实验十-环境因素对微生物的影g向和紫外诱变效应
环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应
环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应姓名：王韬班级：生76组号：7-2组同组人：袁堂谧实验日期：2009-11-26一、实验目的：1.了解物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法。
2.了解紫外诱变的原理和紫外诱变在育种方面的应用。
3.练习单菌落划线分离微生物。
二、实验原理：1.微生物对微生物的影响：温度通过影响酶活力、蛋白质和核酸的活性来影响细胞新陈代谢。
微生物群体生长、繁殖最快的温度是微生物生存的最适温度。
但不一定是积累某一代谢产物的最适温度。
黏质赛氏杆菌能产生红色或紫红色色素，菌落表面颜色随着色素量的增加呈现出由橙黄到深红色逐渐加深的变化趋势。
2.化学因素对微生物的影响：多种化学物质通过不同原理影响微生物的生长。
例如重金属离子可以与菌体蛋白质结合而使之变形。
有机溶剂可以使蛋白质和核酸变性或溶解细胞膜。
3.生物因素对微生物的影响：许多细菌在生命过程中产生某些特殊的代谢产物如抗生素。
这些物质可以影响其它微生物的生长。
青霉素对革兰氏阳性菌的作用强于阴性菌。
链霉素作用于原核生物。
4.紫外线对微生物的影响：1)紫外线具有杀菌作用，主要因为它诱导形成胸腺嘧啶二聚体来破坏DNA的结构，使其不能行使正常功能。
另外，空气在紫外线照射下产生臭氧，也有一定杀菌作用。
紫外线杀菌最强的波长是226-256nm。
可见光能激活生物体中的光复活酶，使形成的二聚体拆开复原，部分或全部消除紫外线的作用，所以杀菌或诱变后的微生物应避光。
2)紫外线对细菌生长的作用。
我们可以利用个体经紫外线照射后的遗传特性会发生改变这种特性来进行灭菌或菌种选育工作。
紫外线诱变最有效的波长仅仅是253-265nm，一般紫外线杀菌灯所发出的紫外线波长大约有80%为254nm。
三、实验材料：菌源：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌菌液（18h）、粘质赛氏杆菌平板、一侧成线的产黄青霉，灰色链霉菌平板各1个培养基：淀粉培养基平板实验试剂：0.5%碘液，1%甲醛，1%过氧化氢，75%乙醇，95%乙醇，1%稀释的84消毒液实验仪器：25 ℃、30 ℃、37 ℃培养箱等，紫外照射箱四、实验步骤：(一)温度对黏质赛氏杆菌菌落色素形成的影响1.用接种环取培养好的粘质赛氏杆菌单菌落，在三个肉汤蛋白胨平板上分区划线接种，要保证能得到单一菌落。
环境因素对微生物生长发育的影响和紫外诱变
实验日期：2017.11.8 实验班级：生物技术指导教师：张建丽姓名：高熹学号：1120152430环境因素对微生物生长发育的影响和紫外诱变一、实验目的了解物理、化学及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其实验方法。
二、实验原理在自然界，微生物广泛分布、无处不在，其生长发育受到环境因素的影响，环境因素包括物理因素、化学因素和生物因素，如温度、渗透压、紫外线、pH、氧气、某些化学药品及拮抗菌等对微生物的生长繁殖、生理生化过程产生影响。
有的环境因素是微生物生长繁殖所必须的条件，有的环境因素则表现出对微生物生长发育的抑制或者杀灭作用。
1.紫外线杀菌实验UV的波长范围为136～390nm，其中200～300nm波长范围的紫外线具有杀菌效应；波长254nm的UV最易被嘌呤和嘧啶碱基吸收，因而杀菌效果最强；紫外线杀菌主要是形成嘧啶二聚体，最常见的是胸腺嘧啶二聚体，相邻碱基间引起DNA螺旋的扭曲畸变，导致细菌的死亡。
实验中常用波长为254nm的15W紫外灯管，照射距离不超过3m。
照射时间为 15-30min。
2.化学消毒剂、抗生素抑菌实验化学消毒剂是通过使菌体蛋白质变性或是与酶的-SH结合使酶失活而发挥杀菌或抑菌作用。
2.5%碘液的作用是碘不可逆地与菌体蛋白络氨酸结合；5%苯酚使蛋白质变性；75%乙醇使蛋白质脱水变性；0.05%龙胆紫中带正电荷基团与蛋白质的羧基结合；新洁尔灭作为阳离子型表面活性剂吸附在菌体细胞表面使其损伤；37%-40%甲醛水溶液与蛋白质氨基结合。
3.生物因素影响用接种环将产黄青霉的孢子划一直线接种于肉汤蛋白胨固体平板，置28℃培养48-72 h。
