生物化学实验课件2 (动态)
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生物化学检验ppt课件

酶类CK-MB,α-AMY等。
底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA, UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,NH4+,CO2 等。
无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波,称为紫外光,波长从400nm-760nm 的电磁波,称为可见光。以波长(λ)为横坐标,以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线,在一段波长范围内,有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin,在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种,适用于酶活性测 定和代谢物检测,多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器,连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是:在酶反应的最适 条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反 应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有:1) 绝对法:酶活力(U/L)=△A×(反应液体积/样品体 积)×(1000/消光系数);2)相对法:酶活力 (U/L)=〔 △A (测定)/ △A (标准) 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法,它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来,可加双试剂的生化分析 仪问世后,才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度,以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是:加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2,其中要读取两次吸光度值,第一次相当于读出样 品空白的值,加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应,因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法,不过 是一种浊度测定,而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法,免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定,如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
底物/代谢产物类:包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA, UREA,Cr,Glu,TP,Alb,T-Bil,D-Bil,NH4+,CO2 等。
无机离子类:包括Ca,P,Mg,Cl 等。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
吸收曲线
波长从200nm-400nm 的电磁波,称为紫外光,波长从400nm-760nm 的电磁波,称为可见光。以波长(λ)为横坐标,以吸光度为纵坐标而绘 制出的一条曲线称为吸收曲线,在一段波长范围内,有最大吸收波长 λmax 和最小吸收波长λmin,在最大吸收波长处测定可获得最大的测 定灵敏度。
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
二、连续监测法
连续监测法属于动态法检测的一种,适用于酶活性测 定和代谢物检测,多有酶的参与。该法是通过适当的 仪器,连续测定酶促反应过程中某一反应产物或底物 的浓度随时间变化的情况。原理是:在酶反应的最适 条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反 应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定 时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速 度计算出酶活力大小代谢物的浓度。计算方法有:1) 绝对法:酶活力(U/L)=△A×(反应液体积/样品体 积)×(1000/消光系数);2)相对法:酶活力 (U/L)=〔 △A (测定)/ △A (标准) 〕标准物的 活力或浓度。
两点终点法
两点终点法也称因定时间法,它可以用一种试剂或两 种试剂。这种方法是近年来,可加双试剂的生化分析 仪问世后,才被广泛应用。优点是可以消除样品、试 剂的颜色、浊度,以及一些干扰物对测定的干扰。原 理是:加入样品→试剂1 →读取A1 →试剂2 →读取 A2,其中要读取两次吸光度值,第一次相当于读出样 品空白的值,加入试剂2至第二次读数才是实际呈色 反应,因此A=A1-A2。比浊法也是一种终点法,不过 是一种浊度测定,而不是比色测定。比浊法可分为化 学比浊法与免疫比浊法,免疫比浊法又分为透射比浊 法和散射比浊法。免疫比浊法目前主要用于血清特种 蛋白的测定,如载脂蛋白(apoAI,apoB 等)、补体类(C3、
生物化学ppt课件

05
生物化学实验技术
Chapter
分光光度法
总结词
基于物质对光的选择性吸收而建立的方法
详细描述
分光光度法是利用物质对光的吸收特性来测定物质浓度的一种方法。通过测量物质在特定波长下的吸光度值,可 以计算出物质的浓度。该方法具有操作简便、准确度高、适用范围广等优点,是生物化学实验中常用的定量分析 方法之一。
分子性质
