Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程
使用ACQUITY UPLC 和Xevo TQ-S 分析食品中致过敏物质肽
38 食品安全导刊 2015年3月使用ACQUITY UPLC和Xevo TQ-S分析食品中致过敏物质肽□ 沃特世公司 供稿食品过敏情况越来越多，对食品呈不良反应的人口数量也一直在增加。
尽管许多食品会导致发生反应，但90%的食品过敏反应局限于少量所谓的关键过敏原。
这些关键过敏原包含在牛奶、甲壳动物、卵、鱼、花生、大豆、坚果和小麦中。
为了帮助那些出现食品过敏的人，全球范围内都有与食品安全问题相关的许多不同法规。
许多年来，分析食品中是否出现过敏组分的最常见分析技术都基于酶联免疫吸附法和实时聚合酶链反应的抗体技术。
ELISA基于可利用目标过敏蛋白质和不会引起其他类似蛋白质反应的抗体，PCR不会标记相应的特定目标蛋白质，因此会产生假阳性结果。
由于能够标记特定蛋白质和一种方法分析多种过敏物质，最近使用质谱（MS）检测过敏原的方式引起很大关注。
能够在方法开发过程中同时监测基质背景，优化出最佳方案,确保方法高效可靠。
该技术简介中，用于制作面包的花生被用于解释食品基质中的过敏原肽标记的检测方法。
还介绍了在定量MRM分析过程中能够同时采集基质背景信息的仪器设计方面的重要进展。
该功能（被分析检测Tlogy科技表1 花生过敏原分析的MRM色谱通道称作RADAR TM 采集）为组分定量分析并且同时监测背景干扰提供了创新方法，能够在方法开发过程的同时持续监测基质背景，优化出最佳方案，确保方法高效可靠。
解决方案之前的实验在沃特世（Waters ®）nanoACQUITY UPLC ®和Xevo QTof MS （应用序列号720003656EN）上使用食品蛋白质组学方法鉴定摄入生或烤花生引起的过敏反应相关标记，该实验鉴定了生和烤花生的肽序列。
在本次实验Copyright©博看网 . All Rights Reserved.Mar 2015 CHINA FOOD SAFETY39图1 加标面包基质中Ara h1蛋白质的三种肽的MRM提取离子色谱图肽序列VLLEENAGGEQEER的三种具体MRM提取离子色谱放大图图2 使用RADAR生成的背景基质信息A：786.9>804.3(VLLEENAGGEQEER)的MRM提取离子色谱图B：688.8>930.5(DLAFPGSGEQVEK)的MRM提取离子色谱图C：全扫描MS TIC色谱图插图A至B分别显示Rt5.67和7.01处的加和全扫描质谱图分析检测中，使用其中两种肽段和ACQUITY UPLC 系统和Xevo TQ-S质谱开发高度灵敏和高特异性的方法。
UPLC-H-Class_系统介绍
培训教程(H-Class 系统)摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 开机顺序及使用注意事项摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 开机顺序及注意事项ACQUITY UPLC H-Class 系统ACQUITY UPLC H-Class 系统核心系统四元溶剂管理器(QSM)样品管理器–Flow Through Needle (SM-FTN) 柱温箱(CH-A)支持所有现在的ACQUITY 检测器–PDA and PDAeλ–TUV–FLR–ELSD–QDa and TQDACQUITY UPLC H-Class 四元溶剂管理器操作特点–最大流速= 2mL/min–最大操作压力= 15,000 psi四元溶剂混合自动混合功能H-Class QSM (四元溶剂管理器)流路QSM With Optional Solvent Select ValveTo SystemVent Valve Filter/MixerOptional SolventSelect ValveIndividual Gradient Proportioning Valves (4)ManifoldIn-Line Filters (4)Primary Accumulatori 2ValveSolvent Solvent SolventACQUITY UPLC H Class硬件简介四元溶剂管理器_Quaternary Solvent Management System （QSM）–脱气机–泵–GPV (比例阀)–Inlet manifold–溶剂处理单元ACQUITY UPLC H Class 溶剂脱气机QSM 脱气/ GPV 流路3-GPV 出口与低压入口混合SM处清除溶剂的脱气包管理器相连2-脱气包连向GPV入口1-溶剂瓶连向脱气包入口QSM 流路初级泵泵头蓄积泵泵头排液阀100 µL 混合器一对梯度比例阀低压混合管理器脱气包Seal Wash 泵QSM 泵头流路初级泵压力传感器到蓄积泵单向阀蓄积泵压力传感器到排液阀低压入口管理器到初级泵的I 2VGPV 出口到低压入口管理器I 2V 主动阀入口管理器滚花式不锈钢接头支架入口管理器侧视图俯视图柱塞相对运动速度图主柱塞蓄积柱塞送液(+)柱塞与流速方向相同进样点主柱塞传递溶液预压缩两柱塞之差送向系统(0.4)蓄积柱塞送液(0.4)过滤器/混合器集成装置位置废液管理器来自于检测器的废液来自于进样器的废液来自于密封清洗的废液QSM 控制面板菜单自动混合（AutoBlend技术）Water AcetonitrileAlcohol ConcentratedModifier95%0%45%50%自动混合梯度Water1%TFAIsopropanolAcetonitrileWater1%TFAIsopropanolAcetonitrile0%5%0%5%100%Water0%Acetonitrile 0.05%TFA 50%Water50%Acetonitrile 0.05%TFA肽图谱方法开发TFA 浓度变化-%DA U0.000.050.100.150.200.250.05% TFA –5% D0.025% TFA –2.5% DU样品管理器-FTN可变进样体积–标配进样体积可达10uL–最大扩展至250uL 进样进样针在流路中的设计–全体积样品进样–更低的交叉污染覆盖全范围的进样盘和样品瓶支持预加载样品和定量环离线功能样品管理器-FTNWash SolventPurge Solvent样品加载样品进样样品管理器（FTN ）正面流路一览至定量注射阀的管路连接单向阀单元进样阀管路连接清洗溶剂入口管路(没有脱气)漏液传感器连接处样品注射器内部流路针驱动装置SS Needle针密封清洗集Needle Lug Latch成装置R-Carriage End Plate针密封清洗装置针进样的位置进样针的类型标配的不锈钢针，15 µL–作为标配安装在样品管理器中不锈钢针包, 30 µL–最耐用的针选配的扩展环 50 µL扩展环 100 µL扩展环 250 µL扩展环样品管理器FTN (flow through needle)样品管理器FTN (flow through needle)色谱柱温控制温度范围: 室温+5 到90°C2.1 到4.6 mm, 最长可达150 mm 色谱柱接在线过滤器或预柱 标配主动预热装置主动预热确保温度控制的一致性消除环境对色谱柱温度带来的影响减小系统体积以减少额外的色谱柱谱带展宽 兼容之前的被动预加热装置主动预加热器ACQUITY UPLC®光电二极管矩阵(PDA)和可调紫外可见(TUV)检测器ACQUITY UPLC® PDA和TUV检测器提高的灵敏度优异的噪音抑制性能光引导流通池设计–两种流通池选件能够满足更广泛的应用范围低电子噪音–高亮度灯宽动态线性范围支持最大80 Hz的采集速率–独立的数据采集速率和滤波常数全控制台软件控制为何使用UPLC®专用检测器?