3.2月季的花药培养
课件5：3.2 月季的花药培养
3.接种和培养
(1)在 无菌条件下,从灭菌后的花蕾中取花药接种到培 养基上,在25 ℃下培养,此时不需要光照。此时可进行 转移培养,即将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便 进一步分化出再生植株。
(2)一般经过20~30 d培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组 织或者胚状体。
(3)在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株, 常常会出现 染色体倍性 的变化,主要是营养细胞的 细胞核和生殖细胞的细胞核融合造成的,因此还需要对 培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
④ 单核居中 期和单核靠边期两个时期。
4.双核期的双核包括花粉管细胞核和⑤ 生殖细胞核,
进而形成两个细胞,一个是营养细胞,一个是 ⑥生殖细胞 。 5.花粉粒形成精子还要经过⑦ 一次有丝分裂 过程
。
二、产生花粉植株的两种途径
一种是花粉通过⑧ 胚状体 阶段发育为植株,一种是花 粉在诱导培养基上先形成⑨ 愈伤组织 ,再将其诱导 分化成植株。
【答案】(1)这两条途径取决于培养基中激素的种类及 其浓度配比。(2)影响花药培养的主要因素:材料的选择 和培养基的组成等。(3)①花期:初花期的花蕾营养状态 及生理状态会比较好,比后期的更容易产生花粉植株,能 提高花粉的诱导成功率。一般,月季的花药培养时间选 在五月初到五月中旬,即月季的初花期。②合适的花粉 发育时期:选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功 率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向 细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。 为了挑选到单 核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。
4.据报道,花粉是一种很好的保健品,可以美容抗衰老,能 够增强体质,增强精神,还可以快速地消除身体疲劳。它 既可以外用也可以内服,是强身健体、美容养颜的佳品
。花粉产自各种植物的花朵。下图表示花粉的形成过 程,据图回答下列问题。
【人教版】高一生物选修一：3.2《月季的花药培养》学案(含答案)
课题2 月季的花药培养1．说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。
2．说出影响花药培养的因素。
3．学习花药培养的基本技术。
4．尝试用月季或其他植物的花药进行培养。
一、被子植物的花粉发育1．被子植物的花粉是在______中由____________经过______分裂而形成的，花粉是单倍体的生殖细胞。
2．被子植物花粉的发育要经历______________时期、______期和______期等阶段。
二、产生花粉植株的两种途径 ⎭⎪⎬⎪⎫1.花药中的花粉 ――→脱分化――→分化丛芽2.花药中的花粉 ――→脱分化 ――→再分化丛芽――→诱导生根 ―→移栽 两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中______的种类及其__________。
三、影响花药培养的因素1．诱导花粉植株成功率高低的主要影响因素是____________与______________。
2．材料的选择与不同植物、同种植物亲本的生理状况，以及花粉发育时期有关。
从花药来看，应当选择花期早期的花药；从花粉来看，应当选择______期的花粉；从花蕾来看，应当选择____________的花蕾。
此时期的营养状态及生理状态比较好，对离体刺激敏感。
思考：为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？3．亲本植株的生长条件、材料的____________以及__________等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作1．材料的选取选择花药时，一般要通过______来确定花粉是否处于适宜的发育时期，此时需要对花粉________进行染色，最常用的方法有__________法和焙花青—铬矾法，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。
2．材料的消毒通常先将花蕾用体积分数为____________浸泡大约30 s ，立即取出，在无菌水中清洗。
取出后用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分，再用质量分数为______________溶液消毒，最后用无菌水冲洗3～5次。
高中生物选修一：3.2月季的花药离体培养
为什如么何不花选选瓣到择松单单动核核会期期给的之材花前料药或的？之消后毒的带花 来药困接难种？？
单单核核期期选花之之择瓣前后完松的的全动花花未后药药开，，，放微质花的生地瓣花物幼已蕾就嫩有可，些能极松侵易动入破，碎又。给材料 的消毒到带花来药困，难给。材料的消毒带来困难。.Biblioteka 11一. 基础知识
（四）影响花药培养的因素
2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先 将花药用_卡__诺__氏__固__定__液___固定20min。该试剂 的配制方法是将____无__水__酒__精__与__冰__醋__酸按体积 比为____3__：_1的比例混合均匀。
.