分子的性质由其组成原子的性质 和分子结构决定,包括极性、溶 解度、挥发性等。
化学键与分子间作用力
化学键
化学键是原子间力的一种表现,主要有共价键、离子键和金 属键。
分子间作用力
分子间作用力是影响物质物理性质的重要因素,包括范德华 力、氢键等。
化学反应与能量转化
化学反应
化学反应是分子间的转化,遵循质量 守恒和能量守恒定律。
生物化学的应用领域
医学
生物化学在医学领域的应用广泛 ,如疾病诊断、治疗和药物研发
等。
农业
通过研究植物的生理生化过程,改 良作物品种,提高农业生产效率。
工业
生物化学在食品、制药、环保等领 域有广泛应用,如发酵工程、酶工 程等。
02
生物化学基础知识
Chapter
分子结构与性质
分子结构
分子由原子组成,通过共价键连 接,具有固定的空间排列。
蛋白质的结构
蛋白质具有一级、二级、 三级和四级结构,这些结 构决定了蛋白质的功能。
蛋白质的功能
蛋白质在生物体内发挥着 多种功能,如酶、运输、 结构等。
核酸的结构与功能
核酸的组成
核酸的功能
核酸由核苷酸组成,包括脱氧核糖核 酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。
DNA携带遗传信息,RNA在转录和翻 译过程中起关键作用。
临床生物化学检验实验课件

实验室评估指标体系建立
评估指标的选择
根据实验室工作特点和质量控制要求,选择具有代表性的指标,如实验结果的准确性、精 密度、可比性等。
评估方法的确定
采用定量和定性相结合的方法,对各项指标进行客观、公正的评价。例如,通过计算标准 差、变异系数等统计量来评价实验结果的精密度;通过比对实验、方法学评价等手段来评 价实验结果的准确性。
排除检测误差、个体差异等因素, 确认结果是否真实异常。
分析异常原因
结合患者临床表现、病史等信息, 分析异常结果的可能原因。
进一步检查建议
根据异常结果及其可能原因,提 出进一步检查以明确诊断的建议。
临床案例讨论
案例选择
选择具有代表性的临床案例,涉及不同疾病类型、不同生化指标异 常等。
案例讨论
分析案例中的异常生化指标,讨论其可能原因、诊断意义及治疗方 案。
实验室安全是实验工作的重要保障, 必须严格遵守实验室安全规定,注意 防火、防爆、防毒、防辐射等安全事 项。
实验过程中应穿戴实验服和防护用品, 避免直接接触有毒有害物质,注意个 人卫生和实验废弃物的处理。
实验前应认真检查实验仪器和试剂是 否完好,熟悉实验操作流程和注意事 项,确保实验过程的安全和顺利进行。
05 实验结果解读与临床应用
正常参考范围及意义
正常参考范围的确定
基于大量健康人群的检测数据,采用统计学方法确定。
正常参考范围的意义
为临床诊断和治疗提供依据,帮助医生判断患者生化指标是否正常。
注意事项
不同实验室、不同检测方法可能有不同的正常参考范围,需结合具 体情况进行解读。
异常结果分析思路
确认异常结果
根据实验需求选择合适的 样本类型,如血液、尿液、 组织液等。
生物化学ppt ppt

-
9
自从1950年以来,由于电镜技术、超速离心
技术、各种色谱技术和电泳技术、x—射线晶体衍
射技术等现代化技术和设备的发明和发展,加上
许多优秀的物理学家、化学家、微生物学家和遗
传学家参加到生物化学的研究领域中来,生物化
学进入了突飞猛进大发展的新时期。集中体现在
对蛋白质、酶和核酸等生物大分子的研究,从分
由于这些有机化合物相对分子质量 很大,所以称为生物大分子 。
除上述四大类物质外,生物体还含 有可溶性糖、有机酸、维生素、激素、 生物碱及无机离子等。
-
5
2.生物体的物质代谢、能量转换 和代谢调节
生命活动包括生物体与外界的物质 交换(摄人营养和排出废物),能量交换, 信息传递,生长发育,遗传变异,运动, 生殖,应激性等。
离提纯和一般性质的测定,发展到确定其化学组
成、序列、空间结构及其与生物学功能的联系,
进而发展到人工合成、人工摹拟,并创立了基因
工程。
-
10
1944年,麦克劳德(Macleod)和麦卡蒂 (Mc Carty)(美)证明DNA是遗传物质.
1953年,Watson和Crick 提出DNA双螺 旋结构模型
生物化学
-
1
绪论
第一章 核酸的结构与功能
第二章 蛋白质化学
第三章 酶
第四章 脂类与生物膜
第五章 糖类代谢
第六章 生物氧化和氧化磷酸化
第七章 脂类代谢
第八章 蛋白质的酶促降解及氨基酸代谢
第九章 核酸的酶促ຫໍສະໝຸດ - 解及核苷酸代谢2绪论
一、生物化学的研究范围 二、生物化学的发简史 三、生物化学与其他学科的关系 四、生物化学的应用和发展前景
生物化学实验设计PPT课件(初中科学)

。
实战演练:
(09杭州)某同学将生长状况类似的A、B二盆蚕豆幼苗分别置于
两个暗箱中,在B盆蚕豆幼苗的暗箱右侧开一小窗口,并在窗口外
侧装一个固定光源,保持其它环境条件适宜并相同。一星期后,
A,B两盆蚕豆幼苗的生长状况如图所示。请回答下列问题:
(1)该同学设计这一实验的目的是为了探究
单侧光对蚕豆幼苗生长的影响
(3)每组为什么要选用较多数量的胚 减少由于种子死亡 ?
或遗传差异带来的误差
实战演练:
(4)小芳同学认为叶绿素的合成除了需要镁等矿物质 元素外,还需要其他的一些环境条件。她设计了如下 表的方案。
分析小芳同学的实验设计,你认为她要研究的问题
是 叶绿素的合成是否需要光
。
根据实验设计方案提出研究问题的技能是:
。
化学实验设计和评价
❖ 化学实验设计题和实验评价题是对学生进行实验综合能力考 查的题型之一,是当前课程改革和中考所关注的热点。其命 题方式通常有:①设计反应原理 ②设计实验装置 ③设计操 作程序 ④侧重于某一要求的综合设计并含定量设计要求⑥以 批评的思想方法对所提供的实验方案进行评价。
❖ 解答实验设计题时,必须遵循“四性”:科学性、可行性、 规律性、创新性。即原理正确、操作简便、现象明显、药品 经济、结论可信、有创新意识。解答实验评价题时,要环绕 题目提供的多种方案,从原理是否科学合理、操作是否简单 可行、所用试剂是否经济、实验现象是否明显、是否体现 “绿色化学”等方面进行评价。
不同浓度的重金属污染液中的种子萌发率都比
蒸馏水中的低,幼苗根长也较短。随着重金属浓度 的升高,种子萌发率降低,幼苗根长也缩短。
活动二:
设计一份实验记录单
培养皿
污染液 浓度 萌发率
生物化学ppt课件

同学们好!