微生物之间的拮抗作用是普遍存在的。
许多微生物在其生命活动过程中能产生某种特殊的代谢产物，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的作用，例如抗生素。
不同抗生素的抗菌谱是不同的，某些抗生素只对少数细菌有抗菌作用，例如青霉素一般只对革兰氏阳性菌有抗菌作用，多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素；而另一些抗生素则对多种细菌有作用，例如四环素、土霉素等对许多革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有作用，这类抗生素称为广谱抗生素。
微生物实验 环境条件对微生物生长的影响
B. S
2人一组，每组每1一浓度1块培养皿，3种菌接在同一皿上 人一组，每组每1一浓度1块培养皿，
三、实验方法
4．微生物对几种抗生素的敏感性
E. c 氯 卡
红 庆
(1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基，做标记； (1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基，做标记； 制平板——牛肉膏蛋白胨培养基 (2)涂布接种： (2)涂布接种：E. coli 或 B. subtilis 或 盐杆菌 涂布接种 制菌悬液——取0.2ml涂布均匀——接纸碟 制菌悬液——取0.2ml涂布均匀——接纸碟 —— 涂布均匀—— (3)将各培养皿置于 ℃下培养48h 48h。 (3)将各培养皿置于28℃下培养48h。 将各培养皿置于 (4)取出观察各菌的生长情况， (4)取出观察各菌的生长情况，确定每种微生物 取出观察各菌的生长情况 对几种抗生素的敏感性。 对几种抗生素的敏感性。 每人1块培养皿， 每人1块培养皿，选1种菌涂布接种，然后加4种抗生素 种菌涂布接种，然后加4
B. S
三、实验方法
2．pH对微生物生长的影响 pH对微生物生长的影响
H. h E. c
(1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基, (1)制平板——牛肉膏蛋白胨培养基, 制平板——牛肉膏蛋白胨培养基 分别标上pH5.0 、pH7.0、 pH9.0标记 分别标上 、 标记
B. S
pH5.0
(2)划线接种——E. (2)划线接种—— coli、B. subtilis、盐杆菌。 划线接种—— 、盐杆菌。 (3)将各培养皿置于 ℃下培养48h 48h。 (3)将各培养皿置于28℃下培养48h。 将各培养皿置于 (4)取出观察各菌的生长情况， (4)取出观察各菌的生长情况，确定每种微生物的最佳 取出观察各菌的生长情况 生长pH。 生长pH。 pH 2人一组，每组每pH一块培养皿，3种菌接在同一皿上 人一组，每组每pH一块培养皿， pH一块培养皿
紫外线对微生物的影响 PPT课件
互关系，有助于了解微生物在自然界的分布与作用，也可 指导人们在食品加工中有效地控制微生物的生命活动，保 证食品的安全性，延长食品的货架期。 温度是影响微生物生长繁殖最重要的因素之一。在一定 温度范围内，机体的代谢活动与生长繁殖随着温度的上升 而增加，当温度上升到一定程度，开始对机体产生不利的 影响，如再继续升高，则细胞功能急剧下降以至死亡。 pH 对微生物生命活动的影响主要是通过以下几个方面 实现的：一是使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生 变化，从而影响其生物活性；二是引起细胞膜电荷变化， 导致微生物细胞吸收营养物质的能力发生变化；三是改变 环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性。不同微生物 对pH 条件的要求各不相同，它们只能在一定pH 范围内生 长。
（三）化学消毒剂实验 1、将已经灭菌并冷却到50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂 培养基倒入无菌培养皿中，水平放置待凝固； 2、用无菌吸管分别吸取0.1mL 培养18h 的金黄色葡萄 球菌菌液（1 皿）和大肠杆菌菌液（1 皿）加入上述平板 中，用无菌三角涂棒涂布均匀； 3、将已经涂布好的平板底皿划分为4 等份，每一等份 内标明一种消毒剂的名称； 4、用无菌镊子将已灭菌的小圆滤纸片分别浸入装有各 种消毒剂的试管中浸湿； 5、将上述贴好滤纸片的含菌平板倒置放于37℃条件下 培养24h 后观察抑菌圈的大小。
