经典的抗原抗体反应PPT课件
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图解抗原抗体反应类型和原理课件

形成的沉淀物少,上清液中可测出游离的抗体或抗
原的现象。
➢带现象包前括带(prozone)抗体过量时称为。
后代(postzone)抗原过量时称为。
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四、阶段性
第一阶段:抗原与抗体发生特异性 结合阶段
特点:反应快 第二阶段:反应可见阶段
特点:反应时间较长
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第三节 抗原抗体反应影响因素
注意:解离后的抗原或抗体仍然保持其原有生物活性
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三、比例性(proportionality)
1、比例性是指抗原与抗体发生可见反应 遵循一定的量比关系。 2、以絮状沉淀实验为例,受抗原抗体比 例性的影响非常明显。
3、根据所形成的沉淀物及抗原抗体比例 关系绘制反应曲线。
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3
教学内容:
第一节 抗原抗体反应的原理 第二节 抗原抗体反应的特点 第三节 影响抗原抗体反应的因素 第四节 免疫学检测技术的类型
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4
第一节 抗原抗体反应的原理
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5
一、抗原抗体的亲和力和亲合力
* 亲和力(affinity):是抗体分 子上一个抗原结合点与相应的抗原决 定簇之间的相适应而结合的强度,是 抗原与抗体间固有的结合力。
2、原因:抗原抗体的结合是分子表面的非共价键 结合,因此形成的复合物不牢固。
3、抗原抗体反应动态平衡式如下:
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4、决定抗原抗体解离的因素
(1)抗体与相应抗原的亲合力。 亲合力低的抗体与抗原形成的复合物较易解离。
(2)环境因素对复合物的影响。 PH过高或过低、增加离子强度均可破坏
抗原抗体反应的课件ppt

比例性
抗原抗体反应具有比例性,即当抗原和抗体比例适当时,反应最完全,形成的免疫复合物 最多。当抗原或抗体过量时,反应则不完全,形成的免疫复合物也较少。这种比例性是由 抗原和抗体的浓度以及它们之间的比例关系决定的。
02
抗原抗体反应机制
抗原识别与结合机制
抗原表位识别
T细胞通过TCR识别抗原肽-MHC分子复合物,B细胞通过BCR识 别抗原表位。
抗原抗体反应特点
特异性
抗原抗体反应具有高度的特异性,即一种抗体只能与相应的抗原发生反应,形成免疫复合 物。这种特异性是由抗原决定簇和抗体结合部位的互补性决定的。
可逆性
抗原抗体反应是可逆的,即在一定条件下,免疫复合物可以解离成游离的抗原和抗体,再 次相遇时仍可重新结合。这种可逆性是由抗原抗体结合的亲和力决定的,亲和力越高,结 合越牢固,解离越困难。
优化抗体药物设计
通过机器学习技术对抗体进行优化设计,提高抗 体的亲和力和特异性。
抗原抗体反应模拟
利用深度学习技术模拟抗原抗体反应过程,为药 物筛选和开发提供新工具。
THANKS
感谢观看
自身免疫性疾病检测及诊断
01
02
03
检测方法
介绍常见的自身免疫性疾 病相关抗体检测方法,如 ELISA、免疫印迹技术等 。
临床意义
阐述自身抗体检测在自身 免疫性疾病诊断、病情监 测和预后评估中的应用价 值。
病例分析
通过具体病例展示自身免 疫性疾病抗体检测的临床 应用,如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。
药物开发中抗原抗体反应的意义
01
阐述药物开发中抗原抗体反应的研究意义,包括药物安全性、
有效性等方面。
药物抗原性的研究方法
02
抗原抗体反应具有比例性,即当抗原和抗体比例适当时,反应最完全,形成的免疫复合物 最多。当抗原或抗体过量时,反应则不完全,形成的免疫复合物也较少。这种比例性是由 抗原和抗体的浓度以及它们之间的比例关系决定的。
02
抗原抗体反应机制
抗原识别与结合机制
抗原表位识别
T细胞通过TCR识别抗原肽-MHC分子复合物,B细胞通过BCR识 别抗原表位。
抗原抗体反应特点
特异性
抗原抗体反应具有高度的特异性,即一种抗体只能与相应的抗原发生反应,形成免疫复合 物。这种特异性是由抗原决定簇和抗体结合部位的互补性决定的。
可逆性
抗原抗体反应是可逆的,即在一定条件下,免疫复合物可以解离成游离的抗原和抗体,再 次相遇时仍可重新结合。这种可逆性是由抗原抗体结合的亲和力决定的,亲和力越高,结 合越牢固,解离越困难。
优化抗体药物设计
通过机器学习技术对抗体进行优化设计,提高抗 体的亲和力和特异性。
抗原抗体反应模拟
利用深度学习技术模拟抗原抗体反应过程,为药 物筛选和开发提供新工具。
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自身免疫性疾病检测及诊断
01
02
03
检测方法
介绍常见的自身免疫性疾 病相关抗体检测方法,如 ELISA、免疫印迹技术等 。
临床意义
阐述自身抗体检测在自身 免疫性疾病诊断、病情监 测和预后评估中的应用价 值。
病例分析
通过具体病例展示自身免 疫性疾病抗体检测的临床 应用,如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。
药物开发中抗原抗体反应的意义
01
阐述药物开发中抗原抗体反应的研究意义,包括药物安全性、
有效性等方面。
药物抗原性的研究方法
02
抗原抗体反应知识讲义PPT(63张)

