蛋白电泳轻链病PPT课件
合集下载
蛋白电泳在呼吸疾病诊断中的临床应用 ppt课件
ppt课件
34
血清蛋白电泳与肺癌的关系
肺癌早期由肺炎，慢阻肺等恶化而来，故其与蛋白 电泳紧密相关。
ppt课件
35
6.胸膜疾病
胸膜的脏层和壁层之间存在有一个潜在腔隙，称为胸膜腔。 正常人胸腔内有5-15ml液体将两层胸膜分开，在呼吸运动 时起润滑作用，利于肺扩张。
胸腔液非固定不变，正常人每24小时有500-1000ml液体渗 出与再吸收，两者处于平衡状态。
结合珠蛋白 α -2 巨球蛋白
ppt课件
免疫球蛋白
C3补体
CRP
转铁蛋白
血红素结合蛋白
18
3.慢阻肺-COPD
定义 与慢支，肺气肿的关系 发病机制 与血清蛋白电泳的关系
ppt课件
19
COPD的定义
• 可以预防、可以治疗的疾病 • 以气流受限为特征 • 气流受限不完全可逆，并呈进行性发展 • 与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关 • 主要累及肺脏,但也可引起全身（或称肺外）的不良效应
老年人肺炎：免疫功能变化明显，其中免疫球蛋 白和补体C3均高于健康人群。附件-表一
另外：CRP, LDH也会明显升高
ppt课件
14
上海中山医院文献报道
许多生物活性分子可作为诊断脓毒症和肺炎的标志物，其 中包括-CRP, PCT, 细胞因子,可溶性受体等。
遗憾的是，这些指标中被临床认可和广泛使用的很少，目 前认为最有临床价值的是：CRP, PCT
28
血清蛋白电泳与肺结核的紧密关系结论
正常对照组：51例，男27例，女24 例，平均年龄35岁。
肺结核组：63例，男32例，女31例， 平均年龄38岁。
所有病例均确诊 ： 原发性肺结核：46例 血行播散型肺结核：17例 实验数据统计结论： 白蛋白明显降低，a1,a2升高，Y区
血清蛋白电泳典型图谱分析.pptx
肾病综合征
肾病综合征时，主要是α2 区的α2巨球蛋白增加，β1 区的ApoB增加所致。
遗传基因突变；或服用β内酰胺类抗生素等导致药物与 白蛋白结合。
低丙球蛋白血症
常见于先天性缺陷或继发性因素（如免疫抑制剂治疗）
高免疫球蛋白血症
高免疫球蛋白(多克隆)，常见于自身免疫性疾病、慢性 感染等
M蛋白
γ区单克隆免疫球蛋白升高，可见于多发性骨髓瘤、淋 巴瘤等疾病
β区M蛋白
因IgA位于β区后部或β和γ区之间，所以单克隆IgA 升高常出现这样图形，主要见于IgA型骨髓瘤 。
M蛋白
M蛋白
即单克隆蛋白monoclonal protein ，是浆细胞或B淋巴细胞 单克隆恶性增殖所产生的一种大量异常免疫球蛋白，其本 质是一种（无功能的）免疫球蛋白或免疫球蛋白片段（重 链，轻链等）。
--毛细管电泳
血清电泳原理
➢ 蛋白质等电点
由于蛋白质含有羧基 “-COOH”和氨基 “-NH2”可 解离成带电荷基团，所以在溶液中有两性电离现象。
当蛋白质溶液处于某一pH时，该蛋白质极性基团解 离正负离子数相等，净电荷为0，此时该溶液的pH值就 是该蛋白质的等电点pI值。
每种蛋白质pI大小是特定的，只与该蛋白质结构有关。
➢ 从正极起依次为白蛋白、a1、a2、b（ b1， b2）、g。 ➢ 区带经丽春红等染料染色后，由光密度扫描仪检测
并自动画出吸光度积分曲线。
血清蛋白电泳正常图谱
Albumin α1 α2 β
γ
正常血清蛋白电泳图谱
白蛋白
a1: a1酸性糖蛋白, a1抗胰蛋白酶，甲胎蛋白等 a2: 结合珠蛋白, a2 巨球蛋白, a脂蛋白, 铜蓝蛋白等 b : 转铁蛋白, b脂蛋白,纤维蛋白原,补体,b2微球蛋白等 g : 免疫球蛋白
轻链病与轻链沉积病诊断与治疗PPT
诊断标准：符合临床表现、实验室检查、影 像学检查、病理学检查和基因检测等标准
了解轻链病与其他疾病的鉴别诊断
轻链病：由轻链 异常引起的疾病， 包括轻链沉积病 和轻链淀粉样变 性
轻链沉积病：轻 链在组织中沉积， 导致器官功能障 碍
轻链淀粉样变性： 轻链在组织中形 成淀粉样物质， 导致器官功能障 碍
鉴别诊断：与其 他疾病如多发性 骨髓瘤、淀粉样 变性病等进行鉴 别诊断
鉴别诊断：需要与其他肾脏疾 病、心脏疾病、肝脏疾病等进 行鉴别诊断
诊断方法：包括血液学检查、 尿液检查、影像学检查等
轻链沉积病：主要表现为肾脏 损害，可伴有心脏、肝脏等器 官损害
治疗方法：包括药物治疗、 血液净化治疗、肾脏移植等
轻链病的治疗
药物治疗
免疫抑制剂：如环磷酰胺、硫唑嘌呤等，用于抑制免疫系统，减轻病情 蛋白酶抑制剂：如硼替佐米、卡非佐米等，用于抑制轻链蛋白的生成 单克隆抗体：如利妥昔单抗、贝伐珠单抗等，用于清除轻链蛋白 干细胞移植：用于治疗重症患者，通过移植健康干细胞，重建免疫系统
避免接触有害物质，如化学品、 辐射等
保持良好的心理状态，避免过 度紧张和焦虑
注意事项
定期体检：定期进行血液检查，及时发 现异常情况
饮食调整：避免高脂肪、高糖、高盐饮 食，多吃蔬菜水果
适当运动：保持适当的运动量，增强体 质
避免感染：避免接触感染源，如病毒、 细菌等
心理调适：保持良好的心态，避免过度 紧张和焦虑
心理支持：提供心 理辅导，帮助患者 缓解焦虑和抑郁情 绪
康复训练：进行适 当的康复训练，提 高生活质量
其他治疗方式
免疫抑制剂：如环磷酰胺、硫唑嘌呤等 生物制剂：如利妥昔单抗、贝伐珠单抗等 化疗：如硼替佐米、来那度胺等 干细胞移植：如自体干细胞移植、异体干细胞移植等
了解轻链病与其他疾病的鉴别诊断
轻链病：由轻链 异常引起的疾病， 包括轻链沉积病 和轻链淀粉样变 性
轻链沉积病：轻 链在组织中沉积， 导致器官功能障 碍
轻链淀粉样变性： 轻链在组织中形 成淀粉样物质， 导致器官功能障 碍
鉴别诊断：与其 他疾病如多发性 骨髓瘤、淀粉样 变性病等进行鉴 别诊断
鉴别诊断：需要与其他肾脏疾 病、心脏疾病、肝脏疾病等进 行鉴别诊断
诊断方法：包括血液学检查、 尿液检查、影像学检查等
轻链沉积病：主要表现为肾脏 损害，可伴有心脏、肝脏等器 官损害
治疗方法：包括药物治疗、 血液净化治疗、肾脏移植等
轻链病的治疗
药物治疗
免疫抑制剂：如环磷酰胺、硫唑嘌呤等，用于抑制免疫系统，减轻病情 蛋白酶抑制剂：如硼替佐米、卡非佐米等，用于抑制轻链蛋白的生成 单克隆抗体：如利妥昔单抗、贝伐珠单抗等，用于清除轻链蛋白 干细胞移植：用于治疗重症患者，通过移植健康干细胞，重建免疫系统
避免接触有害物质，如化学品、 辐射等
保持良好的心理状态，避免过 度紧张和焦虑
注意事项
定期体检：定期进行血液检查，及时发 现异常情况
饮食调整：避免高脂肪、高糖、高盐饮 食，多吃蔬菜水果
适当运动：保持适当的运动量，增强体 质
避免感染：避免接触感染源，如病毒、 细菌等
心理调适：保持良好的心态，避免过度 紧张和焦虑
心理支持：提供心 理辅导，帮助患者 缓解焦虑和抑郁情 绪
康复训练：进行适 当的康复训练，提 高生活质量
其他治疗方式
免疫抑制剂：如环磷酰胺、硫唑嘌呤等 生物制剂：如利妥昔单抗、贝伐珠单抗等 化疗：如硼替佐米、来那度胺等 干细胞移植：如自体干细胞移植、异体干细胞移植等
蛋白质电泳技术介绍ppt课件
.
