氨在肝性脑病发病过程中的作用
氨中毒在肝性脑病发病中的作用
氨中毒在肝性脑病发病中的作用机能学实验报告氨中毒在肝性脑病发病中的作用摘要：【目的】对实验动物输入氯化氨，观察出现症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道pH及注射谷氨酸是针对氨中毒的一项基本治疗措施。
【方法】将将家兔麻醉后实施腹部手术，结扎家兔肝脏的其中3叶，十二指肠注射氯化铵，观察家兔是否出现行为异常以及出现异常所需的时间。
对出现行为异常的家兔静脉注射复方谷氨酸钠进行救治。
【结果】家兔出现了有节律的抽搐，出现四肢伸直，头尾昂起，脊柱挺硬等角弓反张现象。
没有进行救治的家兔持续抽搐，死亡。
【结论】肝功能健全可使氨中毒的作用时间延长，即肝有对氨的解毒作用。
当肝功能受损时，肝脏将氨转化为尿素的能力减弱，可导致血氨升高，间尔影响脑的功能。
复方谷氨酸钠溶液有缓解氨中毒的作用。
关键词:氨中毒；肝性脑病；复方氯化氨；复方谷氨酸钠；醋酸引言：病理情况下，当肝功能受损时，或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多，或经侧支循环进入体循环，均可导致血氨升高。
增高的血氨可经过血脑屏障进入脑组织，通过干扰脑组织的能量代谢，使脑内神经递质发生改变等作用，引起脑的功能障碍，从而出现相应的症状和体征。
1、实验材料1.1实验材料：1.1.1 实验动物：家兔1.1.2实验仪器：家兔手术器械。
1.1.3实验药品：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，醋酸，生理盐水，复方谷氨酸钠溶液2、实验方法：1.2.1麻醉：家兔称重，按5ml/kg体重剂量耳缘静脉缓慢注射氨基甲酸乙酯，麻醉后背位固定于兔手术台上。
1.2.2急性肝功能不全动物模型复制：从胸骨剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，轻轻向下压肝，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。
用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。
对照组动物不结扎肝脏。
1.2.3十二指肠插管：找出十二指肠，用线缝一圆圈，在圆圈中心切一小口，插入导管向下推进约4~5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。
氨中毒
氨中毒在肝性脑病发病中的作用【摘要】目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。
了解降低肠道pH及注射复方谷氨酸钠是针对氨中毒的一项基本治疗措施。
方法：全班分为7大组，其中第一，二组为假手术组，其他组为模型组，第二，六，七组为症状明显抢救组，第一，三，四，五组为早期治疗组。
结果：结扎肝脏并注射复方氯化铵溶液，家兔出现肝性脑病，注射复方谷氨酸钠可解氨毒，醋酸也具有缓解作用；不结扎肝脏则不出现肝性脑病。
结论：血氨升高容易引起肝性脑病，肝脏对氨具有解毒作用，肝功能不全在肝性脑病的发生中占极大地作用。
复方谷氨酸钠可以治疗肝性脑病。
【关键词】氨中毒肝性脑病复方氯化氨复方谷氨酸钠AbstractObjective::①Copy rabbit model of acute hepatic dysfunction, duodenal perfusion with ammonium chloride compound, observation ammonia poisoning effect on brain function in rabbits; ②by ear vein injection of monosodium glutamate treatment of hepatic encephalopathy disease, to explore its therapeutic mechanism. Understand the lower intestinal pH and injection of sodium glutamate compound for ammonia poisoning is a basic treatment.Methods: The class is divided into 7 major groups, the first and second group, sham operation group, model group, the other group, the second, sixth, seventh group symptoms