三、实验材料 1.菌种 培养24小时的枯草杆菌和大肠 杆菌，培养了72小时的黑曲霉或青霉。 2.培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面，马 铃薯葡萄糖培养基斜面。 3.器材 酒精灯，接种针，冰箱，恒温 箱。
四、实验方法 1.接菌 按无菌操作方法进行 （1）在5支牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上都接种 上枯草杆菌，接种时划直线或曲线。 （2）在另5支牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上都接种 上大肠杆菌，接种时划直线或曲线。 （3）在5支马铃薯葡萄糖培养基斜面上接种曲 霉或青霉，接种时用点接法。 2.培养与观察 （1）培养 将上述接种好的菌种，分别放入 0℃、15℃、30℃、37℃、50℃五种温度下培养。 （2）观察 48小时后观察，记录实验结果。
外界因素对细菌的影响实验报告
外界因素对细菌的影响实验报告摘要：本实验主要研究外界因素对细菌的影响，我们使用几种不同的方法研究了温度、pH值和紫外线对细菌的生长和复制的影响。
结果表明，在不同的温度下，细菌的生长和复制速率不同。
当温度较高时，细菌生长和复制速率较快。
在不同的pH值下，细菌的生长也有所不同。
细菌在pH值为7左右的中性条件下生长最好。
经过紫外线照射，细菌的生长也呈明显的受到抑制的趋势，紫外线照射的时间越长，细菌生长能力就越弱。
总的来说，外界因素对细菌的生长和复制有着显著的影响，我们需要了解这些影响以便更好地控制和使用细菌。
引言：细菌是一类单细胞原核生物，广泛存在于自然界中，在医学、环境科学等领域中有着广泛的应用。
对于细菌的生长和繁殖，其与环境因素密切相关。
本实验旨在研究外界因素对细菌生长和复制的影响，包括温度、pH值和紫外线照射等。
材料与方法：1. 材料：细菌溶液、培养基、三角量杯、试管、移液管、离心机、紫外线灯、温度控制箱、pH计、电子天平等。
2. 方法：(1) 温度对细菌的影响实验：准备好培养基和细菌溶液，分别取5ml细菌液，分别放入三个试管中，分别放置在20℃、30℃和40℃的温度箱中，过程中每隔1小时进行一次离心取样，记录细菌生长情况。
(2) pH值对细菌的影响实验：将细菌溶液分别放入pH为4、5、6、7、8、9的培养基中，混合均匀后，进行培养，观察48小时内细菌的生长情况。
(3) 紫外线对细菌的影响实验：在细菌培养基中加入适量的细菌液，用紫外线灯照射不同时间（0、10、20、30分钟），然后观察细菌生长情况。
结果：1. 温度对细菌的影响实验结果表明，在温度为20℃的条件下，细菌生长缓慢，到48小时时，只有非常少的细菌复制了。
在30℃的条件下，细菌生长得更快，到48小时时，有很多细菌繁殖了。
在40℃的条件下，细菌的生长呈明显的停滞，只有很少数的细菌繁殖了。
2. pH值对细菌的影响实验结果表明，在pH为7左右的条件下，细菌的生长最好，在48小时后，培养液中细菌数量大大增加。
环境条件对微生物的影响实验报告
环境条件对微生物的影响实验报告嘿，大家好！今天咱们来聊聊微生物这个小家伙们，以及它们是怎么跟环境条件“打交道”的。
微生物可真是个神奇的存在，肉眼根本看不见，却在我们生活的每一个角落都活跃着。
想象一下，你的冰箱、你的花园，甚至你的手上，都有它们的身影，真是让人又爱又恨。
今天就带你们深入这个“微小世界”，看看它们是如何受环境影响的。
咱们得聊聊温度。
温度可是一把双刃剑，有的微生物在高温下活得欢快，简直像是参加派对，而有的则会瑟瑟发抖，感觉要冻成冰棍。
比如说，嗜热菌就特别喜欢热乎乎的环境，甚至能在100度的水中安然无恙，真是太厉害了。
而像大肠杆菌这种小家伙，稍微一降温，立刻就像被打了鸡血，活力全无。
想想在炎热的夏天，冰淇淋融化得那叫一个快；而在寒冷的冬天，热汤香气四溢，微生物的活动也自然受到影响，这真是温度之神的游戏。
我们来看看湿度。
哎呀，湿度也是个大事儿。
潮湿的环境，微生物就像找到了宝藏，活得可开心了。
比如霉菌，简直就是潮湿的狂热分子，一遇到湿气，立刻就开派对，瞬间就把食物搞得发霉。
而干燥的环境呢？就像是微生物的死亡禁区，很多小家伙就会进入“休眠模式”，静静地等待着下一个机会。
想象一下，家里的衣服发霉了，真让人心烦，这背后可少不了湿度的捣乱。