基本原理
等电聚焦电泳 ，是利用有pH梯度的介质分离 等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率 可到达0.01蛋白质组分。
适用: 1.研究蛋白质微观不均一性 2.测定蛋白质等电点
.
1 用电流在凝 胶溶液中建 立一个稳定 的PH梯度
3 形成电场
2 蛋白质加样
4 蛋白质移动到它 们各自的等电点， 不同等电点的蛋 白质被分开
.
+
pH 3
+
pH 3
+
pH 3
pH 7.5 pH 7.5 pH 7.5
–
pH 10
–
pH 10
–
pH 10
.
pH梯度构建
载体两性电解质pH梯度 (Carrier ampholytes pH gradients， CA):在电场中通过两性缓冲离子建立的pH梯度。
胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面） ❖ 4 倒出水并用滤纸把剩余的水分吸干,按比例配好浓缩胶,连
续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,迅速插入样梳,静置40分钟
.
❖ 上样 按一定顺序在加样孔中加入样品，根据SDS-PAGE电泳玻璃板 间隙厚度不同，选择加入样品量。 ❖ 电泳 打开电源将电压调到80v（一般15min左右），待样品跑过压 缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。
电泳技术介绍
LOGO
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE
(polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)
.
基本原理
1.SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二 级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二 硫键断裂。
基本原理
等电聚焦电泳 ，是利用有pH梯度的介质分离 等电点不同的蛋白质的电泳技术。由于其分辨率 可到达0.01蛋白质组分。
适用: 1.研究蛋白质微观不均一性 2.测定蛋白质等电点
.
1 用电流在凝 胶溶液中建 立一个稳定 的PH梯度
3 形成电场
2 蛋白质加样
4 蛋白质移动到它 们各自的等电点， 不同等电点的蛋 白质被分开
.
+
pH 3
+
pH 3
+
pH 3
pH 7.5 pH 7.5 pH 7.5
–
pH 10
–
pH 10
–
pH 10
.
pH梯度构建
载体两性电解质pH梯度 (Carrier ampholytes pH gradients， CA):在电场中通过两性缓冲离子建立的pH梯度。
胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面） ❖ 4 倒出水并用滤纸把剩余的水分吸干,按比例配好浓缩胶,连
续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,迅速插入样梳,静置40分钟
.
❖ 上样 按一定顺序在加样孔中加入样品，根据SDS-PAGE电泳玻璃板 间隙厚度不同，选择加入样品量。 ❖ 电泳 打开电源将电压调到80v（一般15min左右），待样品跑过压 缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。
电泳技术介绍
LOGO
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE
(polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)
.
基本原理
1.SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二 级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二 硫键断裂。
新版蛋白质分离技术-电泳培训课件.ppt
必须立即固定染色。 4.与PAGE相比，分子筛作用小，区带少。
2021/4/9
9
应
用
2021/4/9
10
琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白
原理 血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以
琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比妥 缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、 大小、形状分离成不同区带。
2021/4/9
11
蛋白质分离技术-电泳
上海交通大学医学院 倪培华 副教授
2021/4/9
1
2021/4/9
2
琼脂糖凝胶
天然琼脂（agar）:又名琼胶、菜燕、冻粉 从 石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高 聚物。 琼脂糖（agarose）
琼脂胶（agaropectin）
Acid sulfate
Carboxylic acid groups 在电场作用下能产生较强的电渗现象
(high density lipoprotein, HDL)
2021/4/9
15
2021/4/9
16
2021/4/9
17
（三）结 构 特 征
2021/4/9
18
2021/4/9
19
CM
—
LDL
VLDL HDL
+
加样槽
β
前β α
2021/4/9
20
临床应用：高脂蛋白血症的分型 CM β 前β α
2021/4/9
34
参考书目
《临床生物化学及生物化学检验》 第三版 人民卫生出版社 周新 主编 《电泳》科学出版社 何忠效 张树政 主编 《蛋白质电泳实验技术》 科学出版社 郭尧君 《蛋白质技术手册》 科学出版社 汪家政 范敏 主编
2021/4/9
9
应
用
2021/4/9
10
琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白
原理 血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以
琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比妥 缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、 大小、形状分离成不同区带。
2021/4/9
11
蛋白质分离技术-电泳
上海交通大学医学院 倪培华 副教授
2021/4/9
1
2021/4/9
2
琼脂糖凝胶
天然琼脂（agar）:又名琼胶、菜燕、冻粉 从 石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状高 聚物。 琼脂糖（agarose）
琼脂胶（agaropectin）
Acid sulfate
Carboxylic acid groups 在电场作用下能产生较强的电渗现象
(high density lipoprotein, HDL)
2021/4/9
15
2021/4/9
16
2021/4/9
17
（三）结 构 特 征
2021/4/9
18
2021/4/9
19
CM
—
LDL
VLDL HDL
+
加样槽
β
前β α
2021/4/9
20
临床应用：高脂蛋白血症的分型 CM β 前β α
2021/4/9
34
参考书目
《临床生物化学及生物化学检验》 第三版 人民卫生出版社 周新 主编 《电泳》科学出版社 何忠效 张树政 主编 《蛋白质电泳实验技术》 科学出版社 郭尧君 《蛋白质技术手册》 科学出版社 汪家政 范敏 主编
蛋白电泳-轻链病课件
助于早期发现和预防。
开展健康教育活动，向公众普及 轻链病的基本知识、症状和预防
措施。
通过媒体和社交平台传播轻链病 的相关信息，提高公众的关注度
和警觉性。
加强轻链病的早期筛查和诊断
建立和完善轻链病的 筛查和诊断体系，提 高早期发现率。
加强医疗机构之间的 合作与交流，提高医 生的诊断水平和经验。
定期开展体检和血液 检查，以便及时发现 轻链病的症状和异常 指标。
蛋白电泳在轻链病治疗中的应用
在轻链病的治疗过程中，蛋白电 泳可以监测治疗效果和病情变化。