rescue groups, the first, three, four, five group early treatment group.Results: ligation and injection of compound ammonium chloride solution, the liver, hepatic encephalopathy in rabbits injected with compound sodium glutamate can be toxic ammonia, acetic acid also has a relief role; did not undergo hepatic encephalopathy is not the liver.Conclusion: The elevated blood ammonia easily lead to hepatic encephalopathy, a liver detoxification of ammonia, hepatic dysfunction in the pathogenesis of hepatic encephalopathy significantly accounted for the role. Sodium glutamate compound can be treated with hepatic encephalopathy.Key words Ammonia poisoning Hepatic encephalopathyAmmonium chloride compound Compound sodium glutamate【引言】肝性脑病过去称肝性昏迷，是严重肝病引起的，以代谢紊乱为基础，中枢神经系统功能失调的综合征，其主要临床表现是意识障碍，行为失常和昏迷。
氨在肝性脑病发病中的作用
The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy
【实验目的】
1.急性阻断肝脏血流造成急性肝功能损伤模型， 观察相关指标的变化。
2.对经不同处理的实验家兔灌入氯化铵或生理 盐水，观察出现相应症状的时间及所需的氯化铵 用量，测定各组动物实验后的血氨和尿素氮水平， 探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。
甲、乙兔灌复方氯化铵（ 3ml／kg／ 5min） 丙兔灌入生理盐水（3ml／kg ／ 5min ） 每次灌药前观察记录上述指标的变化。
四、血氨和血尿素氮（BUN）的测定 在甲兔第一次痉挛抽搐发作时，固定甲兔，心脏采血5ml，
测定血氨（ 1ml ）和血尿素氮。 其它组按甲兔出现痉挛抽搐的时间进行心脏取血，测定血氨
535.91
整理实验数据，填写上表，分析和讨论氨在肝性脑病发病 机制中的作用。
【思考题】 1、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否复制肝性脑
病的动物模型？为什么？ 2、为什么要设立甲、乙、丙组家兔，作用何在？ 3、灌入复方氯化铵溶液后，甲组家兔的呼吸如何
变化？为什么？ 4、血氨和血尿素氮的变化有何关系？道理何在？ 5、氯化铵在哪些方面对CNS起作用？
组别
症状
剂量 时间 血氨（mg/L） 血BUN（mg/L）
呼吸 肌无力 抽搐 ml/ Kg min 变化
实验前 实验后
实验前 实验后
甲 86 不明显 √ 16.8 23′30″
1948
236.8
乙 88 减弱
√ 25.2 39 ′ 1.23±0.47100
28.0±98 48.21
丙 78 不明显
31.52
氨在肝性脑病发病中的作用
氨在肝性脑病发病中的作用
实验目的：
1、采用肝大部分切除术，造成急性肝功能不全的动物模型；
2、用十二指肠灌注复方氯化铵溶液，观察血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。
实验设计思想：
因有胃肠道出血、肾功能不全和电解质紊乱、精神性药物的使用、便秘、过高蛋白质饮食、肝功能的急剧恶化等，对于没有明确诱因的自发性肝性脑病也要高度怀疑有无不正常的循环通路的存在；（3）降低肠道氮质负荷，包括灌肠、使用非吸收性双糖和抗生素；（4）长期治疗必要性和疗效的评估，肝硬化病人有发生肝性脑病的高风险，需要对病人的诱因控制情况、肝性脑病发作的可能性，以及是否需要肝移植等情况进行综合评估，以制定长期治疗方案。
结论
结扎肝脏后，注射氯化铵溶液，使血氨升高而引起肝性脑病；肝脏对氨具有清除作用，所以不结扎肝脏不会发生氨中毒。
氨中毒在家兔肝性脑病发病中的作用
