Y染色体微缺失检测指导

Y 染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗

传因素，其发生率仅次于Klinefelter 综合征( 克氏综合征) 。从1999 年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网(EAA/EMQN为提高诊断质量，出版了

色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。最新版的实验室指

南是2013年9月EAA/EMQ根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004 版的基础上修订而成。新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的

色体微缺失区域，主要是无精子因子(azoospermia factor , AZF)区域仅包含AZFa AZFb AZFbc、AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc区中gr/gr 缺失

是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检

测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。EAA/EMQN2年国际质量评估计划(EQA计划)

的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误

率。Y染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为%处于较高水平，我们建议将

AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF 检测实验室加入EQA 计划，完善中国Y 染色体微缺失检测实验操作规

范。

Y染色体微缺失分子检测在中国已幵展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列

标签位点(sequenee - tagged site, STS) 的数量、检测方法和内部质量控制等临床

问题未达成共识。各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时

有发生，迫切需要建立Y染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。EAA/EMQ更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重

要的指导意

义。

、 Y 染色体微缺失发生频率

Y 染色体微缺失在健康人群中发生率约为 1/4 000 ，但在不育男性中显着升高，微 缺失发生频率为2%-10%甚至更高）。2013版指南指出Y 染色体微缺失在中国不育 男性中发生频率为 %，处于较高水平。 2006年朱晓斌等 ［1］ 针对中国不育男性染色体

的研究表明 AZF 微缺失在非梗阻性无精子症患者中的发生率为

%，严重少精子症患

者中发生率为 %，与国内外其他学者的研究基本一致。 随着微缺失分子机制的阐明和 Y 染色体男性特异区域的结构（MSY ）测序完成，结合 十多年临床数据分析，EAA 专家总结沿用Repping 等［2］对Y 染色体微缺失区域的定 义模式，分为：AZFa 区缺失、AZFb 区缺失、AZFbc 区缺失和 AZFc 区缺失，认为只

有该微缺失模式有明确的临床表现。国内外学者对 AZFd 区缺失是否存在一直存有 争议。尽管发现在AZFb 与 AZFc 两区域之间存在新的缺失位点（一些学者认为的AZFd 区缺失 ），但是该区域缺失没有明确的临床意义，也并非独立存在的缺失模式。所 以第四区域AZFd 区缺失仍存在较多争议。Musi tmanolu 等［3］在2005年的一项研究 中指出AZFd 缺失可能与精子形成有关，但仍缺乏有力的临床证据。 等［4］在精子正常和轻度少精子症患者中都发现了假定的 AZFd 区缺失。然而，至今 为止 AZFd 区域尚未发现与精子生成相关的候选基因，其缺失所对应的临床表型还 二、 gr/gr 缺失不纳入常规检查项目 研究证实gr/gr 缺失属于AZFc 部分缺失，是影响精子生成的一个重要因素，但是

否需要将其作为常规检查指标尚存争议。尽管 gr/gr 缺失可导致AZFc 区一半以上

基因丢失，但其临床意义仍不明确，因为该缺失患者精子生成表型变化多样，从少

2013 年，陈科 需进 步确认。

精到精子数目正常都存在0 gr/gr 缺失表型在不同人种和地域间存在差异，已有研 究证实在欧洲白种人 （ 除了法国人 [5] 和德国人 [6]） 和西太平洋居民中， gr/gr 缺失 是男性生精障碍的高危因素 [7] 0

但在部分亚洲国家如日本和中国 [8,9] ， gr/gr 缺 失在健康人群中的概率和在不育患者的概率无显着差别。李铮等 [10]研究发现Y 染 色体 gr/gr 缺失既存在于严重不育男性，也存在于生精功能正常的捐精者中，缺失 可能遗传自父亲，并未影响精子的发生，不能认为是精子发生的遗传风险因子。因 此在中国 gr/gr 缺失不建议作为 Y 染色体微缺失常规检测的缺失模式。

三、AZF 缺失基因型/表型相关性

Y 染色体微缺失主要是 AZF 的缺失，该区域包含精子生成的相关基因家族，不同程 度的缺失可导致少精子或无精子症。 AZF 区进一步可分为 AZFa AZFb AZFc 区域。 AZFa 区域缺失通常导致唯支持细胞综合征 （SCO 综合征）和无精子症。如果诊断为整 个AZFa 区域缺失，从睾丸中获得精子的概率为 00 AZFb 和AZFbc （P5/P1近端；P5/P1 远端，P4/P1远端）缺失的典型睾丸组织学特征是 SCO 综合征或精子发生阻滞导致的 无精子症。研究表明这些缺失与整个 AZFa 区域缺失情况一样，患者也不能通过睾 丸穿刺（TESE ）获得精子。严重少精子或无精子症患者中 AZFc 缺失发生频率最高, AZFc 缺失的临床表型和睾丸组织学类型多种多样0

一般说来， 存精子生成能力0罕见情况下，其缺失在自然状态下可遗传给其男性后代

50%AZF （缺失的无精子症患者可通过 TESE 获得精子，进行单精子卵胞浆内注射（ICSI ） 受孕，但这些患者的男性后代都将是 AZF （ 缺失的携带者

四、 Y 染色体微缺失检测人群 Y 染色体微缺失检测不仅可以明确严重少精子或无精子症的病因，而且可以对预后 AZFc 缺失患者尚残 [11] 0近