乳中抗生素的检验
乳中抗生素的检验
不显色 显色者 阴性 不显色者 36°cห้องสมุดไป่ตู้浴30min 阳性
红色
抗生素阴性
报告
报告
（1）菌液的制备 将菌种移至脱脂乳中，经 36°c培养15h后已灭菌乳1：1稀释。 （2）检 验 取 检样9ml置于试管。 80°c水浴加热5min，取出冷却至37°c,加菌液1ml， 36°c水浴培养2h 加TTC0.3ml 36°c 水浴培养30min，观察如为阳性，再于水浴培养 30min，作第二次观察。每份检样做二份另外再做 阴性和阳性对照各一份阳性对照管用无抗生素的乳 8ml加抗生素及菌液和TTC,阴性对照管用无抗生素 乳9ml加菌液和TTC
抗生素产生的与原因
• 为了预防和治疗奶牛的乳房炎，成注射大量的抗 生素，例如 青霉素 庆大霉素 卡那霉素 等， 这些霉素的半衰期较长，会残留在乳中。为了保 证饮用者的安全和实际的生产需要，对鲜乳中抗 生素的残留检验很有必要。TTC试验是用来检验鲜 乳中是否含有抗生素的简单方法
细菌进行生物氧化有三种方式： 加氧 脱氢脱电子 ，相反即还原。当乳中 加入嗜热链球菌是乳中无抗生素，嗜热链球菌就繁殖在新陈代谢中进行生物 氧化。其中脱出的氢可以和乳中的氧化型TTC结合而成还原型TTC.氧化TTC 无色 ，还原型TTC红色，所以可以使乳变红色。相反 ，如中存在抗生素， 嗜热链球菌不生长。没有氢的释放，TTC不变色乳汁也无色
阴性 阳性
显色状态
判断
显色状态
判断
未显色者 微红色着
阳性 可疑
桃红色至红色
阴性
抗生素的名称
最低检出量
抗生素的名称
最低检出量
青霉素 链霉素
0.004IU 0.5IU
庆大霉素 卡那霉素
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶中抗生素残留是指生产牛奶过程中使用的抗生素残留在牛奶中的现象。
这可能是因为奶牛在患有疾病时，农民会给奶牛注射抗生素来治疗疾病，或者是在奶牛饲养过程中，农民使用抗生素来预防疾病的发生。
尽管抗生素在奶牛饲养和产奶过程中的使用是为了保证牛奶的质量和奶牛的健康，但过多的抗生素残留可能会对人类健康产生潜在的危害。
牛奶中抗生素残留可能导致人类对抗生素的耐药性增加。
长期摄入含有抗生素残留的牛奶，人体会逐渐产生对这些抗生素的耐药性，从而减弱对治疗感染性疾病的效果。
当人类患病时，需要使用抗生素进行治疗，但由于耐药性的增加，常规剂量的抗生素可能无法起到应有的疗效，导致病情加重或难以治愈。
抗生素残留可能对消费牛奶的人群产生过敏反应。
某些抗生素成分对某些人来说是过敏原，摄入含有抗生素残留的牛奶后，可能会引发过敏反应，如皮肤瘙痒、呼吸困难、恶心等症状。
对于某些敏感人群来说，抗生素残留应尽量避免。
抗生素残留可能对人体的内分泌系统产生干扰。
抗生素残留中的一些化学物质可能对人体的内分泌系统产生干扰，导致内分泌紊乱，影响人体的正常发育和生理功能。
特别是对于婴儿和幼儿来说，抗生素残留可能对其生长发育产生不良影响。
为了保证牛奶的质量和人类的健康，对牛奶中的抗生素残留进行检测是非常重要的。
常用的检测方法包括免疫学方法、生物学方法和化学方法。
免疫学方法主要利用抗生素与特异性抗体之间的免疫反应进行检测，如酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
生物学方法主要是利用生物学试剂对抗生素进行筛选或检测，如生物传感器技术和细菌抑制试验。
化学方法则是通过色谱法、质谱法等对抗生素进行定量分析。
牛奶中抗生素残留的危害包括耐药性增加、过敏反应和内分泌干扰，为了保护人类健康，对牛奶中的抗生素残留进行检测是必要的。
不仅要加强牛奶生产过程中对抗生素的使用和管理，还要建立健全的抗生素残留检测制度，确保牛奶的安全和质量。
《食品微生物检验技术》教学课件—鲜乳中抗生素的检测
工作任务九
1、容易引起过敏反应 2、造成环境平衡紊乱或菌群失调 3、在药物治疗中产生耐药性 4、发酵异常
检验依据：国家标准《GB/T 4789.27-2008 鲜乳中抗生素残留检验》
检测范围：国标中规定
第一法适用于鲜乳中能抑制嗜热链球菌（Streptococcus thermophislus）的 抗生素的检验；
第二法适用于鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种（Bacillus stearothermohpilus var.calidolactis）的抗生素的检验，也可用于复原乳、消 毒灭菌乳、乳粉中抗生素的检测。”
检测原理：