现在开始上课!
生物化学
生物化学
第一章 蛋白质化学 第二章 酶化学 第三章 维生素与辅酶 第四章 生物氧化 第五章 糖代谢 第六章 脂代谢 第七章 核酸的生物化学 第八章 蛋白质代谢 第九章 代谢的调节控制
绪论
▪ 生物化学的概念 ▪ 生物化学研究的主要内容 ▪ 生物化学的研究对象 ▪ 生物化学与其他学科的关系 ▪ 生物化学的发展简史 ▪ 生物化学学习方法及参考用书
2 研究它们在生物体内的化学变化及与外界进行 物质和能量交换的规律,即物质代谢和能量代谢 --动态生物化学
3 研究这些物质的结构、代谢和生物功能与复杂 的生命现象之间的关系--功能生物化学
4 生物体遗传信息的传递、表达及代谢调节
三、生物化学的研究对象
1、以所研究的生物对象之不同 动物--动物生物化学 植物--植物生物化学 微生物--微生物生物化学
(一) 学习方法
• 在理解的基础上掌握生物化学的基本原理 • 注重生物化学理论研究的思路和方法 • 结合专业实际或生活实际理解所学知识 • 强化实验技能学习及实际操作能力锻炼 • 善于总结思考并勤于练习
(二)教材及参考书
教材: 金凤燮,生物化学,中国轻工出版社,2005年
参考书:
1.魏述众:生物化学,中国轻工出版社 2.王镜岩等编:生物化学(上、下),人民教育出版社 3.聂剑初等:生物化学简明教程,高教出版社 4. Biochemistry. Worthpublishers.Inc. 5.沈仁权,生物化学教程,高等教育出版社 6.大连轻工业学院主编:生物化学(工业发酵专业用)轻 工出版社85年出版 7.郑集等:普通生物化学(第三版),高教出版社,1998 年出版
生理机能的协调关系,从而对一定的 生理机能给以化学解释。
现在开始上课!
生物化学
生物化学
第一章 蛋白质化学 第二章 酶化学 第三章 维生素与辅酶 第四章 生物氧化 第五章 糖代谢 第六章 脂代谢 第七章 核酸的生物化学 第八章 蛋白质代谢 第九章 代谢的调节控制
绪论
▪ 生物化学的概念 ▪ 生物化学研究的主要内容 ▪ 生物化学的研究对象 ▪ 生物化学与其他学科的关系 ▪ 生物化学的发展简史 ▪ 生物化学学习方法及参考用书
2 研究它们在生物体内的化学变化及与外界进行 物质和能量交换的规律,即物质代谢和能量代谢 --动态生物化学
3 研究这些物质的结构、代谢和生物功能与复杂 的生命现象之间的关系--功能生物化学
4 生物体遗传信息的传递、表达及代谢调节
三、生物化学的研究对象
1、以所研究的生物对象之不同 动物--动物生物化学 植物--植物生物化学 微生物--微生物生物化学
(一) 学习方法
• 在理解的基础上掌握生物化学的基本原理 • 注重生物化学理论研究的思路和方法 • 结合专业实际或生活实际理解所学知识 • 强化实验技能学习及实际操作能力锻炼 • 善于总结思考并勤于练习
(二)教材及参考书
教材: 金凤燮,生物化学,中国轻工出版社,2005年
参考书:
1.魏述众:生物化学,中国轻工出版社 2.王镜岩等编:生物化学(上、下),人民教育出版社 3.聂剑初等:生物化学简明教程,高教出版社 4. Biochemistry. Worthpublishers.Inc. 5.沈仁权,生物化学教程,高等教育出版社 6.大连轻工业学院主编:生物化学(工业发酵专业用)轻 工出版社85年出版 7.郑集等:普通生物化学(第三版),高教出版社,1998 年出版
生理机能的协调关系,从而对一定的 生理机能给以化学解释。
【医学ppt课件】生物化学(Biochemistry)

2003年版; 3. Hames B et al., Instant notes in biochemistry(影印版),
1999年版。
10
物质代谢变化与生理机能的关系——机能生物化学。
5
(三) 基因表达及其调控
转录
翻译
DNA
RNA
Pr
基因: 携带一定遗传信息的特定DNA片断以及相关的 调控序列;
(四) 专题生化
肝胆生化、水盐代谢和酸碱平衡等。
6
四. 生 物 化 学 与 医 药 学 的 关 系
与医学关系 2. 与药学关系 3. 与其他学科关系
【医学ppt课件】生物化学 (Biochemistry)
第一章 绪 论 (introduction)
2
一. 生物化学
主要是运用化学的理论和方法,从分子水平研究生 物体的化学组成及其在生命活动过程中化学变化规律 的一门学科,从而揭示生命现象的化学本质。
又称生命的化学(chemistry of life)。
3
二. 研 究 对 象
(主要针对组成生物体的六大营养素): 糖、脂、蛋白质、核酸、水和无机盐等
