大鼠取材方案
一种小鼠或大鼠真皮成纤维细胞的分离培养方法
一种小鼠或大鼠真皮成纤维细胞的分离培养方法真皮成纤维细胞是一种重要的细胞类型，其在生物医学研究、组织工程和再生医学等领域具有广泛的应用前景。
以下是一种常用的小鼠或大鼠真皮成纤维细胞的分离培养方法：1. 实验前准备：- 小鼠或大鼠- 麻醉剂，如异氟醚等- 消毒剂- 必需的培养基和培养液2. 小鼠/大鼠的取材：- 麻醉小鼠或大鼠，确保其在实验过程中不会感到疼痛或不适。
- 消毒动物的表面，以减少细菌或其他微生物的污染。
- 取下小鼠/大鼠的皮肤。
使用消毒剪刀和镊子将皮肤切割成小块，以便后续的分离过程。
3. 细胞的分离和培养：- 将皮肤块转移到含有酶解消化液（如胰蛋白酶）的培养皿中，并在37°C的恒温搅拌器上进行酶解（通常为1-2小时）。
- 将酶解后的皮肤块过滤，移至新的培养皿中，加入培养基和培养液，如DMEM/F12或RPMI-1640，并添加10%胎牛血清。
- 将培养皿放在37°C的细胞培养箱中，保持适当的温度、湿度和CO2浓度。
- 培养皿中的细胞会开始生长和扩增。
定期更换培养基，并进行细胞的孵育以保持其正常生长。
4. 细胞的传代：- 当细胞密度达到80-90%时，使用胰蛋白酶或胰蛋白酶-EDTA溶液将培养皿中的细胞与培养皿底部松散的连接断开。
- 将细胞计数，并根据需要的细胞数量进行传代。
一般情况下，将细胞按照1:3或1:4的比例重新分装到新的培养皿中。
- 重复上述步骤，直到获得足够数量且健康的细胞。
这种方法能够有效地分离和培养小鼠或大鼠真皮成纤维细胞，为相关研究提供了重要的细胞资源。
通过优化培养条件和细胞的传代方法，可以获得高质量和稳定的细胞群体，以支持各种实验或应用的需要。
提取大鼠平滑肌细胞——小总结
1．大鼠PASMCs的提取和原代培养(1)提取：对雄性SD大鼠用5％的水合氯醛经腹腔麻醉后，浸泡在75％的乙醇中5 rain。
将麻醉后的大鼠在超净工作台中固定好，无菌操作下迅速分离出心肺组织，置于盛有含有1％青链霉素的PBS培养皿中。
转移至无菌操作台中，漂洗心肺组织数次，眼科镊仔细剥离出肺动脉(包括肺动脉主干和左右肺动脉干)。
将已分离出的肺动脉用含1％青链霉素的HBSS冲洗数次，直至液体清亮为止，以尽量减少血细胞等的混入。
眼科剪纵向剪开肺动脉，内膜面朝上，用刀片来回轻刮2～3遍，去除内膜。
再将外膜面翻转过来，同样方法刮去外膜。
将中膜转移至盛有含20％胎牛血清的DMEM／F12的培养基中，用眼科剪反复剪成1 am×l mm×1 mm 的小组织块。
用滴管将小组织块转移至25T的培养瓶中，均匀的摆放与于瓶底，间距约0．5 cm。
加入3 mL含20％胎牛血清的DMEM／F12培养液，瓶底朝上，静置于37 oC、5％CO，的细胞培养箱巾孵育4～5 h。
待小组织块干涸后，轻翻转培养瓶，让培养液慢慢浸润瓶底上的小组织块，继续静置于培养箱中培养。
(2)原代培养：3—5 d后，有少量细胞从组织块周围游离出来；8—10 d后细胞融合成片，成峰．谷状分布，用胰酶消化传代。
一般2—3 d更换培养液，提取PASMCs 时用含20％胎牛血清的DMEM／F12，培养时用含15％胎牛血清的DMEM／F12。
采用生长状态良好的3～5代细胞进行后续实验。
取材、细胞原代及传代培养SD 大鼠肌注氯胺酮（22 mg / kg）麻醉后，作下腹部横切口，切取双侧输精管。
剥去外膜组织，小圆刀片刮除内膜，4 C PBS缓冲液（含青霉素100 U/ mI、链霉素100#g / mI）反复漂洗4 ~ 6遍，然后剪碎成1 mm3 大小的组织块。
先用0.1%的"型胶原酶消化作用10 min，倒去上清液，再加0.2% 的胰蛋白酶和0.1%的"型胶原酶消化20 min，使游离成单个细胞，600 > ! 离心5 min，收集消化的细胞，接种至25 cm2 培养瓶，加含20%胎牛血清的DMEM 培养液，置37 C含5%CO2孵箱中培养。
实验大鼠取材方案
实验大鼠取材方案引言：实验大鼠作为研究生物学和医学领域的重要动物模型，广泛用于疾病机制研究、药物毒理学评价以及创伤修复等实验中。
为了保证科学合理、可靠可重复的实验结果，大鼠取材方案的制定十分重要。
本文将详细介绍一个实验大鼠取材方案，包括大鼠的选择与购买、饲养与管理、实验前准备及取材方法。
一、大鼠的选择与购买实验大鼠的选择应该根据研究的目的和要求，选用符合实验条件和研究对象的品种，如Sprague Dawley大鼠、Wistar大鼠等。
同时，购买大鼠的时候需要注意以下几个方面：2.注意大鼠的种类、性别、年龄等信息，确保符合实验需求；3.检查大鼠的体表特征，确保健康、无畸形、无伤口等；4.购买大鼠前可以进行一定的初检，如测量体重、观察活动情况等。
二、大鼠的饲养与管理实验大鼠的饲养与管理是保证实验结果可靠性的重要环节。
1.饲养环境：-温度：保持恒温（20-25度），避免极端温度的影响；-湿度：保持适宜湿度（40-70%），避免湿度过高导致疾病的发生；-光照：保持适宜光照，如12小时昼光与12小时黑暗的交替；-通风：保持通风良好，避免污浊空气对大鼠健康的影响。
2.饲料与水：-提供优质饲料，如标准饲料或专门配制的实验饲料；-饲料的存放应防潮、通风，保证其营养成分的稳定性；-提供清洁、安全的饮用水，确保水质的卫生。
3.健康监测：-定期检查大鼠的健康状况，观察是否存在异常行为或症状；-定期测量大鼠的体重、体温等生理指标。
三、实验前准备在进行实验前，需要对大鼠进行一些必要的准备工作：1.环境适应：-将大鼠从饲养环境转移到实验环境前，应进行适应期的过渡；-适当调整温度、湿度和光照等条件的过渡，减少对大鼠的应激。
2.实验前禁食：-固定禁食时间，如12小时或更长时间；-禁食能够减少胃肠道内容物对实验结果的影响。
3.麻醉和体表消毒：-根据实验需要选择合适的麻醉方式，如乙醚麻醉、氧化氮麻醉等；-在取材前进行局部体表消毒，减少感染风险。
大鼠腹膜间皮细胞培养
取材：120-160g雄性清洁级SD大鼠主要仪器设备：超净台、手术剪、眼科剪、镊子、注射器、无菌培养皿、25 cm2培养瓶、25ml 烧杯、CO2培养箱（37℃，5%CO2，湿度95%）、弯头吸管、移液器、10ml尖底离心管、普通离心机、0.22μm滤膜过滤器、倒置相差显微镜。