样品经过80℃杀菌后，添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后，嗜热链球 菌开始增殖。这时候加入代谢底物2,3,5-氯化三苯四氮唑（TTC），若该样 品中不含有抗生素，或抗生素的浓度低于检测限，嗜热链球菌将继续增殖， 还原TTC 成为红色物质。相反，如果样品中含有高于检测限的抑菌剂，则 嗜热链球菌受到抑制，因此指示剂TTC不还原，保持原色。
（2）HLPC法：
高效液相色谱法是世界上迄今为止公认的农残药残的定量方法，同时也是世界 上主要的仲裁标准方法。
1、加强对饲料的检测，防止饲料中出现抗生素药物 2、控制奶牛乳腺炎的发病率 3、严格遵守休药期规定 4、加强饲养管理 5、加强法规体系建设
检验报告： 最终观察时，培养基依然保持原有的紫色，可以报告为抗生素残留性。
鲜乳中抗生素残留检测
1.原理 细菌生物氧化有三种方式，即加氧、脱氢和脱电子。 当样品中加入嗜热链球菌后，如果样品中没有抗生素残 留，嗜热链球菌就生长繁殖，在新陈代谢过程中进行生 物氧化，其中脱出的氢可以和加在样品中的氧化型TTC 结合而成为还原型TTC，氧化型TTC是无色的，还原型 TTC是红色的，所以可以使样品变红色。相反，如果样
鲜乳中抗生素残留检测
注：嗜热链球菌的筛选方法
（1）培养 培养基配方：酵母膏7.5g 、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g 、KH2PO4 2g、西红柿 汁100mL 、吐温80 0.5mL、 蒸馏水900mL pH 7.0 ★ 西红柿汁的制作方法： 将新鲜番茄洗净，去皮切碎（切勿捣碎），放入锥形瓶，置4℃冰箱8~12h，取 出后用纱布过滤。如一次使用不完，可将其置入0℃冰箱，可保存四个月。使 用时让其在常温下自然溶解。 制法：将上述各成分加热溶解，校正pH，分装于灭菌锥形瓶中，在115℃下高 压灭菌20min。取适量酸奶（3~5mL）接种于培养基，进行培养分离。
品中存在抗生素，嗜热链球菌就不能生长繁殖不变色。
鲜乳中抗生素残留检测
2.设备与材料
水浴锅 恒温培养箱
温度计
试管架 灭菌10mL吸管
灭菌1mL吸管
灭菌15×150mm试管 杀菌锅
鲜乳中抗生素残留检测
3.培养基和试剂
菌种：嗜热链球菌 脱脂乳：脱脂奶粉按10%含量（W/V）加蒸馏水调
鲜乳中抗生素残留检测
5. 判断方法
准确培养30min，观察结果，如为阳性，再继续培养30min做第二次观 察。在观察时要迅速，避免光照过久干扰，乳中有抗生素存在，则在向 检样中加入菌液培养时细菌不增殖，此时由于加入的指示剂TTC不还原， 所以不显色。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即进行增殖， TTC被还原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性，成红色为阴 性。
乳中抗生素的检验
利用特定微生物对抗生素的敏感性，将微生物与待测乳样混合培养，根据微生物的生长情况来判 断乳中抗生素的残留。
酶底物法
利用抗生素对特定酶的抑制作用，将酶底物与待测乳样混合，观察底物的水解情况来判断乳中抗 生素的残留。
理化检验方法
高效液相色谱法（HPLC）
利用高效液相色谱技术对待测乳样进行分离和检测，通过对比标准品色谱图来判断乳中抗 生素的种类和含量。
积极参加国内外权威机构组织的能力验证活 动，提高实验室检验能力。
实验室间比对
定期与其他实验室进行比对试验，评估实验 室检验结果的准确性和一致性。
外部审核和认可
接受外部审核机构的审核和认可，确保实验 室管理体系的持续改进和有效运行。
客户满意度调查
定期开展客户满意度调查，收集客户反馈意 见，及时改进服务质量。
依据国家颁布的乳制品中抗生素 残留限量标准及相关法规进行判 定。
02
国际标准和指南
参考国际食品法典委员会(CAC)、 欧盟等国际组织和地区的相关标 准和指南进行结果判定。
03
企业标准和内控指 标
结合企业自身制定的产品标准和 内部控制指标，对检验结果进行 综合判定。
误差来源分析及消除策略
样品处理误差
07 结论与展望
本次研究主要成果总结
1
成功建立了乳中抗生素残留的高效液相色谱检测 方法，该方法具有灵敏度高、准确性好的特点。
2
通过对市售乳制品进行抽样检测，发现部分样品 中存在抗生素残留超标的情况，为乳制品安全监 管提供了有力依据。
3
研究了不同种类抗生素在乳制品中的残留规律， 为制定更加科学合理的乳制品安全标准提供了参 考。
疾病。
氨基糖苷类
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）：高效液相色谱是一种基于溶剂流动的液相色谱方法，具有灵敏度高、分离能力强等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过样品前处理，去除干扰物，然后使用适当的洗脱液将抗生素从固相萃取柱中洗脱出来，最后用高效液相色谱对抗生素进行分离和定量。