通过定期检测患者血清或尿液中 的轻链浓度，可以评估治疗效果，
指导治疗方案调整。
蛋白电泳还可以用于监测病情复 发或转移的情况，及时发现并采
取相应措施。
蛋白电泳在轻链病预后评估中的应用
蛋白电泳可以用于评估轻链病的预后情况。
利用蛋白电泳技术分离和检测生物样本中的蛋白质，用于疾病诊 断、监测和药物研发。
蛋白质相互作用研究
通过蛋白电泳技术分离蛋白质复合物，研究蛋白质之间的相互作用 和功能关联。
蛋白质修饰与磷酸化分析
利用蛋白电泳技术对蛋白质进行修饰和磷酸化分析，揭示蛋白质功 能的调节机制。
蛋白电泳技术的未来发展趋势
自动化与智能化
案例二
患者女性，58岁，因反复咳嗽、气喘就诊。胸部X线片显示双侧胸腔积液，实验 室检查显示血沉增快、C反应蛋白升高，蛋白电泳显示轻链异常升高。进一步检 查证实为轻链病。通过及时治疗，患者病情得到控制，预后良好。
轻链病预防和控制成功的案例分享
案例一
某地区开展健康教育活动，提高公众 对轻链病的认识和预防意识。通过广 泛宣传和普及相关知识，该地区轻链 病的发病率明显降低，控制效果显著。
开展健康教育活动，向公众普及 轻链病的基本知识、症状和预防
措施。
通过媒体和社交平台传播轻链病 的相关信息，提高公众的关注度
和警觉性。
加强轻链病的早期筛查和诊断
建立和完善轻链病的 筛查和诊断体系，提 高早期发现率。
加强医疗机构之间的 合作与交流，提高医 生的诊断水平和经验。
定期开展体检和血液 检查，以便及时发现 轻链病的症状和异常 指标。
蛋白电泳在轻链病治疗中的应用
在轻链病的治疗过程中，蛋白电 泳可以监测治疗效果和病情变化。
通过定期检测患者血清或尿液中 的轻链浓度，可以评估治疗效果，
指导治疗方案调整。
蛋白电泳还可以用于监测病情复 发或转移的情况，及时发现并采
取相应措施。
蛋白电泳在轻链病预后评估中的应用
蛋白电泳可以用于评估轻链病的预后情况。
利用蛋白电泳技术分离和检测生物样本中的蛋白质，用于疾病诊 断、监测和药物研发。
蛋白质相互作用研究
通过蛋白电泳技术分离蛋白质复合物，研究蛋白质之间的相互作用 和功能关联。
蛋白质修饰与磷酸化分析
利用蛋白电泳技术对蛋白质进行修饰和磷酸化分析，揭示蛋白质功 能的调节机制。
蛋白电泳技术的未来发展趋势
自动化与智能化
案例二
患者女性，58岁，因反复咳嗽、气喘就诊。胸部X线片显示双侧胸腔积液，实验 室检查显示血沉增快、C反应蛋白升高，蛋白电泳显示轻链异常升高。进一步检 查证实为轻链病。通过及时治疗，患者病情得到控制，预后良好。
轻链病预防和控制成功的案例分享
案例一
某地区开展健康教育活动，提高公众 对轻链病的认识和预防意识。通过广 泛宣传和普及相关知识，该地区轻链 病的发病率明显降低，控制效果显著。
蛋白电泳-轻链病
2016/4/5
25
• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片
段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并
不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。 • LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通 过自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系 膜细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏 蛋白和纤维连接蛋白
2016/4/5
22
2、免疫荧光检查：免疫组化单克隆轻链抗体染色可见κ/λ轻 链(80%为κ轻链)沉积于肾小球系膜区(结节内)肾小管基底 膜和血管壁补体成分染色常阴性κ/λ轻链弥漫性地沿肾小管 基底膜呈点状或颗粒状沉积是LCDD)的特点 3、电镜检查：肾小球基底膜内稀疏层和系膜区有颗粒状物质 沉积系膜基质增宽和肾小球基底膜增厚；肾小管基底膜和 肾间质血管基底膜可见密集颗粒电子致密物。 4、X线检查：常见骨骼局限性骨质疏松，溶骨破坏和病理性 骨折。 5、相关检查：尿凝溶蛋白尿氮巨球蛋白、白细胞计数白蛋白 碱性磷酸酶肌氨酸酐蛋白定量（尿）血小板
2016/4/5
12
免疫固相电泳
2016/4/5
13
2016/4/5
14
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两 种：κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。 • Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链 有5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2016/4/5
1
2016/4/5
2
2016/4/5
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
血清蛋白电泳课件-PPT
血清蛋白电泳1809年pehce俄国物理学家首先发现电泳现象1937年tiselius瑞典制成界面电泳仪应用于蛋白质研究1948年wieland和fischer建立了滤纸电泳法奠定了区带电泳技术的基础1959年raymond和weintraub创建聚丙烯酰胺凝胶电泳血清蛋白电泳电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动的现象
先天性白蛋白缺陷型
主要特征：由于血清白蛋白 的显著降低，血清总蛋白也 随之降低，α1、α2球蛋白 明显增高，γ球蛋白也增高。 严重无白蛋白血症时，白蛋 白有时可降为零。 产生原因：本病是极少见的 先天性疾病，可能由于肝细 胞内白蛋白合成功能遗传性 缺陷或明显低下所致。
MM的电泳图谱
思考题
❖ 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳后为 何会有区带拖尾及分开不明显的情 况？如何避免？
谢谢观看！ 炎 α带设╱温向优C液6占按无炎醋取按薄薄蛋优电漂取设6按 见按╱见占薄无 蛋温电人血γ血由白白设血纤温出 设如按血染暂 温漂无液无见蛋蛋 γ电电无血纤蛋1如蛋液设产带炎肾1液炎1优标 液无╲╲见1用见出占按见向产见13Cmmm9999971OA症电各度白点体总支光症纤试用膜膜白点泳洗试各分于支于总膜光白度泳类浆清于蛋等各清维度现各果支清色时度洗光体光于白白泳泳光清维白果白体各生电症病体症点本体光于5于现总分于白生于35345℃：MlloO2,,79789其其l型荷 部 、 蛋 ： 对 蛋 持 泽 型 膜 管 途 未 未 质 ： 技 液 管 部 离急 持 急 蛋 位 泽质 、 是 血 ::电 白 成 部 蛋 素 、 β部 电 持 :液 未 型、 液 泽 对 泽 急 质 质技 技 泽 蛋 素 缺 电 质 对 部 原 荷 型 型 对 型 ： ：对 泽 急 急 β蛋 离 急 蛋 原 急+++01α/对年年年年年-是是是L和 和n01HHOO余余： 多吸分白C固白介面：规6不完完的C术：6吸的 慢介慢白置面 的分指液泳、分吸白薄分吸渗介：完主 分：面固面慢的的 术术面白薄乏渗的固吸因多：：固：C血 固面慢慢白的慢白因慢染N，，，，m，-酸指指指支支2γγ++HHAAA各各a表 、光子管体的质朝表格同全全等指3光原 性质性的歪朝 等子带中法脂。光醋膜子光与质丽全要 子3朝体朝性等等 除除朝醋膜症与等体光：、表表体表清 体朝性性的原性管：性比难难0ββW料TRTR性离离离--MMMO，%，%mii管管aa现 分度大中支百形下现及：浸浸电利度理 肾形肝百斜下 电大电有设蛋度酸电大度电形春浸是 大下支下肾电电 了了下酸电：电电支度本分现现支现应 支下肾肾百理肾中本肝ss色以 以i不电电电糖体体体He（（iyyee在在n加加lmm为 子分小加持分状，为点分透透点用分不 炎状炎分、， 点小粒备白分泳小分泳状红透指 小，持，炎点点 用用，泳主泳点持分病子为为持为新 持，炎炎分不炎加病炎1液，分 分lla吸泳泳泳蛋并的的iiαα╱╱VVuu白白2nCoo00╲╲22量别、入物数不点样析或或、电别同 、不和数弯点 、、子简、别、别方不或肾 点物点、、、 于于点要方、物别是量白物鲜 物点、数同、入是和ααSαα6以ss离 离//5附具具具d白经血血nnVV..O蛋蛋m((1111染种和瑞瑞dd小为吸的同样示电温温分泳为： 肾同肝曲样 分吸在单抗为吸为向同温功 吸样的样肾分分 小样包向分的为极小蛋的， 的样肾肾：肾极肝4(((4空））， ，、 、、、++，有有有；过液液O%%%ααl++和和白白00，色以F典典11者附相：侧意泳度度子现区 病：硬，侧 子附电体附相：度能 附侧相侧病子子 分分侧括子相少者白相不 相侧病病区病少硬AA,AAAHH白醋醋出 出-%%αααα蛋灵灵灵)))OO抗经经操iWW管 管其sAAAAA液上2222++))，作对薄置图、过过量象带综薄化与置量作场、作同薄过不作置对置综量量子子置同量对见，及对得对置综综带综见化α醋醋HH管酸酸现 现c白敏敏敏制制凝过过作、、、、、ee和 和和和内内1余h蛋--ii泳用移层于制高高及对电 合层。