（50ml培养瓶、100目不锈钢筛、6孔板[3]）（24、96孔板，25 cm2、75cm2塑料培养瓶、100目不锈钢筛、离心管用15ml/50ml[4]）（恒温震荡箱，离心管用50ml）培养：选择120-160g雄性清洁级SD大鼠，局麻后无菌取大网膜，在pbs中洗去红细胞，然后用含0.125%胰蛋白酶、0.01%EDTA的PBS液消化（37℃）20-25分钟，之后弃去消化液再加入胎牛血清（FBS）终止消化，吹打收集消化下来的单个细胞，4℃下离心（800r/min，5min）得到细胞团，用DMEM/F12培养液（含青、链霉素100U/ml及20%FBS）重悬细胞，接种于25cm2的培养瓶中，在CO2孵箱中培养24h后首次换液，以后每2-3d换液一次。
待细胞融合达80%时传代，用PBS洗一次后，加0.125%胰蛋白酶2ml室温消化3min，用FBS终止消化，4℃离心，细胞团用DMEM/F12生长液重悬，以2×106个细胞/ml的密度接种于25 cm2的培养瓶中，在CO2孵箱中培养24h后首次换液，以后每2-3d换液一次。
第二代被培养的细胞汇合至90%时经倒置相差显微镜观察并用细胞角蛋白抗体及波形蛋白抗体行免疫组化染色进行鉴定，明确其为PMC（腹膜间皮细胞），纯度达到99%以上。
第三代细胞用于实验。
参考文献：[1]马姝琛，严海东，庄守纲等.大鼠腹膜间皮细胞的分离培养方法[J].同济大学学报.2012年12月第33卷第6期[2] 曾莉，毛春芹，陆兔林等.大鼠腹膜间皮细胞的培养与鉴定[J].南京中医药大学学报. 2012年7月第28卷第4期[3]曾莉，徐庆，金桂兰等.大鼠腹膜间皮细胞的原代培养与鉴定[4]杜伟伟，杨洪涛.大鼠腹膜间皮细胞原代培养方法[J].中国中西医结合肾病杂志. 2012年8月第13卷第8期[5]樊敏，刘伏友，段绍斌等.改良法培养鼠腹膜间皮细胞[J].湖南医科大学学报.2002，27（6）细胞原代培养及传代一、腹腔外消化1、明胶铺备培养瓶：2-3ml明胶液体加入25cm2培养瓶，平放培养瓶，使液体全部覆盖瓶底，放入37℃培养箱中静止30min，倾出瓶中多余液体，干燥备用。
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项
实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项[取材内容]大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]大鼠[取材步骤]1. 取材前夜禁食，自由饮水。
2. 小鼠称重，按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。
3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴，另外三个手指抓住大鼠的颈部，使大鼠头部向向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手持注射器，从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入，动作轻柔，缓慢注射。
注射完药物后，缓缓拔出针头，手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩，促进麻醉药物的吸收，掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。
4.将小鼠四肢固定于解剖台上，暴露小鼠整个胸部和腹部，修剪去腹部毛发，75%酒精消毒。
5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突，向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织，暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉，剪开腹膜，暴露腹腔，将肝脏向上翻起，显露肝门。
6.门静脉血采集：将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉，抽取门静脉血2ml，无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜，4℃离心，3000-3500/min，10分钟，吸出上清液，分装，-80摄氏度保存备用。
一种大鼠腰膨大背根神经节取材的改良方法
一种大鼠腰膨大背根神经节取材的改良方法为了获得高质量的大鼠神经节样本，本文提出了一种改良的取材方法。
通过对大鼠腰椎进行解剖，切除脊柱并暴露出神经节，使用显微镊子和显微注射器进行取材，避免了常规方法中可能出现的神经节损伤和污染，同时保证了样本的完整性和纯度。
本方法在研究神经退行性疾病等方面具有应用前景。
关键词：大鼠腰椎；神经节；取材；改良方法引言神经节是神经系统中重要的组成部分，其功能与神经元的生存和发展密切相关。
因此，研究神经节的结构和功能对于理解神经系统的发育和疾病具有重要意义。
大鼠是神经科学领域中常用的实验动物，其神经节样本的获取对于研究神经退行性疾病等具有重要意义。
然而，传统的取材方法存在一些问题，如神经节损伤、污染等，影响了样本的完整性和纯度。
因此，本文提出了一种改良的大鼠神经节取材方法，以期提高样本的质量和可靠性。
材料与方法1. 实验动物本研究使用雄性Sprague-Dawley大鼠，体重250-300g，由实验动物中心提供。
2. 取材工具显微镊子、显微注射器、手术刀、剪刀、镊子、无菌手套、无菌巾等。
3. 取材步骤3.1 麻醉和解剖将大鼠置于麻醉盒中，用异氟醚气体麻醉2-3分钟，待大鼠完全麻醉后，将其移至手术台上。
用无菌巾将大鼠的四肢固定，用手术刀在腰部进行皮肤切开，剪开腹肌，暴露出腰椎。
3.2 切除脊柱用剪刀将腰椎两侧的肌肉和韧带剪开，用镊子将椎弓切除，将脊柱暴露出来。
用剪刀将脊柱切开，切除椎体和椎间盘，暴露出神经节。
3.3 取材用显微镊子将神经节取出，放置在无菌PBS缓冲液中。
用显微注射器将PBS缓冲液注入神经节，使其膨胀，便于后续的分离和处理。
将取出的神经节进行离心，去除PBS缓冲液，即可得到纯净的神经节样本。
结果本方法成功地获得了大鼠腰膨大背根神经节样本，样本完整、纯净。
与传统的取材方法相比，本方法避免了神经节的损伤和污染，取材效率高，样本质量好。
讨论本文提出的大鼠神经节取材方法具有一定的优势。
DRG的取材
DRG的取材