2.毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳法是一种基于电场作用下溶液中离子迁移速度的分析方法。
该方法具有高分离能力、快速分析速度等特点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品进行前处理，然后通过毛细管电泳仪器进行分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且样品准备过程相对简单。
3.气相色谱法（GC）：气相色谱法是一种基于色谱柱分离原理的分析方法，通过适当的蒸发和衍生反应可以将抗生素样品转换为易于气相色谱分析的衍生化物。
该方法具有高度选择性、高灵敏度等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，通常需要进行样品前处理。
首先将牛奶样品中的脂肪物质去除，然后使用适当的溶剂将抗生素从样品中提取出来，并通过气相色谱进行分离和定量分析。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种基于抗原-抗体反应原理的免疫学方法。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先利用适当的蛋白质工程技术制备特异性抗生素抗体，然后将牛奶样品中的抗生素与抗体结合，通过酶标记的二抗或亲和素染色法对特异性抗体进行检测。
该方法具有灵敏度高、操作简单等特点。
5.高分辨质谱法（HRMS）：高分辨质谱法是一种基于质荷比检测的方法，具有高灵敏度、高分辨率等优点。
在牛奶中检测抗生素残留时，首先将牛奶样品经过适当的前处理，然后通过质谱仪对抗生素进行定性和定量分析。
该方法不仅可以同时检测多种抗生素，而且可以准确测定其残留量。
总结起来，牛奶中抗生素残留的检测方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱法、酶联免疫吸附法和高分辨质谱法等。
这些方法具有不同的优点和适用范围，可以根据具体需求选择合适的方法进行检测。
乳酸菌抑制法检测牛乳中抗生素残留
乳酸菌抑制法检测牛乳中抗生素残留乳酸菌抑制法检测牛乳中抗生素残留近年来，人们对食品安全问题越来越关注，其中牛乳作为人们日常饮用的重要食品之一，其安全性备受关注。
然而，由于牛乳生产过程中可能存在抗生素的使用，其中的抗生素残留对人体健康造成潜在的威胁。
因此，开发一种有效的方法检测牛乳中抗生素残留显得尤为重要。
传统的检测方法中，高效液相色谱法（HPLC）是应用最为广泛的一种技术。
然而，该方法通常需要复杂的设备和专业操作，且对操作环境要求较高，给检测工作带来一定的难度和限制。
为了克服这些问题，乳酸菌抑制法应运而生。
乳酸菌抑制法基于乳酸菌对抗生素的敏感性。
乳酸菌属于一类有益菌，其作用是通过产生乳酸、醋酸等有机酸，使环境呈酸性，进而抑制其他微生物的生长。
研究发现，抗生素具有破坏乳酸菌作用的能力，因此可以利用乳酸菌的生长状态来间接推测抗生素在牛乳中的残留情况。
乳酸菌抑制法的实施步骤如下：首先，将乳酸菌培养液均匀涂布在含有津液的平板上；然后，在培养液固化前，将含有不同浓度抗生素的牛乳样品加入到涂布的乳酸菌平板上；最后，在恒温条件下培养一段时间，观察乳酸菌的生长情况。
如果抗生素浓度低于一定阈值，乳酸菌能够正常生长并产生酸性物质，呈现出固定的酸化效果；相反，如果抗生素残留量超过阈值，乳酸菌的生长将受到抑制，无法产生足够的酸性物质，导致涂布的乳酸菌平板呈现中性或碱性。
乳酸菌抑制法具有操作简单、处理时间短、不需要复杂设备等优点。
同时，该方法对抗生素种类的适应性较强，可以检测多种抗生素的残留情况，如青霉素、四环素等。
另外，由于该方法的检测结果直观可见，对于不具备专业知识的人员也较易理解和判断。
不过，乳酸菌抑制法也存在一些局限性。
首先，该方法无法准确测量抗生素残留的具体浓度，只能得出残留的有无和超过阈值与否的结果。
其次，由于牛乳中含有多种成分，这些成分对乳酸菌的生长也可能产生一定影响，因此在使用乳酸菌抑制法时需要对牛乳样品进行预处理，如去除脂肪、蛋白质等。
乳中抗生素的残留的测定
乳中抗生素的残留的测定中图分类号：S816.73文献标识码：A 文章编号：近20年来，兽药（包括药物添加剂）在畜牧业中的应用日益广泛，其在降低家畜发病率与死亡率、促生长、提高饲料利用率和改善产品品质方面的作用是十分显著的，已成为现代畜牧业不可或缺的物质基础。