更快的洗脱峰需要更高的数据采集速率–降低样品谱带在流通池中的扩展时间更小的峰需要最大的信噪比S/N–高光通量/传输–更快的数字滤波时间常数UPLC分离需要低扩散体积的流通池–保持峰形–不产生高反压ACQUITY UPLC® PDA 检测器Waters’ ACQUITY UPLC®PDA检测器–最大采集速率80 Hz–最小化的噪音o10 µAU–最大化的光谱分辨率–最大化的线性范围o为杂质和痕量分析提供更宽的动态范围o用更短的分析时间获得更好的数据o高可信度的数据结果–流通池o新颖的光引流通池设计o更长的激发光路能够给出更好的吸光度和灵敏度ACQUITY UPLC® TUV 检测器Waters’ ACQUITY UPLC®TUV 检测器–80 Hz 最大采集速率–最小化的噪音o 6 µAU–最大化的线性范围o 2.5 AUo为杂质和痕量分析提供更宽的动态范围o用更短的分析时间获得更好的数据o高可信度的数据结果–流通池o新颖的光导流通池设计o更长的激发光路能够给出更好的吸光度和灵敏度ACQUITY UPLC® 高亮度灯高亮度氘灯– 低噪音特性 – 能够输出近两倍于普通氘灯的亮度 （能量）好处– 低噪音 – 更高的灵敏度灯的保证寿命– 2000 小时前面板拆装 软件对灯的固件控制– 运行时间 – 点灯 – 序列号©2014 Waters Corporation41ACQUITY UPLC® 吸光度流通池 – 光引导方法光路TeflonAFα流动相TeflonAF光引导流通池实质上就是中间材料为液体的光纤 进入流通池的液芯中的光线在照射到Teflon® AF壁上时会发生全反射, 即全内反射(Total Internal Reflection, TIR) 理论上讲,在AF管的圆柱表面上的每一点上都会发生全反射,这样除了由 于样品的吸收,入射光就会以接近100% 的效率透射过流通池©2014 Waters Corporation 42PDA 流通池选件高灵敏分析型25 mm 2400 nL10 mm 500 nL©2014 Waters Corporation43TUV 流通池 高灵敏 分析型25 mm 光程 2400 nL 体积©2014 Waters Corporation10 mm 光程 500 nL 体积44反压调节器反压调整器能确保溶解在流动相中的气体不会产生气泡,从而保证基线平稳 不受气泡噪音的干扰 如果UV检测器是系统中的最后一个检测器，一定要装配反压调整器 如果在PDA/TUV后面还连接有质谱或其它检测器，则无需装配反压调整器©2014 Waters Corporation45ACQUITY UPLC® 检测器 -快速数据采集速率0.50 0.45 UPLC 条件 色谱系统: ACQUITY UPLC (BSM, SM, TUV) 色谱柱: 2.1 X 50 mm BEH C18, 1.7 µm 流动相: 50% of A: 10 mMol Ammonium Bicarbonate pH=10 50% of B: Acetonitrile 流速: 1.2 mL/min 进样体积: 1 µL (5 uL Loop, 30 uL PEEK Needle, PLUNO, 1 uL air gaps) 强洗 = 75% ACN/25% Water (250 uL) 弱洗 = 50% ACN/25%Water (1000 uL) 样品室温度: 15 °C 柱温箱温度: 45 °C 检测器: ACQUITY TUV @ 301 nm, Various data rates, FTC=Off 样品 = ~ 0.05 mg/mL Benzocaine, Butamben, and Tetracaine in 1:1 Buffer/ACN 数据: Empower 20.400.350.30AU0.250.20 1 Point per Second 2 Points per Second 5 Points per Second 10 Points per Second 20 Points per Second 40 Points per Second 80 Points per Second0.150.100.050.00 0.12 0.14 0.16 0.18 0.20 0.22 0.24 0.26 0.28 0.30 0.32 Minutes 0.34 0.36 0.38 0.40 0.42 0.44 0.46 0.48对于UPLC, 检测器的采集速率必须足够大，以确保完整检测到狭窄的 UPLC峰 ACQUITY UPLC 检测器支持从1到80Hz的各种采集速率,以满足任何 UPLC应用中的需要 有效的积分算法和独立的时间常数，确保了精确的和可重现的积分©2014 Waters Corporation 46ACQUITY UPLC® 独立的采集速率和滤波常数采集频率和滤波常数的单独优化，使得在确保分辨率和灵敏度最优的 条件下，找到最佳的检测参数©2014 Waters Corporation47PDA 通用(General)界面©2014 Waters Corporation482D 通道吸光度 基线补偿 (MBF) 最大吸收值绘图（Maxplot） 波长差减 波长叠加 比率(Ratio)波长©2014 Waters Corporation49摘要ACQUITY UPLC H-Class 系统原理及特点 运行准备及注意事项©2014 Waters Corporation50。
(沃特世)UPLC超高效液相色谱介绍
UPLC超高效液相色谱（沃特世）主要特点超高速度1.小颗粒填料色谱柱能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度2.显著增加样品的通量，提高工作效率，降低分析成本3.节省以往一向耗时的方法开发与认证的时间超高灵敏度1.小颗粒技术和整体化的仪器设计，UPLC®能在改善分离度的同时提高灵敏度2.更高的柱效和更窄的色谱峰，意味着更高的色谱峰高和更高的灵敏度3.在得到超高分离度和超高速度的同时能够得到超高灵敏度超高分离度1.利用高效创新小颗粒填料（1.7μL），获得超强分离能力2.超低扩散体积，充分发挥小颗粒填料分离能力3.超高分离度，适合复杂混合物的分离分析超级创新为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由沃特世公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
色谱柱安装后，智能化的芯片会自动地把关键参数采集进入色谱柱的历史文档，并记录色谱柱整个寿命周期的历史。
该记录不能被删除。
技术参数最大操作压力：15000psi（1mL/min）溶剂输送精度：0.075%RSD或0.02minSD流速范围：0.010-2.000mL/min，增量0.001mL/min梯度曲线：11种。
包括线性、凹线、凸线和两种步进梯度变化有效系统体积:<140μL，与系统反压无关。
带标准混合器溶剂选择:最多四种。
可在A1与A2和B1和B2之间选择交叉污染:0.005%或2nL进样范围:0.5-50μL进样精度:<0.3%RSD进样线性:>0.999样品室温度控制:4 - 40℃色谱柱历史追踪:使用eCord技术检测器配置:紫外可见检测器、光电二极管矩阵检测器、蒸发光散射检测器以及所有质谱检测器超高速度,超高灵敏度,超高分离度,超级创新为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由Waters公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
H-ClassXEVO TQD 用户操作练习手册