18
二. 实验操作
（二）材料的消毒
阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图：
2 生殖
有丝
居中 靠边
生殖 有丝
营养 花粉管
1个小孢子母细胞产生几个花粉粒？最终产生几个精子？
.
8
一. 基础知识 （三）产生花粉植株的两种途径
1.途径
脱分化
分化
花粉
胚状体
丛芽
脱分化
再分化
花粉
愈伤组织
丛芽
生根 移栽
脱愈形再分状化分伤分态成化组化的根： 织 ：薄或：由脱壁芽高分细细等度化胞胞器分产排官化生列的的的疏过植愈松程物伤而组组无织织规或继则细续，胞进为先产行高芽生培度愈养液伤，泡组又化织可的的以呈过重无程新定
2.外因 1）培养基的组成
MS培养基
2) 其他外因
➢ 亲本植株的生长条件 环境理想的人工气候室
➢ 材料的低温预处理 4-10℃，10-20d
➢ 接种的密度
.
12
二. 实验操作
（一）材料的选取
3.2月季的花药培养
期、双核期等阶段。
（一）被子植物的花粉发育
1花粉母 减分 4个小孢子(小孢子 细胞（2n） 四分体)（n） 单核居中期（n） 单核靠边期（n） 有分
1个花粉管细胞核（n） 1个生殖细胞核（n） 有分
2个精子
注意：
• ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管 细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） • ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前， 生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子， 这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个 精子。 • ③两个精子和一个营养核的基因型相同。
实验操作
材料选取
材料和 消毒
接种和 培养
（一）材料选取
月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的 重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向 细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法：醋酸洋红法。 某些植物的花粉细胞核不易着色， 采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成 蓝黑色。
取材为花药，培养的为 单倍体幼苗，植株弱小， 高度不育，必须用秋水 仙素处理，使染色体加 倍，恢复正常植株的染 色体数，而且为纯种。
化形成愈伤 花药培养技术 组织，再分 化成丛芽， 诱导出根， 然后进行移 栽。
课堂检测 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确 的是（ BD ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂 的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体 时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞 一侧，再移到细胞中央
要彻底除去花丝？
接种花药 每个培养瓶接种 （7～10 ） 个花药？
培养
主要原因是 营养核和生 殖核融合造 成的
3.2月季花药培养
5、无菌水冲洗3～5次
花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
（三）接种和培养
1 灭菌后花蕾，要在无菌条件 下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。 2 在剥离花药时，要尽量 不损伤花药 （否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 胚状体的形成。 主要原因是 7-10 个 25℃ 左 3 通常每瓶接种花药 ，温度控制在 花粉管核和 右，不需要光照。幼小植株形成后才 需要光照 。 生殖核融合
①原因：因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产
生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一 个时期对离体刺激敏感。
②花药时期选择： 单核靠边期。
一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞 一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合 花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。
③其它时期选择的缺点
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣松动，又给材料的 消毒困难，且难以挑选到单核期的花药。
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎， 盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）
焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。
花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上 →焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核 被染用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
4个花粉管细胞核 减数分裂 有丝分裂 ③ 1花粉母细胞 4个小孢子 N 2N N 4个生殖细胞核 有丝分裂