4
三. 主要内容
(一)生物体的物质组成及其结构和功能
蛋白质、核酸和多糖 —— 生物大分子 / 生物信息分子 物质的组成、结构与化学性质等 —— 静态生物化学;
(二) 物质代谢及其代谢调节
物质在体内的代谢变化规律、能量代谢及其代谢调节是生 物化学的中心内容——动态生物化学;
7
五. 学 习 生 化 的 目 的
1. 了解生物体内物质的化学变化过程; 2. 从分子水平阐明疾病发生、发展的机制; 3. 更科学、有效地诊断与防治疾病,并帮助阐明中医
药的作用机理; 4. 指导新药的研制、提高对重大疾病的防治水平; 5. 为其他医药学基础课及临床医学打下扎实的基础。
1999年版。
10
物质代谢变化与生理机能的关系——机能生物化学。
5
(三) 基因表达及其调控
转录
翻译
DNA
RNA
Pr
基因: 携带一定遗传信息的特定DNA片断以及相关的 调控序列;
(四) 专题生化
肝胆生化、水盐代谢和酸碱平衡等。
6
四. 生 物 化 学 与 医 药 学 的 关 系
与医学关系 2. 与药学关系 3. 与其他学科关系
【医学ppt课件】生物化学 (Biochemistry)
第一章 绪 论 (introduction)
2
一. 生物化学
主要是运用化学的理论和方法,从分子水平研究生 物体的化学组成及其在生命活动过程中化学变化规律 的一门学科,从而揭示生命现象的化学本质。
又称生命的化学(chemistry of life)。
3
二. 研 究 对 象
(主要针对组成生物体的六大营养素): 糖、脂、蛋白质、核酸、水和无机盐等
4
三. 主要内容
(一)生物体的物质组成及其结构和功能
蛋白质、核酸和多糖 —— 生物大分子 / 生物信息分子 物质的组成、结构与化学性质等 —— 静态生物化学;
(二) 物质代谢及其代谢调节
物质在体内的代谢变化规律、能量代谢及其代谢调节是生 物化学的中心内容——动态生物化学;
7
五. 学 习 生 化 的 目 的
1. 了解生物体内物质的化学变化过程; 2. 从分子水平阐明疾病发生、发展的机制; 3. 更科学、有效地诊断与防治疾病,并帮助阐明中医
药的作用机理; 4. 指导新药的研制、提高对重大疾病的防治水平; 5. 为其他医药学基础课及临床医学打下扎实的基础。
精品课件-生物化学PPT课件

生物化学 的概念
生物化学是阐明生物分子是如何相互作用而形成 复杂而高效的生命现象的科学。
生物化学是一门运用化学的原理和方法研究生命 现象的本质,揭示生命奥秘的科学。
简单地说生物化学就是生命的化学。
生物化学的 研究内容
① 研究构成生物体的分子基础生物分子的 化学组成、结构、性质和功能。
动态生物化学阶段:奠基时期(20世纪初-1950年)
由于分析鉴定技术的进步,尤其是放射性同位素示踪技术的 应用,生物化学进入深入发展时期。 –科学家对生物物质代谢进行了广泛深入的研究,基本阐明:
(1)酶的化学本质 (2)与能量代谢有关的物质代谢途径
机能生物化学阶段:大发展时期(1950- )
素、辅酶、激素、核苷酸和氨基酸等。 其余都是某些生物小分子的聚合物,分子量很大,一
般在一万以上,有的高达1012,因而称为生物大分子,
如 多糖、脂、核酸和蛋白质。
1、碳架是生物分子结构的基础
• 碳元素一般占细胞干重的50%以 上。
• 碳原子既难得到电子,又难失去 电子,最适于形成共价键。
• 碳原子成键能力很强,且是四面 体构型,因此它自相结合可以形 成结构各异的生物分子骨架(碳 架)。
– 科学家对生物的研究已从整体水平逐步深入到细胞、 亚细胞、分子水平。伴随实验手段、技术(电镜、超 离心、色谱、电泳等)的不断改进,使得对生物大分 子结构及功能的研究也更加深入。
– 50年代以后生物化学迅猛发展,每年的诺贝尔生理 学/医学奖和化学奖的大部分奖项都是与生物化学领 域相关的。
– 美国、法国、德国、英国在近代生物化学发展史贡献 突出。
5、遗传学,研究核酸、蛋白质的生 物合
生物化学的应用
生物化学的原理和技术在生产实践中也得到 广泛的应用。如与农学、某些轻工业(如制药、酿 造、皮革、食品等)、医学都有密切关系,很多问 题都需要从生化的角度、利用生化的方法才能了 解。
《生物化学》教学课件:核苷酸代谢 (2)

核苷酸代谢
Metabolism of Nucleotide
1
概述
核苷酸是核酸的基本结构单位。 人体内的核苷酸主要由机体细胞自身合成。
因此,核苷酸不属于营养必需物质。
2
核酸的消化与吸收
核酸酶
核酸
核苷酸 核苷酸酶
nucleic acid
nucleotide
(肠)
磷酸
核苷
nucleoside
