仪器分析实验论文色谱

仪器分析实验论文

高效液相色谱测定麦麸中阿魏酸含量

姓名：马旋瑞

专业班级：食品质量与安全2010级1班

学号：20105859

阿魏酸(Ferulic Acid)化学名称3-甲氧基-4-羟基肉桂酸，产品类别“医药原料和中间体”，化学式C10H10O4，外观淡黄色结晶粉末，是桂皮酸(又称肉桂酸，3苯基2丙烯酸，分子结构)的衍生物之一。阿魏酸（阿魏酸钠）具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素a2（txa2）的生成，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症药品的基本原料。如心血康、利脉胶囊、太太口服液等等，它同时在人体中可起到健美和保护皮肤的作用。

1、材料与方法

1.1 材料与试剂

甲醇为色谱纯，水为超纯水，冰醋酸，乙醇以及盐酸为分析纯等，13、92ppm阿魏酸标准液

1.2 仪器与设备

LC-10A高效液相色谱仪（LUNA(2)型手动进样器），C18色谱柱

1.3 样品处理

称取10g烘干至恒重的小麦籽粒用粉碎机粉碎后，浸入100m L蒸馏水中加淀粉酶0.2g。在55 ℃下，用4%NaOH调PH=8.0，于恒温水浴锅水浴1 h（每10min 定期振荡）。再用胃蛋白酶0.1g在37℃下，用6mol/LHcl溶液调PH=2，于恒温气浴摇床中再次振荡搅拌1 h,。之后再用四层纱布过滤，取滤渣于105℃下烘干2 h灭酶，得干沉淀，再次称重(记录实际称量质量）。干沉淀用体积比2:1的碱醇（质量分数4%的NaOH，无水乙醇）溶液按料液比1:12（w/v)浸润，在40℃下加入0.3g无水Na2SO3超声0.5 h。用6mol/L Hcl溶液调PH=2.6000rpm/min离心15min，去残渣。上清液于50℃旋转蒸发出其中的乙醇。将余液用流动相定容至50mL,摇匀，用0.45um微孔滤膜滤过即可。

1.4 HPLC测定

用精密注射器分别吸取2.5，5.0，7.5，10.0，15.0 uL进样。

得到如下图的结果：

色谱柱luna(2)c18

标准品浓度16.16ug/mL

进样体积(uL) 保留时间（min) 进样量（ug) 峰面积

2.5 9.765 40.4 242719.7

5.0 9.665 80.8 543902.3

7.5 8.898 121.2 810254.9

10.0 9.473 161.6 543902.3

15.0 9.44 242.4 1057961

标准曲线绘制：

1.5 样品含量的测定

取处理好的三种麦麸5 uL,分别进注入高效液相色谱仪中，然后根据公式y=7024x-35243，R²=0.9987 算出阿魏酸的含量。

样品3

样品分析：

样品编号进样体积

(uL) 保留时间

(min)

进样量

(ug)

峰面积浓度

(ug/mL)

1 5 9.198 84.678 559540.6

2 5 9.332 76.340 500969.6

3 5 9.265 95.886 638257.5

1.6 统计分析

阿魏酸的含量为（+ + ）/ 3 = ug

2、结果与分析

根据实验结果R²=0.9987，标准溶液在9.265 min左右处开始出峰，计算出的三个样品的含量也应在此时间段内，得出的结果......ug,符合实验要求，本次实验比较成功。也说明流动相在30℃下出峰最好，效果最佳。

但本次实验也有些误差，造成误差的原因可能是在进样的时候没有操作好，出现了峰的漂移。或者设备内部被不正确操作，污染了，让出峰时间出现了异常。而且，值得注意的是阿魏酸的化学性质极不稳定，需避光保存并低温冷藏。

而实验选用的超声提取法，操作简便，提取效率高并有效的避免了高热对阿魏酸稳定性的影响。用HP-HPLC法测定麦麸中阿魏酸含量的优点表现在样品预处理简单、回收率好、重现性好、稳定性好及专属性强等方面。

参考文献

【1】张志清，蒙昭，等.小麦苗中阿魏酸含量变化分析[J].食品科学.2010(18)：271-274

【2】王焕荟，银金兰.HPLC法测定阿魏八味丸中阿魏酸的含量[J].中国民族医药杂志.2008(1):48-49.

【3】朱明华.仪器分析[M].北京：高等教育出版社，2007. P：64-96.

【4】刘会荣.阿魏酸含量分析方法概述[J].中国药业，2004.第13卷(7):74-75 【5】

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致谢：感谢张志清教授对我们在仪器分析上的指导，是我对仪器分析的操作及仪器有了初步了解，我将会铭记老师说教授的知识，并将其以之运用，在以后会更加努力学习相关知识。