H-Class/Xevo TQD用户操作练习手册Waters 客服电话座机拨打：8008202676 手机拨打：4008202676 电子邮箱：************************一．仪器的原理H-Class 四元泵示意图H-Class 四元泵比例阀脱气包放空阀低压混合器 Seal wash 泵初级泵蓄集泵过滤器H-Class 自动进样器Sample Manager-FL示意图Sample Manager-FL样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Sample Manager – FTN示意图Sample Manager – FTN样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Xevo TQD示意图二．软件的基本操作与实验的一般流程打开Masslynx软件，调用已有的项目或建立新的项目（project）调用已有的项目1.在桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件2.单击File > Open Project,出现如下对话框3.单击Yes选择合适的路径和合适的项目，单击OK 即可建立新项目1.在桌面上双击Masslynx图标2.单击File > Project Wizard3.出现对话框“When changing to a new project, some services are automatically closed down, Continue?”,单击Yes4.出现如下对话框输入项目名称（project name）,对项目的描述（Description）,路径（Location），在路径中建议在C盘下新建一个文件夹，并命名为MS DATA，所有新建项目都放在这个文件夹中，单击Next5.选择create using existing project as template,并以C:\Masslynx\Default.pro为模板单击Finish注意：一般建议以当前PROJECT或DEFAULT或工程师安装仪器的Installation Project为模板建立新的PROJECT，一般不建议建全新的PROJECT。
Waters Acquity UPLC 超高效液相色谱仪
1.0目的为了指导实验分析员在实验工作中正确使用Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪，特制定本规程。
2.0范围适用于指导实验人员在实验工作中对Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪的操作。
3.0职责3.1实验人员在实验工作中使用Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪时应遵循本规程。
3.2部门负责人负责审核本规程并保证其实施。
3.3 QC部门负责日常运行的监管。
4.0 操作规程4.1 试剂准备使用色谱纯试剂配制的流动相和清洗液.强洗针液用较高比例的甲醇或乙腈的水溶液(如80/20),弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液(如10/90),清洗柱塞密封垫（Seal Wash）溶液应使用纯水或5%～10%甲醇溶液。
4.2 液相开机4.2.1 先打开UPLC所有模块电源（最后打开SO（Sample Organizer）电源），打开Analyst software，点击ACQUITY Console进入液相控制界面，图1。
图14.2.2 连接液相4.2.2.1自动启动液相：点击system，点击control，选择start up system，弹出图2控制界面，依次选择需要执行的项目。
Prime Solvents中选择需要进行SM（Sample Manger）和BSM（Binary Solvent Manager）的相关项目。
依次在Opitonal和Equilibrate to Method 中按实验需要进行设置。
然后点击start，仪器自动进行清洗等准备工作。
如果BSM,SM,SO等显示红色字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击control，reset相关部分。
图24.2.2.2 连接液相各个部分（如果BSM,SM,SO等显示红色字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击control，reset）。
选择BSM，点击control，选择Prime seal wash，进行柱塞杆的清洗。
waters_uplc_超高液相色谱仪使用方法_概述及解释说明
waters uplc 超高液相色谱仪使用方法概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在介绍和解释Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法。
超高液相色谱技术作为一种快速、高效、灵敏的分析方法，已广泛应用于生命科学、环境监测、药物研发等领域。
而Waters UPLC超高液相色谱仪则作为当前市场上领先的仪器之一，拥有先进的特点和优势。
1.2 文章结构本文将按照如下结构来进行介绍和说明：首先，在第2部分中，我们将对Waters UPLC超高液相色谱仪进行详细的介绍，包括其工作原理、构成和组件以及特点和优势。
然后，在第3部分中，我们将概述超高液相色谱分析方法的基本步骤，并重点讨论样品准备工作、色谱柱和流动相选择与优化以及仪器参数设置与调节等方面的内容。
接着，在第4部分中，我们将详细解释使用Waters UPLC超高液相色谱仪的具体步骤和操作说明，包括开机与准备工作、样品处理与注射操作以及方法运行与数据分析等方面。
最后，在第5部分中，我们将总结使用过程中的经验和解决技巧，并展望超高液相色谱在分析领域中的发展方向和应用前景。
1.3 目的本文旨在帮助读者全面了解Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法，包括仪器介绍、分析方法概述以及具体操作步骤。
通过阅读本文，读者将能够熟练运用该仪器进行高效、准确的样品分析，并对超高液相色谱技术在各个领域中的应用前景有更深入的了解。
同时，我们也希望通过分享使用经验和问题解决技巧，能够为相关科研人员提供一些实用的参考和指导。
2. Waters UPLC超高液相色谱仪介绍2.1 原理Waters UPLC（Ultra Performance Liquid Chromatography）超高液相色谱仪是一种高效的色谱分析技术。
其原理基于传统液相色谱，通过使用减小粒径和增强填充剂的方式，实现更高的分离效率和分辨率。
UPLC仪器利用高压泵将样品溶液加速通过色谱柱，在极短的时间内完成分离、富集和检测。
超高效液相色谱串联质谱法和离子色谱法测定饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸的比对
超高效液相色谱串联质谱法和离子色谱法测定 饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸的比对寇 斐（郑州自来水投资控股有限公司，河南郑州 450000）摘 要：目的：分别利用超高效液相色谱串联质谱法与离子色谱法对生活饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸进行测定，比较其检测性能。
方法：样品经滤膜过滤后，以乙腈/0.05%乙酸水溶液作为流动相，梯度洗脱，以三重四极杆质谱检测器进行检测，根据保留时间和特征离子峰进行定量分析。
离子色谱法以KOH作为淋洗液，IonPac AS19分析柱和IonPac AG19保护柱，8～40 mmol·L-1梯度淋洗，以电导检测器检测。