DRG的取材，已经有很多⽂献报道，因为我最近也培养了DRG细胞，所以谈谈⾃⼰的经验：新⽣⼤⿏（红⽪）浸⼊酒精5min 处死，断头后剥开脊髓周围⽪和肌⾁，⽤显微镊剪开脊髓椎管，去除脊髓，使整个脊髓腔暴露，在解剖镜下，椎孔间的DRG 可以清晰看到，⼀个⿏应该有很多对DRG，⽤超细⼿术镊取DRG，动作要轻柔，不能将DRG夹坏。
取下的DRG放在冰PBS ⾥。
取好⾜够的DRG后，还需仔细将每个DRG的包膜剥去，这⼀步很重要，对下⼀步的组织块培养或消化培养时减少杂细胞都很关键。
这种⽅法要点就是要操作快，去除脊髓过程尽量减少出⾎，个⼈经验出⾎过多使DRG浸在⾎中会影响其活⼒。
实在有出⾎应该⽤冰PBS清洗⼀下。
还有就是剥好膜后也要放在新的冰PBS中去除⾎和杂质。
接下来就可以进⾏下⼀步操作了。
SD大鼠背根神经节细胞新取材和培养方法
华中科技大学硕士学位论文SD大鼠背根神经节细胞新取材和培养方法姓名：艾玛AmmarAliAhmed申请学位级别：硕士专业：外科学（手外科）指导教师：康皓2011-05SD大鼠背根神经结细胞的新取材和培养方法华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 硕士研究生：艾玛 指导教师： 康皓 教授 中文摘要 【目的】：探讨有效摘取ＳＤ大鼠背根神经结（ＤＲＧ）的方法，为实验取材奠定基础。
方法①取材 选择为三周ＳＤ大鼠，提取ＤＲＧ神经元。
用显微解剖获取足够数量的ＳＤ大鼠背根神经结，通过胰蛋白酶＋Ⅳ型胶原酶消化②分离：ＰＢＳ洗涤吸干液体，加入０．２％Ⅳ型胶原酶和０．２５％胰蛋白酶放入３７０Ｃ温箱边消化边用眼科剪剪碎背根神经结重复数次，直到消化液变得粘稠后就可以用滴管吹打，吹打后就可以完全的把背根组织彻底的消化掉，加入含有血清的ＮＢＬ培养基终止消化，用１０００转离心，③原代培养将细胞悬液加入底面铺有Ｌ一多聚赖氨酸的培养皿（ＰＰ ）中，放人３７℃、体积分数为０．０５的ＣＯ２培养箱中，让其自然贴壁。
定期在倒置相差显微镜下观察。
【结果】背根神经结细胞原代贴壁生长较慢，一个月以后才能长满瓶底生长二天后２０倍光镜下背根神经结细胞。
细胞成簇生长，向四周放射状排列，细胞核圆形透亮，细胞形态多边型，向四周伸出较长的触须，其他类型细胞基本上已经死掉而悬浮在培养基里。
【关键词】背根神经结；细胞培养 New method in extracting and culture of dorsal rootganglion neurons of SD ratDepartment of Hand surgery, Union Hospital, Tong Ji Medical School, HuazhongUniversity of Science and TechnologyPostgraduate: Ammar Ali Ahmed TaherSupervisor: Pro. KangHaoAbstract【Objectives】To explore the effective method applied in extracting of dorsal root ganglion (DRG) of SD rats, thus lay a foundation for obtainment of the experimental materials.【Methods】①Obtainment of materials: Select 3-week SD rats to extract DRG neuron. Sufficient dorsal root ganglions of SD rat may be obtained via microdissection and digested using trypsin + collagenase IV. ② Isolation:The liquid is washed and sucked up with PBS, add 0.2% collagenase IV and 0.25% trypsin, after that it is placed in 37℃incubator for digestion, during which the dorsal root ganglion should be sheared with ophthalmic scissor for several time until the digestive juice becomes thick, and then a pipette is used to blow, the dorsal root tissue may be digested totally after blowing, add NBL medium containing serum to terminate the digestion process, and centrifuged at 1000r. ③Culture of primary generation of cells: Add cellular suspension in Petri dish (PP) with L-poly-lysine laid down at its bottom, and placed in incubator (37℃, 0.05 volume fraction of CO2) to allow natural adherent growth. The inverted phase contrast microscope is used regularly to perform the observation.【Results】The adherent growth of the primary generation of dorsal root ganglion cells isso slow that a month is needed to cover the bottom of the flask. The dorsal root ganglion cells under 20 x optical microscope grow for two days. The cluster of cells grows in radial arrangement to the surrounding; the nucleus appears round and transparent and cellular morphology in shape of polygon while the longer tentacles expand around the cell; other types of cell have been basically dead and suspend in the medium.【Keywords】Dorsal root ganglion; Cell culture独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。
