骨髓巨核细胞计数规程

骨秽巨核细胞计数规程

1.实验原理

用瑞氏染色法，对制备好的骨髓片进行染色，低倍镜下（必

要时转油镜确认）以1.5cmX 3cm为单位面积，计数巨核细胞数，并加以分类。

2・标本釆集：

2.1骨髓穿刺部分：一般取胸骨、棘突、骼骨前、悄或后悄等部分，两岁以内小儿主张用胫骨穿刺。穿刺部分不同，取材可能有明显的差异，必要时可做多部位取材，以便能得到更准确的分析数据。

2.2骨髓采集量：一般不超过0.2ml,否则易于稀释。

2.3骨髓取材满意的几项指标：

2.3.1抽取骨髓时，患者有特殊酸痛感。

2.3.2骨髓涂片应有骨髓小粒。

2.3.3显微镜下可见骨髓特有细胞成分，如巨核细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜碱细胞、幼稚红细胞、幼稚粒细胞等。

3.标本储存：取材后应立即推制成骨髓薄片，并尽快送检。

4.标本运输：保持干燥，室温运输。

5.标本拒收的标准：重度血稀，无骨髓特有细胞成份标本。

6.实验材料：瑞氏血细胞染色液

7.实验仪器：

7.1仪器名称：OLYMPUS显微镜

7.2仪器厂家：北京普利生公司骨髓细胞分析软件系统

7.3 仪器型号：OLYMPUS CH30

&操作步骤：

8.1骨髓片瑞氏染色：将制好的干燥骨髓涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3・5滴使其迅速盖满骨髓膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。

8.2巨核细胞计数：将瑞氏染色干燥后的骨髓片，用低倍镜计数巨核细胞，并按原始巨核细胞、幼稚巨核细胞、颗粒型巨核细胞、产板型巨核细胞、裸核型巨核细胞分类记录，计数面积以1.5cmX 3cm为一单位面积。

9.质量控制：每30份样本，抽两份样本进行室内工作人员比对分析，要求差异在10%以内。

10 •临床意义：

10.1参考值:巨核细胞参考值7・35个/1.5cmX3cm面积。

分类：原始巨核细胞0,幼稚巨核细胞0・0.05,颗粒型巨核细胞0.10-0.27,产板型巨核细胞0.44-0.60,裸核型巨核细胞0.08-0.30o

10.2原始巨核细胞增多见于巨核细胞白血病（M7）,幼稚型巨

核细胞比例增多见于特发性血小板减少性紫癫的急性型，颗

粒型巨核细胞增多比例增多见于特发性血小板减少性紫癫的

慢性型。巨核细胞减少见于巨核细胞系统再生障碍及某些白血病。

11.变异的潜在来源

11.1取材不当，骨髓成份被血液稀释。

11.2涂片过厚或过薄，影响巨核细胞计数。

11.3低倍镜下漏数小巨核细胞。

12.操作注意事项：

12.1骨髓取材禁忌症：血友病、严重凝血因子缺之症。

12.1取材量不能过多，一般不超过0.2ml,以防血稀。

12.3取材后，必须立即涂片，因骨髓液中纤维蛋白原含量高, 会很快凝固，影响涂片。

12.4推好的髓片应在空气中摇动，使其尽快干燥，以免细胞变形。

12.5根据髓膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果满意。

12.6镜检时循序检查切勿漏检，必要时用油镜确认。

13.参考文献