常用溶液的配制

常用溶液的配制

一、常规溶液

(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)

甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液

Na2HPO4 9.465g

蒸馏水加至1000ml

乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液

KH2P04 9.07g

蒸馏水加至1000m1

分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:

pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI

5.29 5.59

5.91

6.24 6.47 6.64 2.5

5.0

10.0

20.0

30.0

40.0

97.5

95.0

90.0

80.0

70.0

60.0

6.81

6.98

7.17

7.38

7.73

8.04

50.0

60.0

70.0

80.0

90.0

95.0

50.0

40.0

30.0

20.0

10.0

5.0

(二)0.3％台盼兰染液

称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。

(三)0.5％酚红指示剂

酚红 0.5g

0.1N(0.4％)NaOH 15ml

双蒸水 85ml

将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。

(四)5.6％NaHCO3溶液

称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)

(五)10μg／ml秋水仙素

秋水仙素 lOmg

生理盐水 100ml

装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。

(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液

将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。

(七)2％柠檬酸钠

称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。

（八）0.2％次甲基兰染液

称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。

(九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液

洋红 lg

醋酸 90ml

蒸馏水 110ml

将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。

(十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue)

称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。

(十一)1/3000中性红染液

取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。

(十二)Giemsa染液

1．贮备液

Giemsa粉 1g

纯甘油 66ml

甲醇 66ml

先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。

2．工作液

临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。

(十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液

苏木精 1.0g

乙醇 50ml

醋酸 5ml

甘油 50ml

硫酸铝钾 5g

蒸馏水 50ml

将苏木精溶于少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，并不断摇动，此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。

二、细胞化学和细胞组分分离溶液

(一)M一缓冲液

眯唑(Imidazole) 3.404g

KCI 3.7g

MgCl2·6H2O 101.65mg

ECTA 380.35mg

EDTA 29.224mg

巯基乙醇 0.07ml

甘油 297ml

蒸馏水加至1000ml

用lNHCl调pH至7.2室温保存。

(二)2％Triton X一100溶液

量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。

（三）0.2％考马斯亮兰R-250染液

甲醇 46.5ml

醋酸 7.0ml

考马斯亮兰 0.2g

蒸馏水加至100ml

(四)A．0.1％碱性固绿染液(pH8.0～8.5)

1．0.1％固绿水溶液

固绿(Fast green) 0.1g

蒸馏水 100ml

2．0.05％Na2C03溶液

Na2C03 50mg

蒸馏水 100ml

用时按1:1体积混合即可。

B．0.1％酸性固绿染液(pH2.2)

1．0.1％固绿水溶液。

2．mol／L×75盐酸液

盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸馏水至100ml

用时按l:1混合。

(五)甲基绿一哌咯宁染液

1.1mol／L醋酸缓冲液(pH4.8)：

(1)醋酸 17ml

蒸馏水加至200ml

(2)醋酸水 13.5g

蒸馏水加至lOOml

用时分别取两液40ml、60ml混匀即可。

2．甲基绿一哌咯宁(methyl green—Pyrcnln)

5％哌咯宁水溶液 6ml

2％甲基绿水溶液 6ml

蒸馏水 16ml

lmol/L醋酸缓冲液 16ml

lmol/L醋酸缓冲液临用时才可加入染液中。

(六)Schiff试剂

将碱性品红0.5克加入lOOml沸水，持续煮沸5分钟，并随时搅拌，待冷却到50℃时过滤到棕色瓶中，加1N HC11O毫升，冷却至25℃时加入1克NaHSO3，此时需很好的振荡，避光过夜。次日取出(呈淡黄色)加0.25克活性炭剧烈振荡1分钟。过滤后即得Schiff试剂。避光低温保存。

(七)联苯胺混合液

联苯胺(4.4 Diamino benzidine) 0.2g

95％乙醇 lOOml

3％过氧化氢 2滴

此液临用时配制。

(八)l％番红水溶液

番红(Safranin) 1.0g

蒸馏水 100ml

(九)1％SDS(十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate,SDS)

SDS 10g

45％乙醇 100ml