氨中毒在家兔肝性脑病发病中的作用【实验目的】对经处理的实验动物（家兔）输入氯化氨，观察出现相应症状所需氯化氨用量及时间，探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道PH及注射谷氨酸钠的作用。
【摘要】目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。
方法：建立急性肝功能不全模型；结果：复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响，而肝可解氨中毒，复方谷氨酸钠也可缓解其作用。
结论：肝具有解毒作用，氨中毒在肝性脑病的发生中起重要作用。
【关键词】肝性脑病，氨中毒【实验对象】健康家兔一只【实验器材和药品】1、试剂：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液。
2、仪器：10ml注射器、50ml注射器及针头，手术剪，镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管。
【实验步骤】1、称重：将家兔放置于婴儿称重。
2、麻醉固定：按1g/kg体重剂量兔耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯。
待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。
3、急性肝功能不全动物模型复制：从胸骨剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝，剪断肝与横隔之间的镰状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。
用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。
找出十二指肠，切一小口，插入导管向下推进4~5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。
4、实验观察：1、观察家兔注射25g/L复方氯化铵溶液后的表现。
2、记录所用复方氯化铵溶液的总量。
3、家兔出现抽搐后，给家兔按20ml/kg体重剂量自耳缘静脉缓慢注射25g/L复方谷氨酸钠溶液，并按5ml/kg体重剂量向十二指肠注入10g/L醋酸进行治疗，观察家兔的症状。
【实验结果】1、每隔5min向十二指肠导管中注入25g/L复方氯化铵溶液5ml，当复方氯化铵溶液累积注射到30ml时，家兔开始出现轻微抽动，当注射氯化氨溶液到达35ml时，家兔出现全身性抽搐，角弓反张的现象。
氨在肝性脑病中的作用
试验目的肝性脑病是继发于严重肝脏疾病的一系列精神神经综合症。
有关肝性脑病的发病机制有多种学说 其中氨中毒学说受到重视。
正常情况下 血氨的来源与清除保持动态平衡 而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。
病理情况下当肝功能严重受损时 或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多 或经侧支循环进入体循环 均可导致血氨升高。
增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织 通过干扰脑组织对能量代谢 使脑内神经递质发生改变等作用 引起脑的功能障碍从而出现相应的症状和体征。
谷氨酸可与血中过多的氨结合而成为无毒的谷氨酸钠 由尿排出 进而降低血氨。
谷氨酸还可参与脑细胞的代谢 改善中枢神经系统的功能肠道给予醋酸溶液可使肠道PH降低 减少氨的吸收。
步骤1、麻醉家兔称重 按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯。
待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。
2、急性肝功能不全动物模型复制从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口 打开腹腔 暴露肝脏 向下压肝脏 剪断肝与横膈之间的镰状韧带 使肝叶游离辨明肝脏各叶 用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周 不结扎肝脏。
找出十二指肠 找其上壁血管较少的一处做一荷包环形缝合 在环形中间剪一个小口 沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm 切口荷包缝合固定导管 用止血钳关闭腹腔切口。
2、实验观察①观察并记录兔的一般情况 呼吸 频率、幅度角膜反射 对刺激的反映等指标。