电于 及用的补用，层高全 用于移于合及及 物物于，及移的泳移溶 移于合合电合的。γ酸酸调溶溶抗nn区e度度度成成的自自方AAAAA“ “-ββββ加加各白ttr球动等动电负备导导迁混泳 征电流负 迁等作体等电导的 等负动负征迁迁 质质负迁动先动动血 动负征征泳征先VVaaaaa╱0╱0rr零液液建三 三三三胰带高高高界界血然然便ββaa入入11111..管变变质C蛋uu--较，泳极电致致移合、 、泳方极 移用、泳致患 极，极、移移 的的极移，天较，，极、、、、天，╲╲立种 、种、、、、种种蛋均，，，面面γγ液凝凝,bbO00具加大大成桥 桥白快由、端泳干干率物自 肾、向端 率下凝、干者 端由端肾率率 分分端率由性快由由端肾肾自肾性创创读了..球 A球AAAA球球白匀标标标电电经固固O有入；；分” ”aaaaa降；缓板，、燥燥进由 功板不， ，血板燥在 缓，功离离，缓疾；缓缓，功功由功疾建建各H滤蛋 蛋蛋蛋酶，本本本泳泳过而而22222高3。， ，低、、、、、冲电通定或或行界 能电平通 向酶电或治 通冲通能分分通冲病冲冲通能能界能病聚聚管纸白 白白白缺m背用用用仪仪离析析分此 此，AAAAA液泳电量水水分面 衰泳行电 着原泳水疗 电液电衰析析电液，液液电衰衰面衰，l丙丙吸电均 均均均乏景量量量，，，心出出辨βββββ现 现的和免分分离电 竭和与和和分期 的竭外外的可的的竭竭电竭可烯烯光泳α增 增增增症、、、、、清少少少应应将沉的的率2象 象水柱疫蒸蒸分泳 等柱其凝柱蒸间 水等水能水水等等泳等能,,酰酰度法高 高高高、AAAAA晰，，，用用各淀液液最最和及往往γγγγγ分电电发发析、 。电电血电发使 分。分由分分。。、。由胺 胺，，，，，分 分 分于 于蛋后体体主 主。 。 。 。 。γβ选往 往-子泳泳薄薄的等 泳性因泳薄用 子子于子子等于凝凝奠-见 见见见既辨辨辨蛋蛋白球的部部要要球择是 是和和膜膜技速 相子膜大 和和肝和和速肝胶胶定于 于于于易率率率白白区蛋上分分用用蛋性由 由支连与与术电 反、与剂 支支细支支电细电电了各 各各各比高高高质质带白清..于于白特于 于持续滤滤。泳 的抗滤量 持持胞持持泳胞泳泳区种 种种种色，，，研研缺剪部蛋蛋升点II介制纸纸、 电凝纸的 介介内介介、内gg带急 急急急定区区区究究乏下分白白高,AA已质备桥桥等 极血桥质质白质质等白β电、 、、、量带带带症分增 增.质质。-成内的电接接电 移因接的的蛋的的电蛋泳慢 慢慢慢，清清清等别高 高,,核核为酰表泳触触聚 动子触表表白表表聚白技性 性性性又晰晰晰（置所 所酸酸医胺面。不不焦 的、不面面合面面焦合术炎 炎炎炎易，，，较致 致于等等学类之良良电 现良之之成之之电成α的症 症症症透电电电少， ，各生生1检抗间泳 象间间功间间泳功基和 和和和-明泳泳泳见试抗II物物gg验生产。产产能产产能础应 应应应后时时时）管AA胰分分中素生生生遗生生遗与 与激 激激激进间间间中蛋子子常，的的的传的的传肝 肝反 反反反行短短短，白的的用可一一一性一一性纤 纤应 应应应光，，，另、研研的形种种种缺种种缺维 维。 。。。密操操操从究究α技成相相相陷相相陷化 化度作作作空1..术-快关关关或关关或有 有扫简简简糖白.泳电电电明电电明关 关描便便便蛋背动荷荷荷显荷荷显。 。。快快快白景性所所所低所所低捷捷捷、剪的引 引 引 下 引 引 下；；；α一2白起起起所起起所块-巨蛋。。。致。。致平球白。。均蛋成大白分小、，的转治膜铁疗条蛋中置白断于和即空其逐白他渐管微消中量失，蛋。
先天性白蛋白缺陷型
主要特征：由于血清白蛋白 的显著降低，血清总蛋白也 随之降低，α1、α2球蛋白 明显增高，γ球蛋白也增高。 严重无白蛋白血症时，白蛋 白有时可降为零。 产生原因：本病是极少见的 先天性疾病，可能由于肝细 胞内白蛋白合成功能遗传性 缺陷或明显低下所致。
MM的电泳图谱
思考题
❖ 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳后为 何会有区带拖尾及分开不明显的情 况？如何避免？
谢谢观看！ 炎 α带设╱温向优C液6占按无炎醋取按薄薄蛋优电漂取设6按 见按╱见占薄无 蛋温电人血γ血由白白设血纤温出 设如按血染暂 温漂无液无见蛋蛋 γ电电无血纤蛋1如蛋液设产带炎肾1液炎1优标 液无╲╲见1用见出占按见向产见13Cmmm9999971OA症电各度白点体总支光症纤试用膜膜白点泳洗试各分于支于总膜光白度泳类浆清于蛋等各清维度现各果支清色时度洗光体光于白白泳泳光清维白果白体各生电症病体症点本体光于5于现总分于白生于35345℃：MlloO2,,79789其其l型荷 部 、 蛋 ： 对 蛋 持 泽 型 膜 管 途 未 未 质 ： 技 液 管 部 离急 持 急 蛋 位 泽质 、 是 血 ::电 白 成 部 蛋 素 、 β部 电 持 :液 未 型、 液 泽 对 泽 急 质 质技 技 泽 蛋 素 缺 电 质 对 部 原 荷 型 型 对 型 ： ：对 泽 急 急 β蛋 离 急 蛋 原 急+++01α/对年年年年年-是是是L和 和n01HHOO余余： 多吸分白C固白介面：规6不完完的C术：6吸的 慢介慢白置面 的分指液泳、分吸白薄分吸渗介：完主 分：面固面慢的的 术术面白薄乏渗的固吸因多：：固：C血 固面慢慢白的慢白因慢染N，，，，m，-酸指指指支支2γγ++HHAAA各各a表 、光子管体的质朝表格同全全等指3光原 性质性的歪朝 等子带中法脂。光醋膜子光与质丽全要 子3朝体朝性等等 除除朝醋膜症与等体光：、表表体表清 体朝性性的原性管：性比难难0ββW料TRTR性离离离--MMMO，%，%mii管管aa现 分度大中支百形下现及：浸浸电利度理 肾形肝百斜下 电大电有设蛋度酸电大度电形春浸是 大下支下肾电电 了了下酸电：电电支度本分现现支现应 支下肾肾百理肾中本肝ss色以 以i不电电电糖体体体He（（iyyee在在n加加lmm为 子分小加持分状，为点分透透点用分不 炎状炎分、， 点小粒备白分泳小分泳状红透指 小，持，炎点点 用用，泳主泳点持分病子为为持为新 持，炎炎分不炎加病炎1液，分 分lla吸泳泳泳蛋并的的iiαα╱╱VVuu白白2nCoo00╲╲22量别、入物数不点样析或或、电别同 、不和数弯点 、、子简、别、别方不或肾 点物点、、、 于于点要方、物别是量白物鲜 物点、数同、入是和ααSαα6以ss离 离//5附具具具d白经血血nnVV..O蛋蛋m((1111染种和瑞瑞dd小为吸的同样示电温温分泳为： 肾同肝曲样 分吸在单抗为吸为向同温功 吸样的样肾分分 小样包向分的为极小蛋的， 的样肾肾：肾极肝4(((4空））， ，、 、、、++，有有有；过液液O%%%ααl++和和白白00，色以F典典11者附相：侧意泳度度子现区 病：硬，侧 子附电体附相：度能 附侧相侧病子子 分分侧括子相少者白相不 相侧病病区病少硬AA,AAAHH白醋醋出 出-%%αααα蛋灵灵灵)))OO抗经经操iWW管 管其sAAAAA液上2222++))，作对薄置图、过过量象带综薄化与置量作场、作同薄过不作置对置综量量子子置同量对见，及对得对置综综带综见化α醋醋HH管酸酸现 现c白敏敏敏制制凝过过作、、、、、ee和 和和和内内1余h蛋--ii泳用移层于制高高及对电 合层。电于 及用的补用，层高全 用于移于合及及 物物于，及移的泳移溶 移于合合电合的。γ酸酸调溶溶抗nn区e度度度成成的自自方AAAAA“ “-ββββ加加各白ttr球动等动电负备导导迁混泳 征电流负 迁等作体等电导的 等负动负征迁迁 质质负迁动先动动血 动负征征泳征先VVaaaaa╱0╱0rr零液液建三 三三三胰带高高高界界血然然便ββaa入入11111..管变变质C蛋uu--较，泳极电致致移合、 、泳方极 移用、泳致患 极，极、移移 的的极移，天较，，极、、、、天，╲╲立种 、种、、、、种种蛋均，，，面面γγ液凝凝,bbO00具加大大成桥 桥白快由、端泳干干率物自 肾、向端 率下凝、干者 端由端肾率率 分分端率由性快由由端肾肾自肾性创创读了..