3.2月季的花药培养
知识回顾
• 单倍体育种的过程？
正常植株（2N）
花药离体培养（N） 单倍体植株（N）
植株（2N）
秋水仙素处理， 使染色体翻倍
特点：1.明显缩短育种年限
2.后代植株都为纯合子。
一、被子植物的花粉发育
花丝
雄蕊
花药：囊状结构，内有很多花粉
小孢子四分体 单核
双核
花粉母细胞 减数分裂 （小孢子母细胞）
有丝分裂
花粉粒 （双核）
4个小孢子
1个小 孢子
（单细胞花粉粒）
小孢子四分体 单核 双核
花粉母细胞 减数分裂 4个小孢子 （小孢子母细胞）
有丝分裂
花粉粒
花粉管细胞核
（双核）
生殖细胞核
花粉是单倍体的生殖细胞
1个小 孢子
营养细胞
2个精子
花粉囊
花药
成熟 花粉
小孢子母细胞 小孢子
花粉粒 （双核期）
小孢子母细胞 2N
4.对培养出来的幼苗进一步的鉴定和筛选。
5.鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现染色体 倍性的变化（主要原因是营养细胞核和 生殖细胞核融合造成的）。
植物组织培养技术与花药培养技术的比较
项目 植物组织培养
花药培养技术
相同点 不同点
1.培养基配制方法、无菌技术及接种操作 等基本相同。
3. 通常每瓶接种花药 7-10个，温度控制在 25℃左 右， 不需要光照 。幼小植株形成后才 需要光照。
（三）接种和培养
1.剥取花药
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药
注意： ①勿损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产 生愈伤组织。 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药 不利于愈伤组织或胚状体的形成。 2.接种
3.2月季的花药培养
（二）材料的消毒
选取花蕾
初步消毒
（70%酒精）
无菌水再冲洗
无菌水清洗
彻底消毒
（氯化汞）
（三）接种和培养
1、剥离花药 ① 尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤
部位产生二倍体的愈伤组织）， ② 彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于
愈伤组织或胚状体的形成。 2、接种花药 3、培养 ①培养条件：25℃，幼小植株形成后才需要光照 ②过程：
先脱分化培养，当花药裂开长出愈伤组织后及 时转移到分化培养基上。
在花药培养中，特别是通过愈伤组织 形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性 的变化。
（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）
直接由器官产生 由单个细胞产生
由愈伤组织产生
人工种子
又称人造种子、合成种子或无性种子， 就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定 芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹 在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再 在外面包上一层具有保护功能和防止机械 损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似 种子的结构，能在一定的条件下萌发生长， 形成完整植株。
4个生殖细胞核
有分
8个精子
（二）产生花粉植株的两种途径
①
花药中 的花粉
脱分化
胚状体
分化
丛芽
②
花药中 的花粉
脱分化
再分化
愈伤组织
丛芽
诱导
移栽
生根
体细胞胚（胚状体）： 在组织培养过程中，某些体细胞在
形态上转变为与合子发育成的胚非常相 似的结构，发育过程亦与合子胚类似， 被称为体细胞胚（胚状体）。
胚状体
（三）影响花药培养的因素
1、材料的选择（内因）
32月季花药培养
双 核 期
•2个精子同营养细胞 的基因型都一样。
生殖细胞
有丝 分裂
精子 精子
3、被子植物花粉的发育 ②花粉是小孢子母细经胞过 分减裂数而形成的， 因此，花粉是 倍体单的 细胞生殖
③经历时期： 四分体时期、 期单、核 期 双核
注：此处的四分体时期不同于减数分裂中的四分体。
： 思减考数分裂中四分体：联会后一对同源染色体中含有 四个姐妹染色单体。 1、两个小精孢子子和细花胞粉四管分细体胞期核：的花基粉因母型细是胞否经相减同数？分裂 2、形每成个的精4子个中连的在染一色起体的数单和倍花体粉细母胞细胞中染色体数什 么关系？
分化
胚状体
从芽
诱导 脱分化
花粉
再Hale Waihona Puke 化愈伤组织从芽生根
移栽
2.产生花粉植株具有两条途径的原因： 主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。
①体细胞胚 ：植物组织培养过程中，某些体细胞在形 态上转变为与合子发育成的胚（具有胚根、胚芽、胚轴 等结构）非常相似的结构，称做体细胞胚或胚状体。
②花粉胚 ：植物组织培养过程中，某些单倍体性细胞 在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，称 做花粉胚或胚状体。
种密度易等消毒。
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
（一）材料选取
1、从花期看：月季的初花期（根据时令判断） 从花粉看：单核期（需要镜检） 从花蕾看：完全未开放的（肉眼观察）
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)（常用）
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎， 盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）
• 一、课题目标：
3.2月季的花药培养.