牛乳与人们的生活息息相关，因此牛乳中的抗生素残留问题一直是各国政府和食品安全机构关心的重点，中国近年来对牛乳中的抗生素残留问题也逐渐予以关注。
1.1 牛乳中抗生素残留的原因青霉素、阿莫西林、氨苄西林等抗生素在奶牛养殖业中常用于治疗奶牛乳房炎和子宫内膜炎，由于其廉价和广谱的抗菌性而被大量且频繁地超剂量使用，因此导致了牛乳中高浓度抗生素残留。
牛乳中抗生素残留的原因主要是：非治疗目的用药、治疗目的用药和非法人为掺杂非治疗目用药的主要指在牛饲料中添加含有一定比例的抗生素的饲料添加剂，在饲料中添加抗生素的主要作用是：杀灭或抑制畜体内(特别是消化道内)的有害微生物，调节畜体胃肠道微生态平衡，从而改善动物健康，促进动物生长，达到预防奶牛疾病和使其生产力提高的目的。
这也是造成牛乳中抗生素残留的一个非常重要的一个原因如果在治疗后停止用奶时间不够，可能导致牛乳中抗生素残留超标美国食品和药品管理局（FDA）调查表明，用药不当是导致牛乳中抗生素残留的主要原因。
1.2 牛乳中抗生素残留的危害对于食品中药物残留是否引起严重后果仍有争议，特别是对药物残留的长期影响还不清楚，但是对于牛乳中抗生素残留引起的以下几点危害目前还是可以肯定的。
1.2.1 对人类健康的危害如果含有致敏抗生素的牛乳被敏感人群饮用，可引起食用者过敏反应，表现的症状轻则是皮疹、发热、关节疼痛，严重时可发生过敏性休克甚至危及生命。
曾报道，英国一对青霉素高度敏感的病人，使用约10IU/mL的青霉素的商品牛乳后，发生了变态反应。
链霉素可引起肾损害和听觉神经受损，四环素引起肝损害，其与骨骼、牙齿中的钙质结合，产生骨及牙齿感染，还可影响儿童的生长发育。
乳品中抗生素的检测方法
乳品中抗生素的检测方法引言：抗生素是一种用于治疗和预防疾病的药物，但在食品中的残留量超标可能对人体健康造成负面影响。
乳制品是人们日常生活中常见的食品之一，因此对乳品中抗生素残留的检测方法至关重要。
本文将介绍几种常用的乳品中抗生素检测方法。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常见的用于检测乳制品中抗生素残留的方法。
该方法能够在短时间内对多种抗生素进行分离和定量。
具体操作步骤如下：1.准备样品：将待测乳制品样品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
2.样品的制备：将样品提取液进行蒸发浓缩，得到浓缩样品。
3.高效液相色谱分离：将浓缩样品溶解于适量的溶剂中，并通过高效液相色谱仪器进行分离，获得不同抗生素的峰。
4.定量分析：通过标准曲线法，根据峰的面积或高度进行定量分析，得出样品中抗生素的浓度。
优点：高效液相色谱法能够同时检测多种抗生素，具有较高的定量精度和分辨率。
二、酶联免疫吸附试验法（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种利用抗生素与酶标记物结合来检测乳制品中抗生素残留的方法。
具体操作步骤如下：1.制备测定板：首先将具有抗生素特异性的抗体固定在微孔板上。
2.加样：将待测样品加入微孔板中，经过一定的反应时间，让样品中的抗生素与抗体结合。
3.洗涤：用洗涤缓冲液清洗微孔板，去除未结合的物质。
4.酶标记：加入酶标记抗体，使其与结合到微孔板上的抗生素形成复合物。
5.底物溶液：加入底物溶液，通过底物的催化反应，将其转变为有颜色的产物。
6.测定：通过酶标仪器测定样品中产生的颜色和强度，得出抗生素的浓度或者阳性相关性结果。
优点：酶联免疫吸附试验法具有操作简便、快捷、敏感性高等优点，能够检测到低浓度的抗生素残留。
三、质谱法（MS）质谱法是一种通过对乳品样品中的物质进行化学分析的方法，它能够精确地分析样品中的抗生素成分。
该方法结合了质谱仪和色谱仪的特点，具体步骤如下：1.样品制备：将待测乳制品样品加入适量的提取剂中，经过摇晃和离心等操作，获得样品提取液。
乳品中抗生素的检测方法
上海千测标准技术服务有限公司乳品中抗生素的检测方法乳品中抗生素的检测方法经多年的实践，人们认识到抗生素可以增强牲畜抗病能力、提高养殖业产投比。
但过量使用，将降低畜牧产品品质，影响乳品发酵。
而含有抗生素残留的动物性产品，进入人类食物链，会使体内菌株产生抗生素抗性，扰乱机体内环境平衡，菌群失调而不利于健康；也会对易感人群产生过敏反应、激素障碍变态反应。
因此，FAO及WHO早在1969年就提出应规定各种动物性食品中的抗生素残留允许标准，WHO于1979年规定原料奶及消毒牛奶中不得有抗生素。
近年来，国内对奶制品中的抗生素残留也非常关注，无抗奶（Antibiotic-FreeMilk）的生产和消费已成为大势所趋。