球 A球AAAA球球白匀标标标电电经固固O有入；；分” ”aaaaa降；缓板，、燥燥进由 功板不， ，血板燥在 缓，功离离，缓疾；缓缓，功功由功疾建建各H滤蛋 蛋蛋蛋酶，本本本泳泳过而而22222高3。， ，低、、、、、冲电通定或或行界 能电平通 向酶电或治 通冲通能分分通冲病冲冲通能能界能病聚聚管纸白 白白白缺m背用用用仪仪离析析分此 此，AAAAA液泳电量水水分面 衰泳行电 着原泳水疗 电液电衰析析电液，液液电衰衰面衰，l丙丙吸电均 均均均乏景量量量，，，心出出辨βββββ现 现的和免分分离电 竭和与和和分期 的竭外外的可的的竭竭电竭可烯烯光泳α增 增增增症、、、、、清少少少应应将沉的的率2象 象水柱疫蒸蒸分泳 等柱其凝柱蒸间 水等水能水水等等泳等能,,酰酰度法高 高高高、AAAAA晰，，，用用各淀液液最最和及往往γγγγγ分电电发发析、 。电电血电发使 分。分由分分。。、。由胺 胺，，，，，分 分 分于 于蛋后体体主 主。 。 。 。 。γβ选往 往-子泳泳薄薄的等 泳性因泳薄用 子子于子子等于凝凝奠-见 见见见既辨辨辨蛋蛋白球的部部要要球择是 是和和膜膜技速 相子膜大 和和肝和和速肝胶胶定于 于于于易率率率白白区蛋上分分用用蛋性由 由支连与与术电 反、与剂 支支细支支电细电电了各 各各各比高高高质质带白清..于于白特于 于持续滤滤。泳 的抗滤量 持持胞持持泳胞泳泳区种 种种种色，，，研研缺剪部蛋蛋升点II介制纸纸、 电凝纸的 介介内介介、内gg带急 急急急定区区区究究乏下分白白高,AA已质备桥桥等 极血桥质质白质质等白β电、 、、、量带带带症分增 增.质质。-成内的电接接电 移因接的的蛋的的电蛋泳慢 慢慢慢，清清清等别高 高,,核核为酰表泳触触聚 动子触表表白表表聚白技性 性性性又晰晰晰（置所 所酸酸医胺面。不不焦 的、不面面合面面焦合术炎 炎炎炎易，，，较致 致于等等学类之良良电 现良之之成之之电成α的症 症症症透电电电少， ，各生生1检抗间泳 象间间功间间泳功基和 和和和-明泳泳泳见试抗II物物gg验生产。产产能产产能础应 应应应后时时时）管AA胰分分中素生生生遗生生遗与 与激 激激激进间间间中蛋子子常，的的的传的的传肝 肝反 反反反行短短短，白的的用可一一一性一一性纤 纤应 应应应光，，，另、研研的形种种种缺种种缺维 维。 。。。密操操操从究究α技成相相相陷相相陷化 化度作作作空1..术-快关关关或关关或有 有扫简简简糖白.泳电电电明电电明关 关描便便便蛋背动荷荷荷显荷荷显。 。。快快快白景性所所所低所所低捷捷捷、剪的引 引 引 下 引 引 下；；；α一2白起起起所起起所块-巨蛋。。。致。。致平球白。。均蛋成大白分小、，的转治膜铁疗条蛋中置白断于和即空其逐白他渐管微消中量失，蛋。
蛋白电泳-轻链病PPT演示幻灯片
2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
13
2020/5/20
14
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
•Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有 两种：κ链和λ链，κ链：λ链比值约为
2：1。
•Ig重链的分子质量为50-75 kD，重 链有5种，分别是
μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链决
定了Ig的类别，即
IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
2020/5/20
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/5/20
1
2020/5/20
2
2020/5/20
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G）
• 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。
• 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。
• 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相 蛋白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！
2020/5/20
17
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴 浆细胞性B细胞病变，如淋m
2020/5/20
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
13
2020/5/20
14
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
•Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有 两种：κ链和λ链，κ链：λ链比值约为
2：1。
•Ig重链的分子质量为50-75 kD，重 链有5种，分别是
μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链决
定了Ig的类别，即
IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
2020/5/20
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/5/20
1
2020/5/20
2
2020/5/20
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G）
• 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。
• 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。
• 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相 蛋白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！
2020/5/20
17
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴 浆细胞性B细胞病变，如淋m
2020/5/20
轻链病与轻链沉积病讲课PPT课件
药物治疗是首选，但当药物治疗无效或病情严重时，需要考虑手术治疗。
手术治疗的目的是清除沉积在组织和器官中的轻链，恢复器官功能。
手术治疗的方法包括手术切除、干细胞移植等。
其他治疗方法
干细胞移植：通过移植健康的干细胞来重建免疫系统，治疗轻链病。
基因治疗：针对轻链病的基因突变进行基因治疗，纠正异常的免疫球蛋白。
鉴别诊断：轻链病需与多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症等其他浆细胞异常增生性疾病相鉴别；轻链沉积病需与淀粉样变性、冷球蛋白血症等其他沉积性疾病相鉴别。
诊断流程：对于疑似轻链病或轻链沉积病的患者，应进行全面的体格检查、实验室检查和影像学检查，并根据检查结果进行初步诊断和鉴别诊断。
诊断流程图
影像学检查：进行X光、CT、MRI等检查，观察病变部位
内脏损害：表现为消化系统症状、呼吸系统症状、心血管系统症状等
04
轻链病与轻链沉积病的诊断与鉴别诊断
诊断方法
实验室检查：检测血尿免疫球蛋白轻链水平
病理学检查：观察组织中轻链沉积情况
影像学检查：X线、CT等检查观察骨骼变化
临床表现：关注患者症状和体征，结合实验室检查结果进行诊断
鉴别诊断方法
实验室检查：血尿轻链检测、免疫学指标等
轻链沉积病的治疗：以免疫抑制治疗为主，可采用糖皮质激素、环孢素等药物治疗。
新型免疫疗法：针对轻链病和轻链沉积病的免疫异常，采用新型免疫疗法，如CAR-T细胞治疗等。
其他治疗方法：如血浆置换、免疫球蛋白治疗等，可根据病情选择合适的治疗方法。
手术治疗
轻链病与轻链沉积病的治疗方法包括药物治疗和手术治疗。
适量运动：进行适度的有氧运动，增强身体免疫力
心理调适：保持乐观心态，积极面对疾病，减轻心理压力
蛋白质电泳分析PPT课件
蛋白质组学研究
蛋白质电泳分析在蛋白质组学研 究中具有重要作用，可用于分离 和鉴定蛋白质，揭示蛋白质的表
达模式和功能。
生物标志物发现
通过蛋白质电泳分析，可以发现 与疾病相关的生物标志物，有助