核苷酶
PRPP IMP
IMP AMP GMP
腺苷酸 AMP ATP 代琥珀酸
XMP GMP GTP
特点:自身产物反馈抑制,彼此产物相互促进 23
(二)嘌呤核苷酸的补救合成
原料
游离的嘌呤碱或嘌呤核苷 (如:腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌 呤和腺嘌呤核苷)
场所
脑、骨髓
24
重要酶:
APRT
腺嘌呤磷酸核糖转移酶
HGPRT
dUDP
dUMP
dTMP
5-氟尿嘧啶
54
二、嘧啶核苷酸的分解代谢
核苷酸酶
嘧啶核苷酸
核苷
PPi
1-磷酸核糖
核苷磷酸化酶
嘧啶碱
55
胞嘧啶
NH3
尿嘧啶
胸腺嘧啶
二氢尿嘧啶
H2O
β-脲基异丁酸
H2O
β-丙氨酸 TAC
CO2 + NH3 肝
尿素
β-氨基异丁酸 TAC
代谢终产物: 磷酸、核糖、β -氨基酸、NH3、CO2 56
C OO
P
44
两种氨基甲酰磷酸合成酶的异同:
CPSⅠ
CPSⅡ
分布
线粒体(肝C)
氮源 功能
NH3 合成尿素
Metabolism of Nucleotide
1
概述
核苷酸是核酸的基本结构单位。 人体内的核苷酸主要由机体细胞自身合成。
因此,核苷酸不属于营养必需物质。
2
核酸的消化与吸收
核酸酶
核酸
核苷酸 核苷酸酶
nucleic acid
nucleotide
(肠)
磷酸
核苷
nucleoside
核苷酶
PRPP IMP
IMP AMP GMP
腺苷酸 AMP ATP 代琥珀酸
XMP GMP GTP
特点:自身产物反馈抑制,彼此产物相互促进 23
(二)嘌呤核苷酸的补救合成
原料
游离的嘌呤碱或嘌呤核苷 (如:腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌 呤和腺嘌呤核苷)
场所
脑、骨髓
24
重要酶:
APRT
腺嘌呤磷酸核糖转移酶
HGPRT
dUDP
dUMP
dTMP
5-氟尿嘧啶
54
二、嘧啶核苷酸的分解代谢
核苷酸酶
嘧啶核苷酸
核苷
PPi
1-磷酸核糖
核苷磷酸化酶
嘧啶碱
55
胞嘧啶
NH3
尿嘧啶
胸腺嘧啶
二氢尿嘧啶
H2O
β-脲基异丁酸
H2O
β-丙氨酸 TAC
CO2 + NH3 肝
尿素
β-氨基异丁酸 TAC
代谢终产物: 磷酸、核糖、β -氨基酸、NH3、CO2 56
C OO
P
44
两种氨基甲酰磷酸合成酶的异同:
CPSⅠ
CPSⅡ
分布
线粒体(肝C)
氮源 功能
NH3 合成尿素
生物化学2(共73张PPT)

氨基酸缩写符号:略
氨基酸的理化性质
①PI,两性解离 概念: ②紫外吸收:280nm(色、苯、酪) ③颜色反应、“茚三酮”570nm
3. 掌握肽键、多肽链一级结构和高级结构的概念
[肽]
概念:2个aa之间
→以酰胺缩合,此酰胺键称为
肽键。-CONHC-
肽链:有方向性自N→C,链内的aa叫残基。
生物活性肽:10肽以内为寡肽,MW. 1万以内为多
蛋白质变性是由于 A. 蛋白质的一级结构的改变 B 蛋白质亚基的解聚 C 蛋白质空间构象的破坏
D 辅基的脱落 E 蛋白质水解
答案:[C]
[评析]: 本题考点:蛋白质变性的概念
在某些理、化因素作用下,使蛋白质特定的空间构象破坏,导致 其理化性质 改变、生物学性质改变,称为蛋白质的变性作用。一般认为蛋白质变性主要发生二 硫键和非共价键破坏,即空间构象的破坏并不涉及一级结构的改变。
酶
[概念]:
缺O 时,葡萄糖分解生成乳酸的过程。 主要: 肝 70 ~ 80 %
2 [调节]:四个关键酶。
FFA ATP CoA 脂酰CoA +AMP + PPi
[部位]:胞液。 特点:Km不变, Vmax↓
核酸的一级结构、空间结构与功能。
白三烯:过敏反应的慢反应物质,促进炎症和过敏反应等
抗代谢物的作用及机制。
米式常数的意义
①Km为速度是最大反应速度一半时的[S] ②[S]≥Km, Km不计, V=Vmax ③[S]≤Km,分母的[S]不计,反应速度V与[S]成正比
④Km反映酶与作用物的亲合力,Km大,亲合力小; Km小,亲合力大。
(2)酶浓度的影响:V与酶浓度成正比。 (3)pH的影响:最适pH——酶活性最大时的pH。
氨基酸的理化性质
①PI,两性解离 概念: ②紫外吸收:280nm(色、苯、酪) ③颜色反应、“茚三酮”570nm
3. 掌握肽键、多肽链一级结构和高级结构的概念
[肽]
概念:2个aa之间
→以酰胺缩合,此酰胺键称为
肽键。-CONHC-
肽链:有方向性自N→C,链内的aa叫残基。
生物活性肽:10肽以内为寡肽,MW. 1万以内为多
