中药指纹图谱
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第六节 中药指纹图谱
前 言：
中药产业现代化的瓶颈是质量不可控!安全不可靠。后者 是指重金属!农药!微生物!化学物质的污染;前者虽然有中国药 典的质量标准模式和指标,但与国外的植物药药典一样,均是模 仿化学药品的质量控制模式,选定1,2个有效成分!活性成分或指 标成分进行鉴别和含量测定。然而这种以单一化学成分分析的 观点,导致人们力求把中药(天然药物)这一综合的复杂的“整体” 分解成便于观察和研究的简单“单元”或“分子”,以便于清 楚明确的研究。分析工作者沿着这条思路力求运用各种分析检 测手段测定某种有效成分，或某一活性成分含量的多少来判断 某种药材的质量,对复方制剂也以同样的观点和方法制订其质 量标准。
§6-5 中药指纹图谱的应用、研究现状及发展趋 势
1. 中药指纹图谱的应用
①以指纹图谱作为控制方法已成为目前国际共识，美国食 品与药品管理局（FDA）、世界卫生组织（WHO）、 欧盟都已有相关规定，允许以指纹图谱证明产品质量。
②我国对中药注射剂也做出了必须检测指纹图谱的规定
2. 中药指纹图谱的研究现状
§6-1 中药指纹图谱的概念、特点及意义
1.中药指纹图谱的概念 某种（或某产地）中药材或中药制剂经适当处理后，
采用一定的分析手段，得到的能够标示其特性的色谱或 光谱图。
2.中药指纹图谱的特点 ①一种综合的、可量化的鉴定手段； ②用于鉴别真伪、评价原药材、半成品及其制剂质
量的均一性和稳定性； ③基本属性是“总体性”和“模糊性”。
在对中药指纹图谱的研究进行到一定阶段，得到 相对完备的指纹图谱数据，相对合理的数学模型后， 指纹图谱的研究就应进入研究的高级阶段了，即指纹 特征和药效相关性研究，指纹图谱的生物等效性研究。 采用多种分析仪器联用的模式，建立多维指纹图谱， 引入有效部位的概念，使中药的特征谱努力做到包括 化学和药效两方面的信息。
3. 测定方法：优选色谱方法，成分复杂的选用多种检测 方法，测定条件应固定 。
（二）指纹图谱与技术参数 1. 指纹图谱 ①HPLC、GC--记录时间1小时 ②TLCS—提供从原点到前沿的图谱 ③光谱法--全谱 ④成分复杂样品—建立多张指纹图谱 2. 共有峰的标定 ①根据10次以上结果标定共有峰； ②色谱法—采用相对保留时间（允许一定幅度范围）标定共有峰； ③光谱法--采用波长或波数等标定共有峰。
10. DNA：特异性强、稳定性好、微量便捷、准确。适 合于相近、易混品种及各种珍贵品种，特征性和专 属性最强、先进可行、稳定。
§6-3 中药指纹图谱建立的方法与步骤
1. 一般原则 ①系统性：指纹图谱中所反映的化学成分应包括该中药有 效部位所含大部分成分的种类，或指标性成分的全部。 ②特征性：指纹图谱中反映的化学成分信息（如保留时间） 应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征地 区分中药真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。 ③稳定性：指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度， 以体现其通用性和实用性。
3.中药指纹图谱的意义
针对中药的作用特点—多成分、多用途、多靶点， 采用多种分析方法和技术进行多指标、客观的和整体 的综合评价研究，全面反映中药内在化学成分，对中 药材、中药制剂的规范化生产，对进一步研究中药的 作用机理、物质基础和量效关系，提高其质量都具有
重要意义。
§6-2 中药指纹图谱分类
1. TLC：比较TLC图谱或TLCS图谱，方法简便、快速、灵敏， 分析结果以直观的彩色图像表达是其独有特点，具有离线操作 灵活性适于推广应用。
2. HPLC：具有分离效能高、分析速度快及仪器化特点， 比较HPLC图谱的一致性，是中药指纹图谱研究广为应 用的方法之一。
3. GC：对不同产地、不同采收期的含挥发性成分中药材及其 成品进行气相色谱指纹图谱研究，可从整体上定性中药材及 其成品的品质。可靠。
4. HPCE：毛细管区带电泳（CZE）和胶束电动毛细管 电泳（MEKC）是最常用的两种模式，具有高分离效 率、高速、低耗的特点。
Βιβλιοθήκη Baidu 2. 样品的收集：具有代表性，不少于10批，提取共有息。
3. 样品的制备：选用适宜的溶剂和提取方法，尽量使其 成分较多地在指纹图谱中反映出来，并达到较好的分 离效果。
