鼠类携带汉坦病毒的基因特征及溯源研究

2005-2014年共报告HFRS 204例，年均
发病率为4.52/10万；2010年出现死亡2例。 发病率呈下降趋势，但年均发病率仍高于 全市的3.13/10万、全省的0.96/10万。仍 为中等强度发病流行区。 呈现高度散发但又有相对集中的特点，主 要集中在好溪、新建溪沿岸的地区。
在汉城市区的褐家鼠中分离出另一种病毒
汉城病毒(Seoul virus，SEOV)
后来又陆续发现其他型别的病毒，最后将这些
病毒其归入布尼亚病毒科，确立为一个新属， 命名为汉坦病毒属(hantavirus) 。 汉他病毒
1993年美国西部暴发了汉坦病毒肺综合征
疫情，在疫区的鹿鼠中分离出的病毒被确认 为是该疾病的病原体 辛努柏病毒 Sin Nombre virus SNV 无名病毒（no-name virus）
病毒感染后,血清中出现二种抗体
lgM抗体发热1-2 d即可检出，7-10d达高峰
lgG抗体则要5-7d方可检出，14-20d达高峰；
IgM多用于临床早期诊断
IgG多用于流行病学调查
目前病毒核酸主要通过PCR及其衍生的相
关技术进行检测。 选取HV核酸的S、L保守片段的核苷酸序 列设计属特异性引物进行汉坦病毒检测， 而选取M变异片段的核苷酸序列设计型特 异性引物进行病毒分型检测。
通过对鼠类标本进行汉坦病毒核酸检测，
基因序列测定及进化分析。 摸清本地流行的汉坦病毒的基因特征。
通过对鼠类进行血清学调查，了解鼠类
携带汉坦病毒的感染水平。
通过对急性期肾综合征出血热病人进行
汉坦病毒核酸检测与分型，并与鼠类携带的
汉坦病毒进行比较，对不同型别的病毒基因
进行溯源。
通过对不同类别的健康人群进行汉坦病毒 IgG抗体横断面血清学调查。了解人群中对
有多种，最常用的为非洲绿猴肾细胞 （VeroE-6）； 增殖速率较慢，杀伤细胞作用较小,几乎 不引起细胞病变（CPE） 更多的是用ELISA、IFA等方法来检测感 染细胞浆内存在的病毒抗原作为病毒增殖 的指标
ห้องสมุดไป่ตู้
由于汉坦病毒的核衣壳NP蛋白，具有很强的 抗原性，可用于疾病的早期诊断。目前检测 抗原的方法有ELISA、生物探针技术、量子 点荧光技术等方法。
2016年2月
汉坦病毒（Hantavirus，HV）属于布尼亚病 毒科、汉坦病毒属，是有包膜、分节段的单 股负链 RNA病毒，由大（L）、中（M）、 小（S） 三个基因片段组成；S段与L段相对 保守，而M段常会发生变异。HV的自然宿主 以小型啮齿动物为主，并经由啮齿类动物传 染给人类。
临床上主要引起二种急性传染病 肾综合征出血热 (HFRS) 发热、出血、肾功能损害、免疫功能紊乱
已历时14个月。 2. 先后经历了项目调研、课题设计、人员培 训、试剂采购、标本采集、病原检测、数 据整理、统计分析，撰写报告、论文等过 程。
鼠类标本：共计鼠肺645份、鼠血清397份 人群标本：肾综合征出血热病例血清5份、
健康人群血清627份。 完成鼠肺汉滩病毒核酸PCR检测 完成鼠血清汉坦病毒IgG酶标检测（鼠用） 完成健康人群血清汉坦病毒IgG酶标检测（人） 病例血清的PCR检测、基因测序看起二项工作尚未完 成。 （包括丽水的部分）
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鼠肺核酸PCR检测 共检测645份，阳性2份，阳性率0.31%。 鼠血清IgG检测 共检测397份，阳性54份，阳性率13.60%。 健康人群血清IgG检测 共检测627份，阳性29份，阳性率4.63%。