从检测时间、准确度、精密度、检出限等方面对两种方法进行对比。
结果：两种方法测定二氯乙酸、三氯乙酸线性良好，超高效液相色谱串联质谱法测定二氯乙酸检出限为0.000 6 mg·L-1，三氯乙酸检出限为0.001 8 mg·L-1，检测时间为4.5 min；离子色谱法测定二氯乙酸检出限为0.001 2 mg·L-1，三氯乙酸检出限为0.002 2 mg·L-1，检测时间为32 min。
两种方法精密度和准确度均满足实验要求。
结论：生活饮用水中二氯乙酸、三氯乙酸可以用以上两种方法进行定性和定量分析，其中离子色谱法所需有机试剂少，但检测时间长，检测限较高；超高效液相色谱串联质谱法检测限较低，灵敏度高，检测时间短。
日常检测工作中，可根据水样具体情况，选择合适的检测方法。
关键词：二氯乙酸；三氯乙酸；生活饮用水Comparison Between Ultra High Performance LiquidChromatography Tandem Mass Spectrometry and Ion Chromatography for the Determination of Dichloroacetic Acid and Trichloroacetic Acid in Drinking WaterKOU Fei(Zhengzhou Water Supply Investment Holdings Company Limited, Zhengzhou 450000, China) Abstract: Objective: Dichloroacetic acid and trichloroacetic acid in drinking water were determined by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry and ion chromatography respectively, and their detection performance was compared.. Method: The liquid chromatography tandem mass spectrometry sample was filtered through a filter membrane, and acetonitrile/0.05% acetic acid aqueous solution was used as the mobile phase for gradient elution. The detection was performed using a triple quadrupole mass spectrometer detector, and quantitative analysis was performed based on retention time and characteristic ion peaks. The ion chromatography method used KOH as the eluent, IonPac AS19 analysis column and IonPac AG19 protection column, with a gradient elution of 8～40 mmol·L-1, and conductivity detector detection. Compare the two methods based on indicators such as detection time, accuracy, precision, and detection limit. Result: The linearity of the two methods for determining dichloroacetic acid and trichloroacetic acid was good. The detection limit of dichloroacetic acid by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrum was 0.000 6 mg·L-1, and the detection limit of trichloroacetic acid was 0.001 8 mg·L-1, with a detection time of 4.5 min; the detection limit of ion chromatography for dichloroacetic acid is 0.001 2 mg·L-1, and for trichloroacetic acid is 0.002 2 mg·L-1, with a detection time of 32 min. The precision and accuracy of both methods meet the experimental requirements. Conclusion: Dichloroacetic acid and trichloroacetic acid in drinking water can be qualitatively and quantitatively analyzed by the above two methods. Ion chromatography生活饮用水的安全越来越受到人们的重视，随着饮用水消毒技术的发展，氯化消毒、臭氧消毒、二氧化氯等消毒技术的应用越来越广泛。
Waters 产品分类
3
高效液相色谱仪
主要分为两大类
1、1500系列 2、Alliance系统
©2011 Waters Corporation
4
1500系列液相
515 （单泵）+Empower软件 1515（单泵）+Breeze软件 1525（二元） +Breeze软件
©2011 Waters Corporation
5
Alliance
Alliance e2695
©2011 Waters Corporation
6
超高效液相色谱（UPLC）
UPLC H-Class
UPLC I-Class
©2011 Waters Corporation
7
超高效合相色谱（UPCC）
©2011 Waters Corporation
12
串四极
TQD+Empower软件
Xevo TQD Xevo TQ-S Micro Xevo TQ
Xevo
TQ-S
©2011 Waters Corporation
13
高分辩
Xevo G2-S Tof Xevo G2-S Qtof Synapt G2-Si MS Synapt G2-Si HDMS MALDI Synapt G2-Si MS MALDI Synapt G2-Si HDMS
再次重新定义色谱科学 2012.3.12
©2011 Waters Corporation
8
GPC/APC
GPC 液相+示差检测器+GPC软件 ACQUITY APC ---超高效凝胶色谱仪 （超高效聚合物色谱系统）
沃特世ACQUITY UPLC⑧H-Class系统快速测定黄曲霉毒素
46 食品安全导刊 2012年3月刊ANALySIS & TEST 分析与检测沃特世ACQUITY UPLC ®H－Class系统快速测定黄曲霉毒素□ 沃特世科技（上海）有限公司 供稿目标在不进行衍生操作的条件下, 证明ACQUITY UPLC ® H-CLASS系统的多元混合能力；配合使用沃特世黄曲霉毒素分析包，可提高分离黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1、G 2和M 1的分辨率且缩短分析时间。
背景黄曲霉毒素是由真菌、黄曲霉菌和寄生曲霉代谢生成的一组真菌毒素，其可能出现在各种食品，如谷物、花生、调味料和乳制品中。