于疾病的早期诊用于药物靶点 的筛选和验证，以及药物作用机
制的研究，有助于新药研发。
绝对定量
通过灰度扫描电泳图谱中蛋白质条带， 可以计算出各蛋白质条带的相对含量。
通过标准品或已知浓度的蛋白质样品， 可以建立标准曲线，从而对未知浓度 的蛋白质样品进行绝对定量分析。
相对定量
通过比较不同样品中蛋白质条带的灰 度值或亮度，可以计算出各蛋白质的 相对表达量。
04
蛋白质电泳分析的优缺点
优点
03
蛋白质电泳分析结果解读
电泳图谱的解读
01
02
03
蛋白质分子量标准
电泳图谱中通常会有一条 蛋白质分子量标准，用于 参考和标定蛋白质的分子 量。
蛋白质条带位置
通过观察电泳图谱中蛋白 质条带的位置，可以判断 蛋白质的迁移率和分子量 大小。
蛋白质表达量
通过比较不同样品中蛋白 质条带的亮度或密度，可 以判断蛋白质的表达量。
在食品安全和检测领域的应用前景
食品成分分析
蛋白质电泳分析可用于食品中蛋白质的鉴定和含 量测定，确保食品质量和安全。
污染物检测
蛋白质电泳分析可以检测食品中的有害物质和污 染物，如农药残留、重金属等。
转基因食品检测
通过蛋白质电泳分析，可以检测转基因食品中的 外源蛋白质，保障消费者权益。
THANKS
感谢观看
蛋白质电泳分析PPT 课件
目录
• 蛋白质电泳分析概述 • 蛋白质电泳分析实验操作 • 蛋白质电泳分析结果解读 • 蛋白质电泳分析的优缺点 • 蛋白质电泳分析展望
轻链沉积病PPT医学课件
4
基本简介
• 轻链—214个氨基酸组成的蛋白质，分子量约为 25kD。 • 根据恒定区（CL）结构分为κ轻链和λ轻链。
κ轻链常引起轻链沉积病，占LCDD的80%。 λ轻链常引起淀粉样变性病。
5
临床特点
• 发病相对少见：Lin J报道7241份病理报告中，23例 LCDD（0.32%）。 • 多发于中老年人(>45岁)，男女比4:1。 • 起病多缓慢。 • 临床可表现为不明原因的贫血、发热、周身无力、 出血倾向，浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限 性或多发性骨痛、病理性骨折或局部肿瘤。
肾
肾功能不全
脏
症
状
肾病综合征的发生率高,占83%
AL
肾功能不全发生率较低(约 20%-30%)
27
• 肾LCDD 和AL 的诊断依赖于肾活检组织的病理检查, 光镜下刚果红染色，以及电镜检查具有重要诊断价 值。
28
29
典型改变：小球系膜区及节段性GBM 内、外侧均可见大量紊乱分布或束状 排列的淀粉样细纤维，伴小血管壁的 细纤维沉积，肾间质内细纤维沉积。
• 严重者常由于肾功能或多器官功能衰竭而死亡。
8
肾脏
• 多数患者以肾脏受累为首发症状。 • 表现不同程度的蛋白尿、镜下血尿、高血压及肾功 能不全, 部分病例(23~ 53%) 表现为肾病综合征。 • 有的病例肾小管间质病变较重, 可引起急性肾功能 不全。
9
临床表现——肾外
• 心脏：80% 的LCDD 病例合并心脏受累，呈心脏 舒张功能受损或限制性心肌病的表现。 • 神经系统：20% 的病例累及中枢及周围神经系统, 临床表现格林—巴利综合征，或末梢神经感觉消退、 自主功能丧失。
AL 性疾病，多数为原发性。
基本简介
• 轻链—214个氨基酸组成的蛋白质，分子量约为 25kD。 • 根据恒定区（CL）结构分为κ轻链和λ轻链。
κ轻链常引起轻链沉积病，占LCDD的80%。 λ轻链常引起淀粉样变性病。
5
临床特点
• 发病相对少见：Lin J报道7241份病理报告中，23例 LCDD（0.32%）。 • 多发于中老年人(>45岁)，男女比4:1。 • 起病多缓慢。 • 临床可表现为不明原因的贫血、发热、周身无力、 出血倾向，浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限 性或多发性骨痛、病理性骨折或局部肿瘤。
肾
肾功能不全
脏
症
状
肾病综合征的发生率高,占83%
AL
肾功能不全发生率较低(约 20%-30%)
27
• 肾LCDD 和AL 的诊断依赖于肾活检组织的病理检查, 光镜下刚果红染色，以及电镜检查具有重要诊断价 值。
28
29
典型改变：小球系膜区及节段性GBM 内、外侧均可见大量紊乱分布或束状 排列的淀粉样细纤维，伴小血管壁的 细纤维沉积，肾间质内细纤维沉积。
• 严重者常由于肾功能或多器官功能衰竭而死亡。
8
肾脏
• 多数患者以肾脏受累为首发症状。 • 表现不同程度的蛋白尿、镜下血尿、高血压及肾功 能不全, 部分病例(23~ 53%) 表现为肾病综合征。 • 有的病例肾小管间质病变较重, 可引起急性肾功能 不全。
9
临床表现——肾外
• 心脏：80% 的LCDD 病例合并心脏受累，呈心脏 舒张功能受损或限制性心肌病的表现。 • 神经系统：20% 的病例累及中枢及周围神经系统, 临床表现格林—巴利综合征，或末梢神经感觉消退、 自主功能丧失。
AL 性疾病，多数为原发性。
血清蛋白电泳PPT课件
则较慢
蛋白质的等电Hale Waihona Puke 、分子量及迁移率蛋白质名称
白蛋白
等电点
4.84
相对分子量
6.9万
电泳迁移率
5.9*10-5
α1-球蛋白 5.06
20万
5.1*10-5
α2-球蛋白 5.06
30万
4.1*10-5
β-球蛋白 5.12
9万～15万 2.8*10-5
γ-球蛋白 6.86～7.30 15.6万～30万 1.0*10-5
57～68 1.0～5.7 4.9～11.2 7.0～13.0 9.8～18.2
各组分构成
Alb：白蛋白
α1：α1酸性糖蛋白；α1抗胰蛋白 酶；甲胎蛋白；高密度脂蛋白
α2：触珠蛋白；铜兰蛋白；α2巨球蛋白； α脂蛋白
β：转铁蛋白；补体系统；β脂蛋白 γ：IgG；IgM；IgA；IgD；IgE； CRP
注意事项
通电时，不得接触槽内缓冲液或CAM， 以防触电
缓冲液液面要保证一定高度 标本：血清应新鲜，不得溶血 染料：对蛋白质的各组分亲和力相同，
水溶性好，稳定，吸光度敏感，形成的 染料蛋白质复合物稳定且易洗脱比色
注意事项
电泳后区带拖尾、各区带分开不明显原因： 点样过多 点样不均匀、不整齐 样品触及薄膜边缘；薄膜过湿，样品扩散； 薄膜未完全浸透或温度过高导致干燥或水分
临床意义
肝病型：
➢ Alb降低 ➢ β和γ-球蛋白增高 ➢ 出现β和γ难以分离，出现 “β-γ桥”，此
蒸发薄膜与滤纸桥接触不良 薄膜位置歪斜、弯曲，与电流方向不平行 缓冲液变质；样品不新鲜 CAM质量不高等 电渗现象
评价
❖ 优点：CAM电泳具有灵敏度高，标本用量少，
蛋白质的等电Hale Waihona Puke 、分子量及迁移率蛋白质名称
白蛋白
等电点
4.84
相对分子量
6.9万
电泳迁移率
5.9*10-5
α1-球蛋白 5.06
20万
5.1*10-5
α2-球蛋白 5.06
30万
4.1*10-5
β-球蛋白 5.12
9万～15万 2.8*10-5
γ-球蛋白 6.86～7.30 15.6万～30万 1.0*10-5
57～68 1.0～5.7 4.9～11.2 7.0～13.0 9.8～18.2
各组分构成
Alb：白蛋白
α1：α1酸性糖蛋白；α1抗胰蛋白 酶；甲胎蛋白；高密度脂蛋白
α2：触珠蛋白；铜兰蛋白；α2巨球蛋白； α脂蛋白
β：转铁蛋白；补体系统；β脂蛋白 γ：IgG；IgM；IgA；IgD；IgE； CRP
注意事项
通电时，不得接触槽内缓冲液或CAM， 以防触电
缓冲液液面要保证一定高度 标本：血清应新鲜，不得溶血 染料：对蛋白质的各组分亲和力相同，
水溶性好，稳定，吸光度敏感，形成的 染料蛋白质复合物稳定且易洗脱比色
注意事项
电泳后区带拖尾、各区带分开不明显原因： 点样过多 点样不均匀、不整齐 样品触及薄膜边缘；薄膜过湿，样品扩散； 薄膜未完全浸透或温度过高导致干燥或水分
临床意义
肝病型：
➢ Alb降低 ➢ β和γ-球蛋白增高 ➢ 出现β和γ难以分离，出现 “β-γ桥”，此
蒸发薄膜与滤纸桥接触不良 薄膜位置歪斜、弯曲，与电流方向不平行 缓冲液变质；样品不新鲜 CAM质量不高等 电渗现象
评价
❖ 优点：CAM电泳具有灵敏度高，标本用量少，
内科学_各论_疾病：轻链病与轻链沉积病_课件模板
内科学疾病部分：轻链病与轻链沉积病>>>
诊断：
(2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋 白的恒区，其典型的单克隆轻链免疫荧光 呈强阳性;而后者沉积的轻链片段是免疫 球蛋白的可变区，所以其抗κ和 λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。