但我们对奶制品中抗生素的检测缺乏必要的研究，检测技术还十分落后。
本文旨在对抗生素的检测方法进行总结，为在我国开展相关工作奠定基础。
我国关于奶制品中抗生素检测的国家标准方法最早出现在《牛乳检验方法——GB5409—85》中，采用TTC法。
1994年制订的《食品卫生微生物学检验？鲜乳中抗生素残留量检验——GB/T？4789.27—1994》，也采用TTC法。
2001年9月，农业部发布的《无公害食品生鲜牛乳》行业标准中，检测方法同《GB5409—85》，并不得检出。
《绿色食品消毒牛乳标准》也做了类似规定。
可看出，我国还未将抗生素纳入常规检测，作为必检项目；所采用的TTC法精确性和时效性都比较差。
展望新世纪的乳制品工业，为了保障人体健康，适应WTO的要求，增强国内乳制品业的国际竞争力，必须将抗生素的检测纳入议事日程。
首先是要制定相应的法规和检测程序，将乳制品中抗生素的检测、报告、处罚和管理等纳入法制化轨道，适应市场经济就是法制经济的要求。
其次是要修订、制订乳制品标准，将抗生素的检测纳入国标体系。
解决国内标准混乱，与国际标准冲突的问题，加大采用国际标准的比例，同国际标准接轨。
再次是要进行抗生素检测方法筛选工作，提高国产试剂盒的研制能力。
鲜乳中抗生素的检验
TTC检测法操作步骤
菌液制备:将菌种移种脱脂乳,经36±1℃培养15h后,以灭 菌脱脂乳1:1稀释待用。 检验：取检样9mL,置15mm×150mm试管内,80℃水浴加热 5min冷却37℃以下,加菌液1mL,36±1℃水浴培养2h,加 TTC0.3mL,36±1℃水浴培养30min,观察如为阳性,再于水 浴中培养30min作第二次观察,每份检样作二份,另外再作 阴性和阳性对照各一份,阳性对照管用无抗生素的乳8mL 加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加 菌液和TTC。 判断方法：准确培养30min观察结果,如为阳性,再继续培 养30min作第二次观察。观察时要迅速,避免光照过久发 生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加菌液培养物, 但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。 与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增 殖,TTC被还原而显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳 性,呈红色为阴性，见表1，检测各种抗生素的灵敏度见 表2 。
表1 显色状态判断标准
显色状态 未显色者 徽红色者 桃红色至红色者 判断 阳性 可疑 阴性
表2 检测各种抗生素的灵敏度
抗生素名称 青霉素 链雹素 庆大霉素 卡那霉素 最低检出量 0.004单位 0.5单位 0.4单位 5单位
注意事项
• 1、配制培养基应注意的问题 • 2、嗜热链球菌的保存
TTC检测法
TTC法，即氯化三苯基四氮唑法( tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫 生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的 检测方法(GB5409—85)。该法简便、快 速，无需特殊设备，3～4h可见报告，很 适合牧场、乳品厂及食品卫生检测部养基和试剂 菌种:嗜热乳酸链球菌。 脱脂乳:经113℃灭菌20min。 4%2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液:称取 1gTTC,溶于5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃ 冰箱保存,临用时用灭菌蒸馏水稀释至5倍。如 遇溶液变为玉色或淡褐色,则不能再用。 • 仪器 水浴锅、培养箱、不锈钢锅、温度计、蜡笔、 试管架、1ml和10ml的灭菌吸管、灭菌试管
乳品中抗生素的检测方法
乳品中抗生素的检测方法引言：乳制品是广大人群日常生活中必不可少的食品之一、为保证乳制品的质量安全，检测乳制品中的抗生素成分显得尤为重要。
本文将介绍几种常见的乳品中抗生素的检测方法。
一、抗生素的简介抗生素是指一类可以抑制或杀灭细菌的化学物质，广泛应用于药物治疗、动物饲料和农业生产当中。
但当抗生素滥用或者超量使用时，会对人体健康带来一定的风险。
二、检测乳品中抗生素的方法1.高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前最常用的乳品中抗生素的检测方法之一、它以色谱为基础，通过流动相和固定相之间的相互作用来分离样品中的化学成分。