然后每隔5min向十二指肠导管中注入25g/L复方氯化铵溶液5ml 动态观察并记录各项指标的变化 直至出现全身性抽搐、角弓反张为止 记录所用的复方氯化铵溶液的总量 并计算每公斤体重的用量。
3、结果时间和用量讨论1、氯化铵经肠道水解为氢离子和氨，氨经肠道弥散入血，氨在肝脏可形成尿素，另外氨与谷氨酸钠结合为谷氨酰胺，由于肝脏被结扎，其解毒能力减弱，造成血氨升高，没有结扎肝脏的动物也造成死亡，说明肝脏的解毒能力有一定的限度！2、氯化铵(NH4Cl)进入肠道后分解成NH3即氨，当大量的氨经肠道吸收进入血，使血氨增高而产生肝性脑病；肝脏大部分结扎后，造成肝脏鸟氨酸循环障碍，肝脏对氨的清除能力下降，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组织，引起肝性脑病。
氨在肝性脑病发生中的作用
昏睡期
昏睡、精神错乱
昏迷期
肝性昏迷 (hepatic coma) 神智丧失、不能唤醒, 无扑击样震颤
肝性脑病的发生机制
假性神经递质学说
氨中毒学说
肝性脑病
综合学说
γ-氨基丁酸学说
血浆氨基酸 失衡学说
氨中毒学说
• 内容: 在严重肝病时，机体内氨生成过多而 肝脏对氨的清除能力下降，致使血氨水平 显著升高，高浓度的氨通过血脑屏障进入 脑组织，引起脑功能障碍。
继续推注复方NH4Cl直至乙兔 出现大抽搐, 记录所用复方 NH4Cl总量和时间
观测项目
• 呼吸运动、肌张力、抽搐。 • 出现大抽搐时两兔复方NH4Cl用量及时间 • 血氨浓度
注意事项
• 专人测定血氨 • 肝叶结扎线置于肝叶根部 • 乙兔注射复方NH4Cl晚于甲兔 • 复方NH4Cl切勿漏入腹腔 • 原则上选择体重相差不超过250g的
氨对脑代谢功能的影响
• 1、干扰脑细胞能量代谢 • 2、使脑内神经递质改变 • 3.氨对神经细胞膜的抑制作用
血氨水平的变化 3.掌握肝性脑病的概念及发病机制
实验动物
家兔, 体重2.0～2.5Kg
实验器材
家兔急性手术器械一套, 兔固定台, 粗棉线, 细 丝线, 1ml注射器2具, 2ml注射器1具, 10ml注射器 1具 ,婴儿秤,扩散瓶2个,试管2只等
药品
0.5%利多卡因 , 1％肝素, 复方氯化铵溶液, 纳氏试剂, 0.5mol/L硫酸, 饱和碳酸钾
实验方法
甲兔: 结扎大部肝叶＋注射复方 NH4Cl
乙兔: 不结扎肝叶 ＋ 注射复方 NH4Cl
称重 分组 固定 剪毛 局麻(颈部、上腹部) 颈
总动脉插管,放血1ml测血氨,暴露肝脏,观察家兔一般情况后:
氨在肝性脑病发病中的作用中山大学基础医学实验教学中心
每公斤体重 给药量(ml)
开始实验
小结
肝脏的功能 氨中毒机理
中山大学中山医学院 病理生理学教研室 谭红梅
实验原理
NH4+ + OH-
NH3 + H2O
脑 血脑 血液
屏障
鸟氨酸循环
肝
尿素
实验对象：家兔
实验器材：兔手术台及器械、注射器、导尿管 定时钟、纱布、棉线、缝合针等
实验药品：1%普鲁卡因、2.5%氯化铵混合液、 1%醋酸、2.5%谷氨酸钠混合液
观察指标
一般情况、角膜反射、对刺激的反应 出现痉挛时间、给药量
每次 5 ml 每 5 min 源自次 直到出现痉挛抢救十二指肠插管 1%醋酸，5 ml/kg
NH4+ + OH- NH3 + H2O
耳沿静脉 2.5%谷氨酸钠，30 ml/kg
谷氨酸钠 + NH3 谷氨酰胺
实验结果
组别
1
实
2
验
3
组
4
平均
1
对
2
照
3
组
4
平均
出现痉挛时间 (min)
总给药量 (ml)
实验步骤
家兔称重、固定 上腹正中局麻
实验组
对照组
结扎切除肝脏
假结扎肝脏
十二指肠插管 关闭腹腔松绑 注射氯化铵液
抢救
肝脏结扎示意图
尾叶
注意：切断镰状韧带时勿损伤后方的下腔静脉 在肝蒂部结扎肝脏，结扎要牢固
十二指肠插管荷包缝合法
胃
6～8 cm
注意：插管朝下，打防滑结，防治插管脱出
氯化铵混合液注射
氨在肝性脑病发病中的作用
中山大学中山医学院 病理生理学教研室 谭红梅
兔肝性脑病实验报告
本实验旨在通过复制家兔急性肝功能不全模型，探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用，并了解降低肠道pH及注射谷氨酸钠在治疗肝性脑病中的作用。
二、实验材料与方法1. 实验动物：健康成年家兔，体重2-2.5kg，共10只。
2. 实验器械：手术器械、麻醉机、十二指肠插管、灌胃针、生理盐水、氯化铵、谷氨酸钠等。
3. 实验方法：（1）将家兔随机分为五组，每组2只，分别为：对照组、模型组、低pH组、谷氨酸钠组、联合治疗组。
（2）对照组：给予正常饮食和饮水，观察家兔生理指标。
（3）模型组：禁食禁水12小时后，通过十二指肠插管给予氯化铵溶液，使肠道pH降至5.0以下，复制急性肝功能不全模型。
