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临床免疫学检验技术PPT(共64页)
临床免疫学检验技术
• 江西省胸科医院：熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzy发展，放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验， 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程， 极大地提高了免疫学检验的灵敏度，拓展 了免疫学检测范围，从检测免疫相关物质 （抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等）到检测体液中的微量物质（激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等）。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体，读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶（HRP）、 碱性磷酸酶（AP）等，HRP常用的底物有 邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺 （TMB），碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯（P-NPP）作为底物，产物为黄色的 对硝基酚，在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子，用于判断机体细胞免疫功 能状况。
• 江西省胸科医院：熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzy发展，放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验， 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程， 极大地提高了免疫学检验的灵敏度，拓展 了免疫学检测范围，从检测免疫相关物质 （抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等）到检测体液中的微量物质（激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等）。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体，读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶（HRP）、 碱性磷酸酶（AP）等，HRP常用的底物有 邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺 （TMB），碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯（P-NPP）作为底物，产物为黄色的 对硝基酚，在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子，用于判断机体细胞免疫功 能状况。
临床常用免疫学检测PPT课件
四、降钙素原检测
严重全身性细菌感染时升高 动态监测可评估治疗效果
五、特异性IgE检测
介绍了临床常用免疫学检测项目的临床意义及应用，检测方法及参考范围，各 临床免疫学检测项目的特点。
谢谢您的观看！
CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中，不存在于黏液型卵巢癌中。
（五）癌抗原242测定 （六）癌抗原153测定
乳腺癌时，30％～50％的病人可见CA153明显升高，但在早期乳腺癌时，它的阳性率仅 为20%～30%左右，因此主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。
诊断学（第9版）
三、酶类肿瘤标志物检测
（一）前列腺酸性磷酸酶测定 （二）神经元特异性烯醇化酶测定
诊断学（第9版）
降钙素
四、激素类肿瘤标志物检测
甲状腺滤泡细胞C细胞合成和分泌的一种单链多肽激素，甲状腺髓样癌病人血清降钙素 明显升高，而且由于降钙素的半减期较短，因此可作为观察临床疗效的标志物。
第四节
自身抗体检测
诊断学（第9版）
一、类风湿因子的检测
一、蛋白质类肿瘤标志物的检测
（一）甲胎蛋白测定
胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生后，AFP的合成很快受到抑制。
1.原发性肝癌病人血清中AFP的含量明显升高，常>300μg/L 2.病毒性肝炎与肝硬化病人血清中AFP有不同程度的升高，但常300μg/L 3.生殖腺胚胎肿瘤病人血清中AFP可升高 4.妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg/L，分 娩后3周恢复正常
第八章
临床常用免疫学检测
第一节 体液免疫检测 第二节 细胞免疫检测 第三节 肿瘤免疫检测 第四节 自身免疫检测 第五节 感染免疫检测 第六节 抑制免疫检测 第七节 其他免疫检测
严重全身性细菌感染时升高 动态监测可评估治疗效果
五、特异性IgE检测
介绍了临床常用免疫学检测项目的临床意义及应用，检测方法及参考范围，各 临床免疫学检测项目的特点。
谢谢您的观看！
CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中，不存在于黏液型卵巢癌中。