蛋白质变性是由于 A. 蛋白质的一级结构的改变 B 蛋白质亚基的解聚 C 蛋白质空间构象的破坏
D 辅基的脱落 E 蛋白质水解
答案:[C]
[评析]: 本题考点:蛋白质变性的概念
在某些理、化因素作用下,使蛋白质特定的空间构象破坏,导致 其理化性质 改变、生物学性质改变,称为蛋白质的变性作用。一般认为蛋白质变性主要发生二 硫键和非共价键破坏,即空间构象的破坏并不涉及一级结构的改变。
酶
[概念]:
缺O 时,葡萄糖分解生成乳酸的过程。 主要: 肝 70 ~ 80 %
2 [调节]:四个关键酶。
FFA ATP CoA 脂酰CoA +AMP + PPi
[部位]:胞液。 特点:Km不变, Vmax↓
核酸的一级结构、空间结构与功能。
白三烯:过敏反应的慢反应物质,促进炎症和过敏反应等
抗代谢物的作用及机制。
米式常数的意义
①Km为速度是最大反应速度一半时的[S] ②[S]≥Km, Km不计, V=Vmax ③[S]≤Km,分母的[S]不计,反应速度V与[S]成正比
④Km反映酶与作用物的亲合力,Km大,亲合力小; Km小,亲合力大。
(2)酶浓度的影响:V与酶浓度成正比。 (3)pH的影响:最适pH——酶活性最大时的pH。
第二章--生物化学检验基本知识PPT课件

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二、生物化学检验报告单的发放
即使是临床医护人员能够通过“医院信息系统(HIS)”在医生 工作站直接读取检验结果的临床科室或医疗单位,实验室也 应该用电话向临床报告,这是考虑到临床一线医护人员可能 会忙于抢救而不能及时观察到检测结果需要提醒的缘故。
“危急值”报告不同于“急诊检验”报告,是两个完全不同
4.技术要求高的检测项目 检测系统本身的不稳定因素,影响检验结果可靠性的检
验项目,或者检测系统本身存在着影响检验质量的诸多人
为环节,对检验人员的理论和技能要求较高的检验项目。
(三)急诊生化检验
急诊检验是实验室为了配合临床对危、急、重症患者的诊 断和抢救而实施的一种特需检验。如血气分析、电解质、 淀粉酶、心肌标志物、血糖等。
2.标本难以获得的检测项目
某些检验项目的标本获得比较困难,或者因为标本数 量极少,对标本的处理和保存都不能按规定要求和程序 进行,甚至不能进行复检的检验项目。
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一、生物化学检验的项目
3.发病率低或成本高的检测项目 由于某疾病的发病率很低造成标本数量过少或检验成 本过高的检验项目。
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第二节 生物化学检验的标本
一、标本的采集
生物化学检验最常用的标本是血液,其次是尿液,此外还有 脑脊液、浆膜腔积液、羊水等各种体液。 正确采集标本是获得准确、可靠检验结果的关键。
标本采集时应尽可能避免一切干扰因素,选择最佳的采集时 间,减少饮食和药物影响,减少昼夜节律带来的干扰。对于 有创伤性的操作,操作前应先与患者沟通建立互信,消除患 者的恐惧和紧张情绪。
剂及抗凝原理;尿液标本的采集方法;标本收检、分离、储存和转运;生物 化学检验项目类型;危急值、危急值报告的概念;检验报告单的发放方式。
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二、实验原理
三、实验仪器和试剂
1、主要仪器: (1)旋光仪 (2)电子天平(感量0.0001g) 2、试剂: ⑴1%盐酸溶液 ⑵30%硫酸锌溶液。 ⑶15%亚铁氰化钾溶液。
四、实验步骤
1.样品的处理 在电子天平上称取小麦粉2.5000g置于三角瓶中→加入 50mL 1%HCl混成浆状(不能有结块)→沸水浴中准确加热 15min→先加1mL 30% ZnSO4混匀→再加1mL 15%亚铁氰 化钾混匀→移至100mL容量瓶中加水定容混匀后过滤→弃去 最初15mL收集其余滤液。 2.旋光度测定
五、结果计算
斑点中心到点样点距离 (b) Rf 展开剂前沿移动距离( a)
六、思考题
1.计算出各种氨基酸的Rf值,并根据Rf值鉴定出混 合氨基酸中的各组分,在层析图谱上标出各氨基酸 名称。 2.对氨基酸移动快慢的原因给予简要分析。
实验三
一、实验目的
蛋白质分子量测定
掌握电泳基本原理、分类、影响因素 , SDS-聚丙烯酰胺 凝胶电泳用途,凝胶制备。
三、仪器和试剂