天然形成的黄曲霉毒素有4种：B 1、B 2、G 1和G 2，其中，B 1和G 1是毒性较大的两种。
M 1是二次代谢产物，是乳牛食用B 1污染的谷物后代谢生成的副产物，可对牛奶等乳制品造成污染。
黄曲霉毒素具有很强的毒性，可对人类和动物产生致癌作用，相关政府部门对其在食品中的含量有很严格的限制，因此，食品行业需要灵敏、精确且具有良好重现性的分析方法对该类物质进行检测。
黄曲霉毒素的检测通常基于反相HPLC色谱分离和荧光检测，由于反相洗脱会使黄曲霉毒素B 1和G 1的荧光效应发生猝灭，需要进行衍生化处理以增强这些待测物的反应。
常规检测方法是使用三氟乙酸（TFA）进行柱前衍生，采用碘法、电化学衍生溴法或光化学UV衍生法进行柱后衍生。
但这些方法耗时较长，需要购置昂贵的柱后反应器，和获得电化学生成溴的电化学单元，而且TFA 的使用会增加技术人员的安全隐患。
解决方案进行黄曲霉毒素检测时，采用基于VICAM AflaTest ® P方法学的沃特世黄曲霉毒素分析包进行样品前处理，采用ACQUITY UPLC ® H-CLASS系统，配合其UPLC ® 优化的荧光（FLR）检测器进行检测。
黄曲霉毒素B 1、B 2、G 1、G 2和M 1的基线分离分析时间为4.5分钟，无需进行衍生化。
超高效液相色谱-串联质谱仪测定纺织品中的喹啉
超高效液相色谱-串联质谱仪测定纺织品中的喹啉摘要：本文建立了一种采用超高效液相色谱-串联质谱仪（UPLC-MS/MS）测试纺织品中喹啉的方法，以甲醇为溶剂，通过超声波萃取，采用超高效液相色谱-串联质谱仪（UPLC-MS/MS）对萃取液分析来测定样品中的喹啉含量。
结果表明，喹啉在0.1 mg/L~2.0 mg/L范围内线性良好（r>0.9990），回收率为92.5%~99.3%，相对标准偏差<3%，方法定量限可低至3mg/kg，可用于快速定量分析纺织品中喹啉的含量。
关键词：纺织品；喹啉；超高效液相色谱-串联质谱仪（UPLC-MS/MS）Determination of Quinoline in textile by UPLC-MS/MSXiaoyingHe, Shuke He,Yanfen.HuangAbstract: A method was established for the determination of Quinoline in textile sample by UPLC-MS/MS through ultrasonicextraction with methanol. The results showed that Quinoline have good linearity in the range of 0.1 mg/L~2.0 mg/L (r>0.9990), values of recovery in the range of 92.5%~99.3%, the RSDs were less than 3%, and the LOQ of method was as low as3 mg/kg.It could be used for rapid quantitative analysis of Quinoline in textile sample.Keywords: Textile; Quinoline; UPLC-MS/MS引言喹啉（Quinoline）是一种芳香类化合物，喹啉或其衍生物常用于制取C.I.酸性黄3、C.I.直接黄22、C.I.溶剂黄33和Palanil黄3G等染料，这些染料是黄色染料的主导品种，在印染行业中，常用于纺织品的染色；另外，喹啉经过硝化、还原得到氨基喹啉，也会被用于纺织品染色辅助剂和毛发、毛坯染色剂。
超高效液相色谱-质谱联用测定皮革中的甲醛
超高效液相色谱-质谱联用测定皮革中的甲醛何晓莹;张建武;魏莹莹【摘要】建立了一种皮革中甲醛的超高效液相色谱-质谱联用的分析方法,该方法利用十二烷基磺酸钠水溶液在40℃条件下萃取皮革中的甲醛,再用对-肼基苯甲酸对萃取的甲醛进行衍生反应,采用超高效液相色谱-质谱联用的方法来分析甲醛的衍生物,具有良好的灵敏度和排干扰性.本方法对甲醛的检测限为0.25 mg/kg,平均加标回收率为80%~110%,相对标准偏差<10%,完全可以满足皮革中甲醛含量的测定.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)013【总页数】3页(P134-135,138)【关键词】甲醛;皮革;超高效液相色谱-质谱联用法【作者】何晓莹;张建武;魏莹莹【作者单位】东莞市中鼎检测技术有限公司, 广东东莞 523808;广东安源鼎盛检测评价技术服务有限公司, 广东东莞 523000;东莞市中鼎检测技术有限公司, 广东东莞 523808【正文语种】中文【中图分类】TS57甲醛是一种无色、有强烈刺激性臭味的有毒气体，极易溶于水和醇，对于皮肤黏膜有很强的刺激作用。
最新研究表明，甲醛具有强烈的致癌作用，已经被世界卫生组织确定为第一类致癌和致畸性物质。
皮革及其制品在传统加工工艺中所用的防腐剂、杀菌剂、合成鞣剂、树脂鞣剂、固定剂等化学品中都可能含有甲醛或甲醛前体物质。
由于甲醛极易溶于水的特性，皮革及其制品中的甲醛可通过汗液的浸渍经皮肤进入人体。
长期接触低浓度的甲醛，会引起皮肤过敏及呼吸道疾病。
浓度较高时，甲醛分子与蛋白质分子发生交联、凝固，会引起人体免疫力下降，严重者还会引起细胞核基因突变。
许多国家对皮革产品中的甲醛限量制定了一系列标准，我国也制定了GB 20400-2006 《皮革和毛皮有害物质限量》标准，对甲醛提出了限值要求。
目前，检测皮革中甲醛含量常用的方法为紫外分光光度计法和液相色谱法，当样品为深色皮革，萃取液本身有颜色时，用紫外分光光度法，定性及定量均会受到萃取液颜色干扰，用液相色谱分析方法时，定性及定量也会受到其他酮类、醛类物质及样品基质的影响，本试验使用超高效液相色谱-质谱联用的方法，选用正离子模式，使用离子对，对甲醛和对肼基苯甲酸的衍生物进行分析检测，可以避免样品萃取液本身颜色的影响及其他醛类酮类物质的影响。
Waters ACQUITY UPLC H-Class 操作规程
Waters ACQUITY UPLC H-Class操作规程一、日常开机步骤1.制备流动相和清洗液—用0.22µm的滤膜过滤缓冲液，所有的缓冲液和超纯水（18.2MΩ）都要新配制，超纯水和缓冲液使用不得超过二天。
缓冲盐一定要是可挥发的，而且浓度不要大于10mM。
—有机相要使用原装进口的色谱纯。
—UPLC对洗针液的要求：强洗针液用较高比例的甲醇/水或乙腈/水（例如:80/20）；弱洗针液用纯水或含少量甲醇或乙腈的水溶液（例如:10%甲醇溶液）。
—清洗柱塞密封垫（seal wash）的溶液含5%~10%甲醇的超纯水（一般放在弱洗溶液中）。
2.打开计算机电源，进入Windows7操作系统3.依次打开SM-FIN样品管理器，QSM四元溶剂管理器电源，待各部件通过自检完成（Power状态灯右边Run状态由红色变为熄灭）4.双击桌面Empower图标，输入用户名和密码，进入Empower3QuickStart界面（默认用户名:system密码:manager）5.打开UPLC控制台(图标在运行样品界面,样品管理器SampleManager-FTN控制面板右下角）6.QSM泵和SM-FTN样品管理器启动准备操作UPLC H-Class系统启动准备操作1)四元溶剂管理器QSM启动准备操作注意：先选中UPLC控制台左边竖列中四元溶剂管理器Quaternary Solvent ManagerA.灌注柱塞杆清洗液(Prime Seal wash)点击菜单控制Control>灌注柱塞杆清洗Prime Seal wash时间可设为3分钟*注意:为避免污染，请勿循环使用Seal wash清洗液B.溶剂管路灌注(Prime Solvents)点击菜单控制Control>灌注溶剂Prime Solvents，勾选需要灌注的溶剂管路A、B、C或D，通常灌注时间可设定为3分钟；如果长时间停机，如超过7天，可适当延长灌注时间，如5分钟，点击开始Start。