（五）癌抗原242测定 （六）癌抗原153测定
乳腺癌时，30％～50％的病人可见CA153明显升高，但在早期乳腺癌时，它的阳性率仅 为20%～30%左右，因此主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。
诊断学（第9版）
三、酶类肿瘤标志物检测
（一）前列腺酸性磷酸酶测定 （二）神经元特异性烯醇化酶测定
诊断学（第9版）
降钙素
四、激素类肿瘤标志物检测
甲状腺滤泡细胞C细胞合成和分泌的一种单链多肽激素，甲状腺髓样癌病人血清降钙素 明显升高，而且由于降钙素的半减期较短，因此可作为观察临床疗效的标志物。
第四节
自身抗体检测
诊断学（第9版）
一、类风湿因子的检测
一、蛋白质类肿瘤标志物的检测
（一）甲胎蛋白测定
胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生后，AFP的合成很快受到抑制。
1.原发性肝癌病人血清中AFP的含量明显升高，常>300μg/L 2.病毒性肝炎与肝硬化病人血清中AFP有不同程度的升高，但常300μg/L 3.生殖腺胚胎肿瘤病人血清中AFP可升高 4.妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg/L，分 娩后3周恢复正常
第八章
临床常用免疫学检测
第一节 体液免疫检测 第二节 细胞免疫检测 第三节 肿瘤免疫检测 第四节 自身免疫检测 第五节 感染免疫检测 第六节 抑制免疫检测 第七节 其他免疫检测
临床常用免疫学检查新ppt课件
临床常编用辑免版疫pp学t 检查
9
•
IgG最多、主力军 IgA血清型和分泌型 IgM最早出现 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关
2020/8/20
临床常编用辑免版疫pp学t 检查
10
正常值： 单向免疫扩散法— IgG 7.0~16.6 g/L IgA 0.7~3.5g/L IgM 0.5~2.6 g/L ELISA法— IgE 0.1~0.9mg/L
2020/8/20
编辑版ppt
21
2020/8/20
编辑版ppt
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二、维持机体内环境稳定
•促进免疫复合物清除 •清除凋亡细胞
2020/8/20
编辑版ppt
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3、清除免疫复合物
2020/8/20
编辑版ppt
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清除凋亡细胞的机制 C1q、MBL、C3b等可与凋亡细胞的分子结合
2020/8/20
2020/8/20
编辑版ppt
29
第三节 免疫细胞检测
针对细胞的数量(amount)、活性（功 能 function）、表面标志物(membrane molecules )表达(express)程度～
T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测 细胞因子检测 中性粒细胞吞噬杀菌功能检测
2020/8/20
第四节 肿瘤标志物 （tumor marker）检测
1、是由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤细 胞反应而产生的一类物质
2、可反映细胞恶变各阶段的表型及基因特征性 3、包括蛋白类（甲胎蛋白、癌胚抗原等）、糖类、 酶类肿瘤标志物
2020/8/20
临床常编用辑免版疫pp学t 检查
41
恶性肿瘤增长的检测
《诊断学》第二版PPT第二十四章 临床常用免疫学检测
检测：感染性疾病、免疫增值性疾病和免疫缺 陷性疾病的诊断、鉴别诊断、疾病进展和预后。
血清免疫球蛋白分类
根据重链稳定区的分子 结构和抗原特异性的不 同，分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
血清免疫球蛋白分类
检测方法
酶联免疫法（ELISA) 放射免疫（RIA) 荧光标记免疫(IFA) 化学发光法（CLIA) 免疫透射比浊、免疫散射比浊
减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、 自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病 毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良 和遗传性补体成分缺乏症等
二、补体C3检测
是一种由肝脏合成的β2-球蛋白。C3在补体系 统各成分中含量最多，是经典途径和旁路途径 的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。
参考值
参考值 0.5 ～2.6 g/L
临床意义
IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类 风湿关节炎、SLE等，原发性巨球蛋白血症时， IgM呈单克隆性明显增高
IgM降低 见于IgG型重链病， IgA型MM，先 天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统 肿瘤和肾病综合症。
四、免疫球蛋白E的检测
– 半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆 Ig片段。
– 恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。 – 良性M蛋白血症：