该方法检测灵敏度高，测量结果可靠，因此被广泛应用于抗生素的检测领域。
不过，高效液相色谱法的缺点是需要进行复杂的样品准备和操作步骤，且检测过程耗时较长。
2.液质联用技术液质联用技术（LC-MS/MS）是目前应用较广的一种检测方法。
它将液相色谱法和质谱法结合起来，通过质谱仪对液相色谱分离出的化合物进行定性和定量分析。
液质联用技术的优点是准确、灵敏度高、分析速度快，并且能够同时检测多个抗生素成分，适用于同时检测多种抗生素的复杂样品。
3.酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫吸附试验是一种常用的抗生素快速检测方法，其原理是利用酶和抗体之间具有高度特异性的结合反应来检测抗生素的存在。
该方法操作简便、迅速，且不需要复杂的设备，可以在实验室和现场快速检测乳制品中的抗生素。
但是，酶联免疫吸附试验在灵敏度上相对较低，不能满足一些特殊要求。
4.快速液相色谱法（RPLC）快速液相色谱法是传统液相色谱法的改进。
该方法通过改善液相色谱柱的设计和技术参数的优化，使得样品分离更快速、更高效、更稳定。
快速液相色谱法在抗生素的检测中具有一定的优势，能够满足高通量和快速分析的需求，但其设备和耗材价格较高。
结论：综上所述，乳品中抗生素的检测方法有很多种，不同的方法在灵敏度、准确性、操作复杂度、分析速度和设备成本等方面存在差异。
牛奶抗生素检测方法
牛奶抗生素检测方法
牛奶中抗生素残留的检测方法通常包括以下几种：
1. 高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）：这是目前最常用的方法之一，其原理是利用高效液相色谱和质谱联用技术，可以对牛奶中的抗生素进行快速、准确的检测和分析。
2. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）：这种方法利用特定的抗体和牛奶中的抗生素结合，通过酶的作用来检测抗生素的残留量，具有高灵敏度和快速的特点。
3. 色谱-质谱联用技术（GC-MS/MS）：这种方法也是一种常用的检测方法，通过气相色谱和质谱联用技术可以对牛奶中的抗生素进行准确的检测和分析。
4. 生物传感技术：这种技术利用生物传感器对牛奶中的抗生素进行检测，具有快速、灵敏度高，操作简便等优点。
需要注意的是，以上方法都需要在实验室条件下进行，使用专业设备和技术进行检测，确保牛奶中的抗生素残留符合国家标准和食品安全要求。
鲜乳中抗生素残留检测课件
免疫分析法
免疫分析法利用抗原与抗体的特异性 结合原理，通过标记抗体来检测抗生 素残留。
免疫分析法具有高灵敏度、高特异性 的优点，但成本较高，且可能存在交 叉反应。
高效液相色谱法
高效液相色谱法是一种分离和检测复杂混合物中各组分的方法，通过色谱柱分离 抗生素残留，再用紫外或荧光检测器进行检测。
高效液相色谱法具有高分离效能、高灵敏度的优点，但操作复杂，需要专业人员 操作。
04
抗生素残留检测流程
采样
01
02
03
采样时间
在鲜乳生产和运输过程中 进行采样，确保样品的代 表性。
采样点
选择具有代表性的采样点 ，如奶牛场、加工厂入口 和出口等。
采样量
根据检测需求和样品特性 确定采样量，确保足够的 检测精度。
样品处理
样品预处理
去除杂质、分离脂肪等，使至合适浓度。
样品稳定化
对于不稳定物质，需要进行稳定化 处理，以确保检测结果的准确性。
检测方法选择与操作
检测方法
选择适合鲜乳中抗生素残 留检测的方法，如微生物 法、免疫分析法、色谱法 等。
操作流程
按照所选方法的要求进行 操作，确保检测过程的规 范性和准确性。
质量控制
在检测过程中实施质量控 制措施，如空白试验、平 行样测定等，以提高检测 结果的可靠性。
地方标准
部分省份和地区根据实际情况制 定了更严格的地方标准，以确保 当地奶制品的质量和安全。
企业标准
企业自检标准
奶制品生产企业通常会制定自己的企 业标准，以确保所采购的原料奶中抗 生素残留符合要求。
合作方要求
奶制品生产企业会与奶源供应商合作 ，要求供应商提供的原料奶中抗生素 残留符合企业自定的标准或更严格的 标准。
抗生素检测方法
抗生素检测方法
1、取100ml样品（称取62.5g乳粉定溶至500ml，溶解，从中取100ml 样品）于250ml三角烧瓶内,记录样品号。
2、加热杀菌
将样品放在电炉上加热煮沸1分钟。
3、冷却、接种
用硅胶塞封口，置于冷水浴中（注意不要使奶液流动触及封口塞），使奶温降至43℃，用天平称取3g发酵菌种(预制)加入盛有奶样的三角瓶内。
摇动三角瓶，使发酵菌种与奶液混合均匀。
4、恒温发酵