超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定化妆品中环吡酮胺含量
DOI：10.13822/ki.hxsj.2021007370 化学试剂，2021，43(3)，345~349超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定化妆品中环批酮胺含量李晓宇\曹海荣\王思怿(1.上海化工研究院有限公司，上海200062;2.上海应用技术大学化学与环境工程学院，上海201418)摘要：建立了一种超高效液相色谱-串联质谱（U P L C-M S/M S)的方法用来测定化妆品中环吡酮胺的含量。
使用沃特世超高效液相色谱C l8色谱柱（1.7 ^111X2. 1m m x50m m)，以甲醇/水（含0. 1%甲酸）溶液为流动相进行梯度洗脱，流速设定为0.5 m L/r n i n，进样量设置为2 p L，在电喷雾正离子模式下（E S I+)，采用多反应监测（M R M)模式进行定性和定量测定。
结果表明，建立的分析方法在所研究的范围内浓度和峰面积具有良好的线性关系，相关系数为0.999 6,平均加标回收率为107.9%(n=3)，平均相对标准偏差（R S D)为4.80%U=6)，检出限浓度为0.066 8 m g/k g，定量限浓度为0.223 m g/k g，该 方法方便、灵敏、准确，适用于化妆品中环吡酮胺的含量检测与质量监督。
关键词：环吡酮胺；化妆品；超高效液相色谱-串联质谱法；检出限；定量限；线性相关系数中图分类号：0657.63 文献标识码：A文章编号：0258-3283(2021)03-0345-05Determination of Ciclopirox Olamine in Cosmetics by Ultra Performance Liquid Chromatography-triplequadrupole Mass Spectrometry LI Xiao-yu ,C A0Hai-rong2 ,WANG S i-y i*\ 1.Shanghai Research Institute of C h e m i c a l Industry Co., Ltd., Shanghai 200062, C h i n a； 2. School of Chemical and Environmental Engineering, Shanghai Institute of Technology, Shanghai 201418，C h i n a)，H u a x u e Shiji，2021 ,43(3) ,345 〜349Abstract: A n U P L C-M S/M S m e t h o d for the determination of ciclopirox olamine in cosmetic samples has b e e n developed. T h e U P L C separation w a s carried out on a Waters Acquity U P L C® B E H C l g c o l u m n(1.7(xmx2. 1m m x50 m m)by gradient elution using methanol/water (containing 0. 1%formic acid) system.The flow rate is 0. 5 m L/m i n a n d sa m p l e injection a m o u n t is 2 jxL. T h e electrospray ionization source in positive ion m o d e( E S I+ )w a s used for qualitative analyzing a n d quantitative analyzing of ciclopirox olamine in the multiple reaction monitoring ( M R M)m o d e.T h e developed m e t h o d has a good linear relationship between concentration a n d p e a k area in the corresponding concentration range.The linear correlation coefficient is 0. 999 6,a n d the average recoveries of standard addition is 107. 9%(n = 3) ,and the average relative standard deviation is 4. 80%(m=6) ,the limit of d etection is 0. 066 8 m g/k g,a n d the limit of quantification is 0. 223m g/k g.T h e m e t h o d is convenient,sensitive and accurate, a n d the good analytical features of the proposed met h o d m a k e i t useful to carry out the quality control of cosmetic products a n d raw materials to assure the safety of users.Key words ：ciclopirox o l a m i n e；cosmetics；U P L C-M S/M S；limit of detection；limit of quantification；linear correlation coefficient环吡酮胺是一种抗菌谱广、毒性低、渗透力强的抗真菌剂[|’2],对皮肤真菌（一种生长在皮肤、头发和指甲上的真菌）、酵母菌、放线菌、双相真菌等有较强的抑菌和杀菌作用[3]。
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定15种胆汁酸的方法分析
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定15种胆汁酸的方法分析罗腾飞;胡文胜【摘要】目的初步建立同时测定人体血清中15种胆汁酸的超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的分析方法 .方法通过同位素标记的胆汁酸作为内标,使用乙腈对血清中的胆汁酸进行提取,采用Waters BEH C18色谱柱,对15种胆汁酸进行分离.使用串联质谱进行检测,在负离子模式使用多反应监测模式定量分析血清中胆汁酸的浓度.结果 15种胆汁酸在1.0～6000.0 nmol/L范围内线性关系良好,线性相关系数r2>0.993;目标物的定量限为1.0～10.0 nmol/L;低、中、高浓度的平均回收率为97.1％～108.3％,日内、日间平均相对标准偏差小于7.8％.所开发的方法被应用于检测24例健康志愿者的血清标本,健康者的胆汁酸以甘氨酸结合型为主,游离型胆汁酸和牛磺酸结合型胆汁酸浓度相对较低.男性血清中脱氧胆酸浓度显著高于女性,男性血清中甘氨熊脱氧胆酸浓度显著低于女性,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LC-MS/MS法能有效分离并定量检测人血清中15种胆汁酸的水平,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,有望作为临床血清15种胆汁酸检测的参考方法.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2018(015)016【总页数】4页(P2412-2415)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱;胆汁酸;胆固醇【作者】罗腾飞;胡文胜【作者单位】浙江省杭州市妇幼保健院产科 310008;浙江省杭州市妇幼保健院产科 310008【正文语种】中文【中图分类】R446.1胆汁酸由胆固醇代谢产生，根据合成途径，可以分为由胆固醇为原料直接合成的初级胆汁酸和代谢产生的次级胆汁酸[1]。