第二节 血清补体检测
补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途 径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9，旁路途 径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组 成
参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应
识别阶段
细胞膜
C3转化酶的形成
活 化 阶 段
C4b2b 为C3转化酶
C4b
C5转化酶的形成
血清免疫球蛋白分类
根据重链稳定区的分子 结构和抗原特异性的不 同，分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
血清免疫球蛋白分类
检测方法
酶联免疫法（ELISA) 放射免疫（RIA) 荧光标记免疫(IFA) 化学发光法（CLIA) 免疫透射比浊、免疫散射比浊
减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、 自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病 毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良 和遗传性补体成分缺乏症等
二、补体C3检测
是一种由肝脏合成的β2-球蛋白。C3在补体系 统各成分中含量最多，是经典途径和旁路途径 的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。
参考值
参考值 0.5 ～2.6 g/L
临床意义
IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类 风湿关节炎、SLE等，原发性巨球蛋白血症时， IgM呈单克隆性明显增高
IgM降低 见于IgG型重链病， IgA型MM，先 天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统 肿瘤和肾病综合症。
四、免疫球蛋白E的检测
– 半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆 Ig片段。
– 恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。 – 良性M蛋白血症：
第二节 血清补体检测
补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途 径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9，旁路途 径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组 成
参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应
识别阶段
细胞膜
C3转化酶的形成
活 化 阶 段
C4b2b 为C3转化酶
C4b
C5转化酶的形成
最新临床常用免疫学检测教学讲义PPT课件
教学内容
第一节、体液免疫检测 第二节、细胞免疫检测 第三节、肿瘤标志物检测 第四节、自身抗体的检测 第五节、感染免疫的检测 第六节、移植免疫的检测 第七节、其他免疫检测
第三节 肿瘤标志物检测
• 肿瘤标志物是由肿瘤细胞本身合成、释放，或是 机体对肿瘤细胞反应而产生或升高的一类物质。
• 存在于血液、细胞、组织或体液中； • 反映肿瘤的存在和生长； • 对肿瘤的诊断、疗效和复发的监测、预后的判断
IgE临床意义
1.生理性变化 婴儿脐血水平很低，出生后逐渐升高，12岁达成人
水平； 2.病理性变化 （1）增高：见于IgE型MM、重链病、肝脏病、结节
病、类风湿关节炎、特异性皮炎、过敏性哮喘、 过敏性鼻炎、荨麻疹、嗜酸性粒细胞增多症、疱 疹样皮炎、寄生虫感染、支气管肺曲菌病等疾病 。
（2）降低：见于先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症 、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂和共济失调毛细 血管扩张症等。
IgA临床意义
1.生理性变化 儿童比成人低，到16岁前达到成人水平； 2.病理性变化 （1）增高：见于IgA型MM、SLE、类风湿关节炎、肝
硬化、湿疹和肾脏疾病等； （2）降低：见于反复呼吸道感染、非IgA型MM、重
链病、轻链病、原发性和继发性免疫缺陷病、自 身免疫性疾病和代谢性疾病。
（三）免疫球蛋白M
• 参与抗感染及免疫调节， • 介导病理性反应。
（一）补体C3
• 补体C3是一种由肝脏合成的β2球蛋白，由α和β 两条多肽链组成。
• 含量最多； • 是经典途径和旁路途径的关键物质； • 是急性时相反应蛋白。
参考区间：成人C3: 0.8～1.5g/L。
C3临床意义
1.生理性变化 出生后逐渐增加，12岁左右达成人水平； 2.病理性变化 （1）增高：常见于一些急性时相反应，如急性炎症
临床常用免疫学检验方法PPT(21张)
•
3、大概是没有了当初那种毫无顾虑的勇气，才变成现在所谓成熟稳重的样子。
•
4、世界上只有想不通的人，没有走不通的路。将帅的坚强意志，就像城市主要街道汇集点上的方尖碑一样，在军事艺术中占有十分突出的地位。
•
5、世上最美好的事是：我已经长大，父母还未老;我有能力报答，父母仍然健康。
•
6、没什么可怕的，大家都一样，在试探中不断前行。