4. 条件的选择：根据分析试样中所含化学成分的理化性 质，选择适宜的测定方法。试验条件应能满足指纹图 谱的需要。
5.指纹图谱的建立和辨认：①直观比较；②计算量化参 数，比较相似度；③计算机处理。
5. UV：专属性差，适合成分简单的中药材及其制剂，也 可作为一种辅助手段。
6. IR：专属性强于UV法。
7. NMR：可以反映出有机分子中氢或碳的类型。与UV、 IR法比较，信息量大，重现性更好。
8.MS：要求样品供试液中主成分含量高，实验费用较大。
9. X-射线衍射：快速、简便、图谱稳定可靠，指纹性强。
6.指纹图谱的检验与复核：对所建立的指纹图谱按有关 规定要求进行实验条件、方法及结果的校验与复核。
§6-4 中药注射剂指纹图谱的技术要求
（一）指纹图谱的检测标准
1. 供试品的制备：选择适宜方法，使主要化学成分在图 谱中能再现。
2. 参照物的制备：根据供试品中所含化学成分的性质， 选择适宜的对照品或内标物作为参照物。
实际上对于中医理论指导下的中药,尤其是复方制剂,任何 一种活性成分均不能反映中医用药所体现的整体疗效,这是中 药与化学合成药品质量标准的根本区别。所以宏观地综合分 析成为必然的发展趋势,事实上这也是在人类进入系统科学时 代以后,人们的科学认识观念更新,综合分析与整体分析成为分 析化学发展的必然的反映。在寻求综合评价中药质量的过程 中,值得注意的趋势是色谱指纹图(chromatographic fingerprint)的应用。近来此类研究和文章日益增多,因为它提 供的有关质量的综合信息比单一成分的含量要丰富和有用的 多。
就目前而言，指纹图谱的研究还尚处于起步阶 段。虽然，经过数十年的研究和发展，中药包括中药 材，中药饮片，中成药等等均得到了大量研究，对于 其中物质的分离和成分测定积累了大量数据，在一定 程度上，为中药的整体性说明打下了较好的基础。不 过，从对中药全面质量控制的角度，还需要进一步深 入探讨。
3. 中药指纹图谱的发展趋势
3. 共有指纹峰面积比值： ①以对照品为参照物：参照物面积为1，计算共有峰
与参照物峰面积比；
②以内标为参照物：共有峰中面积相对较大、较稳定 的一个峰为1，计算其它峰与其比值；
③共有峰面积相对固定，允许一定幅度。
4. 非共有峰面积：控制在一定范围内。
5. 中药材、有效部位、中间体和注射剂指纹图谱的相关性： 根据中药材、有效部位、中间体和注射剂的指纹图谱，标 定各指纹图谱之间的相关性
前 言：
中药产业现代化的瓶颈是质量不可控!安全不可靠。后者 是指重金属!农药!微生物!化学物质的污染;前者虽然有中国药 典的质量标准模式和指标,但与国外的植物药药典一样,均是模 仿化学药品的质量控制模式,选定1,2个有效成分!活性成分或指 标成分进行鉴别和含量测定。然而这种以单一化学成分分析的 观点,导致人们力求把中药(天然药物)这一综合的复杂的“整体” 分解成便于观察和研究的简单“单元”或“分子”,以便于清 楚明确的研究。分析工作者沿着这条思路力求运用各种分析检 测手段测定某种有效成分，或某一活性成分含量的多少来判断 某种药材的质量,对复方制剂也以同样的观点和方法制订其质 量标准。
§6-5 中药指纹图谱的应用、研究现状及发展趋 势
1. 中药指纹图谱的应用
①以指纹图谱作为控制方法已成为目前国际共识，美国食 品与药品管理局（FDA）、世界卫生组织（WHO）、 欧盟都已有相关规定，允许以指纹图谱证明产品质量。
②我国对中药注射剂也做出了必须检测指纹图谱的规定
2. 中药指纹图谱的研究现状
§6-1 中药指纹图谱的概念、特点及意义
1.中药指纹图谱的概念 某种（或某产地）中药材或中药制剂经适当处理后，
采用一定的分析手段，得到的能够标示其特性的色谱或 光谱图。
2.中药指纹图谱的特点 ①一种综合的、可量化的鉴定手段； ②用于鉴别真伪、评价原药材、半成品及其制剂质
量的均一性和稳定性； ③基本属性是“总体性”和“模糊性”。
在对中药指纹图谱的研究进行到一定阶段，得到 相对完备的指纹图谱数据，相对合理的数学模型后， 指纹图谱的研究就应进入研究的高级阶段了，即指纹 特征和药效相关性研究，指纹图谱的生物等效性研究。 采用多种分析仪器联用的模式，建立多维指纹图谱， 引入有效部位的概念，使中药的特征谱努力做到包括 化学和药效两方面的信息。
3. 测定方法：优选色谱方法，成分复杂的选用多种检测 方法，测定条件应固定 。
（二）指纹图谱与技术参数 1. 指纹图谱 ①HPLC、GC--记录时间1小时 ②TLCS—提供从原点到前沿的图谱 ③光谱法--全谱 ④成分复杂样品—建立多张指纹图谱 2. 共有峰的标定 ①根据10次以上结果标定共有峰； ②色谱法—采用相对保留时间（允许一定幅度范围）标定共有峰； ③光谱法--采用波长或波数等标定共有峰。
