蛋白电泳轻链病PPT课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
(3)LCDD的轻链沉积呈颗粒状而非纤维样或β片层结构，不能结合刚 果红和硫黄素；而AD的轻链沉积在电镜下呈纤维样或β片层结构， 能与刚果红结合在偏光显微镜下呈现绿色双折光与硫黄素结合产生 黄绿色荧光。
(4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其他疾病如淋巴瘤或原发性巨球蛋 白血症等导致单克隆轻链过度产生。
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/6/20
1
2020/6/20
2
2020/6/20
Hale Waihona Puke Baidu
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G） • 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。 • 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。 • 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相蛋
2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
13
SUCCESS
THANK YOU
2020/6/20
2020/6/20
15
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两种： κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。
• Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链有 5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链
决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
球蛋白： 补体C3、C4 IgG、A、M、D、E
深蓝色柱为典型肾病电泳图，方块内文字是与肾病相关电泳增高的意义
正正常常血血清清蛋蛋白白电电泳图泳形图状形及其及意意义义
2020/6/20
5
1.50m
正常球蛋白高度
2020/6/20
6
【醋酸纤维素膜法】[参考值范围]
A 白蛋白 0.62~0.71(62%~71%)
多克隆典型电泳图
8
1.85m
2020/6/20
多克隆球蛋白
9
哪些病M带增高：
1、骨髓瘤
2、轻链病、重链病、 淋巴瘤、某些白血病。
3、原发巨球蛋白血症
单珠峰电泳图（M带）
2020/6/20
10
2.06m
2020/6/20
多克隆球蛋白（M带）
11
如果出现单克隆球蛋白（M带） 必须做免疫固相蛋白电泳
白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！ • 免疫球蛋白由4个肽链组成：2个轻链、2个重链（M带5个）。 • 免疫球蛋白包括重链包括： μ、δ、γ、α、ε链 和 免
疫球蛋白轻链包括： κ、λ链
2020/6/20
4
2球蛋白：肾上腺不 足、肾上腺皮质类固 醇治疗、糖尿病 、肾 病综合征
球蛋白： 转铁蛋白(Tf) C-反应蛋白 营养不良
轻链病与轻链沉积病-发病机制
• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片 段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并 不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。
• LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通过 自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系膜 细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏蛋
2020/6/20
16
轻链病与轻链沉积病
• 轻链病(LCD)与轻链沉积病(LCDD)是一种浆细 胞异常增生性疾病。本病多发于中、老年人 (＞45岁)。本病起病多缓慢。
• 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引 起相应的临床表现即为轻链沉积病。
• 约2/3的LCDD患者合并MM。
2020/6/20
17
α1球蛋白 α2球蛋白 β 球蛋白
0.03~0.04(3%~4%) 0.06~0.10(6%~10%) 0.07~0.11(7%~11%)
γ 球蛋白
0.09~0.18(9%~18%)
60-5-9-12-20
2020/6/20
7
2020/6/20
哪些病多克隆（Gamma）增高： 1、风湿、免疫性疾病 2、慢性肝病 3、慢性感染、炎症
白和纤维连接蛋白
2020/6/20
18
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴浆 细胞性B细胞病变，如淋巴瘤或原发性巨 球蛋白血症。
2020/6/20
19
二、鉴别诊断
1、LCDD与原发性淀粉样变（AD）鉴别要点：
(1)LCDD其沉积轻链中约80%为κ链，而AD沉积轻链中约75%为λ轻 链。
(2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋白的恒区，其典型的单克隆轻链 免疫荧光呈强阳性；而AD沉积的轻链片段是免疫球蛋白的可变区所 以其抗κ和λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。
• 为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道 上进行测试。经电泳后，ELP作为参考泳道以显示 电泳后的蛋白质。
• 其余五条泳道用于鉴定单克隆成分，通过它与抗 血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)、 重链和κ、 λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
2020/6/20
12
免疫固相电泳
2020/6/20
2、LCDD与糖尿病肾病鉴别，根据糖尿病肾病典型的病史及上述肾活 检病理特点不难鉴别。
2020/6/20
21
轻链病与轻链沉积病-实验室检查
一、实验室检查：
1、血液检查：常见严重贫血、白细胞计数可以正常、增多或减少。 血小板计数大多减低并发骨髓瘤的患者可出现少数骨髓瘤细胞。 患者可出现巨球蛋白血症，多数骨髓瘤患者本-周蛋白可阳 性。
4、尿液检查：伴或不伴有镜下血尿但尿蛋白较少，但病人尿中可 排出单克隆轻链蛋白尿蛋白电泳上白蛋白较少，而球蛋白显著 增多。
2020/6/20
22
二、辅助检查
肾活检病理改变可有以下三个特点。 1、光镜检查：肾小球可有多种表现，从正常肾小球到不同程度系膜
增宽硬化以及系膜结节状改变等都可在LCDD患者中见到，其中系 膜结节状改变较为特异，与糖尿病肾病患者典型的KimmelstielWilson系膜结节硬化类似，不同在于LCDD的系膜结节PAS染色更强 而银染较弱刚果红染色阴性，后者结节不均一，有糖尿病史及与 抗轻链κ/λ抗血清反应阴性，以及有入球微动脉管壁透明变性等。 另外与糖尿病肾病不同之处还表现在于光镜下LCDD的肾小球基底 膜无增厚，其他肾小球可以完全正常或只有轻度系膜硬化。肾小 球尚可有毛细血管微血管瘤改变。有些肾小球可有膜增生性特征 肾小管表现基膜增厚，值得注意的是MM合并LCDD时骨髓瘤管型很 少见到。