1、主要仪器: (1)层析缸 (2)微量进样器 (3)喷雾器 2、试剂 : (1)展开剂:乙醇:水:冰乙酸=50:10:1 (2)氨基酸溶液:0.5%的赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸溶 液及它们的混合液 (3)显色剂:0.1%水合茚三酮丙酮溶液。
四、实验步骤
1、平衡:将展开剂(乙醇:水:冰乙酸=50:10:1)放入培养 皿中置于密闭容器内使其充满展开剂(24h左右) 2、点样:取滤纸1张用铅笔在距下方2cm处划线并将所得线段 分成 5等分从而得到 4个标记点,用微量进样器分别取 5μL下列 样品①phe②lys③pro④混合Aa向4个标记点上加样(样品扩散 中Ø≤1cm) 3、展层:将滤纸卷成筒状且不能够重叠,并用棉线扎紧然后垂 直放入培养皿中进行展层 2h(当展开剂沿到达滤纸长度三分之 二时,即可取出)测量展开剂前沿移动距离(a) 4、显色:用0.1%茚三酮-丙酮溶液朝点样面喷雾(不要喷得太 多)然后将滤纸置于电炉上方20cm处加热直至斑点出现为止, 测量各斑点中心到点样点距离(b)
五 、 结果计算
1、计算相对迁移率:
蛋白质谱带迁移距离 相对迁移率(MR) 染色前胶长 脱色后胶长 指示剂迁移距离
2、以相对迁移率MR为横坐标、LgMr为纵坐
标,作出分子量标准曲线。
3、求分子量
五、注意事项
1.30%Acr-Bis是神经毒化合物,操作时要小心,做好个 人防护 2.过硫酸铵需现用现配 3.过硫酸铵和TEMED在灌胶前加入即可 4.用微量加样器上样时,勿刺破胶面
五、结果计算
β-淀粉酶活力=(α+β)淀粉酶总活力-α-淀 粉酶活力
六、附 注
1.样品提取液的定容体积和酶液稀释倍数可根据不同材 料酶活性的大小而定。 2.为了确保酶促反应时间的准确性,在进行保温这一步 骤时,可以将各试管每隔一定时间依次放入恒温水浴,准 确记录时间,到达5min时取出试管,立即加入3,5-二硝基 水杨酸以终止酶反应,以便尽量减小因各试管保温时间不 同而引起的误差。同时恒温水浴温度变化应不超过 ±0.5℃。 3.如果条件允许,各实验小组可采用不同材料,例如萌 发1d、2d、3d、4d的小麦种子,比较测定结果,以了解 萌发过程中这两种淀粉酶活性的变化。
9. 实验完毕后,要求整理、清洁实验台面,检查水、电、气源,打扫实验室卫生。
10. 实验记录经教师签名认可后,方可离开实验室。
实验一
一、实验目的
1. 2.
淀粉含量测定
掌握旋光仪的操作使用。 了解旋光法测粗淀粉的基本原理。 在加热及稀盐酸的作用下,淀粉水解并转入盐酸溶 液中。在一定的水解条件下,不同谷物淀粉的比旋 光度是不同的。其在 171 ~ 195 之间,因此可用旋 光法测定粗淀粉的含量。
1. 进入实验室,须遵守实验室纪律和制度,听从老师指导 2. 未穿实验服、未写实验预习报告者不得进入实验室进行实验。 3. 进入实验室后,要熟悉周围环境,熟悉防火及急救设备器材的使用方法和存放位置, 遵守安全规则。
4. 实验前,清点、检查仪器、明确仪器规范操作方法及注意事项,否则不得动手操作。
5. 使用药品时,要求明确其性质及使用方法后,据实验要求规范使用。禁止使用不明确 药品或随意混合药品。 6. 实验中,保持安静,认真操作,仔细观察,积极思维,实验过程中必须有原始记录, 不得擅自离开岗位。 7. 实验室公用物品(包括器材、药品等)用完后,应归放回原指定位置。实验废液、废 物按要求放入指定收集器皿。 8. 爱护公物,注意卫生,保持整洁,节约用水、电、气及器材。
Henan University of Technology
生物化学实验
河南工业大学生物工程学院 生物技术系 2015.3
实验内容
1. 淀粉含量测定 2. 氨基酸的纸上层析 3. 蛋白质分子量测定 4. 淀粉酶活力测定 5. 蛋白质含量测定 6. 甲醛滴定测氨基氮 7. 酵母RNA的提取、组分鉴定和含量测定 8. 赖氨酸含量测定 9. 凝胶层析法分离蛋白质 10. 蔗糖酶的提取与部分纯化 11. 蔗糖酶活力的测定 12. Bradford法测定蛋白质含量
教学目的
生物化学是专业基础实验课,其先修课程为
无机化学、分析化学和有机化学 。其目的是:
学习和掌握生物技术,培养动手观察和思维能
力。
学习方法
1、预习:实验前必须进行充分的预习和准备,并写出预习报告,做到心中 有数,这是做好实验的前提。 2 、操作:应按拟定的实验操作计划与方案进行。做到轻(动作轻、讲话 轻),细(细心观察、细致操作),准(试剂用量准确、结果及其记录 准确),洁(使用的仪器清洁,实验桌面整洁,实验结束把实验室打扫 清洁)。 3、在实验全过程中,应集中注意力,独立思考解决问题。自己难以解释时 可请老师解答。
