷却。
3
— — — — — 0.03 3.0
2、分光光度计测定方法：波长505nm，以空白 管调零，测定标准管和各样品管吸光度值，按公式 计算测定结果。
四、计算与数据处理
⑴计算公式： Glu含量（mmol/L）= Au ×Cs
基础样品
—
—
—
干扰样品1
干扰样品2
干扰样品3
☆
五、结果判断
干扰值即偏差，对于血糖测定来说，当 干扰物引起的偏差在总允许误差的1/4范围 内，则不会影响测定结果的临床应用价值， 可以近似认为当干扰物浓度低于该浓度时不 会对血糖测定产生影响。
六、注意事项
• 干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，
而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的 恒定系统误差；
1. 评价实验
• 准确度的评价：方法比较试验、回收试验和干扰
试验。
• 精密度的评价：批内重复性试验、日内重复性试
验、日间重复性试验、患者样本的平行双份测定。
2、原理
• 用来衡量测定方法准确度，用于测定某物质加到样品中产
生的系统误差。在加入一定浓度干扰物的条件下，形成恒 定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而变化。 。 干扰物浓度不同，误差的大小也不同 干扰试验即用于检验某方法的特异性，也用于检测干扰物 质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。
（GOD：葡萄糖氧化酶）
H2O2+4-AAP+酚 POD 2H2+红色醌类化合物
（4-AAP： 4氨基氨替比林） （POD：过氧化物酶）
二、样品制备
干扰样品
血清
基础血清（ml） 0.9
样品Ⅰ (ml) 0.9
样品Ⅱ (ml) 0.9
样品Ⅲ （ml） 0.9
维生素C -
0.1(750mg/L) 0.1(500mg/L) 0.1(250mg/L)
蒸馏水 0.1 -
三、测定方法
1、加样
试剂
校准（S） 空白（B） 基础样品 干扰管1 2
பைடு நூலகம்
校 准 液 （ml） 0.03
—
—
——
蒸 馏 水（ml） —
0.03 —
——
基础样品 （ml） —
— 0.03
——
干扰样品1（ml） — 干扰样品2（ml） — 干扰样品3（ml） — 工作试剂 （ml） 3.0
其中：Cs=5.55 mmol/L
As
干扰物加入量 =
干扰物浓度
干扰物溶液量（ ml） 血清量（ ml） 干扰量溶液量（
ml ）
干扰值（mmol/L）= 干扰样品测定值-基础样品测定值
干扰率（%）= 干扰值/基础值×100
⑵干扰试验的数据处理：
样品（ml） GLU测得值(mmol/L) 干扰物值加入量(mmol/L) 干扰值(mmol/L) 干扰率(%)
• 如要区别是干扰还是方法的特异性差，可
用干扰物的纯溶液作为样本测定，如仍形 成干扰值，则属侯选方法的特异性差。
• 采用维生素C作为GOD-POP法测定血糖的干扰物质，当干扰
物的浓度达到一定量时，将对相应的实验产生干扰。 维生素C可以和GOD反应生成的H2O2发生还原反应，影 响H2O2参与第二步POD的反应，从而降低显色反应，产 生分析误差。
3、葡萄糖测定原理
β-D-葡萄糖+O2+H2O GOD D-葡萄糖酸+H2O2
—
— 0.03 —
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—
— 0.03
—
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3.0 3.0
3.0 3.0
各管充分混匀置37水浴10分钟后室温冷却。
3
— — — — — 0.03 3.0
2、分光光度计测定方法：波长505nm，以空白 管调零，测定标准管和各样品管吸光度值，按公式 计算测定结果。
四、计算与数据处理
⑴计算公式： Glu含量（mmol/L）= Au ×Cs
基础样品
—
—
—
干扰样品1
干扰样品2
干扰样品3
☆
五、结果判断
干扰值即偏差，对于血糖测定来说，当 干扰物引起的偏差在总允许误差的1/4范围 内，则不会影响测定结果的临床应用价值， 可以近似认为当干扰物浓度低于该浓度时不 会对血糖测定产生影响。
六、注意事项
• 干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，
而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的 恒定系统误差；