10. DNA：特异性强、稳定性好、微量便捷、准确。适 合于相近、易混品种及各种珍贵品种，特征性和专 属性最强、先进可行、稳定。
§6-3 中药指纹图谱建立的方法与步骤
1. 一般原则 ①系统性：指纹图谱中所反映的化学成分应包括该中药有 效部位所含大部分成分的种类，或指标性成分的全部。 ②特征性：指纹图谱中反映的化学成分信息（如保留时间） 应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征地 区分中药真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。 ③稳定性：指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度， 以体现其通用性和实用性。
3.中药指纹图谱的意义
针对中药的作用特点—多成分、多用途、多靶点， 采用多种分析方法和技术进行多指标、客观的和整体 的综合评价研究，全面反映中药内在化学成分，对中 药材、中药制剂的规范化生产，对进一步研究中药的 作用机理、物质基础和量效关系，提高其质量都具有
重要意义。
§6-2 中药指纹图谱分类
1. TLC：比较TLC图谱或TLCS图谱，方法简便、快速、灵敏， 分析结果以直观的彩色图像表达是其独有特点，具有离线操作 灵活性适于推广应用。
2. HPLC：具有分离效能高、分析速度快及仪器化特点， 比较HPLC图谱的一致性，是中药指纹图谱研究广为应 用的方法之一。
3. GC：对不同产地、不同采收期的含挥发性成分中药材及其 成品进行气相色谱指纹图谱研究，可从整体上定性中药材及 其成品的品质。可靠。
4. HPCE：毛细管区带电泳（CZE）和胶束电动毛细管 电泳（MEKC）是最常用的两种模式，具有高分离效 率、高速、低耗的特点。
Βιβλιοθήκη Baidu 2. 样品的收集：具有代表性，不少于10批，提取共有息。
3. 样品的制备：选用适宜的溶剂和提取方法，尽量使其 成分较多地在指纹图谱中反映出来，并达到较好的分 离效果。
4. 条件的选择：根据分析试样中所含化学成分的理化性 质，选择适宜的测定方法。试验条件应能满足指纹图 谱的需要。
5.指纹图谱的建立和辨认：①直观比较；②计算量化参 数，比较相似度；③计算机处理。
5. UV：专属性差，适合成分简单的中药材及其制剂，也 可作为一种辅助手段。
6. IR：专属性强于UV法。
7. NMR：可以反映出有机分子中氢或碳的类型。与UV、 IR法比较，信息量大，重现性更好。
8.MS：要求样品供试液中主成分含量高，实验费用较大。
9. X-射线衍射：快速、简便、图谱稳定可靠，指纹性强。
6.指纹图谱的检验与复核：对所建立的指纹图谱按有关 规定要求进行实验条件、方法及结果的校验与复核。
§6-4 中药注射剂指纹图谱的技术要求
（一）指纹图谱的检测标准
1. 供试品的制备：选择适宜方法，使主要化学成分在图 谱中能再现。
2. 参照物的制备：根据供试品中所含化学成分的性质， 选择适宜的对照品或内标物作为参照物。
实际上对于中医理论指导下的中药,尤其是复方制剂,任何 一种活性成分均不能反映中医用药所体现的整体疗效,这是中 药与化学合成药品质量标准的根本区别。所以宏观地综合分 析成为必然的发展趋势,事实上这也是在人类进入系统科学时 代以后,人们的科学认识观念更新,综合分析与整体分析成为分 析化学发展的必然的反映。在寻求综合评价中药质量的过程 中,值得注意的趋势是色谱指纹图(chromatographic fingerprint)的应用。近来此类研究和文章日益增多,因为它提 供的有关质量的综合信息比单一成分的含量要丰富和有用的 多。
就目前而言，指纹图谱的研究还尚处于起步阶 段。虽然，经过数十年的研究和发展，中药包括中药 材，中药饮片，中成药等等均得到了大量研究，对于 其中物质的分离和成分测定积累了大量数据，在一定 程度上，为中药的整体性说明打下了较好的基础。不 过，从对中药全面质量控制的角度，还需要进一步深 入探讨。
3. 中药指纹图谱的发展趋势
3. 共有指纹峰面积比值： ①以对照品为参照物：参照物面积为1，计算共有峰
与参照物峰面积比；
②以内标为参照物：共有峰中面积相对较大、较稳定 的一个峰为1，计算其它峰与其比值；
③共有峰面积相对固定，允许一定幅度。
4. 非共有峰面积：控制在一定范围内。
5. 中药材、有效部位、中间体和注射剂指纹图谱的相关性： 根据中药材、有效部位、中间体和注射剂的指纹图谱，标 定各指纹图谱之间的相关性