• 对项目的部分工作、数据进行分析处理，
并整理成文。 •完成《 项目中期执行情况报告》 •完成科技论文4篇。
汉坦病毒肺综合征（HPS）
呼吸窘迫、衰竭为特征
旧称
流行性出血热 朝鲜出血热 远东出血热 肾综合征出血热。
中国、日本 朝鲜、韩国 前苏联地区
1980年世界卫生组织将其统一命名为
主要流行于美国，以及南美洲的阿根廷、
巴西、巴拉圭、玻利维亚等地区
1993年 美国暴发疫情 呼吸衰竭
200多人发病，死亡率50%， 非典11%，比埃博拉90%
汉坦病毒目前已发现有40多个型别 肾综合征出血热：有 7个型别
汉滩病毒、汉城病毒、普马拉病毒等 汉坦病毒肺综合征：有15个型别 辛诺柏病毒、纽约病毒、安第斯病毒等 其他型别的HV其致病性还未完全清楚 中国1935年/浙江1963年 出现病例
1978年韩国的李镐汪等从疫区汉江边上的
黑线姬鼠肺组织中分离一株病毒。 汉滩病毒（hantaan virus，HTNV）
已录用论文： 《汉坦病毒检测技术的研究进展》 《健康人群汉坦病毒隐性感染率监测分析》
已投稿论文： 《缙云县人间、鼠间肾综合征出血热监测结果分析》
项目的大部分工作已完成，接下来重点做好 肾综合征出血热病例的汉坦病毒核酸检测和 核酸阳性标本的基因分型工作，保质保量地 在规定期限内完成整个项目的全部研究工作。
科研项目 国家、省、市、县级 医学论文 职称评审、单位评分
谢 谢
据省疾控中心的姚苹苹、徐芳等学者的研究， 基本确定浙江省大部分地区（包括丽水）的 汉坦病毒均为汉滩病毒HTNV
中国疾病预防控制中心张永振研究员前几年 在浙江龙泉的中菊头蝠中发现了一种新的汉 坦病毒。被命名为龙泉病毒 当地蝙蝠龙泉病毒携带率为5.3%
病毒培养、抗原检测、抗体检测、核酸检测
病毒培养 目前可用于 HV培养的细胞系
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肾综合征出血热全球每年约有10万例HFRS
发生，病死率约为2%～10%，中国约占世 界报道病例总数的90%以上。 浙江省自1963年发现首例HFRS病例以来 ,70-80年代发病人数不断上升,90年代以后疫 情逐步下降。但部分县市的发病率还是居高 不下。 病例宁波、台州、绍兴、衢州、丽水 丽水 龙泉、缙云
项目周期：2015年1月～2016年12月，共24个月时间。 （1）2015年1月：完成课题设计和科研项目申请工作。
（2）2015年2月：完成项目参与人员的专业培训工作。
（3）2015年3月-7月：完成标本的采集与前处理工作。 （4）2015年8月-10月：完成本地实验室的检测工作。 （5）2016年1月-3月：送省级实验室进行基因测序工作。 （6）2016年4月-12月：完成数据分析，撰写论文、报告。
迄今为止，我国尚未见HPS病例的报道。
主要宿主 鼠类、蝙蝠 传播途径3类5种 动物源性传播：动物的唾液、尿液、粪便
经呼吸道、消化道、伤口接触 垂直传播：胎盘 感染的孕妇 带毒的孕鼠 虫媒传播：革螨、恙螨 传播媒介/存储宿主 人-人之间传播 肾综合征出血热 未见 汉坦病毒肺综合征 少见
汉坦病毒的自然免疫水平。
对鼠类标本进行汉坦病毒核酸检测与分型，研 究本地鼠类携带汉坦病毒的基因特征，为制定 肾综合征出血热防控策略措施提供参考依据。
建立汉坦病毒检测技术平台，开展核酸检测
与血清学检测的技术应用。
预期在省级以上专业杂志发表科研论文2篇。
1. 本项目自2015年1月1日开始启动，至今，