胆汁酸是胆汁的重要组成成分，是人体脂肪代谢的必须物质[2]。
胆汁酸不仅能够调节葡萄糖和脂代谢，还能与肠道菌群相互作用，具有重要的临床意义[3]。
不同的胆汁酸亚型在临床上具有不同的诊断意义，因此检测每一种亚型的胆汁酸在体内水平而非简单地定量测量总胆汁酸水平，对于肝胆和肠道疾病的筛查、诊断和鉴别诊断具有重要意义[4]。
色谱仪器参数
其它名称：ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪,超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC制造商：Waters公司参数：流速范围：0.010～2.000mL/min，增量0.001mL/min 溶剂输送精度：0.075%RSD或0.02minSD 最大操作压力：15000 psi（1mL/min）延迟体积：<140μL，与系统反压无关。
交叉污染：0.005%或2nL超高速度小颗粒填料色谱柱能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度显著增加样品的通量，提高工作效率，降低分析成本节省以往一向耗时的方法开发与认证的时间超高灵敏度小颗粒技术和整体化的仪器设计，UPLCTM能在改善分离度的同时提高...UPLC超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）色谱理论认为提高色谱柱的效能（efficiency）就能增加仪器的解析度（resolution），而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法。
但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直是色谱仪器科学的瓶颈，因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如6000psi/400bar），需要更小的系统体积（死体积），并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。
Waters公司在传统HPLC系统基础上开发的超高效液相色谱（ACQUITY Ultra PerformanceLC）系统突破了色谱科学的瓶颈，充分利用了传统HPLC望尘莫及的小粒度色谱柱的优势，使色谱分离的解析度达到新的高度。
与传统的高效液相色谱（HPLC）相比，UPLC具有以下优势：1.高分离度（ultra resolution）根据液相色谱分离的解析度方程，解析度正比于柱效能的平方根而根据范迪姆特（Van Deemter）色谱理论，柱效反比于系统固定相粒度大小。
UPLC系统运用的固定相粒度能达到1.7μm，根据上述方程，该系统达到的效能将比5μm粒度系统高70%，而比3.5μm高40%。
watersacquityuplch-class_xevotqd超高效液相质谱联用仪操作规程
Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪 操作规程一、 目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。
二、 范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。
三、 环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
四、操作步骤：1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过）2.抽真空：桌面上双击Masslynx 图标，打开Masslynx 软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum 项下pump 开始抽真空。
（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在左右。
抽真空的状态至少4小时以上。
）3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate ）、流动相（设置流动相流速和比例）五、软件操作规范流程：工作软件操作流程概述：调用已有项目 选择C:\Mass Data\*****.PRO 项目准备液相 一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统准备质谱 一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart 开始调谐>查看Intellistart 中自动生成的质谱方法建立液相方法 在液相方法编辑窗口（Inlet Method ），单击Inlet，编辑参数，单击OK, 选择File > SaveAs 保存方法。
单击 Load Method ，平衡液相系统。
建立样品列表在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。
超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中三氯生和三氯卡班
1.7 μm）；以水为流动相A，甲醇为流动相B，梯度 稀释， 0.22 μm滤膜过滤至棕色进样瓶中作为待测
洗脱，柱温 30 ℃，进样量2 μl。详见表1。
溶液。
表1 高效液相色谱流动相及参考分离条件
2.1.5 标准溶液配制 准确称取三氯生和三氯卡班对
[8] 刘茵, 王明刚, 毛德文, 等. 解毒化瘀颗粒对肝衰竭大鼠外周 CTL、Treg细胞的影响研究[J]. 时珍国医国药, 2018, 29(6): 1290-1293.
[9] 康晓琳. IL-21 DNA微球疫苗的制备及其对CTL细胞抗肿瘤作用 的影响[J]. 山东医学高等专科学校学报, 2016, 38(3): 225-228, 封3.
健产品[3-5]中应用广泛。国内关于三氯生对人体是 的分析方法。
否存在致癌性仍有争议，尚无足够证据证实其对人 1 仪器与材料
体的致癌性，Zeng等[6]指出三氯生能诱导小鼠肝硬 化，有肝肿瘤促进剂的作用和肝毒性效应，且与 含氯的自来水发生反应形成氯仿。三氯卡班能引 起人体肝细胞DNA 损伤[7]，是种新型的内分泌干 扰素[8]。
收稿日期：2021-11-15 作者简介：范晨丽，硕士，主管技师，研究方向为化妆品中限用物质、禁用物质分析，E-mail：312654345@
[5] 陈珍香, 罗和平, 张金萍, 等. 胸腺肽对50例复发性口腔溃疡患 者的免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的影响[J]. 上海医药, 2016, 37(19): 31-33.