（4）低pH组：在模型组的基础上，给予生理盐水灌胃，观察家兔生理指标。
（5）谷氨酸钠组：在模型组的基础上，给予谷氨酸钠溶液灌胃，观察家兔生理指标。
（6）联合治疗组：在模型组的基础上，给予生理盐水和谷氨酸钠溶液灌胃，观察家兔生理指标。
（7）观察指标：家兔的精神状态、行为变化、生理指标（心率、呼吸频率、体温等）。
三、实验结果1. 对照组：家兔精神状态良好，行为正常，生理指标稳定。
2. 模型组：家兔出现精神萎靡、行为异常、反应迟钝等症状，生理指标明显异常。
3. 低pH组：家兔症状较模型组有所改善，但生理指标仍异常。
4. 谷氨酸钠组：家兔症状较模型组明显改善，生理指标有所恢复。
5. 联合治疗组：家兔症状和生理指标均得到明显改善。
1. 氨在肝性脑病发病机制中起重要作用。
2. 降低肠道pH和注射谷氨酸钠可以改善肝性脑病症状，具有治疗作用。
3. 联合治疗肝性脑病效果更佳。
五、实验讨论1. 本实验通过复制家兔急性肝功能不全模型，成功模拟了肝性脑病的发生过程，为研究肝性脑病的发病机制提供了实验依据。
2. 氨是肝性脑病发病的关键因素，其升高可导致脑组织功能障碍。
本实验结果表明，降低肠道pH和注射谷氨酸钠可以有效降低血氨水平，从而改善肝性脑病症状。
3. 联合治疗肝性脑病的效果优于单一治疗，说明多种治疗方法的协同作用在肝性脑病治疗中具有重要意义。
机能实验讨论：氨在肝性脑病发病中的作用
2020.5.8二、氨在肝性脑病发病中的作用1、肝性脑病的概念及发病机制是什么？2、PPT的实验步骤中为什么要分别设立甲、乙、丙兔，其目的何在?3、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否能复制肝性脑病的动物模型？为什么？4.这三组家兔的血氨的变化趋势是什么?机制为何？5、肝叶結扎并注射氯化铵組会产生什么症状?其原因是什么?1、肝性脑病的概念及发生机制是什么？概念：肝性脑病（HE）又称肝性昏迷，是指严重肝病引起的、以代谢紊乱为基础的中枢神经系统功能失调的综合征，早期表现为可逆性的，主要包括人格改变，智力减弱，意识障碍等，晚期发生不可逆性肝昏迷，甚至死亡。
发生机制：①氨中毒学说：血氨↑，进入脑组织，引起脑的代谢和功能障碍。
②假性神经递质学说：严重肝病时，假性神经递质在脑干网状结构中堆积，使神经冲动的传递发生障碍，不能维持唤醒功能，从而发生昏迷。
③氨基酸失衡学说：严重肝病时，血浆BCAA/AAA比值↓→脑内假神经递质↑，正常递质↓→抑制性神经活动增强，严重可出现昏迷。
④GABA 学说：血氨↑，进入脑组织，增强抑制性递质介导的中枢抑制作用，中枢抑制作用增强。
2、PPT的实验步骤中为什么要分别设立甲、乙、丙兔，其目的何在？影响肝性脑病的发生的因素有血氨浓度和肝脏功能，设置甲乙丙是为了做对照，甲乙对比可以说明肝对氨的解毒作用，甲丙对比可以说明血氨在肝功能障碍时的毒性作用。
3、结扎肝门血管以及灌入氯化铵是否能复制肝性脑病的动物模型？为什么？可以，因为结扎肝门血管可以导致肝功能障碍而导致对氨的解毒作用降低甚至丧失，此时注入氯化铵可以导致血氨浓度升高进而导致肝性脑病的发生。
4、这三组家兔的血氨变化趋势是什么？机制为何？甲组的血氨浓度明显升高，因为甲组肝功能障碍，解毒能力下降，注入氯化铵会导致血氨明显升高。
乙组血氨浓度略微升高然后恢复正常，乙组肝功能正常，注入氯化铵后血氨升高，一段时间后由于肝脏的解毒功能而恢复正常。
丙组血氨浓度刚开始无明显变化，随着时间的推移而逐渐升高，丙组的肝功能障碍，没有注入氯化铵，故开始时血氨正常，但随着机体代谢产生氨，而肝脏无法代谢，导致氨在血液中堆积，使血氨逐渐升高。
氨在肝性脑病发病过程中的作用
结论：
1、肝脏在氨的代谢中起重要作用
2、氨在肝性脑病发病过程中有一定的作用
3、谷氨酸钠和醋酸对肝性脑病有一定的缓解作用
集体备课建议及意见：
氨在肝性脑病发病过程中的作用
实验结果：见表
表氨中毒实验结果
动物
氯化铵用量
（ml/kg）
中毒发生时间
(mБайду номын сангаасn)
中毒症状
抢救效果
实验兔
12
30
呼吸急促，痛觉消失，角膜反射消失，震颤，角弓反张
死亡
对照兔
20
50
呼吸急促，痛觉不敏感，角膜反射减弱，震颤，角弓反张
震颤停止，角膜反射恢复，呼吸平稳
实验讨论：
肝性脑病是继发于严重肝脏疾病的神经精神综合症。肝性脑病发作时脑组织无明显的形态学改变，主要表现为轻微的精神异常乃至昏迷。有关肝性脑病的发病有以下几种学说：氨中毒学说，血浆氨基酸失衡学说，GABA学说等。本实验以氨中毒学说为基础，选择家兔制备肝功能不全病理模型，观察氨在肝性脑病发病中的作用。
见表氨中毒实验结果动物氯化铵用量mlkg中毒发生时间min中毒症状抢救效果实验兔1230呼吸急促痛觉消失角膜反射消失震颤角弓反张死亡对照兔2050呼吸急促痛觉不敏感角膜反射减弱震颤角弓反张震颤停止角膜反射恢复呼吸平稳实验讨论