大鼠标本制备
先买40只大鼠，在实验室适应一段时间{一周到两周}，实验开始前准备2ml、20ml注射器，一次性手套、口罩、50ml广口瓶，购买试剂卵清蛋白（OV A）、氢氧化铝，再去3号楼4楼找老师要PBS缓冲液（PH7.2-7.4）
第一步配置致敏剂，40只大鼠每只腹腔注射1ml，最好配置50毫升制剂（包括浪费的10毫升），每只大鼠OV A10毫克，氢氧化铝20毫克，把两种成分（OV A10mg×50=500mg，氢氧化铝20mg×50=1000mg）溶解在50毫升PBS液中或生理盐水中，制成OV A浓度为10mg/ml、氢氧化铝20mg/ml。
制成之后，每只小鼠1ml腹腔注射（腹中线左侧，大鼠头部朝下，回抽有无液体和空气，避免注入膀胱、肠管）。
隔天注射一次，或其他方案，致敏两周，大鼠产生抗体，两周之后，用PBS溶液配制滴鼻液开始激发大鼠。
SD大鼠背根神经节细胞新取材和培养方法
华中科技大学硕士学位论文SD大鼠背根神经节细胞新取材和培养方法姓名：艾玛AmmarAliAhmed申请学位级别：硕士专业：外科学（手外科）指导教师：康皓2011-05SD大鼠背根神经结细胞的新取材和培养方法华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 硕士研究生：艾玛 指导教师： 康皓 教授 中文摘要 【目的】：探讨有效摘取ＳＤ大鼠背根神经结（ＤＲＧ）的方法，为实验取材奠定基础。
方法①取材 选择为三周ＳＤ大鼠，提取ＤＲＧ神经元。
用显微解剖获取足够数量的ＳＤ大鼠背根神经结，通过胰蛋白酶＋Ⅳ型胶原酶消化②分离：ＰＢＳ洗涤吸干液体，加入０．２％Ⅳ型胶原酶和０．２５％胰蛋白酶放入３７０Ｃ温箱边消化边用眼科剪剪碎背根神经结重复数次，直到消化液变得粘稠后就可以用滴管吹打，吹打后就可以完全的把背根组织彻底的消化掉，加入含有血清的ＮＢＬ培养基终止消化，用１０００转离心，③原代培养将细胞悬液加入底面铺有Ｌ一多聚赖氨酸的培养皿（ＰＰ ）中，放人３７℃、体积分数为０．０５的ＣＯ２培养箱中，让其自然贴壁。
定期在倒置相差显微镜下观察。
【结果】背根神经结细胞原代贴壁生长较慢，一个月以后才能长满瓶底生长二天后２０倍光镜下背根神经结细胞。
细胞成簇生长，向四周放射状排列，细胞核圆形透亮，细胞形态多边型，向四周伸出较长的触须，其他类型细胞基本上已经死掉而悬浮在培养基里。
【关键词】背根神经结；细胞培养 New method in extracting and culture of dorsal rootganglion neurons of SD ratDepartment of Hand surgery, Union Hospital, Tong Ji Medical School, HuazhongUniversity of Science and TechnologyPostgraduate: Ammar Ali Ahmed TaherSupervisor: Pro. KangHaoAbstract【Objectives】To explore the effective method applied in extracting of dorsal root ganglion (DRG) of SD rats, thus lay a foundation for obtainment of the experimental materials.【Methods】①Obtainment of materials: Select 3-week SD rats to extract DRG neuron. Sufficient dorsal root ganglions of SD rat may be obtained via microdissection and digested using trypsin + collagenase IV. ② Isolation:The liquid is washed and sucked up with PBS, add 0.2% collagenase IV and 0.25% trypsin, after that it is placed in 37℃incubator for digestion, during which the dorsal root ganglion should be sheared with ophthalmic scissor for several time until the digestive juice becomes thick, and then a pipette is used to blow, the dorsal root tissue may be digested totally after blowing, add NBL medium containing serum to terminate the digestion process, and centrifuged at 1000r. ③Culture of primary generation of cells: Add cellular suspension in Petri dish (PP) with L-poly-lysine laid down at its bottom, and placed in incubator (37℃, 0.05 volume fraction of CO2) to allow natural adherent growth. The inverted phase contrast microscope is used regularly to perform the observation.