沸水浴中准确煮沸5min后流水冷却至室温
蒸馏水(mL) A540 16 16 16 16 16 16
以麦芽糖含量(mg)为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 淀粉酶液的制备: 在电子天平上称取小麦芽(在9428冰箱内,用后放回)0.5g置于研钵中 加20mL水研成浆状→转移至离心管中2000转/分离心5min(注意离心前 对称放置的离心管应在天平上平衡)→取上清液于100mL容量瓶中加水 定容混匀→即得淀粉酶原液→用于α-淀粉酶活力测定 吸取原液5mL于100mL容量瓶中加水定容即得淀粉酶稀释液→用于总酶 活力测定。 3. 淀粉酶活力测定 ①α-淀粉酶活力测定 吸取原液1mL于具塞试管中→70℃保温15min用于钝化β-淀粉酶→加 1mL 1%淀粉置于40℃水浴中保温5min→加1% 3.5一二硝基水杨酸2mL 沸水加热5min后加水至20mL混匀测A1(用1#管调零) ②总酶活力测定 吸取稀释液1mL于具塞试管中→加1mL 1%淀粉40℃保存5min→加入1% 3.5一二硝基水杨酸2mL沸水加热5min后加水至20mL混匀测A2(用1#管 调零)
玉米
184.6
六、思考题
样品加盐酸处理时,煮沸时间少于或多于 15min会对测定 结果产生什么影响?
实验二
一、实验目的
氨基酸的纸上层析
通过对氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方 法。
二、实验原理
纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析,滤纸纤维上的 -OH具有亲水性,因此能吸附一层水作为固定相,而通常 把有机溶剂作为流动相。有机溶剂自上而下流动,称为下行 层析;自下而上流动,称为上行层析。流动相流经支持物时 与固定相之间连续抽提,使物质在两相之间不断分配而得到 分离。
取滤液20mL置于旋光管中,先用1%HCl 调节旋光仪“0” 点,然后将样品溶液放入旋光仪中测α
五 、 结果计算
淀粉含量(%)=
100 100 20 D .L W
20 其中: D 182.7
L 2dm W:样品质量(g)
表1-1不同谷物淀粉的比旋光度 品种 小麦 黑麦 大麦 水稻 [α]D20 182.7 184.0 181.5 185.9 品种 马铃薯 小米 荞麦 燕麦 [α]D20 195.4 171.4 179.5 181.3
六、思考题
根据本实验所学知识,自行设计豌豆凝集素的分离纯化实验。
实验四
淀粉酶活力测定
一、实验目的
学习和掌握测定淀粉酶(包括α-淀粉酶和β-淀粉酶)活力 的原理和方法。
二、实验原理
淀粉酶主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。α-淀粉酶可作 用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三 糖、糊精等还原糖,β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行 水解,生成麦芽糖。淀粉酶催化产生的这些还原糖能使 3,5二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
4、写实验报告:做完实验后,应解释实验现象,并作出结论,或根据实验 数据进行计算和处理。主要包括: a 、目的, b 、原理, c 、操作步骤及 实验性质、现象, d 、数据处理(含误差原因及分析), e 、讨论, f 、 思考题回答。
实验室守则
生物化学实验室守则是学生实验正常进行的保证,学生进入实验室必须遵守 以下规则:
其反应如右图:
淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比。用标准浓度 的麦芽糖溶液制作标准曲线,用比色法测定淀粉酶作用于淀 粉后生成的还原糖的量,以单位重量样品在一定时间内生成 的麦芽糖的量表示酶活力。 淀粉酶存在于萌发后的禾谷类种子中,,其中主要是α-淀粉酶 和β-淀粉酶。两种淀粉酶特性不同,α-淀粉酶不耐酸,在 pH3.6以下迅速钝化。β-淀粉酶不耐热,在70℃15min钝化。 根据它们的这种特性,采用加热的方法钝化β-淀粉酶,测出α淀粉酶的活力。在非钝化条件下测定淀粉酶总活力(α-淀粉酶 活力+β-淀粉酶活力),再减去α-淀粉酶的活力,就可求出β淀粉酶的活力。