如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体， 花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基， 以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。
植物组织培养技术与花药培养技术的异同点
项目
相同点
不同点
植物组织培养技术 离体的植物组织 外植体为体细胞，
经脱分化形成愈 染色体数无需加
伤组织，再分化 倍。
课题2 月季的花药培养
植物花药离体培养的意义
缩短了 育种周期， 为新品种的 培育开辟了 新途径。
花粉粒（1N）
单倍体植株 （1N）
二倍体纯合子 植株（2N）
花的结构
二、 基础知识
（一）被子植物的花粉发育 花粉：
雄蕊 花丝 花药
雄蕊 囊状结构，内有很多花粉粒
花粉囊 当花粉囊的壁组织逐步发育分化时，会
4个生殖细胞 4个花粉管细胞 核（n） 核（n）
有丝分裂
双核期
卵细胞的形成
大孢子 减数 4个大孢子（3 3次核 母细胞 分裂 个退化消失） 分裂
1个卵细胞 5个其它细胞 2个极核
成熟胚囊的结构与功能
极核2:与一精子结合,发育 成胚乳
卵细胞1:雌配子,受精后发 育成胚.
雄蕊（花药）
花粉管细胞核（营养细胞核）
实例一
• 关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是 （BD ）
• A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的
• B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果
• C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、 单核期、双核期等阶段
• D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧， 再移到细胞中央
注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的 细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞 核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。
课件11：3.2 月季的花药培养
一、被子植物的花粉发育 1．花粉：是由 花粉母细胞 经过减数分裂形成的单倍体的 生殖细胞。
2．花粉的发育过程
二、产生花粉植株的两种途径
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素 的种类及其 浓度配比 。
三、影响花药培养的因素 1．主要因素： 材料 的选择与培养基的组成。 (1)花药方面，应选择 初花 期的花药。 (2)花粉方面，应选择单核 期的花粉。 (3)花蕾方面，应选择 完全未开放 的花蕾。 2．其他因素：亲本植株的 生长条件、材料的低温预处 理及接种 密度 等。
3．(1)被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分，后者为囊状结 构，内部含有许多花粉。一个成熟花粉粒可形成两个细胞即 ____________、____________。 (2) 被 子 植 物 花 粉 的 发 育 要 经 历 __________ 、 __________ 和 ______________等阶段。正常情况下，一个基因组成为 AaBb(两 对基因分别位于两对同源染色体上)的小孢子母细胞能形成 __________个精子，精子的基因型有________种。 (3)通过花药培养产生花粉植株，一般有两种途径即通过胚状体阶 段发育为植株或通过愈伤组织发育为植株，这两种途径主要取 决于培养基中_______________________________。
4．在月季花药培养成单倍体植株的过程中，应选择哪个时期的花
药最易成活
( C)
A．四分体时期
B．单核期前
C．单核期
D．双核期
解析：单核期的花药菌少、易消毒。而单核期以前的花药
质地幼嫩，极易破碎。选择单核期以后的花药，其花瓣已
有些松动，给材料的消毒带来困心要点二 花药的离体培养 1．实验操作及注意事项
生物人教版高二选修1素材：教材梳理_专题3课题2月季的花药培养_word版含解析
庖丁巧解牛知识•巧学一、被子植物的花粉发育1.发育场所：被子植物雄蕊的花药中。
2.分裂方式：花粉是由花粉母细胞经减数分裂而形成的，因而花粉是单倍体的生殖细胞。
3.发育过程：四分体时期———→单核期———→双核期在四分体时期，4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时，四分体时期的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。
这时的细胞含浓厚的原生质，核位于细胞的中央（单核居中期）。
随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧（单核靠边期），并分裂成1个生殖细胞核和1个花粉管细胞核，进而形成两个细胞，一个是营养细胞，一个是生殖细胞。
生殖细胞再分裂一次，形成两个精子。
要点提示花粉母细胞形成花粉粒的过程是减数分裂。
花粉粒形成营养细胞、两个精子的过程是有丝分裂。
二、产生花粉植株的两种途径这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