(3)LCDD的轻链沉积呈颗粒状而非纤 维样或β片层结构，不能结合刚果红(C
内科学疾病部分：轻链病与轻链沉积病>>>
诊断：
ongo red)和硫黄素(thioflavine);而后 者的轻链沉积在电镜下呈纤维样或β片层 结构，能与刚果红结合，在偏光显微镜下 呈现绿色双折光，与硫黄素结合产生黄绿 色荧光。
(4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其 他疾病如淋巴瘤或原发性巨球蛋白血症等， 导致单克隆轻链过度产生。
内科学疾病部分：轻链病与轻链沉积病>>>
症状及病史：
型病例存在心脏、神经、肝、和肾脏受累， 而且诸如皮肤、脾脏、甲状腺、肾上腺和 胃肠道等也可能受累。肾脏受累时常有明 显的肾小球病变，半数以上病人表现为肾 病综合征，伴有高血压和肾功能不全，伴 或不伴有镜下血尿，其特点是肾功能不全 明显且出现早，并呈快速进展趋势。有些 患者可以出现严重的小管间质
内科学疾病部分：轻链病与轻链沉积病>>>
诊断：
2.LCDD与糖尿病肾病鉴别 根据糖尿 病肾病典型的病史及上述肾活检病理特点 不难鉴别。
内科学疾病部分：轻链病与轻链沉积病>>>
并发症：
轻链病与轻链沉积病并发症_轻链病与轻 链沉积病有哪些并发症
约2/3 LCDD患者合并多发性骨髓瘤， 在组织中沉积的轻链类型与骨髓中异常浆 细胞产生相一致。肾脏损害并发症主要有 肾病综合征、慢性间质性肾炎和急慢性肾 功能不全。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
(3)LCDD的轻链沉积呈颗粒状而非纤维样或β片层结构，不能结合刚 果红和硫黄素；而AD的轻链沉积在电镜下呈纤维样或β片层结构， 能与刚果红结合在偏光显微镜下呈现绿色双折光与硫黄素结合产生 黄绿色荧光。
(4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其他疾病如淋巴瘤或原发性巨球蛋 白血症等导致单克隆轻链过度产生。
4、尿液检查：伴或不伴有镜下血尿但尿蛋白较少，但病人尿中可 排出单克隆轻链蛋白尿蛋白电泳上白蛋白较少，而球蛋白显著 增多。
2020/6/20
22
二、辅助检查
肾活检病理改变可有以下三个特点。 1、光镜检查：肾小球可有多种表现，从正常肾小球到不同程度系膜
增宽硬化以及系膜结节状改变等都可在LCDD患者中见到，其中系 膜结节状改变较为特异，与糖尿病肾病患者典型的KimmelstielWilson系膜结节硬化类似，不同在于LCDD的系膜结节PAS染色更强 而银染较弱刚果红染色阴性，后者结节不均一，有糖尿病史及与 抗轻链κ/λ抗血清反应阴性，以及有入球微动脉管壁透明变性等。 另外与糖尿病肾病不同之处还表现在于光镜下LCDD的肾小球基底 膜无增厚，其他肾小球可以完全正常或只有轻度系膜硬化。肾小 球尚可有毛细血管微血管瘤改变。有些肾小球可有膜增生性特征 肾小管表现基膜增厚，值得注意的是MM合并LCDD时骨髓瘤管型很 少见到。
Байду номын сангаас
2020/6/20
19
二、鉴别诊断
1、LCDD与原发性淀粉样变（AD）鉴别要点：
(1)LCDD其沉积轻链中约80%为κ链，而AD沉积轻链中约75%为λ轻 链。
(2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋白的恒区，其典型的单克隆轻链 免疫荧光呈强阳性；而AD沉积的轻链片段是免疫球蛋白的可变区所 以其抗κ和λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。
• 为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道 上进行测试。经电泳后，ELP作为参考泳道以显示 电泳后的蛋白质。
• 其余五条泳道用于鉴定单克隆成分，通过它与抗 血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)、 重链和κ、 λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
2020/6/20
12
免疫固相电泳
2020/6/20
2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
球蛋白： 补体C3、C4 IgG、A、M、D、E
深蓝色柱为典型肾病电泳图，方块内文字是与肾病相关电泳增高的意义
正正常常血血清清蛋蛋白白电电泳图泳形图状形及其及意意义义
2020/6/20
5
1.50m
正常球蛋白高度
2020/6/20
6
【醋酸纤维素膜法】[参考值范围]
A 白蛋白 0.62~0.71(62%~71%)
白和纤维连接蛋白
2020/6/20
18
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴浆 细胞性B细胞病变，如淋巴瘤或原发性巨 球蛋白血症。
α1球蛋白 α2球蛋白 β 球蛋白
0.03~0.04(3%~4%) 0.06~0.10(6%~10%) 0.07~0.11(7%~11%)
γ 球蛋白
0.09~0.18(9%~18%)
60-5-9-12-20
2020/6/20
7
2020/6/20
哪些病多克隆（Gamma）增高： 1、风湿、免疫性疾病 2、慢性肝病 3、慢性感染、炎症
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/6/20
1
2020/6/20
2
2020/6/20
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G） • 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。 • 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。 • 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相蛋
白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！ • 免疫球蛋白由4个肽链组成：2个轻链、2个重链（M带5个）。 • 免疫球蛋白包括重链包括： μ、δ、γ、α、ε链 和 免
疫球蛋白轻链包括： κ、λ链
2020/6/20
4
2球蛋白：肾上腺不 足、肾上腺皮质类固 醇治疗、糖尿病 、肾 病综合征
球蛋白： 转铁蛋白(Tf) C-反应蛋白 营养不良
轻链病与轻链沉积病-发病机制
• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片 段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并 不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。
• LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通过 自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系膜 细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏蛋
13
SUCCESS
THANK YOU
2020/6/20
2020/6/20
15
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两种： κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。
• Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链有 5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链
决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
2020/6/20
16
轻链病与轻链沉积病
• 轻链病(LCD)与轻链沉积病(LCDD)是一种浆细 胞异常增生性疾病。本病多发于中、老年人 (＞45岁)。本病起病多缓慢。
• 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引 起相应的临床表现即为轻链沉积病。
• 约2/3的LCDD患者合并MM。