将该批奶样置于已恒温至43℃的培养箱中进行发酵。
5、观察
恒温培养3小时后即可观察奶样。
取出样品，摇动三角烧瓶，观察凝固状态，并测定滴定酸度。
如酸度≥50。
T，则表明样品质量良好，抗生素阴性；如酸度＜50。
T，表明原料奶中有抗生素残留，抗生素阳性。
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法
牛奶中抗生素残留的危害及检测方法牛奶中抗生素残留是牛奶中存在的一种潜在的危害，抗生素残留的存在可能导致乳制品对人体健康造成潜在风险，因此现代养殖中的抗生素使用应该受到合理的限制与管理。
本文将介绍牛奶中抗生素残留的危害和检测方法。
抗生素残留是指动物在治疗过程中或者禁用期间再次投药导致药物残留在动物体内，被乳腺排出的未经处理的牛奶中。
抗生素残留在牛奶中可能会对人体健康造成潜在威胁。
1.对细菌的抗药性抗生素是一种杀菌或抑制菌生长的药物，常常用于治疗感染和疾病，但是长期的抗生素使用可能导致对某些菌株的抗药性增强，导致细菌对抗生素的耐受性增强2.人体健康风险抗生素残留在牛奶中被人体吸收，会对人体健康造成潜在风险，导致人体对抗生素的抗药性增强，甚至引发过敏反应，牛奶中抗生素残留对儿童和老年人尤为危险。
3.影响生产者信誉若检测出牛奶中存在较高水平的抗生素残留，不仅会影响消费者的信心，同时也会影响生产者的信誉与市场竞争力。
针对牛奶中抗生素残留的问题，现在常见的检测方法主要包括生物检测法和化学检测法两种。
1.生物检测法生物检测法是检测抗生素残留最常用的方法。
这种方法通过蛋白质结合技术将乳汁分离，将不同抗生素添加到不同份分离的液体中，观测不同的反应并确定抗生素是否存在。
但是生物检测需要对不同种类的抗生素配制不同的试验剂，生产成本较高且操作复杂。
2.化学检测法化学检测法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、免疫吸附层析试剂盒法等。
这种方法主要是使用化学方法来检测抗生素浓度，但是化学方法有时可能会发生误判和假阳性结果的情况，需要依赖先进的仪器和专业的化学技术人员进行操作，具有一定的局限性。
三、结论在牛奶生产中，应该非常注重对牛奶中抗生素的残留情况进行检测和限制，以保证消费者的健康安全。
同时，生产者也需要加强对动物的健康管理，合理使用抗生素。
尤其是要在动物治疗结束后，检测一段时间，确认牛奶不含有任何抗生素残留，才能将其投入市场销售，从而提高消费者的信心和市场竞争力。
奶制品抗生素检测方法
奶制品抗生素检测方法引言：随着人们对食品安全的要求越来越高，检测食品中的抗生素残留成为了一个重要的问题。
其中，奶制品作为重要的食品之一，其抗生素残留问题尤为重要。
本文将介绍一些常用的奶制品抗生素检测方法，包括微生物学方法、生物传感器方法和色谱法等，以期提高奶制品抗生素残留检测的准确性和可靠性。
一、微生物学方法1. Bacillus subtilis生物传感器法该方法主要是利用Bacillus subtilis感应菌株的响应来检测奶制品中抗生素的残留。
此感应菌株具有对多种抗生素具有特异性响应的特点，通过菌株呼吸过程中释放的二氧化碳的生成量来检测抗生素的残留水平。
2.抑菌圈法抑菌圈法是通过将抗生素加入到含有抗生素敏感菌的培养基上，观察形成的抑菌圈的大小，从而判断抗生素的残留水平。
这是一种简单、快速、经济的奶制品抗生素检测方法。
二、生物传感器方法1.酶传感器法酶传感器法是以酶为敏感元件，通过测定酶催化底物的反应产物或底物消失的速度，来确定奶制品中抗生素的残留水平。
例如，可以利用氨化酶催化酶法检测β-内酰胺类抗生素。
2.免疫传感器法免疫传感器法利用抗生素抗原和特异性抗体之间的结合反应来检测奶制品中抗生素的残留。
可以采用电化学、光学等方法来检测抗生素-抗体结合反应产生的信号差异。
三、色谱法1.高效液相色谱法高效液相色谱法是常用的奶制品抗生素检测方法之一、它通过在液相中将混合物分离，然后通过检测不同组分的保留时间、峰面积等参数来确定抗生素的残留水平。
2.气相色谱法气相色谱法是另一种常用的奶制品抗生素检测方法。
首先将奶制品中的抗生素以化学方法提取，然后通过气相色谱的分离和检测来确定抗生素的残留水平。
该方法具有高灵敏度和高分辨率的优点。
结论：奶制品抗生素残留检测是食品安全中的重要环节，需要提高检测方法的准确性和可靠性。
微生物学方法、生物传感器方法和色谱法是常用的奶制品抗生素检测方法，它们各有优缺点，需要根据实际情况选择合适的方法。
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检验所需器材