【Results】The adherent growth of the primary generation of dorsal root ganglion cells isso slow that a month is needed to cover the bottom of the flask. The dorsal root ganglion cells under 20 x optical microscope grow for two days. The cluster of cells grows in radial arrangement to the surrounding; the nucleus appears round and transparent and cellular morphology in shape of polygon while the longer tentacles expand around the cell; other types of cell have been basically dead and suspend in the medium.【Keywords】Dorsal root ganglion; Cell culture独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。
大鼠一般操作技术
抓取大鼠时应保持实验者的安全， 避免被咬伤或抓伤。
注意事项
保定大鼠时需谨慎，避免对其 造成伤害或引起应激反应
抓取大鼠时需用适当的工具， 如鼠笼、鼠夹等，并确保安全
抓取大鼠时应避免直接用手接 触，以免被咬伤或感染病菌
在保定与抓取大鼠的过程中， 需保持安静，避免惊吓到动物
大鼠编号与标记
编号方法
耳号法：在耳朵上打孔或剪缺口，用数字或字母进行编号 化学物质标记法：用特殊的化学物质涂抹在动物身上，以便长期跟踪和识别 电子标记法：使用无线电频率识别技术，将电子芯片植入动物体内，通过扫描设备进行识别 染色法：给动物毛发染色，以便区分不同组别的动物
抓取技巧
抓取大鼠时应使用适当的保定工具， 如鼠笼或鼠夹，以避免伤害大鼠或 实验者。
抓取大鼠时应保持稳定和轻柔的动 作，避免过度用力或突然移动，以 免引起大鼠的应激反应或伤害大鼠。
添加标题
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抓取大鼠时应选择适当的抓取部位， 如大鼠的背部或后颈部，以避免伤 害大鼠或影响实验结果。
大鼠采血与取材
采血方法
眼眶取血 心脏取血 尾部取血 耳缘取血
取材方法
采血：大鼠尾部采血，常用方法有断尾采血和心脏采血 取材：大鼠不同部位的组织取材，如肝脏、肾脏、脑组织等 注意事项：确保无菌操作，避免损伤大鼠 用途：用于实验研究、药物筛选等
注意事项
采血前应确保大鼠禁食12小时以上， 以避免食物对血液成分的影响。
遵循伦理原则，确保实验过 程符合动物福利和伦理要求
选择合适的处死方法，确保 实验结果的准确性和可靠性
实验操作过程中应保持清洁 卫生，避免交叉感染和污染
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标记方法
大鼠取材方案
实验大鼠取材方案［取材内容］1. 取人皿汀脉L分页亠浆、亠涓-80C保存。
2. 取人.帚门叩献血分岛血I青-80 C保存。
3. 农人鼠巾:犬腺却织制各甲状腺匚瓷观察标木乂余菲.沢浅氮讹廉保存峯比.4. 战人就胸腺细次制卜比版汨次匸饥（虫肃:木、免寢汎化规察呼Y JU汨织液殂沐桥保存备用。
5. 敗人和门厂汉「各F叽织1筈抚农琳•仁免疫汕牛观察标木比余汇汉分装液齟沐拣保存备用。
6. 敗,m即织制幻匚汉匚後証瞬林仁免■疫汨•化观护必具余汀织分炷液也冰冻保存备用。
7. 敗人細灿脚却制紐川浏汉匚後証瞬标仁免■疫汨•化观护必貝氏側分炷液也冰冻保存备用。
8. 取人闕扬系膜淋巴结落织制备畅聚慎淋巴纭免疫纠化斑察标木贯余组织液氮冰拣保存。
9. 収人和「惻却制紐|粘琪叽织电遵观嘤标-仁免疫汕牛亦铀•讣兀余纭织分蕙我氮冰冻保存备用。
10. 取大鼠空肠沮织制金肠迫粘膜幼织匚说观秦械仁免疫汨化观祭标木英余组织分號液氮冰冻保存备用。
11. 敗丿爲£可肠汨汉制徉场道牯慎汀汉匸槿死察杠木.先疫汕比现察标木兀余泪汉分临液氮冰冻保存备用。
12. 堰人讹肾纠织制备芹仔纠親电镜观密标木、免疫泪化观察标爪右肾组织液氮冰栋探存备用。
13. 堰兴甌肾匕腺组织芹测制备肾匕II赴匚貌免疫绅化观察标木右切肾上腺掖氮彼冻保存备用。
14. 脱乂誠里凡汨汉片啊匸备电筈观奧瑞木、免疫泪化规験对；木左怛里丸液氮沐洙保辛备有。
［试剂及药品］戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、 3 戊［鲨磷酸盐缓冲液（PBS0.01mol/LP pH7.4）或4 .戊一咋、!」-壶讷、器械液卅械沾沅汨卷液［器材］备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、拣存管、那点钾真空采血佇、徽量移液器、高返离心机、注肘器10ml、5ml、2ml 、丿二菌亍贡‘冰彩、护:令：、浪罠［取材动物］Wistar大鼠［取材步骤］1. 脱材人氐孑視杂食门中竹2. 腹腔注射戊巴比妥钠（45mg/kg）或10%水合氯醛（300mg/kg）将动物麻醉。
一种大鼠腰膨大背根神经节取材的改良方法
一种大鼠腰膨大背根神经节取材的改良方法
1、材料和方法：
（1）实验材料：四只雄性大鼠
（2）实验方法：
a.用动物右侧膝关节把大鼠夹住，用手指按压背骨曲线处胸骨，使大鼠处于安静平卧状态。
b.取材时，用双钳片分开第4脊椎到第7脊椎之间的腰部软组织，可很清楚看到神经节，然后对神经节进行取材。
c.腰膨大段的肌节取材一般采用三层的钳取法，即用双夹钳先夹住神经节，再用单钳片夹住其上、下层细胞组织及膜，最后一次挤压，使神经节断裂，取材完毕。
2. 结果
实验完毕后，成功取得4只大鼠的腰膨大背根神经节，组织伤口恢复良好，没有出现肿胀、红肿等异常现象。
3、结论
本文提出的大鼠腰膨大背根神经节取材的改良方法，可以有效地提高实验效果，准确地取得大鼠腰膨大背根神经节，且低痛损伤。
大鼠取材方案
大鼠取材方案实验大鼠取材方案[取材内容]1. 取大鼠静脉血分离血浆、血清 -80℃保存。
2. 取大鼠门静脉血分离血清 -80℃保存。
3. 取大鼠甲状腺组织制备甲状腺电镜观察标本其余组织液氮冰冻保存备用。
4. 取大鼠胸腺组织制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存备用。