氨中毒在肝性脑病发病中的作用
氨中毒在肝性脑病发病中的作用【摘要】目的对经不同处理的实验动物输入氯化氨，观察出现症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道pH及注射谷氨酸是针对氨中毒的一项基本治疗措施。
方法：将将家兔麻醉后实施腹部手术，结扎家兔肝脏的其中3叶，十二指肠注射氯化铵，观察家兔是否出现行为异常以及出现异常所需的时间。
对出现行为异常的家兔静脉注射复方谷氨酸钠进行救治。
结果:家兔出现了有节律的抽搐，出现四肢伸直，头尾昂起，脊柱挺硬等角弓反张现象。
没有进行救治的家兔持续抽搐，死亡。
结论：肝功能健全可使氨中毒的作用时间延长，即肝有对氨的解毒作用。
当肝功能受损时，肝脏将氨转化为尿素的能力减弱，可导致血氨升高，间尔影响脑的功能。
复方谷氨酸钠溶液有缓解氨中毒的作用。
【关键词】氨中毒肝性脑病复方氯化氨复方谷氨酸钠【实验材料和方法】：材料：实验动物家兔主要试剂及仪器氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸溶液，醋酸，生理盐水，手术台，纱布，玻璃分针，哺乳动物手术器械，不同型号的注射器，粗绳线，培养皿方法:麻醉家兔称重，按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯，家兔麻醉后背位固定于兔台上。
急性肝功能不全动物模型复制从胸骨剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝，剪断肝与剑突之间的镰状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。
用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。
对照组动物不结扎肝脏。
找出十二指肠。
切一小口，插入导管向下推进约4~5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。
实验观察观察并记录兔一般情况，呼吸（频率、幅度），角膜反射、对刺激的反应等指标。
然后每隔5min向十二指肠导管中注入25kg/L复方氯化铵溶液5ml,动态观察并记录各项指标的变化，直至出现全身抽搐、角弓反张为止，记录所用的复方氯化铵溶液的总量，并计算每公斤体重的用量。
机能实验设计
研究题目:肝对激素的灭活及氨在肝性脑病发病过程中的作用理论依据及研究现状：理论依据：肝脏是人体最大的腺体，参与体内的消化，代谢，排泄，生物转化（解毒）以及免疫等多种功能。
通过不同途径给家兔注射肾上腺素，观察家兔的变化及比较药效上的差异，分析肝脏的首过效应（即肝脏对激素的灭活作用）。
接肠系膜静脉给药，因药物首先通过肝门静脉入肝，受到肝生物转化的影响，肾上腺素在肝内被破坏氧化失效，因此，其药物效应应该明显低于通过外周静脉给药的效果。
肝性脑病是继发于严重肝病所引起的神经精神综合征，其临床症状重，病死率高。
肝性脑病的发病机制复杂，目前有氨中毒学说、假性神经递质学说、血浆氨基酸失衡学说及γ-氨基丁酸学说等。
据统计，约80%肝性脑病的病人具有血氨升高表现，使氨中毒学说在肝性脑病的发病机制中占有最重要的地位。
本实验采用家兔肝大部分结扎，复制急性肝功能不全的动物模型，造成肝解毒功能急剧降低，在此基础上经十二指肠灌入复方氯化铵溶液，导致肠道中氨生成增多并吸收入血，引起家兔血氨迅速升高，出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状，证明氨在肝性脑病发病机制中的作用以及肝脏在解毒作用中的重要地位。
研究现状：研究内容：1.通过不同途径给家兔注射肾上腺素后，观察家兔的反应变化，比较药物效应上的差异。
2.氨在肝性脑病发病过程中的作用。
研究方法：通过不同途径（家兔耳缘静脉和肠系膜静脉）给家兔注射肾上腺素，通过MS4000生物信号定量记录分析系统，观察家兔的反应变化，比较药物效应上的差异。
给家兔肝大部分结扎，复制急性肝功能不全的动物模型，造成肝解毒功能急剧降低，在此基础上经十二指肠灌入复方氯化铵溶液，导致肠道中氨生成增多并吸收入血，引起家兔血氨迅速升高，出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状，证明氨在肝性脑病发病过程中的作用。
再耳缘静脉注射谷氨酸钠进行抢救。
实验对象：家兔性别：两只相同性别规格：2~3kg数量：2只实验组与对照组的处理：实验组按照实验步骤进行，对照组的家兔在进行复制急性肝功能不全的模型时，不对肝脏进行结扎，其余操作步骤同实验组复制急性肝功能不全的模型的操作。