2020/6/20
17
多克隆典型电泳图
8
1.85m
2020/6/20
多克隆球蛋白
9
哪些病M带增高：
1、骨髓瘤
2、轻链病、重链病、 淋巴瘤、某些白血病。
3、原发巨球蛋白血症
单珠峰电泳图（M带）
2020/6/20
10
2.06m
2020/6/20
多克隆球蛋白（M带）
11
如果出现单克隆球蛋白（M带） 必须做免疫固相蛋白电泳
2、LCDD与糖尿病肾病鉴别，根据糖尿病肾病典型的病史及上述肾活 检病理特点不难鉴别。
2020/6/20
21
轻链病与轻链沉积病-实验室检查
一、实验室检查：
1、血液检查：常见严重贫血、白细胞计数可以正常、增多或减少。 血小板计数大多减低并发骨髓瘤的患者可出现少数骨髓瘤细胞。 患者可出现巨球蛋白血症，多数骨髓瘤患者本-周蛋白可阳 性。
(4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其他疾病如淋巴瘤或原发性巨球蛋 白血症等导致单克隆轻链过度产生。
4、尿液检查：伴或不伴有镜下血尿但尿蛋白较少，但病人尿中可 排出单克隆轻链蛋白尿蛋白电泳上白蛋白较少，而球蛋白显著 增多。
2020/6/20
22
二、辅助检查
肾活检病理改变可有以下三个特点。 1、光镜检查：肾小球可有多种表现，从正常肾小球到不同程度系膜
增宽硬化以及系膜结节状改变等都可在LCDD患者中见到，其中系 膜结节状改变较为特异，与糖尿病肾病患者典型的KimmelstielWilson系膜结节硬化类似，不同在于LCDD的系膜结节PAS染色更强 而银染较弱刚果红染色阴性，后者结节不均一，有糖尿病史及与 抗轻链κ/λ抗血清反应阴性，以及有入球微动脉管壁透明变性等。 另外与糖尿病肾病不同之处还表现在于光镜下LCDD的肾小球基底 膜无增厚，其他肾小球可以完全正常或只有轻度系膜硬化。肾小 球尚可有毛细血管微血管瘤改变。有些肾小球可有膜增生性特征 肾小管表现基膜增厚，值得注意的是MM合并LCDD时骨髓瘤管型很 少见到。
Байду номын сангаас
2020/6/20
19
二、鉴别诊断
1、LCDD与原发性淀粉样变（AD）鉴别要点：
(1)LCDD其沉积轻链中约80%为κ链，而AD沉积轻链中约75%为λ轻 链。
(2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋白的恒区，其典型的单克隆轻链 免疫荧光呈强阳性；而AD沉积的轻链片段是免疫球蛋白的可变区所 以其抗κ和λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。
• 为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道 上进行测试。经电泳后，ELP作为参考泳道以显示 电泳后的蛋白质。
• 其余五条泳道用于鉴定单克隆成分，通过它与抗 血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)、 重链和κ、 λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
2020/6/20
12
免疫固相电泳
2020/6/20
2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。
3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。
球蛋白： 补体C3、C4 IgG、A、M、D、E
深蓝色柱为典型肾病电泳图，方块内文字是与肾病相关电泳增高的意义
正正常常血血清清蛋蛋白白电电泳图泳形图状形及其及意意义义
2020/6/20
5
1.50m
正常球蛋白高度
2020/6/20
6
【醋酸纤维素膜法】[参考值范围]
A 白蛋白 0.62~0.71(62%~71%)
白和纤维连接蛋白
2020/6/20
18
轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴浆 细胞性B细胞病变，如淋巴瘤或原发性巨 球蛋白血症。
α1球蛋白 α2球蛋白 β 球蛋白
0.03~0.04(3%~4%) 0.06~0.10(6%~10%) 0.07~0.11(7%~11%)
γ 球蛋白
0.09~0.18(9%~18%)
60-5-9-12-20
2020/6/20
7
2020/6/20
哪些病多克隆（Gamma）增高： 1、风湿、免疫性疾病 2、慢性肝病 3、慢性感染、炎症
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
2020/6/20
1
2020/6/20
2
2020/6/20
3
首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G） • 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。 • 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。 • 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相蛋
白电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！ • 免疫球蛋白由4个肽链组成：2个轻链、2个重链（M带5个）。 • 免疫球蛋白包括重链包括： μ、δ、γ、α、ε链 和 免
疫球蛋白轻链包括： κ、λ链
2020/6/20
4
2球蛋白：肾上腺不 足、肾上腺皮质类固 醇治疗、糖尿病 、肾 病综合征
球蛋白： 转铁蛋白(Tf) C-反应蛋白 营养不良
轻链病与轻链沉积病-发病机制
• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片 段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并 不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。
• LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通过 自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系膜 细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏蛋
13
SUCCESS
THANK YOU
2020/6/20
2020/6/20
15
免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两种： κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。
• Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链有 5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链
决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
2020/6/20
16
轻链病与轻链沉积病
• 轻链病(LCD)与轻链沉积病(LCDD)是一种浆细 胞异常增生性疾病。本病多发于中、老年人 (＞45岁)。本病起病多缓慢。
• 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引 起相应的临床表现即为轻链沉积病。
• 约2/3的LCDD患者合并MM。
2020/6/20
17
多克隆典型电泳图
8
1.85m
2020/6/20
多克隆球蛋白
9
哪些病M带增高：
1、骨髓瘤
2、轻链病、重链病、 淋巴瘤、某些白血病。
3、原发巨球蛋白血症
单珠峰电泳图（M带）
2020/6/20
10
2.06m
2020/6/20
多克隆球蛋白（M带）
11
如果出现单克隆球蛋白（M带） 必须做免疫固相蛋白电泳
2、LCDD与糖尿病肾病鉴别，根据糖尿病肾病典型的病史及上述肾活 检病理特点不难鉴别。
2020/6/20
21
轻链病与轻链沉积病-实验室检查
一、实验室检查：
1、血液检查：常见严重贫血、白细胞计数可以正常、增多或减少。 血小板计数大多减低并发骨髓瘤的患者可出现少数骨髓瘤细胞。 患者可出现巨球蛋白血症，多数骨髓瘤患者本-周蛋白可阳 性。