5. 取大鼠肺组织制备肺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
6. 取大鼠肝脏组织制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
7. 取大鼠胰腺组织制备胰腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
8. 取大鼠肠系膜淋巴结组织制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存。
9. 取大鼠胃部组织制备胃粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
10. 取大鼠空肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
11. 取大鼠回肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
12. 取大鼠肾组织制备左肾组织电镜观察标本、免疫组化观察标本右肾组织液氮冰冻保存备用。
13. 取大鼠肾上腺组织左侧制备肾上腺组织免疫组化观察标本右侧肾上腺液氮冰冻保存备用。
14. 取大鼠睾丸组织左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本右侧睾丸液氮冰冻保存备有。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3 戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4 戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器 10ml、5ml、2ml 、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]Wistar大鼠[取材步骤]1. 取材大鼠前夜禁食自由饮水。
大鼠灌注固定取脑,解剖取材
主讲：陈爽 2017.9.12
用途
1.用于常规HE染色，免疫组化分析。 2.冰冻切片可以不做脑组织固定。
3.不可用于western blot和PCR。
4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时，不作灌注 固定，而是在取出脑组织后作固定，将大大影响效果。
原理 心脏灌流术能够快速冲净血液并在动物 死 亡前进行组织的前固定,避免了组织的自 溶 现象,是脑组织切片观察的常用方法。多 聚 甲醛使组织蛋白发生交联，以保持蛋白 的 原位和表面结构不变，从而能使其对应 的抗体，准确检测其表达的位置和量。
固定时间过长蛋白多肽链都交连在一起了,抗原性就 很弱了，很可能没有阳性结果,抗原修复时一般的修复很 难把抗原性恢复. 可能会有影响，但不会太大。固定时间 长，抗原修复时间也要长一些。
4.灌注多长时间？灌注液多少？
• 每个人的灌注液用量都不一样，灌注速度 也能没有很清楚的说法，灌注时间也不确 定。主要还是看灌注成功的标志。现将看 到的比较详细的处理方法列出。灌注速度， 大家比较公认的是先快后慢。
• 短期灌注：采用心脏穿刺快速灌注20 min,其中生理盐水灌注50~ 100mL,4 %多聚甲醛缓冲液灌注150 mL。
• 长期灌注：灌注时间延长到1 h,其中生理盐水灌注200mL,4 %多 聚甲醛缓冲液灌注400 mL。
• 短期灌注组脑组织结构保留基本良好,与长期灌注组相比稍差,研 究皮层和海马结构损伤基本可以满足;长期灌注组结构保留最好, 但是耗时长、固定液用量大,致使试验进度慢等缺点不容忽视。, 对皮层和海马缺血再灌注损伤研究选择短期灌注取脑尚可满足 需要,深部脑白质及核团缺血再灌注损伤研究还是要用长期灌注 固定取脑法,或者在取脑后立即根据实验取材要求将脑切成块再 浸泡入固定液充分固定。 • 下面是夹闭腹主动脉: • 每只大鼠先快速推注生理盐水50 ml冲洗,继而灌注固定液(如4% 多聚甲醛等)50~80 ml,先快后慢,需10~15 min,在灌注固定液过程 中,颈部逐渐变硬;灌注结束后,开颅取出脑组织,置于固定液中后 固定24 h
大鼠冰冻切片
【操作步骤】
1．小鼠的灌注固定：动物经麻醉后开胸暴露心脏，经左心室先快速灌注生理盐水(50mL左右)至流出液变清亮，然后换4％多聚甲醛继续灌注大约100ml至组织变硬。
2．取材：小心剥离脑组织，置广口瓶中用4％多聚甲醛后固定12～24h。
3．脱水：将标本移入30%蔗糖溶液（用4％多聚甲醛配制），4℃放置至组织块沉底
4．将少量包埋剂OCT滴加到标本台，放入恒冷箱切片机内至变白，然后取出快速将表面用单面刀片修平。
5．用安全刀片将标本底部修平后迅速粘附于标本台，然后置入-24℃恒冷箱切片机的冷冻台。
待组织略微发白时用OCT在标本表面涂一薄层，继续冷冻20min。
6．调好切片厚度后开始切片。
如果是采用漂片，切片厚度一般20～30ìm，切好的片子可以连续收集也可以每隔5～6片收集一片，移入含4％多聚甲醛的6孔板、24孔板或别的容器。
如果是准备做贴片，片厚一般10ìm；可以连续裱片，也可以每隔5片或10片裱一片，贴好后放切片盒，50度左右烤片1小时使其贴牢.
7．将切好的片子放4℃保存备用。
做室旁核的话可以将脑袋反过来，在腹侧面，大概切掉视交叉前和下丘脑之后的部分、只保留中间部分然后连续切片就可以了。
如果是漂片，室旁核的部分切不了很多；如果贴片那切出来的要多一点。
做免疫组化的话漂片就可以了。
液氮或低温冰箱里的冻存必须要有防冻液，否则必然切片会碎掉。
肺动脉平滑肌取材
SD大鼠肺动脉平滑肌层取材步骤
1、提前向100ml配好的HBSS液中加入150ul 1M C a Cl2液，
预冷备用；
2、取SD大鼠，，腹腔注射3%戊巴比妥钠溶液（45mg/kg），
待麻醉完全，快速取下心肺组织，置于上述HBSS液内，置于冰上；
3、将所取组织置于平皿内，加入适量HBSS液保持湿润，将
肺组织贴近胸腔面置下，用针头固定肺组织，体视镜下小心去除胸腺及脂肪组织，暴露肺动脉、肺静脉近心端；
4、明确肺动静脉的解剖结构（按此固定方法肺门处从上到下
依次为肺静脉、支气管、肺动脉），沿分离出的近心端肺动脉逐渐分离出二、三级肺动脉血管（先分离肺静脉后分离肺动脉，肺动脉形状较圆，动脉脚静脉色泽深）；
5、将分离出的肺动脉剪下，固定于一干净平皿内，小心剪除