糖脂类P460-461
癌抗原50（cancer antigen 50, CA-50) 癌抗原72-4（cancer antigen 72-4, CA72-4) 糖链抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,
CA19-9) 癌抗原242（carbohydrate antigen 242, CA242)
临床常用免疫学检
验
西南医院检验 科
府伟 灵
要 求 了解常用免疫学检验方法
熟练掌握常用免疫学指标的临床意义
能根据诊断需要准确选用免疫学指标
能准确解读临床免疫学检验报告
免疫学检验技 免疫沉术淀技术
免疫电泳技术 酶联免疫测定 放射免疫分析 化学发光免疫测定 其他免疫细胞活性与数量测定技术
免疫球蛋白 IgA、IgG、IgM 免疫比浊法
IgE
IgE
免疫发光
血清补体检测
P442-443
缺乏特异性诊断意义，主要用于 机体体液免疫功能状态的评估。
临床检验现状：
感染性疾病的免疫学诊断
在《临床病原体检查》 中讲述。
肿瘤标志物检测
P458-462
肿瘤标志物（tumor marker)：P458
在肿瘤发生、发展过程中，由肿瘤细 胞合成、释放的物质或由机体对肿瘤发 生反应而产生的一类物质；与正常组织 相比，这些物质在机体内的含量显著增 高；检测这些物质可以反映肿瘤的恶变 阶段和肿瘤的基因型。
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➢感染性疾病的免疫学诊断
在《临床病原体检查》 中讲述。
➢肿瘤标志物检测
P458-462
肿瘤标志物（tumor marker)：P458
在肿瘤发生、发展过程中，由肿瘤细 胞合成、释放的物质或由机体对肿瘤发 生反应而产生的一类物质；与正常组织 相比，这些物质在机体内的含量显著增 高；检测这些物质可以反映肿瘤的恶变 阶段和肿瘤的基因型。
蛋白类P458-460
甲种胎儿球蛋白（alpha fetoprotein, AFP) 癌胚抗原（carcineombryonic antigen, CEA) 前列腺特异抗原（prostate specific antigen, PSA) 癌抗原125（cancer antigen 125, CA125) 癌抗原15-3（cancer antigen 15-3, CA15-3) 组织多肽抗原（tissue polypeptide antigen, TPA) 鳞状上皮细胞癌抗原（squamouse cell carcinoma antigen, SCC)
➢免疫球蛋白检测
P440-442
缺乏特异性诊断价值，主要用于机体体液免疫 功能状态的评估。
临床检验现状：
检验目的
内容
检验方法 参考范围
免疫球蛋白 IgA、IgG、IgM 免疫比浊法
IgE
IgE
免疫发光
➢血清补体检测
P442-443
缺乏特异性诊断意义，主要用于 机体体液免疫功能状态的评估。
临床检验现状：
Fc——EA-RFC 补体受体——EAC-RFC 小鼠红细胞受体——M-RFC
B细胞分化抗原测定
NK细胞免疫检测(P445-446)
活性测定 ADCC测定
酶类P461-462
α-L岩藻糖苷酶 （ α-L-fucosidase，AFU）
前列腺酸性磷酸酶 （prostatic acid phosphates，PAP）
神经原特异性烯醇化酶 （neuron specific enolase， NSE）
异常凝血酶原 （abnormal prothrombin， APT）
循环免疫复合物(IC) 冷丙种球蛋白(CG) C反应蛋白(CRP)
➢细胞免疫检测
(P444-447)
T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞(NK)免疫检测 细胞因子检测
T细胞免疫检测(P444)
T细胞花环形成试验 (ERFT)
T细胞分化抗原测定 T细胞转化试验源自B细胞免疫检测(P445)
B细胞表面免疫球蛋白测定 红细胞-抗体-补体花环试验
➢自身免疫病相关免疫指标
（P462-465） 类风湿因子 （rheumatoid factor, RF) 抗核抗体
(antinuclear antibody, ANA) 组织和细胞抗体
抗核抗体(P462-464)
抗组蛋白抗体 抗脱氧核糖核蛋白(DNP)抗体 抗双链DNA抗体 抗RNA抗体 抗可提取核抗原(ENA)抗体
❖ 了解常用免疫学检验方法 ❖ 熟练掌握常用免疫学指标的临床意义 ❖ 能根据诊断需要准确选用免疫学指标 ❖ 能准确解读临床免疫学检验报告
➢免疫沉淀技术 ➢免疫电泳技术 ➢酶联免疫测定 ➢放射免疫分析 ➢化学发光免疫测定 ➢其他免疫细胞活性与数量测定技术
➢免疫球蛋白检测 ➢血清补体检测 ➢感染性疾病的免疫学指标 ➢肿瘤标志物检测 ➢自身免疫性疾病的免疫学指标 ➢其他体液免疫指标 ➢细胞免疫相关检测
糖脂类P460-461
癌抗原50（cancer antigen 50, CA-50) 癌抗原72-4（cancer antigen 72-4, CA72-4) 糖链抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,
CA19-9) 癌抗原242（carbohydrate antigen 242, CA242)
抗Sm抗体 抗RNP抗体 抗SS-A(Ro)抗体 抗SS-B(La)抗体 抗Scl-70抗体
抗着丝点抗体 抗PM-1抗体 抗JO-1抗体 抗核仁抗体
组织和细胞抗体
P464-465
抗线粒体抗体 抗甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺微粒体抗体 抗乙酰胆碱能受体抗体 抗平滑肌抗体
➢其他体液免疫指标
(P465-466)