然后就是光照了。
太阳是个好东西，但对于微生物来说，光照就像是一把利刃，能把它们分成两派。
光合细菌就是光的追随者，沐浴在阳光下，兴致勃勃地进行光合作用，生成能量；而一些厌氧菌则完全不喜欢光，甚至连听都不想听，光线一来，它们就躲得远远的，跟光说再见。
就像在学校里，爱学习的孩子在阳光下跳舞，而那些不爱学习的则在阴暗角落偷懒。
说到营养物质，那可真是微生物的“饭碗”。
不同的营养成分就像是不同的美食，有的微生物偏爱糖分，有的则喜欢蛋白质。
就拿酵母菌来说，遇到糖就像老鼠见到奶酪，乐得不行。
它们通过发酵，转化成美味的面包和酒，真是有本事。
而如果缺少营养，那可就惨了，很多微生物只能“忍饥挨饿”，生活得十分艰难。
12环境因素对微生物生长的影响
环境因素对微生物生长的影响环境因素对微生物生长的影响实验内容▪1.温度对微生物的影响▪2.化学因素对微生物的影响▪3.生物因素对微生物的影响▪4.紫外线对微生物的影响▪5.紫外线对微生物的诱变效应第I部分温度对微生物生长的影响▪用连续划线法分别接种大肠杆菌和酵母菌在4块LB和4块PDA平板上，写好标记，将平板分别放置在4℃、室温、28℃和37℃培养箱中进行培养，24h后取出，观察不同温度培养下的微生物生长状况，注意记录室温的实际温度。
（小平板）菌种培养基4℃室温28℃37℃大肠杆菌LB酵母菌PDA第II部分化学因素对微生物的影响化学消毒剂基本原理▪重金属及其盐类▪与菌体蛋白质结合而使之变性或与某些酶蛋白的巯基相结合而使酶失活▪蛋白质沉淀剂，或与代谢产物发生鳌合作用而使之变为无效化合物▪有机溶剂(酚、醛、醇等)▪使蛋白质及其核酸变性，也可破▪卤族元素及其化合物碘可与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋白质失活；氯气与水发生反应产生的强氧化剂也具有杀菌作用。
染料：低浓度条件下可抑制细菌生长，染料对细菌的作用具有选择性，革兰氏阳性菌普遍比革兰氏阴性菌对染料更加敏感▪表面活性剂降低溶液表面张力，这类物质作用于微生物细胞膜，改变其透性，同时也能使蛋白质发生变性。
器材1、菌种金黄色葡萄球菌2、培养基Luria-Bertani（LB）培养基3、溶液或试剂70%乙醇(1红)，95%乙醇(2黄)，双氧水（3蓝），饱和次氯酸钠(4绿)，碘酊(5棕)，其他(6白)（自选：洗手液、洗洁精、舒肤佳、染色液……）4、仪器或其他用具无菌培养皿，无菌滤纸片，试管，吸管，三角涂棒等操作步骤1、在无菌环境下用移液枪吸取0.2ml金黄色葡萄球菌菌液置于LB板上，涂布均匀。
2、将已涂布好的平板底皿划分成5-6等份，每一等份内标好试剂名称。
操作步骤▪3、用无菌镊子将已灭菌的小圆滤纸片(D5mm)分别浸入装有各种消毒剂溶液的试管中浸湿。
▪注意取出滤纸片时保证过滤纸片所含消毒剂溶液量基本一致，并在管内壁沥去多余药液，圆片一定要贴平。
环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应
环境因素对微生物的影响和紫外诱变效应姓名：王韬班级：生76组号：7-2组同组人：袁堂谧实验日期：2009-11-26一、实验目的：1.了解物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法。
2.了解紫外诱变的原理和紫外诱变在育种方面的应用。
3.练习单菌落划线分离微生物。
二、实验原理：1.微生物对微生物的影响：温度通过影响酶活力、蛋白质和核酸的活性来影响细胞新陈代谢。
微生物群体生长、繁殖最快的温度是微生物生存的最适温度。
但不一定是积累某一代谢产物的最适温度。
黏质赛氏杆菌能产生红色或紫红色色素，菌落表面颜色随着色素量的增加呈现出由橙黄到深红色逐渐加深的变化趋势。
2.化学因素对微生物的影响：多种化学物质通过不同原理影响微生物的生长。
例如重金属离子可以与菌体蛋白质结合而使之变形。
有机溶剂可以使蛋白质和核酸变性或溶解细胞膜。
3.生物因素对微生物的影响：许多细菌在生命过程中产生某些特殊的代谢产物如抗生素。
这些物质可以影响其它微生物的生长。
青霉素对革兰氏阳性菌的作用强于阴性菌。
链霉素作用于原核生物。
4.紫外线对微生物的影响：1)紫外线具有杀菌作用，主要因为它诱导形成胸腺嘧啶二聚体来破坏DNA的结构，使其不能行使正常功能。
另外，空气在紫外线照射下产生臭氧，也有一定杀菌作用。
紫外线杀菌最强的波长是226-256nm。