血管外纤维组织，然后剖开血管，用蘸有HBSS液的棉签小心擦掉血管内壁除去内皮细胞，即得肺动脉平滑肌组织（分离过程中组织全程处于HBSS液环境）。
1。
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实验大鼠取材方案[取材内容]1. 取大鼠静脉血分离血浆、血清-80℃保存。
2. 取大鼠门静脉血分离血清-80℃保存。
3. 取大鼠甲状腺组织制备甲状腺电镜观察标本其余组织液氮冰冻保存备用。
4. 取大鼠胸腺组织制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存备用。
5. 取大鼠肺组织制备肺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
6. 取大鼠肝脏组织制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
7. 取大鼠胰腺组织制备胰腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
8. 取大鼠肠系膜淋巴结组织制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存。
9. 取大鼠胃部组织制备胃粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
10. 取大鼠空肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
11. 取大鼠回肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。
12. 取大鼠肾组织制备左肾组织电镜观察标本、免疫组化观察标本右肾组织液氮冰冻保存备用。
13. 取大鼠肾上腺组织左侧制备肾上腺组织免疫组化观察标本右侧肾上腺液氮冰冻保存备用。
14. 取大鼠睾丸组织左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本右侧睾丸液氮冰冻保存备有。
[试剂及药品]戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液[器材]备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐[取材动物]Wistar大鼠[取材步骤]1. 取材大鼠前夜禁食自由饮水。
2. 腹腔注射戊巴比妥钠(45mg/kg) 或10%水合氯醛(300mg/kg)将动物麻醉。
用5ml的注射器配合5.57号针头。
腹腔注射时右手持注射器左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴另外三个手指抓住大鼠的颈部使大鼠的头部向下。
这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
进针的动作轻柔防止刺伤腹部器官。
尤其是对于体重较小的大鼠腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离最好是从腹部一侧进针穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔注射完药物后缓缓拔出针头并轻微旋转针头防止漏液。
待动物麻醉成功后仰卧位固定于解剖台。
3. 修剪去颈部及腹部毛发75%酒精消毒。
4. 沿腹侧正中线自阴茎上缘由下而上剪开腹部皮肤直至剑突向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织暴露腹壁浅肌层。
沿白线钝性分离腹壁肌肉剪开腹膜暴露腹腔将肝脏向上翻起显露门并游离静脉将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉抽取门静脉血2ml无创血管夹夹闭门静脉止血。
将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜4℃离心3000-3500/min10分钟吸出上清液分装-80摄氏度保存备用。
5. 把胃与脾之间的薄膜除去可见到在其下方有如树枝状的肉色组织分为左、右两叶钝锐结合整体取下胰腺组织及脾脏组织结扎止血。
胰腺放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①切取胰腺体部约1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②胰腺体部相邻部位组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③其余组织全部液氮冰冻保存备用。
生理盐水冲洗操作器械。
6. 剔除脾周组织放置脾脏于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①从脾脏一端切取5×5mm脾组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定②继续切取脾约1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定③其余组织液氮冰冻保存备用。
7. 从剑突继续向上剪开皮肤自颌下向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织暴露胸廓及颈浅肌层。
沿正中剪开胸廓、胸膜避免损伤胸腺的胸腔脏器。
暴露心脏找到上下腔静脉后确认右心房5ml注射器直接穿刺右心房最大量抽取外周回心静脉血。
加4ml静脉血入肝素锂真空采血管摇匀室温静置10分钟4℃离心3000-3500/min5分钟吸出上清液分装-80摄氏度保存备用。
2ml加入普通真空采血管低温静置过夜4℃离心3000-3500/min5分钟吸出上清液分装-80摄氏度保存备用。
8. 展开肠系膜于肠系膜根部寻找淡蓝色结节样淋巴结组织剔取肠系膜淋巴结数枚放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①取部分淋巴结组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定②其余组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