特异性示意图
*交叉反应(cross reaction) 两种不同的抗原 物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇
(共同抗原),则可与彼此相应的抗体反应。
二、比例性(proportionality)
*最适比:是指抗原与抗体发生可见反应,需遵循 一定的量比关系,只有当二者浓度比例适当时, 才出现可见反应。
1.抗原决定簇又称表位(epitope),是指抗原性物质 表面决定该抗原特异性的特殊化学基团,是免疫应答和免 疫反应具有特异性的物质基础。
2.抗原决定簇是很小的,其大小相当于相应抗体的 结合部位,它们可由5-7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成。
3.抗原结合价:是指能与抗体分子结合的抗原决定 簇的总数。每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇,而 天然抗原含有很多不同的抗原决定簇,它是带有大量多种 "天然"半抗原的大分子。
应速度快,几秒钟或几分钟即可完成,但不 出现肉眼可见反应。
第二阶段为可见阶段,表现为凝集、沉淀、
补体结合等反应,本阶段有两个特点,一是 反应进行慢,需要几分钟、几十分钟或更长。 其二是受电解质、温度、酸碱度等多种因素 影响。
二、基本条件:
结合力 亲和力和亲合力 亲水胶体转化为疏水胶体
一、抗原抗体结合力
• 当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化 层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后, 与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为 疏水胶体。
• 在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形 成可见的抗原抗体复合物。
亲水胶体转化为疏水胶体示意图
转化
NaCl
亲水胶体
疏水胶体
可见反应
第二节 抗原抗体反应的特点
特异性 比例性 可逆性 阶段性
絮状沉淀试验
抗原抗体反应的原理PPT课件

免疫细胞(Immune cells) 泛指所有参与免疫应答及与免疫应答活动相关的细胞。
免疫活性细胞(Immune competent cell,ICC) 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效
应产物的淋巴细胞。
第7页/共50页
免疫细胞的类型
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细
半抗原-C-O-C-O-CH2CH(CH3)2 + 蛋白质- NH2 半抗原-CO- NH -蛋白质 + HO-CH2CH(CH3)2
半抗原与载体直接联接
第43页/共50页
琥珀酸酐法
OO 半抗原-CH2 –OH + C-O-C
CH3 CH3
O 半抗原-CH2 –O-C-(CH2 ) 2-COOH
半抗原与载体间接联接
第4页/共50页
第二节 有关免疫学基本概念
一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程
第5页/共50页
抗原的概念与属性
免疫原性——可识别、可反应性 (诱导机体产生免疫应答的特性) 免疫反应性 ——选择结合性 (和免疫应答产物特异性结合的特性)
第6页/共50页
免疫细胞的概念与分类
第8页/共50页
免疫应答的概念与过程
免疫应答(immune response) 免疫系统接触抗原后,免疫细胞对抗原进行识别;并使特异性淋巴细胞
活化、增殖;表现出免疫效应的过程。 免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段(antigen-recognizing phase) 2、淋巴细胞活化阶段(lymphocyte-activating phase) 3、抗原清除阶段(antigen-eliminating phase)
免疫活性细胞(Immune competent cell,ICC) 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效
应产物的淋巴细胞。
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免疫细胞的类型
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细
半抗原-C-O-C-O-CH2CH(CH3)2 + 蛋白质- NH2 半抗原-CO- NH -蛋白质 + HO-CH2CH(CH3)2
半抗原与载体直接联接
第43页/共50页
琥珀酸酐法
OO 半抗原-CH2 –OH + C-O-C
CH3 CH3
O 半抗原-CH2 –O-C-(CH2 ) 2-COOH
半抗原与载体间接联接
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第二节 有关免疫学基本概念
一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程
第5页/共50页
抗原的概念与属性
免疫原性——可识别、可反应性 (诱导机体产生免疫应答的特性) 免疫反应性 ——选择结合性 (和免疫应答产物特异性结合的特性)
第6页/共50页
免疫细胞的概念与分类
第8页/共50页
免疫应答的概念与过程
免疫应答(immune response) 免疫系统接触抗原后,免疫细胞对抗原进行识别;并使特异性淋巴细胞
活化、增殖;表现出免疫效应的过程。 免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段(antigen-recognizing phase) 2、淋巴细胞活化阶段(lymphocyte-activating phase) 3、抗原清除阶段(antigen-eliminating phase)
《抗原抗体反应》课件