226
食品与药品 Food and Drug 2021年第 23卷第3期
2 方法与结果
品需50～60 ℃水浴约2～3 min即可溶解）。超声振
2.1 方法
荡20～30 min后，用甲醇定容至刻度，于6000 r/
H-ClassXEVO TQD 用户操作练习手册
H-Class/Xevo TQD用户操作练习手册Waters 客服电话座机拨打：8008202676 手机拨打：4008202676 电子邮箱：************************一．仪器的原理H-Class 四元泵示意图H-Class 四元泵比例阀脱气包放空阀低压混合器 Seal wash 泵初级泵蓄集泵过滤器H-Class 自动进样器Sample Manager-FL示意图Sample Manager-FL样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Sample Manager – FTN示意图Sample Manager – FTN样品盘盘号选择钮进样六通阀样品注射器Xevo TQD示意图二．软件的基本操作与实验的一般流程打开Masslynx软件，调用已有的项目或建立新的项目（project）调用已有的项目1.在桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件2.单击File > Open Project,出现如下对话框3.单击Yes选择合适的路径和合适的项目，单击OK 即可建立新项目1.在桌面上双击Masslynx图标2.单击File > Project Wizard3.出现对话框“When changing to a new project, some services are automatically closed down, Continue?”,单击Yes4.出现如下对话框输入项目名称（project name）,对项目的描述（Description）,路径（Location），在路径中建议在C盘下新建一个文件夹，并命名为MS DATA，所有新建项目都放在这个文件夹中，单击Next5.选择create using existing project as template,并以C:\Masslynx\Default.pro为模板单击Finish注意：一般建议以当前PROJECT或DEFAULT或工程师安装仪器的Installation Project为模板建立新的PROJECT，一般不建议建全新的PROJECT。
利用UPLC和XevoTQ
1沃特世解决方案Xevo™ TQ-SACQUITY UPLC ®ACQUITY UPLC BEH 色谱柱化学品MassLynx™与TargetLynx™的联合使用关键词StepWave™, T-Wave,™ 多肽生物分析、去氨加压素应用优势Xevo TQ-S 是一款新型的串联四极杆质谱系统，可提供最高灵敏度的多肽生物分析。
它具有快速的数据捕获率和双扫描多反应监测能力，可对UPLC ®产生的狭窄色谱峰进行准确定量并可准确确认色谱峰的特性。
利用UPLC 和Xevo TQ-S 对血浆中的治疗性多肽进行高灵敏度定量分析Robert S. Plumb, Gareth Booth, 和 Paul D. Rainville美国米尔福德马萨诸塞州沃特世公司尽管我们观测到的是多电荷化合物，且多肽高分子质量为1000~4000 amu ，但对于这些多肽的检测，要求质谱仪的质量检测上限为2000 m/z 才可成功对其进行分析。
在本应用纪要中，针对高灵敏度多肽生物分析，我们介绍了ACQUITY UPLC 系统和新型的高灵敏度串联四极杆质谱系统Xevo TQ-S 的使用情况。
简介多肽因其高耐受性、靶受体选择性和高效能的特性而逐渐被作为治疗药物使用。
要对生物体液中的这些治疗性多肽进行准确定量，就必须具备选择性分离技术、高分辨力色谱系统及高灵敏度检测器。
高分辨力的色谱系统可从血浆和血液中的内源性多肽中分离出目标分析物，其中部分可能是相同质量数的离子或形成相同质量数的碎片离子。
由于这些治疗性多肽可模仿或取代内源性多肽的活性，检测过程中必须对这些内源性和外源性多肽进行区分。
图 1. 采用MRM 模式对大鼠血浆提取物中的去氨加压素进行UPLC/MS/MS 定量分析。
上面的色谱图表示采用Xevo TQ-S 的新型StepWave 离子传输技术的峰值响应；下面的色谱图表示采用传统离子传输技术时的峰值响应。
StepWave 离子传输技术传统离子传输技术去氨加压素的化学结构。
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Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD
超高效液相质谱联用仪操作规程
一、目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。
二、范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。
三、环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
四、操作步骤：
1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过）
2.抽真空：桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum项下pump开始抽真空。
（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在1.30-e-5左右。
抽真空的状态至少4小时以上。
）
3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液
质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate）、流动相（设置流动相流速和比例）
五、软件操作规范流程：
工作软件操作流程概述：
5.1调用已有项目选择C:\Mass Data\*****.PRO项目
5.2准备液相一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统
5.3准备质谱一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart开始调谐>查看Intellistart中自动生成的质谱方法
5.4建立液相方法在液相方法编辑窗口（Inlet Method），单击Inlet，编辑参数，单击OK, 选择File > Save As 保存方法。
单击 Load Method ，平衡液相系统。
5.5建立样品列表
5.5.1. 在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。
Sample list的使用与Windows EXCEL表格类似。
5.5.2. File Name栏：输入文件名，如training 001.建议以3位数字结尾。
5.5.3. File Text栏：输入样品信息
5.5.4. MS File 栏：选择质谱方法
5.5.5. Inlet File栏：选择液相方法
5.5.
6. Bottle栏：输入样品瓶的位置
5.5.7. Inject Volume栏：输入进样体积
5.5.8. 可右键> Add, 增加样品表的行数
5.5.9. 保存样品表：File > Save As，输入样品表名称，将样品表保存在项目的sampledb文件夹下，建议使用有规律的命名，如检测项目或操作人加年月。
5.6 样品采集与处理点击开始进行图谱采集。
5.7 报告输出
5.8关机与维护
5.8.1日常关机：完成实验后，应根据色谱柱的使用说明或维护指南，对色谱柱进行冲洗保存。
一般如果流动相中有缓冲盐必须先将缓冲盐用高水相冲洗掉，再从高水相过渡到高有机相（如95%以上乙腈），冲洗10倍以上柱体积，停流速。
关质谱：关高压（STANDBY） > 等待去溶剂气温度降低至100度以下 > 关氮气。
5.8.2 彻底关机：①先完成日常关机；②泄真空: tune page > vacuum > vent > 当涡轮分子泵转速降到40以下时，仪器会自动关闭机械泵电源；③退出软件，计算机关机；④关质谱电源 > 关所有UPLC电源；⑤关闭UPS电源。
六、使用注意事项
6.1使用后须认真履行使用登记制度，保存实验数据并填写仪器使用记录表。
6.2所有流动相都要求经0.22um过滤器过滤，水相要用前新配，并不得超过两天。
样品必需使用0.22μm的膜过滤。
6.3长时间待机，注意关闭PDA检测器的氘灯。
6.4氩气少开，不用时可以关掉。
6.5清洗锥孔时，要关闭高压和锥孔阀门，↓箭头向下即关闭，←箭头向左即打开。
操作时必须全程佩戴无尘手套，清洗锥孔时，锥孔头要保持向上。
6.6氮气的废液要随时观察，满了就要倒掉；质谱的废液管不能放到废液的液面以下。