知识拓展在植物组织培养过程中，某些体细胞在形态上会转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，它的发育过程也和合子胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子，这种结构就叫做体细胞胚或胚状体。
制作人工种子选用的是体细胞胚，因为它与亲本的遗传物质相同，而花粉胚则为单倍体。
三、影响花药培养的因素1.材料的选择不同的植物、同一种植物的不同生理状况、花期的早晚、花粉发育的不同时期等因素都会影响诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低。
疑点突破对花期而言，选择早期的花药培养更容易产生花粉植株。
对花粉的发育时期而言，选择单核期的花药培养成功率最高，为选到单核期的花药，要选择完全未开放的花蕾。
2.培养基的组成、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作：月季的花药培养1.材料的选取选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。
方法：醋酸洋红法，焙花青－铬矾法。
2.材料的消毒体积分数为70％的酒精浸泡—→无菌水清洗—→放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液—→无菌水冲洗。
月季的花药培养教学设计
月季的花药培养教学设计.docx1.教学目标(一)知识与技能1、识记被子植物花粉发育的过程2、通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力(二)过程与方法1、列表比较花药培养与组织培养2、选择适宜的培养材料和培养基(三)情感、态度与价值观1）培养动手实践、勇于探索的科学探究素质2）通过讨论花药离体培养技术在生产实践中的应用，帮助学生确立理论联系实际的观占八、2.教学重点/难点1、课题重点：选取适宜的培养材料和培养基2、课题难点：选取适宜的培养材料和培养基3、教学用具：多媒体、板书、教材4、标签教学过程(一)引入新课利用植物的茎可以经过组织培养得到新植株但这种方法同时也存在着一定的缺陷殖出来的新植株往往无法获得一些新的性状。
本节我们将学习花药离体培养技术。
(二)进行新课1.基础知识活动1：阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题1）被子植物的花粉是在花粉管中由生殖细胞经过减数分裂形成的。
2）结合教材内容填下列示意图HUni4J侍（JaniJ1Tmilled思考2由此可见，被子植物的花粉的发育要经历四分体时期，单核期和双核期等阶段。
思考3在正常情况下小孢子母细胞可以产生4个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。
思考4营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么控制花粉的萌发并提供营养。
活动2:阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题1）产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株；二是通过愈伤组织阶段发育为植株。
这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。
2）填写培育花粉植株的途径图解at0Ifn3）胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为分化,而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化活动3:阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题1）影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。
2）材料的选择从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉从花蕾来看，应当选择（完全未开开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
3.2月季的花药培养课件
（二）材料的消毒
阅读“（二）材料的消毒”，填写下列流程图：
花 蕾
70%酒精） （______ （_______ 无菌水）
浸泡约 30s 清洗
无菌吸水纸 （ __________）
吸干水分
（_______ 无菌水 ） 冲洗3～5次
1% 1% 次氯酸钙溶液 氯化汞溶液 1% 氯化汞溶液） 饱和漂白粉溶液 （____________ 消毒2～4min