可见光能激活生物体中的光复活酶，使形成的二聚体拆开复原，部分或全部消除紫外线的作用，所以杀菌或诱变后的微生物应避光。
2)紫外线对细菌生长的作用。
我们可以利用个体经紫外线照射后的遗传特性会发生改变这种特性来进行灭菌或菌种选育工作。
紫外线诱变最有效的波长仅仅是253-265nm，一般紫外线杀菌灯所发出的紫外线波长大约有80%为254nm。
三、实验材料：菌源：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌菌液（18h）、粘质赛氏杆菌平板、一侧成线的产黄青霉，灰色链霉菌平板各1个培养基：淀粉培养基平板实验试剂：0.5%碘液，1%甲醛，1%过氧化氢，75%乙醇，95%乙醇，1%稀释的84消毒液实验仪器：25 ℃、30 ℃、37 ℃培养箱等，紫外照射箱四、实验步骤：(一)温度对黏质赛氏杆菌菌落色素形成的影响1.用接种环取培养好的粘质赛氏杆菌单菌落，在三个肉汤蛋白胨平板上分区划线接种，要保证能得到单一菌落。
实验九 环境因素对微生物的影响
下次实验
微生物的生理生化鉴定与酸奶制作请预习! 请预习3 化学药剂对微生物的影响
(1)将灭菌滤纸片浸入供试药剂中 (1)将灭菌滤纸片浸入供试药剂中 (2)平皿分区 平皿分区: (2)平皿分区:分别取已知菌与未知菌的平皿各一 分为六个区, 只，分为六个区,在背面做好标记 (3)加药剂 用无菌镊子夹取浸药滤纸片（ 加药剂： (3)加药剂：用无菌镊子夹取浸药滤纸片（注意把 药液沥干）分别平铺于对应的区间内， 药液沥干）分别平铺于对应的区间内，注意药剂之 间不要互相沾染。 间不要互相沾染。 (4)培养 两只平皿置于28℃下培养48hr 培养： 28℃下培养48hr后观察结 (4)培养：两只平皿置于28℃下培养48hr后观察结 果。
2、紫外线杀菌试验
(1) 紫外灯预热20分钟 紫外灯预热20分钟 20 取已冷却凝固的平皿2 未知菌）， ），分别用无菌镊 (2) 取已冷却凝固的平皿2只（未知菌），分别用无菌镊 子夹取已灭菌的五角星图案纸放在平皿中央。 子夹取已灭菌的五角星图案纸放在平皿中央。 将两只平皿置于紫外灯下，打开皿盖，照射5分钟， (3) 将两只平皿置于紫外灯下，打开皿盖，照射5分钟， 不开灯取出一皿 用报纸包好培养。另一皿用日光灯照射10 取出一皿， 不开灯取出一皿，用报纸包好培养。另一皿用日光灯照射10 分钟后，放入培养箱培养。 分钟后，放入培养箱培养。 培养：平皿置于28℃下培养48hr后观察结果。 28℃下培养48hr后观察结果 (4) 培养：平皿置于28℃下培养48hr后观察结果。
4 抗生素对微生物的影响 方法同3 方法同3，采用不同的抗生素
思考题
只被紫外线照射和被紫外和可见光分别照射 过的平板上菌落的生长情况有何不同？ 过的平板上菌落的生长情况有何不同？为什 么？ 化学药剂对微生物所形成的抑菌圈是否说明 微生物细胞已被杀死？ 微生物细胞已被杀死？ 能否通过你或同学做的实验结果对未知菌做 个初步判断？ 个初步判断？
实验十+环境因素对微生物的影响
大肠
大肠
金葡 枯草
2皿 /组 各 8支 / 各 8支 / 2皿 /组 2皿 /组 组 组
五、实验结果
将所观察到的实验现象记录下来并分析 原因。
六、问题与讨论
1. 含化学消毒剂的滤纸片周围形成的抑(杀) 菌圈表明该区域培养基中的原有细菌被杀 死或被抑制而不能进行生长，你如何用实 验证明抑(杀)菌圈的形成是由于化学消毒 剂的抑菌作用还是杀菌作用? P103，2 （ 1） 。
2. 化学因素对微生物的影响
①pH的影响：取pH 3、5、7、9的2套葡萄糖蛋白 胨液体培养基，分别接种大肠杆菌及啤酒酵母 菌悬液0.2ml→37℃培养24h观察混浊度。
②化学药物的影响：(2皿/组) 用平板涂布法分别接种大肠和金葡，分别按顺 序将浸有75%乙醇、红药水、来苏水、碘酒的 滤纸片〔沥干药液〕贴在培养基上→37℃培养 24h观察抑菌圈的大小。
化学因素
物理因素
紫外线 ：
紫外线对微生物有诱发突变和致死作用，因紫外线 照射剂量不同而异，低剂量用于微生物诱变育种， 高剂量用于实验室或工作间消毒杀菌。紫外线照射 剂量与照射光强、距离以及照射时间相关。
温度 ：
微生物的生命活动，必须在一定温度范围内进行， 温度过高或过低，均会影响其代谢方式、生长速度 甚至可能致死微生物。根据微生物生长最快的温度 可以测定微生物的最适生长温度。不同微生物最适 生长温度不同
2. 解释在细菌培养中吲哚检测的化学原理， 为什么在这个试验中用吲哚的存在作为 色氨的酶活性的指示剂，而不用丙酮酸?