(4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其他疾病如淋巴瘤或原发性巨球蛋 白血症等导致单克隆轻链过度产生。
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/6/20
1
2020/6/20
2
2020/6/20
Hale Waihona Puke Baidu
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G） • 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。 • 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。 • 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相蛋
2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
13
SUCCESS
THANK YOU
2020/6/20
2020/6/20
15
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两种： κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。
• Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链有 5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链
决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
球蛋白： 补体C3、C4 IgG、A、M、D、E
深蓝色柱为典型肾病电泳图，方块内文字是与肾病相关电泳增高的意义
正正常常血血清清蛋蛋白白电电泳图泳形图状形及其及意意义义
2020/6/20
5
1.50m
正常球蛋白高度
2020/6/20
6
【醋酸纤维素膜法】[参考值范围]
A 白蛋白 0.62~0.71(62%~71%)
多克隆典型电泳图
8
1.85m
2020/6/20
多克隆球蛋白
9
哪些病M带增高：
1、骨髓瘤
2、轻链病、重链病、 淋巴瘤、某些白血病。
3、原发巨球蛋白血症
单珠峰电泳图（M带）
2020/6/20
10
2.06m
2020/6/20
多克隆球蛋白（M带）
11
如果出现单克隆球蛋白（M带） 必须做免疫固相蛋白电泳
白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！ • 免疫球蛋白由4个肽链组成：2个轻链、2个重链（M带5个）。 • 免疫球蛋白包括重链包括： μ、δ、γ、α、ε链 和 免
疫球蛋白轻链包括： κ、λ链
2020/6/20
4
2球蛋白：肾上腺不 足、肾上腺皮质类固 醇治疗、糖尿病 、肾 病综合征
球蛋白： 转铁蛋白(Tf) C-反应蛋白 营养不良
轻链病与轻链沉积病-发病机制
• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片 段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并 不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。
• LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通过 自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系膜 细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏蛋
2020/6/20
16
轻链病与轻链沉积病
• 轻链病(LCD)与轻链沉积病(LCDD)是一种浆细 胞异常增生性疾病。本病多发于中、老年人 (＞45岁)。本病起病多缓慢。
• 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引 起相应的临床表现即为轻链沉积病。
• 约2/3的LCDD患者合并MM。
2020/6/20
17
α1球蛋白 α2球蛋白 β 球蛋白
0.03~0.04(3%~4%) 0.06~0.10(6%~10%) 0.07~0.11(7%~11%)
γ 球蛋白
0.09~0.18(9%~18%)
60-5-9-12-20
2020/6/20
7
2020/6/20
哪些病多克隆（Gamma）增高： 1、风湿、免疫性疾病 2、慢性肝病 3、慢性感染、炎症
白和纤维连接蛋白
2020/6/20
18
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴浆 细胞性B细胞病变，如淋巴瘤或原发性巨 球蛋白血症。
2020/6/20
19
二、鉴别诊断
1、LCDD与原发性淀粉样变（AD）鉴别要点：
(1)LCDD其沉积轻链中约80%为κ链，而AD沉积轻链中约75%为λ轻 链。
(2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋白的恒区，其典型的单克隆轻链 免疫荧光呈强阳性；而AD沉积的轻链片段是免疫球蛋白的可变区所 以其抗κ和λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。
• 为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道 上进行测试。经电泳后，ELP作为参考泳道以显示 电泳后的蛋白质。
• 其余五条泳道用于鉴定单克隆成分，通过它与抗 血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)、 重链和κ、 λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
2020/6/20
12
免疫固相电泳
2020/6/20
2、LCDD与糖尿病肾病鉴别，根据糖尿病肾病典型的病史及上述肾活 检病理特点不难鉴别。
2020/6/20
21
轻链病与轻链沉积病-实验室检查
一、实验室检查：
1、血液检查：常见严重贫血、白细胞计数可以正常、增多或减少。 血小板计数大多减低并发骨髓瘤的患者可出现少数骨髓瘤细胞。 患者可出现巨球蛋白血症，多数骨髓瘤患者本-周蛋白可阳 性。
4、尿液检查：伴或不伴有镜下血尿但尿蛋白较少，但病人尿中可 排出单克隆轻链蛋白尿蛋白电泳上白蛋白较少，而球蛋白显著 增多。
2020/6/20
22
二、辅助检查
肾活检病理改变可有以下三个特点。 1、光镜检查：肾小球可有多种表现，从正常肾小球到不同程度系膜
增宽硬化以及系膜结节状改变等都可在LCDD患者中见到，其中系 膜结节状改变较为特异，与糖尿病肾病患者典型的KimmelstielWilson系膜结节硬化类似，不同在于LCDD的系膜结节PAS染色更强 而银染较弱刚果红染色阴性，后者结节不均一，有糖尿病史及与 抗轻链κ/λ抗血清反应阴性，以及有入球微动脉管壁透明变性等。 另外与糖尿病肾病不同之处还表现在于光镜下LCDD的肾小球基底 膜无增厚，其他肾小球可以完全正常或只有轻度系膜硬化。肾小 球尚可有毛细血管微血管瘤改变。有些肾小球可有膜增生性特征 肾小管表现基膜增厚，值得注意的是MM合并LCDD时骨髓瘤管型很 少见到。