9.草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后 代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培 育出无病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本过程如下：外植 体 ① 愈伤组织 ② 芽、根 植株 请回答： （1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取 茎尖、根尖不含病毒 _________ ___ 。 茎尖、根尖 作为外植体，其依据是_ （2）在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量 有机物 元素、微量元素和______ ，在配制好的培养基中，常常需 要添加________ ，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组 植物激素 织。接种后2~5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可 能是__________ 。 外植体消毒不彻底 （3）在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形 成根，但分化出了芽，其原因可能是_____________ 。 培养基中生长素类 物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低
为什么花瓣松动会给 为什么花瓣松动会给材 材料的消毒带来困难？ 料的消毒带来困难？
答：花瓣松动后，微
生物就可能侵入到花药，
给材料的消毒带来困难。
2.培养基的组成：
花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的 水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2， 4-D、IAA； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA代之。
2019-2020学年高二生物人教版选修一教学案：专题3 课题2 月季的花药培养 Word版含答案
一、被子植物的花粉发育（阅读教材P37～38）1．发育场所：被子植物雄蕊的花药中。
2．花粉的形成：由花粉母细胞经过减数分裂形成，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。
3．花粉的发育经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段。
(1)小孢子四分体时期：4个单倍体细胞连在一起。
(2)单核期：①四分体的4个单倍体细胞彼此分离，形成4个具有单细胞核的花粉粒。
②单核期分为单核居中期和单核靠边期两个时期。
(3)双核期：细胞中含有生殖细胞核和花粉管细胞核，它们进而形成一个生殖细胞和一个营养细胞，其中的生殖细胞再分裂一次形成两个精子。
二、产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径（阅读教材P38）1．过程图示2．形成原因：主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
三、影响花药培养的因素（阅读教材P38～39）1．主要因素(1)材料的选择①不同植物的诱导成功率很不相同。
②同一种植物，花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。
③花粉发育时期也是影响花药培养的重要因素，一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。
(2)培养基的组成：培养基的成分及比例对花药培养也有影响。
2．其他因素：亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响。
四、实验操作（阅读教材P39～40）1．材料的选取(1)取材：对绝大多数植物而言，适宜花粉培养的时期是单核期。
(2)花药发育时期的确定：一般通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期。
(3)镜检方法：①最常用的是醋酸洋红法。
②但某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青－铬矾法。
2．消毒3．接种和培养(1)接种要求：将在无菌条件下除去萼片、花瓣和花丝的花药立即接种到培养基上。
(2)培养条件：培养温度在25_℃左右，幼小植株形成后才需要光照。
(3)鉴定和筛选：在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体组数目的变化，因此需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。
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普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[ 人教版]课题 2 月季的花药培养★课题目标（一）知识与技能1、识记被子植物花粉发育的过程2、通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力1、列表比较花药培养与组织培养2、选择适宜的培养材料和培养基（三）情感、态度与价值观1、培养动手实践、勇于探索的科学探究素质2、通过讨论花药离体培养技术在生产实践中的应用，帮助学生确立理论联系实际的观点八、、★课题重点选取适宜的培养材料和培养基★课题难点选取适宜的培养材料和培养基★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课利用植物的茎可以经过组织培养得到新植株，但这种方法同时也存在着一定的缺陷，繁殖出来的新植株往往无法获得一些新的性状。
本节我们将学习花药离体培养技术，这是一种信的育种技术。