氨在肝性脑病发生中的作用
[复习思考题]
肝性脑病的氨中毒学说的基本观点是什 ． 沿胃幽门向下找出十二指肠，剪一 小口，将细塑料管向下插入十二指肠腔 内约4cm，用线结扎系牢，再将肠管回纳 腹腔，只留塑料管一端于腹外。以皮肤 钳对合夹住腹壁切口，关闭腹腔，动物 松绑。
[方法和步骤]
4．观察并记录兔的呼吸，角膜反射，瞳孔大 小、对疼痛刺激的反应及肌张力等情况。 5．从暴露于腹外的塑料导管中每隔5 min向十 二指肠腔注入2.5%复方氯化铵5ml。仔细观察 动物一般情况和对刺激反应的变化，注意有无 反应性增高，肌肉痉挛。若出现全身性抽搐时， 记录从肠腔给药至出现大抽搐的时间及氯化铵 总用量。
[方法和步骤]
2．从胸骨剑突下作长约6-8cm的上腹正中切口， 打开腹腔，暴露出肝脏，术者左手食指和中指 在镰状韧带两侧将肝脏往下压，右手持剪剪断 肝与横隔之间的镰状韧带。再将肝叶上翻，剥 离肝胃韧带，使肝叶完全游离。辨明肝脏各叶， 用粗线沿肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶 之根部围绕一周并结扎，待上述肝叶变成暗褐 色后用组织剪逐叶剪除。由于供应右外叶及尾 状叶之门脉血管为独立分支，不会同时被结扎， 因而得以保留。
[观察项目]
观察并记录兔的呼吸，角膜反射，瞳孔 大小、对疼痛刺激的反应及肌张力等情 况。并记录出现各总变化时的时间及氯 化铵总用量。
[注意事项]
1．剪镰状韧带时勿损伤膈肌和血管；游 离肝脏时动作宜轻以免肝叶破裂出血,结 扎线应扎于肝叶根部。 2．切肝时一定要在结扎线上，以免引起 大出血。 3．十二指肠插管不要插向胃的方向，氯 化铵溶液切勿注入腹腔。
氨在肝性脑病发生中的作用
安徽医科大学 病理生理学教研室
[目的和原理]
氨在肝性脑病发病机制中的作用
万方数据
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应激、ＭＡＰ激酶的激活、诱导ＭＰＴ和激活转录因子ＮＦ＿ＫＢ，均 是由氨作用于神经系统特别是星形胶质细胞而产生的一系列 复杂结果。他们对星形胶质细胞功能障碍、ＨＥ发病机制和氨神 经毒性起着重要作用‘“。 ２．２氨引起的能量代谢障碍过去的几十年，人们对氨引起的 能晕代谢改变进行了大量研究，Ｒａｍａ Ｒａｏ等¨Ｊ总结了氨对机 体能量代谢的影响：①糖利用：ＨＥ患者脑内葡萄糖的代谢率明 显降低，而在高血氨大鼠动物模型大脑皮层葡萄糖的代谢率亦 明显降低，丘脑和下丘脑葡萄糖的代谢率却明显增加。②糖酵 解：在高血氨大鼠动物模型大脑糖酵解明显增加，糖酵解途径 中的酶如磷酸果糖激酶、二磷酸果糖酶、３一磷酸甘油醛脱氢酶和 丙酮酸激酶活性增加。在一种先天性高血氨ｓｐｆ小鼠町以持续 观察到脑内葡萄糖含量增加、丙酮酸含量降低，表明其脑内存 在糖酵解紊乱。③三羧酸循环：氨消耗三羧酸循环的中间产物 ｒ酮戊二酸、ＮＡＤＨ＋，合成谷氨酸，导致前两种物质含量的降 低。体外脑线粒体氨处理后，可引起ａ一酮戊二酸脱氢酶和异柠 檬酸脱氢酶活性降低。此外，细胞内苹果酸一天冬氨酸穿梭系统 将ＮＡＤＨ从胞浆转移至线粒体，以确保线粒体内氧化磷酸化 的进行。以前认为氨在脑内引起谷氨酸含量的降低是引起苹 果酸一天冬氨酸穿梭系统抑制的诱因，而最近研究表明高氨条件 下胞浆和线粒体内天冬氨酸转氨酶以及线粒体苹果酸脱氢酶 活性降低，对苹果酸一天冬氨酸穿梭系统也有不利的影响。④线 粒体呼吸：对先天性高血氨ｓｐｆ小鼠研究发现，氨町以抑制多种 电子传递链复合体，特别是复合体ＩＶ（细胞色素ｃ氧化酶）。进 一步观察发现，与非突触内线粒体相比，氨对突触内线粒体电 子传递链复合体抑制作用更加明显。⑤ＡＴＰ的合成及利用：在 ｓｐｆ小鼠和氨处理的星形胶质细胞，可以观察到ＡＴＰ含量明显 降低。ＮＯ能够激活神经元线粒体和细胞液中多种酶，抑制星 形胶质细胞中谷氨酰胺合成酶的活性。Ｃａ”一ＣＭ激活蛋白磷 酸酶，抑制蛋白激酶ＰＫＣ磷酸化，从而激活ＡＴＰ酶。ＮＭＤＡ 受体中过量的Ｎａ＋被清除，而这一过程消耗大量ＡＴＰ。细胞液 中过量的Ｃａ”进入线粒体，导致线粒体内Ｃａ２＋蓄积，抑制线粒 体呼吸，减少ＡＴＰ合成，增加氧化应激自由基的形成。以上过 程导致ＡＴＰ下降［７］。⑥糖原：糖原是脑内一种重要的能量储 备，在神经活动增加时被分解利用。星形胶质细胞含有大量的 糖原。氨处理星形胶质细胞１ ｄ可以短暂引起细胞内糖原含量 降低，３ ｄ后可以抑制去甲肾上腺素诱导的糖原分解。这螳结 果提示，氨抑制细胞内糖原分解导致神经活动增加时能量供应 的降低。 ２．３氨引起的线粒体通透性转换线粒体通透性转换（ｍｉｔｏ－ ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ＭＰＴ）可能参与氨引起的线 粒体失能。ＭＰＴ是指线粒体内膜对小分子（＜１．５ ｋＤａ）物质的 通透性突然增加，这是由位于线粒体内膜的通透性转换孔（ｐｅｒ— ｍｅａｂｉｌｉｔｙ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｐｏｒｅ，ＰＴＰ）突然开放引起的。ＭＰＴ作用的 直接结果是使线粒体内膜电位（△可ｍ）的消失，Ａ皿ｍ的消失 会引起线粒体基质肿胀、氧化磷酸化不全、ＡＴＰ合成障碍以及 产生活性氧（Ｒｏｓ）。ＭＰＴ产生的后果可能是细胞的凋亡或坏 死。
