乳中抗生素的检验

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抗生素名称 青霉素 最低检出量 0.004单位
链雹素
庆大霉素 卡那霉素
0.5单位
0.4单位 5单位
注意事项
配制培养基应注意的问题
嗜热链球菌的保存
结束语
综上所述,鉴于牛奶中抗生素残留是涉及人 类健康的公共卫生问题,应重视和加强检测 工作,并努力研究发展一些简单、快速和便 携化的筛选多残留分析技术;发展高效、高 灵敏的联用技术和多残留组分确证技术;实 现分析过程自动化或智能化,以提高分析效 率、降低成本,保证消费者的健康。
TTC检测法实验原理

嗜热乳酸链球菌对多种抗生素都很敏感,故可用于 多种抗生素的残留量检验。乳中有抗生素存在,则 检样中虽加入菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑 制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如 果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还 原而显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳性, 呈红色为阴性,见表1 。
不显色 红色 抗生素阴性
36±1℃水浴30MIN 显色者抗生素阴性 报告 阴 性 对 照 管
无抗生素的乳 8mL加抗生素及 菌液和TTC 无抗生素乳9mL 加菌液和TTC
Байду номын сангаас
显色者抗生素阳性 阳 性 对 照 管
报告
TTC检测法实验结果

准确培养30min观察结果,如为 阳性,再继续培养30min作第二 次观察。观察时要迅速,避免 光照过久发生干扰。检测各 种抗生素的灵敏度见表2 。
班级:10食检二班 姓名:马兰
引言
随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛 应用,牛奶中抗生素残留问题日益 受到国际社会的重视。对此,检测 技术也迅速发展,以寻求简便、快 速、准确、敏感性高的检测方法满 足日趋严格的残留限量要求,保障 人们饮用牛奶的卫生和安全。
牛奶中抗生素残留的来源
一般认为,对泌乳牛用药不当或不注意安全时 间是牛乳中抗生素残留的重要因素,尤其是使 用乳房灌注法治疗乳腺炎时,易造成牛乳中抗 生素残留。在牛饲料中添加饲料添加剂已十分 普遍,其中含有一定比例的抗生素,主要作用 是预防疾病,这是牛奶抗生素残留的重要原因。 此外,一些不法交奶户在高温季节为防止乳的 酸败,往往向牛乳中掺杂各种抗生素,这也是 乳中抗生素残留的一个来源。1983年,Egan调查 表明,用经抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给 正常乳牛挤乳,可使正常牛的乳中残留抗生素, 所以挤乳是乳中抗生素残留的另一个来源。
牛奶中抗生素残留的危害
加工上不能用于生产 发酵乳 ② 对饮用者的健康不利

微生物检测法
微生物检测法是应用较广泛的方法,其测定原 理是根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的 抑制作用,来定性或定量确定样品中抗微生物药 物残留,如纸片法(PD)、TTC法、拭子法 (STOP)等。采用传统的微生物检测方法,缺 点是:(1)时间长;(2)显色状态判断通过肉眼辨 别,易产生误差,对微红色者无法做出准确判 断;(3)操作复杂。优点是费用低,一般实验室 都能操作。其中, 纸片法和TTC法是牛奶中药 物残留检测的两种常用的微生物检测法。
检验所需器材


菌种、培养基和试剂 菌种:嗜热乳酸链球菌。 脱脂乳:经113℃加热灭菌20min。 4%2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液:称取1gTTC,溶于 5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用 灭菌蒸馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则 不能再用。 仪器用品 水浴锅、培养箱、不锈钢锅、温度计、蜡笔、试管架、 1ml和10ml的灭菌吸管、灭菌试管
什么是TTC检测法?
TTC法,即氯化三苯基四氮唑法 ( tripheye tetrazolium chloride),是目前 我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗 生素残留的检测方法(GB5409—85)。该 法简便、快速,无需特殊设备,3~4h可 见报告,很适合牧场、乳品厂及食品卫生 检测部门采用。
显色状态 未显色者 徽红色者 桃红色至红色者 判断 阳性 可疑 阴性
将菌种移种脱脂乳,经36±1℃ 培养15h后,以灭菌脱脂乳1:1 稀释待用
检样 80℃,加热5MIN 冷却37℃以下
取检样9mL,置15mm×150mm 试管内
加菌液1mL
加菌液,36±1℃水浴2h
加TTC0.3mL
加TTC指示剂,36±1℃水浴30MIN
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