（二）进行新课1基础知识活动2:阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题：1 被子植物的花粉是在_________________ 中由_____________ 经过__________ 分裂形成的。
2. 结合教材内容填下列示意图：〖思考2〗由此可见，被子植物的花粉的发育要经历四分体时期,单核期和双核期等阶段。
〖思考3〗在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生_4_个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。
〖思考4〗营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。
活动3:阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题：1•产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。
这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。
3•胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为分化而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。
活动4:阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题：1. 影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。
2. 材料的选择：①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉;③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
〖思考5〗除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。
〖思考6〗为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。
〖思考7〗花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是外界环境中的微生物容易侵入到花药中。
2 •实验设计活动5:阅读“材料的选择”，回答下列问题：1选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是醋酸洋红溶液和焙花青-铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。
2.在使用焙花青-铬钒溶液时，需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20min。
该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3 : 1的比例混合均匀。
活动6:阅读“材料的消毒”，填写下列流程图：〖思考8〗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。
活动7:阅读“接种和培养”，回答下列问题：1剥取花药：消毒后的花蕾，要在无菌条件下除去花萼、花瓣。
〖思考9〗剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是容易从受伤部位产生愈伤组织；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。
2 •接种花药：剥取的花药要立刻接种到培养基上。
每个培养瓶接种7〜10个花药。
3. 培养：花药培养利用的培养基是MS 培养基,pH为5.8 ，温度为25 C,幼苗形成之前（需要、不需要）光照。
〖思考10〗在花药培养基中，用量最高的激素是IAA ;在诱导丛芽或胚状体培养基中，用量最高的激素是BA ;在诱导生根的培养基中，用量最高的激素是IAA 。
4 •培养20 - 30d后，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。
前者还要转移到分化培养基上进行分化培养成再生植株；后者要尽快分开并转移到新的培养基上。
5 •通过愈伤组织形成的植株，常常会出现染色体倍性的变化，因而需要鉴定和筛思考 11〗为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变化？（III ）有些是由花粉发育形成的单倍体花粉植株， 有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体花药 壁植株。
（三）课堂总结、点评本课题有一定难度， 成功率较低。
全部完成课题不仅耗时较长，又有季节限制。
最好课 前做好时间规划，以提高工作效率。
建议教师提前做好相关环节的准备，如花蕾的选择、培 养基配方等。
同时对于兴趣较高的同学可以安排在课外动手尝试， 教师提供相关的技术指导。
（四）实例探究例 1．某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离。
为了防止性状分离并快速繁殖，可以利 用该植物的一部分器官或组织进行离体培养， 发育出完整植株。
进行离体培养时不应采用该 植株的（ ）A .茎尖B .子房壁C .叶片D .花粉粒解析：本题主要考查无性生殖特点。
涉及知识点有：组织培 养、体细胞、生殖细胞等。
抓住无性生殖能够保持原物种特性这一特 点。