有些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的 色氨酸产生吲哚和丙酮酸，吲哚与对二甲基氨 基苯甲醛结合，就会形成玫瑰吲哚，此为红色 化合物。因此吲哚试验可以作为一个生物化学 检测的指标。 这些细菌在产生吲哚的同时，也产生丙酮 酸。但是由于糖在发酵之后都产生丙酮酸，因 此丙酮酸不能作为色氨的酶活性的指示剂。
环境因素对微生物生长的影响实验报告
环境因素对微生物生长的影响实验报告随着人类对环境的不断破坏，环境因素对微生物生长的影响也越来越受到人们的重视。
为了深入研究这一问题，我们开展了一项环境因素对微生物生长的影响实验。
本实验使用的微生物是大肠杆菌，实验中我们选择了三个不同的环境因素，包括温度、酸碱度和营养物质，分别控制这些环境因素对微生物的影响。
实验过程中，我们使用培养皿和培养基进行微生物培养，并将其放置在不同的环境条件下进行观察记录，对微生物的生长情况进行了详细的分析。
首先，我们探究了不同温度对微生物生长的影响。
我们在实验中设置了三个不同的温度条件，分别为室温、37度和60度。
实验结果表明，在37度的条件下，微生物的生长最为迅速，而在60度的条件下，微生物的生长则受到了显著的抑制。
这表明温度对微生物生长具有重要的影响，不同的温度条件对微生物的生长速度存在显著的差异。
其次，我们考察了酸碱度对微生物生长的影响。
我们将培养基分别调整为pH值为5.5、7.0和9.0的三种不同的酸碱度条件。
通过实验我们发现，在pH值为7.0的条件下，微生物的生长最为迅速，而在酸性条件下（pH值为5.5）和碱性条件下（pH值为9.0），微生物生长速度均受到了一定程度的抑制。
这表明酸碱度对微生物的生长速度也存在着显著的影响。
最后，我们研究了营养物质对微生物生长的影响。
我们在三种不同的培养基上分别添加了不同的营养物质，并对微生物的生长情况进行了观察。
结果表明，在含有丰富营养物质的培养基中（如牛肉汤培养基），微生物的生长最为迅速；而在无机盐类含量较高的培养基（如无菌纯水培养基）中，微生物的生长则受到了显著的抑制。
综合以上实验结果，我们得出了以下结论：环境因素对微生物生长具有重要的影响，不同的环境条件对微生物的生长速度存在显著的差异。
在未来的生物技术研究中，我们应当充分考虑环境因素对微生物的影响，以便更好地控制微生物的生长，提高其产量和品质。
实验十 环境因素对微生物的影响27页PPT
38、若是没有公众舆论的支持，法律 是丝毫 没有力 量的。 ——菲 力普斯 39、一个判例造出另一个判例，它们 迅速累 聚，进 而变成 法律。 ——朱 尼厄斯
40、人类法律，事物有规律，这是不 容忽视 的。— —爱献 生
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
实验十 环境因素对微生物的影响27页PPT
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安Hale Waihona Puke 。56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
实验十 环境因素对微生物的影响
6
、
露
凝
无
游
氛
，
天
高
风
景
澈
。
7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
、
吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左
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课程名称：中学生物实验技术实验名称：实验十环境因素对微生物的影g向和紫外诱变效应姓名：学号：实验成绩：
实验日期：年月日实验地点：指导教师：
一，实验目的
1．了解物理因素、化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法．
2．了解紫外线诱变原理，并初步掌握紫外线诱变育种的方法．
二、实验原理
在自然界中，微生物分布极其广泛，几乎无处不在，微生物的生长发育受着环境因素的影响，而不同的微生物及微生物不同的生理状态受环境因素影响的程度也不同，有的环境因素是微生物生长繁殖所必需的条件，有的表现为抑制作用，有的表现为杀菌作用。