氨在肝性脑病发病机制中的作用-河北北方学院病理生理教学中心
肝性脑病的发生
增高的氨可经过血脑屏障进入脑内，产生以下作用： ①干扰脑组织的能量代谢：进入脑内的NH3，通过消耗 α -酮戊二酸、NADH、ATP使脑组织内能量物质生成减少 →大脑处于抑制状态。 ②使脑内的神经递质发生改变：进入脑内的NH3，与谷氨 酸结合生成谷氨酰胺→兴奋性神经递质（谷氨酸）减少， 而抑制性神经递质（谷氨酰胺）生成增多→脑内神经递质 平衡失调→中枢神经系统功能紊乱 ③氨对神经细胞的抑制作用：进入脑内的NH3，抑制神经 细胞膜上的Na+-K+-ATP酶活性→影响细胞内外Na+、K+ 分布→影响膜电位和兴奋及传导等功能活动
血氨增高是引起肝性脑病发生的重要原因，本实验通
过肝大部分结扎的方法，造成肝脏功能严重受损，在 此基础上经消化道输注氯化铵，使血氨迅速增高，出 现抽搐、昏迷等类似肝性脑病的症状，证明氨在肝性 脑病发生机制中的作用。由于肝功能正常时，输入大 量氯化铵，也可以出现类似症状，因此，实验中要增 设对照组，以证明肝脏功能正常与否在肝性脑病中的 作用。
氨中毒学说：氨（NH3）是一种机体代谢产生的毒物，必
须及时将氨转变成无毒或毒性低的物质，排出体外。正常 情况下，氨的生成和消除之间维持着动态平衡，使正常人 的血氨不超过59μ mol/L。当氨的生成增多而消除减少时， 可使血氨升高。增高的血氨通过血脑屏障进入脑内，使脑 内代谢和功能障碍，导致肝性脑病。
实验动物
器械与药品
常规手术器械，家兔固定台，5ml、50ml注射
器，婴儿秤，细导尿管，粗棉线，婴儿头皮针 。
1%普鲁卡因，复方氯化铵（含2.5%氯化铵，
1.5%碳酸氢钠，5%葡萄糖），复方谷氨酸钠 （含2.5%谷氨酸钠，5%葡萄糖），0.1%肝素化 生理盐水。
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实 验 兔2.分析实验结果并写出实验报告。
抢救效 果
【注意事项】
提前做好抢救准备
弄断镰状韧带时要小心，勿伤及膈肌、 肝脏及后方的下腔静脉。
十二指肠插管要结扎牢固。
缝合针的选择（十二指肠、腹肌—圆针； 皮肤—角针）。
谷氨酸钠为碱性药物，对组织有刺激性， 静脉注射时要避免漏出血管外。
预习下次实验
6. 每隔5min向十二指肠注入氯化铵5ml，观察 家兔的反应，至全身抽搐时停止。
7. 抢救：耳缘V注射谷氨酸钠30~40ml/kg，十 二指肠注入醋酸5ml/kg，观察症状有无缓解。
8. 对照兔：除不做肝脏结扎，余处理同上。
【实验后处理】
1.列表显示相关实验结果
表 7-5 氨中毒实验结果
动物 氯化铵用 中毒发生 中毒症 量 时间(min) 状
第十二次实验
氨在肝性脑病 发病过程中的作用
【相关知识】
肝性脑病： 是继发于严重肝病的神经精神综合症。
临床表现从轻微的精神异常到昏迷可人为 地分为四期，最终进入昏迷阶段。
❖ 发病机制
▪ 氨中毒学说 ▪ 假性神经递质学说 ▪ 血浆氨基酸失衡学说 ▪ GABA学说
氨中毒学说
氨的产生
氨的清除
肝 鸟氨酸循环
家兔急性肾功能不全
❖ 机体内氨的代谢
BBB
血氨
脑组织
分解代谢生成的氨 少量
肝脏 鸟氨酸循环
合成某些 氨基酸和含氮物质
尿素
肾脏 排除体外
❖ 本实验
NH3
角弓反张 扑翼样震颤
肝大部 分结扎
血3;
i.v 谷氨酸钠
谷氨酰胺
排出 体外
NH4+ NH3 醋酸 NH4Cl
【实验步骤】
1. 家兔称重、固定、局麻、气管插管。 2. 上腹部正中切口，打开腹腔，游离肝脏。 3. 上翻肝脏，辩明各叶，用粗棉线接扎(尾 状叶除外)各肝叶的根部，由红色变为褐色后由 结扎线上方切除。 4. 十二指肠荷包缝合，插管固定，关闭腹腔。 5. 观察家兔的一般情况、呼吸、角膜反射、瞳 孔大小、疼痛反应、肌张力。
氨中毒学说
消化道出血 消化、吸收 排空障碍 氮质血症 腺苷酸分解 肠道PH值
脑组织
NH3
肝 鸟氨酸循环
氨对中枢神经系统的毒性作用
干扰脑细胞的能量代谢
影响脑内正常神经递质的生成和平衡 兴奋性递质（谷氨酸、乙酰胆碱）↓ 抑制性递质（γ-氨基丁酸、谷氨酰胺）↑
对神经细胞膜的直接抑制作用 干扰神经细胞膜上Na+-K+-ATP酶活性