心管5ml、9. 上端于贲门上端结扎食管下端于直肠远端结扎直肠末端钝锐结合完整取下胃肠道。
10. 离断胃放置于无菌培养皿残端结扎。
①沿胃大弯剖开生理盐水洗涤切取约1mm×1mm×1mm胃窦和胃体黏膜组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②剪取宽约0.5-1.0cm包含胃窦、胃体组织1条浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③其余胃组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
11. ①距treitz韧带10cm处切取空肠10cm距回盲部10cm处切取回肠10cm生理盐水洗涤切取约1mm×1mm×1mm空肠和回肠黏膜组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②剪取宽约0.5-1.0cm包含全层的空肠和回肠组织各1条做标记浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③其余空肠和回肠组织全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
12. 结扎剪断肝门管道系统钝锐结合完整取出大鼠肝脏放置于无菌培养皿生理盐水冲洗称重并记录。
①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②左叶肝组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③右叶肝组织称重记录分装后全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
13. 于腹膜外腰部脊柱两侧寻找到肾脏表面光滑、背腹略扁呈蚕豆形。
在肾脏的前方内侧和腰下肌的腹面相接处寻找到肾上腺。
右侧肾上腺呈豆状长轴指向后内侧左侧呈卵圆形长轴指向腹外侧。
钝锐结合摘取两侧肾上腺。
①左侧肾上腺浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定②右叶肾上腺放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
14. 剪开后腹膜结扎剪断双侧肾门钝锐结合取下双侧肾脏剔除肾周筋膜组织放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①于中间肾门部横行切开左侧肾脏切取上端肾脏1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②下端脾脏浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③右侧肾脏放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
15. 大鼠的阴囊是由肛门腹侧会阴部皮肤下垂所形成的囊袋。
性成熟的大鼠睾丸和附睾下降入阴囊使表面凸出并突向后方。
小心剪开双侧阴囊可见椭圆形睾丸钝锐结合摘取双侧睾丸、附睾放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
16. 颈白线钝锐结合分离颈前肌群直至气管向上显露甲状腺。
仔细操作切取包括甲状软骨在内的甲状腺。
①切取约1mm×1mm×1mm组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②其余组织全部浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定。
切取左侧睾丸下端1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②余左侧睾丸组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③右侧睾丸组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
17. 大鼠胸腺由两叶组成似等边三角形。
大部分位于胸腔前纵膈顶端近喉部基底部附着于心包腹面的前上方。
钝锐结合完整取下胸腺放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①切取胸腺1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②切取胸腺5mm×5mm×5mm组织1块浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③其余组织置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。
18. 整体取下大鼠心肺组织剪开分离双侧肺脏置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。
①切取左肺1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②余左肺浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定冻存管液氮冰冻保存备用。
19. 各取样标本细致编号登记。
20. 大鼠废弃尸体处理。
[注意事项1. 戊巴比妥钠配成1%生理盐水溶液平均每只大鼠用量12.6mg 1.2ml左右。
2. 大鼠腹腔注射可以大鼠腹腔注射的给药容积一般为510ml/kg。
3. 完整取下胃肠道后已将肠系膜撕碎不易寻找肠系膜淋巴结所以先取淋巴结。
取下胃肠道由专人操作取胃肠道及胃肠道取下后取材的操作器械单用一套。
4.取材时三人同时操作取一只大鼠结合取材方案多脏器并行取材缩短取材时间。
③右肺组织置于无菌1、解剖后应迅速将脏器称重，以免水分蒸发造成差异，特别是肾上腺等小器官的称重。
2、脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除，并用滤纸吸去脏器表面血液及体液，特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官，更要新鲜称重，防止器官干燥失水而重量减轻。
3、空腔器官称重前，应清除其腔内液体，如心脏应除去血块。