菌种、培养基和试剂 菌种:嗜热乳酸链球菌。 脱脂乳:经113℃加热灭菌20min。 4%2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液:称取1gTTC,溶于 5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用 灭菌蒸馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则 不能再用。 仪器用品 水浴锅、培养箱、不锈钢锅、温度计、蜡笔、试管架、 1ml和10ml的灭菌吸管、灭菌试管
不显色 红色 抗生素阴性
36±1℃水浴30MIN 显色者抗生素阴性 报告 阴 性 对 照 管
无抗生素的乳 8mL加抗生素及 菌液和TTC 无抗生素乳9mL 加菌液和TTC
显色者抗生素阳性 阳 性 对 照 管
报告
TTC检测法实验结果
准确培养30min观察结果,如为 阳性,再继续培养30min作第二 次观察。观察时要迅速,避免 光照过久发生干扰。检测各 种抗生素的灵敏度见表2 。
什么是TTC检测法？
TTC法，即氯化三苯基四氮唑法 ( tripheye tetrazolium chloride)，是目前 我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗 生素残留的检测方法(GB5409—85)。该 法简便、快速，无需特殊设备，3～4h可 见报告，很适合牧场、乳品厂及食品卫多种抗生素都很敏感，故可用于 多种抗生素的残留量检验。乳中有抗生素存在，则 检样中虽加入菌液培养物，但因细菌的繁殖受到抑 制，因此指示剂TTC不还原，不显色。与此相反，如 果没有抗生素存在，则加入菌液即行增殖，TTC被还 原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性， 呈红色为阴性，见表1 。
班级：10食检二班 姓名：马兰
引言
随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛 应用，牛奶中抗生素残留问题日益 受到国际社会的重视。对此，检测 技术也迅速发展，以寻求简便、快 速、准确、敏感性高的检测方法满 足日趋严格的残留限量要求，保障 人们饮用牛奶的卫生和安全。
牛奶中抗生素残留的来源
一般认为，对泌乳牛用药不当或不注意安全时 间是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使 用乳房灌注法治疗乳腺炎时，易造成牛乳中抗 生素残留。在牛饲料中添加饲料添加剂已十分 普遍，其中含有一定比例的抗生素，主要作用 是预防疾病，这是牛奶抗生素残留的重要原因。 此外，一些不法交奶户在高温季节为防止乳的 酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，这也是 乳中抗生素残留的一个来源。1983年，Egan调查 表明，用经抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给 正常乳牛挤乳，可使正常牛的乳中残留抗生素， 所以挤乳是乳中抗生素残留的另一个来源。
抗生素名称 青霉素 最低检出量 0.004单位
链雹素
庆大霉素 卡那霉素
0.5单位
0.4单位 5单位
注意事项
配制培养基应注意的问题
嗜热链球菌的保存
结束语
综上所述，鉴于牛奶中抗生素残留是涉及人 类健康的公共卫生问题，应重视和加强检测 工作，并努力研究发展一些简单、快速和便 携化的筛选多残留分析技术；发展高效、高 灵敏的联用技术和多残留组分确证技术；实 现分析过程自动化或智能化，以提高分析效 率、降低成本，保证消费者的健康。
显色状态 未显色者 徽红色者 桃红色至红色者 判断 阳性 可疑 阴性
将菌种移种脱脂乳,经36±1℃ 培养15h后,以灭菌脱脂乳1:1 稀释待用
检样 80℃，加热5MIN 冷却37℃以下
取检样9mL,置15mm×150mm 试管内
加菌液1mL
加菌液，36±1℃水浴2h
加TTC0.3mL
加TTC指示剂，36±1℃水浴30MIN
牛奶中抗生素残留的危害
加工上不能用于生产 发酵乳 ② 对饮用者的健康不利
①
微生物检测法
微生物检测法是应用较广泛的方法，其测定原 理是根据抗生素对微生物的生理机能、代谢的 抑制作用,来定性或定量确定样品中抗微生物药 物残留，如纸片法（PD）、TTC法、拭子法 （STOP）等。采用传统的微生物检测方法，缺 点是：(1)时间长；(2)显色状态判断通过肉眼辨 别，易产生误差，对微红色者无法做出准确判 断；(3)操作复杂。优点是费用低，一般实验室 都能操作。其中， 纸片法和TTC法是牛奶中药 物残留检测的两种常用的微生物检测法。