1．温度对微生物的影响；温度通过影响蛋白质、植酸等生物大分子的结构与功能，以及细胞结构如细胞膜的流动性及完整性来影响微生物的生长、繁殖和新陈代谢．过高的环境温度会导致蛋白质或核酸的变性失活，而过低的温度会使酶活力受到抑制，细胞的新陈代谢活动减弱。
微生物群体生长、繁殖最快的温度为其最适生长温度，但它并不等于积累某一代谢产物的最适温度。
黏质赛氏杆菌能产生红色或紫红色色素，菌落表面颜色随着色素量的增加呈现出由橙黄到深红色逐渐加深的变化趋势。
2．化学因素对微生物的影响：常用的化学消毒剂主要包括重金属及其盐类、有机溶剂(酚、醇、醛等)、卤族元素及其化合物和表面活性剂等．重金属离子可与菌体蛋白质结合而使之变性或与某些酶蛋白的巯基相结合而使酶失活，重金属盐则是蛋白质沉淀剂，或与代谢产物发生整合作用而使之变为无效化合物；有机溶剂可使蛋白质及校酸变性，也可破坏细胞膜透性使内含物外溢；碘可与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋白质失活，氧气与水发生反应产生的强氧化剂也具有杀寓作用；染料在低浓度条件下可抑制细菌生长，染料对细菌的作用具有选择性，革兰阳性菌普遍比革兰阴性菌对染料更加敏感，表面活性剂能降低溶液表面张力，这类物质作用于微生物细胞膜，改变其进性，同时也能使蛋白质发生变性。
3．生物因素对微生物的影响：生物之间的关系从总体上可分为互生、共生、寄生、拮抗等，微生物
之间的拮抗现象是普遍存在于自然界的．许多微生物在其生命活动过程中能产生某种特殊代谢产物如抗生素，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的作用．不同抗生素的抗菌诺是不同的，某些抗生素只对少数细菌有抗菌作用，例如青霉素一般只对革兰阳性菌具有抗菌作用，多黏菌素只对革兰阴性菌有作用，这类抗生常称为窄谱抗生素；另一些抗生素对多种细菌有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰阳性菌和革兰阴性菌都有作用，称为广谱抗生素。
可以通过抗菌谐试验来检测某一种抗生震的抗菌范围。
本实验中主要验证产黄青霉产生的青霉菌和灰色链霉菌产生的链霉素对不同细菌的抑制效果。
产黄青霉分泌青霉素抑制细菌细胞壁的合成，其机理是青霉索与肽聚糖五肽侧链末端D—丙氨酰—D—丙氨酸结构类似，青霉素竞争与转肽酶结合形成青霉素转肽酶复合物，从而破坏细胞壁完整网状结构．青霉素对革兰阳性菌的作用强于革兰阴性菌，链霉素作用于核糖核酸30S亚基，由于真核生物是80S(60S~40S)，原核生物是70S(30S+50S)．所以链霉素只作用原核生物．
4．紫外线对微生物的影响及诱变效应
(1)紫外线具有杀菌作用：主要是因为它诱导形成胸腺嘧啶二聚体来破坏DNA的结构，使其不能正常行使功能。
另外，空气在紫外线照射下产生臭氧(O3)，也有一定杀菌作用。
紫外线杀菌力最强的波长是226~256nm部分，紫外线灭菌一般是用紫外灯管实现的。
紫外线透过物质能力很差，所以只适用于空气及物体表面的灭菌，它距离照射物以不超过1．2m为宜。
紫外线对于人体也有伤害作用．所以不能直视开着的紫外灯，更不能在开着紫外灯的情况下工作．可见光能激活生物体中的光复活酶，使形成的二聚体拆开复原，部分或全部消除紫外线的作用，所以也不能同时开着钨丝灯及日光灯情况下开紫外灯灭菌。
且经诱变处理后的微生物菌种要避免长波紫外线和可见光的照射，需用双层报纸包裹后培养。
(2)紫外线对细菌生长的影响：此影响是随着紫外线对微生物照射剂量、时间及距离的不同，对微生物的生理活动也相应地产生不同的效果，剂量高、时间长、距离短就易杀死它们，剂量怔、时间短、距离长时就会有少量个体残存下来，其中一些个体的遗传特性发生了变异。
我们可以利用这种特性来进行灭菌或菌种选育工作．紫外诱变最有效的波长仅仅是在253~265nm，一般紫外线杀菌灯所发射的紫外
线大约有80％是254nm。
紫外线诱变的主要生物学效应是由于DNA变化而造成的，DNA对紫外线有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感．紫外线引起DNA结构变化的形式很多，如DNA链的断裂、碱基破坏。
但其最主要的作用是使同链DNA的相邻嘧啶间形成胸腺嘧啶二聚体，阻碍碱基间的正常配对，从而引起微生物突变。
三、实验材料
1．紫外照射箱，37℃培养箱、25℃培养箱，200μl、1ml、5ml取液器，相应的灭菌枪头。