组织培养就是无性生殖的一种方式，它是由体细胞培养而来的， 含有原物种的全部基因， 而花粉粒是生殖细胞。
该题易陷入思维定势， 联想到花粉粒的离体培养。
可见，植物组织培养若取自体细胞则为无 性生殖；若取自生殖细胞则为有性生殖。
答案： D例 2 ． 一个初级精母细胞在减数分裂的第一次分裂时，有一对同源染色体不发生分离， 所形成的次级精母细胞减数分裂的第二次分裂正常； 另一个初级精母细胞减数分裂的第一次 分裂正常， 减数第二次分裂时， 在两个次级精母细胞中， 有一个次级精母细胞的 1 条染色体 姐妹染色单体没有分开。
以上两个初级精母细胞可产生染色体数目不正常的配子 （以下简称 不正常的配子）。
上述两个初级精母细胞减数分裂的最终结果应当是A ． 两者产生的配子全部都不正常B ． 前 者产生一半不正常的配子，后者产生的配子不正常C ． 两 者都产生一半不正常的配子D .前者产生全部不正常的配子，后者只产生一半不正常的配子解析：初级精母细胞的减数第一次分裂过程，是同源染色体分开，进入两个次级精母细 胞。
若此过程中同源染色体不发生分离， 形成的两个次级精母细胞中， 一个多了一条染色体， 另一个少了一条染色体。
次级精母细胞进行的减数分裂的第二次分裂， 是姐妹染色单体分开， 平均分配到两个精子细胞中。
若此过程中姐妹染色单体不分开， 形成的两个精子细胞中的染 色体数目均不正常。
选。
05 全国理综答案：D ☆综合应用例3.下图是被子植物的受精过程（1） 写出图中数字所代表的结构的名称：① _______ ② __________ ③ ___________ ④ ________ ⑤ ___________ ⑥ __________（2） 草履虫进行 ______ 生殖；蘑菇进行 _________ 生殖，酵母菌和水螅常常进行 _________生 殖。
（3）下列图解表示水稻（2n=24 ）胚珠中胚囊的发育过程，试根据图回答:单核胚囊（n ）三次有丝分裂4 成熟胚囊（7细胞8核）① 水稻种子的种皮遗传物质应为 __________ n ,其中遗传物质应与 _______________ 相同。
② 水稻胚珠中的胚囊应共有染色体 __________ 条，其中卵细胞中含染色体 _____________ 条；若 水稻授粉受精后发育成胚和胚乳， 则胚细胞中含有染色体 ________________ 条，胚乳细胞中含染 色体 _________ 条。
③ 7细胞或8核中的7细胞其中就包括了一个卵细胞和两个极核，若水稻的基因型为AaBb ，则胚囊母细胞基因型为 _________________ 。
④ 如果水稻卵细胞基因型应为Ab ，则极核的基因型为 _________________ ，其原因是 ______解析：图中给出一个被子植物子房结构示意图， 首先要求学生能够正确识图， 弄清各数字代表的结构名称。
胚囊中7个细胞，从图解中我们可以看出是由一个胚囊母细胞发育而来 的，所以这几个细胞的基因型完全相同（卵细胞和极核的基因型完全相同）。
花粉粒落到雌直接发育*胚囊母细胞（2n ）减数分裂④ ⑤ ⑥薄壁细胞 孢原细胞（2n蕊柱头上萌发生出花粉管， 花粉管通过珠孔进入胚囊， 释放出两个精子， 一个精子与卵细胞 结合，形成受精卵，受精卵发育成植物的胚；另一个精子与极核结合，形成受精极核，将来 发育成胚乳（双子叶植物胚乳发育过程中，胚乳被子叶吸收）。
答案：（ 1）花粉管 子房壁 珠被 受精极核 受精卵 珠孔 （ 2）分裂 孢子 出芽 （ 3）2 母方 12 24 36 AaBb Ab 卵细胞和极核是由单核胚囊经三次有丝 分裂而来（五）巩固练习1． 在月季花药培养成单倍体植株的过程中，应选择哪个时期最易成活（ ）A •单核期前的花药B •单核期后的花药C .单核期花药D •双核期2． 影响花药培养的主要因素是3. 粗糙脉孢菌的单倍体细胞中具有 7 条染色体。
两 个不同类型的粗糙脉孢菌 A 和 a 融合后成为二倍体， 随即发生典型的减数分裂， 紧接着又进行一次有丝分裂。
此过程最 终形成的子细胞数及每个子细胞中的染色体数分别为（ ）A . 8个、7条B . 8个、14 条C . 4个、7条 4.某高等植物体细胞内假设有 6 条染色体，它们是 AaBbDd ，那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是（ ）A . ABD 和 abdB . AbD 和 abdC . AaB 和 BbdD . Abd 和 Abd 5．用兰花茎尖细胞可快速培养兰花苗，这种生殖方式不能叫 （ ）A .无性生殖B .组织培养C .植物克隆D .有性生殖6．有同源染色体存在，但在光镜下一定看不到同源染色体之间两两配对联会的是（ ）A .初级精母细胞B .次级精母细胞C .精细胞D .根尖分生区细胞7．玉米的体细胞含有 20条染色体。
在正常情况下，它的卵细胞、一个极核、胚细胞、胚乳细胞、珠被细胞和子房壁细胞所含染色体数目依次应为（）A ． 10、10、20、 20、20、20B ．10、10、30、30、20、20C ． 10、10、20、30、20、 20D ．10、20、20、 30、20、 208．如果某种植物的基因型为AABb ，这两对基因分别位于两对同源染色体上，去雄后授以aabb 植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（）A ． AAaBBb 、AAabbb 、 AAaBbbB ．AABB 、 AABbC ． AaaBBb 、AaabbbD ．AaaBbb 、 Aaabbb9．番茄的染色体数目是 24，一个番茄细胞发生减数分裂，形成的细胞中有三个退化消失。