高中生物第一章基因工程..导入、检测和鉴定目的基因课件苏教版

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的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,该方法比较经济和有
解析 植物基因工程中除了农杆菌转化法之外,还有基因枪法和花粉管通 道法等。
解析 答案
一题多变 判断正误: (1)获得上述转基因植物的核心步骤是a( √ ) (2)用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,从而把目的基因导 入植物细胞,在这个过程中所有细胞都导入了目的基因( × ) (3)在过程a中只需要DNA连接酶参与( × ) (4)用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞,要经过植物组织培 养才能获得表现出新性状的植物( √ ) (5)因病毒能够侵染正常细胞,有的病毒还能将自己的核酸整合到宿主细 胞的染色体上,所以动植物病毒也可作为基因工程的载体( √ )
农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA
片段,它具有可转移至受体细胞
并整合到受体细胞染__色__体__的__D__N_A_
上的特点,因此只要将携带外源
基因的DNA片段插入到_T_-__D__N_A__片__段__(内__部__)_(部位)即可。 解析 一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物,可感染双子叶植物和裸
答案
易错点拨
农杆菌转化法中两次拼接、两次导入的辨析 第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA的中间部位,第二次 拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体 的DNA上;第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌,第 二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。
内容索引
一、导入目的基因 二、检测和鉴定目的基因 当堂检测
一、导入目的基因
基础梳理
将目的基因导入受体细胞的方法和过程
受体 细胞
农植杆物菌细转化胞
常用 ___T_-_D_N_A____法 方法
动显微物注细射胞
微感生受态物细细胞胞
感受
法态

显微注射
将目的DN基A 因插 入Ti质粒的
Ca2+处理细胞
2.下列关于目的基因导入受体细胞的描述,不正确的是
A.基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济和有效
B.显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C.大肠杆菌最常用的转化方法,是使细胞的生理状态发生改变
D.农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
解析 不同受体细胞导入目的基因的方法不同,每种方法都有利弊。目
将含有目的基
DNA分子
→____
因的表达载体
1.农杆菌转化法的分析
问题探究
(1)将基因表达载体导入农杆菌细胞时,应怎样处理农杆菌细胞?
答案 基因表达载体(重组质粒)导入农杆菌细胞时,要用Ca2+处理农杆
菌细胞,使其处于感受态,利于重组质粒的导入。
答案
(2)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,为什么一 定要将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上?
子植物。利用其感染性,可实现目的基因导入植物细胞。真正可转移至受
体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上的是农杆菌T-DNA片段,因此
目的基因必须插入到该部位才能成功。
解析 答案
(2)根据T-DNA这一转移特点,推测该DNA片段上可能含有控制_D__N_A_连___ _接__酶__、__限__制__酶合成的基因。
答案
拓展应用
1.农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染植物,因而 在植物基因工程中得到了广泛的运用。如图为农杆菌转化法的示意图, 试回答下列问题:
(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是_单__子__叶__植__物__,利用农杆菌自然条 件下感染植物的特点,能实现_将__目__的__基__因__导__入__植__物__细__胞__。具体原理是在
方式二 目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特 性,只有通过检测和鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。以上 步骤完成后,在全部的受体细胞中,真正能够摄入重组DNA分子的受体 细胞是很少的。因此,必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目 的基因进行检测。检测的方法有很多种,例如,大肠杆菌的某种质粒具 有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒, 并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断 受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后,受体细 胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。
第一章 第一节 基因工程概述
第3课时 导入、检测和鉴定目的基因
学习导航 1.理解目的基因导入受体细胞的方法。 2.掌握检测与鉴定目的基因的方法。 重难点击 1.目的基因导入受体细胞的方法。 2.检测和鉴定目的基因的方法。
课堂导入 方式一 通过前面的学习,我们了解了基因工程中目的基因的获取及基 因表达载体的构建。 在目的基因与载体连接成重组DNA分子以后,下面的重要工作主要是将 其导入受体细胞进行扩增和筛选,获得大量的重组DNA分子,这就是外 源基因的无性繁殖,即克隆(cloning)。 由于外源基因与载体构成的重组DNA分子性质不同、宿主细胞不同,将 重组DNA导入宿主细胞的具体方法也不相同。
答案 农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细 胞,并且整合到受体细胞的染色体DN源自文库上。
答案
2.植物基因工程常用的受体细胞为什么可以是体细胞,而动物基因工程一 般只用受精卵? 答案 植物体细胞的全能性较高,可经植物组织培养过程形成完整植物 体,因此受体细胞可以是体细胞;动物体细胞的全能性受到严格限制, 因此动物基因工程中的受体细胞一般只用受精卵。 3.为什么微生物细胞适合作为基因工程的受体细胞? 答案 微生物细胞具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少的优点。
解析 根据T-DNA这一转移特点,可以推测该DNA片段能控制合成DNA 连接酶、限制酶以实现与双子叶植物细胞染色体DNA的整合。
解析 答案
(3)图中c过程中,能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是_酚__类化合物。
解析 植物细胞受伤后可产生酚类物质,促进农杆菌向植物细胞转移。
解析 答案
(4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外,还可采取_基__因__枪__法__、__花__粉__管__ _通__道__法__ (至少写出两种)。
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