2．20个无菌平板(内含20ml左右固体培养基)，l0ml无菌带帽试管(或Eppendorf管)每组10支，无菌涂棒，无菌的小圆滤纸片，接种环，黑纸，标签纸，酒精灯，记号笔，试管架．3．金黄色葡萄球菌液(Staphyloccus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、黏质赛氏杆菌(Serratia marcescens)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)的试管斜面、在一边已长成一直线状菌落的产黄青霉，灰色链霉菌平板各1个。
4．肉汤蛋白胨琼脂培养基、淀粉培养基．
5．2．5％碘酊，75％乙醇，5％苯酚，1；200稀释的84消毒液，1／500甲醛溶液，0.05％甲紫，
四、实验步骤
(一) 化学因素对微生物生长的影响
1．用无菌吸头吸取200μl培养了18h的金黄色葡萄球菌菌液于肉涵蛋白胨培养基上，用无菌涂布棒涂布均匀．放置片刻，等菌液全部被培养基吸收后进行下一步实验．
2．将上述培养皿用记号笔分成数等份，每一等份内标明一种药物名称．
3．用无菌镊子将小滤纸片分别浸入各种药剂中，取出，并在试管内壁上除去多余药液后，以无菌择作将纸片对号放人培养皿的小区内．注窟每种药剂专用一把镊子，防止不同药剂互相污染．4．置37℃培养箱培养48h后观察结果。
比较抑菌圈大小．
(二)生物因素对微生物生长的影响(选做)
1．用肉汤蛋白胨培养基制成平板，在平板一侧，用接种环取产黄青霉的孢子，在平扳上划一直线接种，置于28℃培养48~72h．
2．待形成菌苔后，从距产黄毒霉的菌苔边缘5mm处用接种环并分别垂直向外划直线接种已培养18h的大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌。
在37℃培养箱中培养48h．观察结果．用同样的方法做灰色链霉菌的抗菌性试验．
(三)紫外线杀菌效果的观察
用无菌吸头吸取l00ml培养了18h的金黄色葡萄球菌液于肉汤蛋白胨培养基平板上，以无菌涂棒涂布均匀，用一张三角形锡纸条(或其他形状的纸条)遮住部分平板，打开皿盖，置紫外灯下照射3rain后取出锡纸(或纸条)，盖上皿盖。
在黑暗中(或红灯下)用双层报纸包裹，倒置于37℃培养箱中培养48h后观察结果。
(四)紫外线对微生物的诱变效应
1．菌液的制备：把枯草杆菌菌种接人有l00ml培养基的250ml无菌三角瓶中，37℃，200r／min 摇床培养18h。
2．稀释：取摇瓶培养至对敷生长期的菌液(菌液浓度为108～1010／m1)0.5ml入4.5ml生理盐水中或0.1ml入4.9ml生理盐水中，进行10倍稀释，稀释度为l0-1一10-8。
3．涂布；取10-1～10-8的菌液各100μ1涂平板，每个稀释度涂平板2块。
4，紫外线处理；分别对10-6-10-1的平板照射10s，20s，30s，40s，50s，60s(紫外灯功率为30W，照射距离为30cm)。
以10-7和l0-8平板作对照。
处理的培养皿在黑暗中(或红灯下)用双层报纸包好，倒置37'C培养，48h后观察并记录结果。
5．观察诱变效应：将培养皿取出，分别向菌落分散开的平板内加卢戈碘液(或革氏碘液)数滴，在菌落周围将出现透明圈，分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值(HC值)。
与对照平板进行比较，把明显大于对照的菌落接到斜面培养保存。
五，实验结果与讨论
1．观察化学试剂的抑菌现象，测量抑菌圈半径，如表10—1．
表10-1 化学试剂的抑菌现象
化学试剂抑菌圈半径(mm)抑菌能力排序
2.5%碘酊31
75%乙醇 1.26
5%苯酚 3.22
1：200稀释的84消毒液23
1／500甲醛溶液 1.84
0.05%甲紫 1.55
2．记录紫外线对各浓度枯草杆菌的诱变情况，填入表10—2。
并测定透明圈直径与菌落直径的比值．
表10-2紫外线对各浓度枯草杆菌的诱变情况
稀释度照射时间(s)处理后活菌数平均值存活率%致死率
12
10-160菌苔菌苔\\\
10-430545 425485 2.3497.67
10-520130119124694
10-6101321178.1991.81
10-70141916.51000
10-8023 2.51000
注：处理时间10-30秒的致死率在90-95%的范围，可以视为有效的辐射剂量。
没有得到透明圈直径与菌落直径比(约2.5mm)大的菌落。