夹心反应
总结词
指抗原和抗体结合后,其复合物可与其 他物质结合,形成夹心结构所引发的反 应。
VS
详细描述
在夹心反应中,抗原和抗体结合后,其复 合物可以与另一种物质结合,形成一种夹 心的结构。这种反应可以显著增加反应的 灵敏度,常用于检测低浓度的抗原。例如 在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,酶标 板上的抗体与抗原结合后,再与酶标记的 抗体结合,形成夹心结构。
抗体
指由抗原刺激机体免疫系统产生的,能与相应抗原特异性结合的 球蛋白。
抗原抗体的特性
特异性
抗原和抗体之间的结合具有高度的特异性,即一种 抗原只能与相应的抗体发生结合反应。
亲和力
抗原和抗体之间的结合力称为亲和力,亲和力的大 小决定了抗原抗体反应的强弱。
可逆性
抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可以解 离,即抗原抗体反应具有可逆性。
凝集反应
观察抗原抗体结合后颗粒物的凝集情况,判断反 应结果。
荧光免疫技术
利用荧光物质标记抗体或抗原,通过荧光信号的 强弱判断反应结果。
06
抗原抗体反应的注意事项
实验前的准备
实验材料准备
确保抗原和抗体溶液的浓 度和纯度,选择适当的标 记物如荧光染料、酶等。
实验设备检查
检查实验所需仪器设备, 如离心机、显微镜、酶标 仪等,确保其正常运行。
02
抗原抗体反应的原理
抗原抗体的结合力
02
01
03
静电吸引
抗原和抗体带有相反的电荷,通过静电吸引相互结合 。
氢键
抗原和抗体中的极性基团形成氢键,增强结合力。
疏水相互作用
抗原和抗体的非极性基团相互靠近,形成疏水键。
抗原抗体的亲和力
《抗原抗体反应》课件

免疫测定技术
酶联免疫吸附试验(ELISA)
01
利用抗原抗体反应的原理,通过酶标记技术检测样本中微量抗
原或抗体的方法。
免疫荧光技术
02
利用抗原抗体反应标记荧光物质,通过荧光显微镜观察荧光信
号,对细胞或组织中的抗原进行定位和定性分析。
免疫印迹技术
03
将抗原抗体反应与电泳技术结合,分离并检测复杂样本中的抗
免疫学领域的发展趋势
免疫疗法
随着免疫疗法的发展,抗原抗体反应在肿瘤、感染等疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
免疫预防
利用抗原抗体反应,研发新型疫苗,提高预防传染病的效果。
THANKS
感谢观看
亲和力定义
抗原和抗体结合时,它们 之间的亲和力是指它们相 互吸引的强度和稳定性。
亲和力常数
亲和力常数是用来描述抗 原和抗体结合强度的物理 量,其值越大表示结合越 稳定。
亲和力影响因素
亲和力受到多种因素的影 响,如抗原抗体的结构、 电荷分布、溶剂环境等。
抗原抗体反应的动力学
反应速率
抗原抗体反应的动力学特征包括 反应速率和反应机制。
等。
05
抗原抗体反应的实验操作
抗原抗体的制备
抗原的制备
选择适当的抗原物质,经过适当的处理和纯化,确保抗原的纯度和特异性。
抗体的制备
免疫动物以产生特异性抗体,通过细胞培养或杂交瘤技术制备单克隆抗体。
抗原抗体的纯化
亲和层析
利用抗原抗体特异性结合的特性,通 过亲和层析介质分离纯化抗体。
凝胶过滤层析
利用分子大小差异进行分离,排除杂 质,纯化抗原抗体。
详细描述
当抗原和抗体结合后,由于分子量增 大,可形成肉眼可见的沉淀物。这种 沉淀反应可用于检测抗原或抗体的存 在,如免疫比浊法测定抗原的浓度。
图解抗原抗体反应类型和原理ppt

Keq =
104 Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
二、抗原抗体的结合力
不形成牢固的共价键,通过非共价键结合
这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力 1、静电引力 3、氢键 2、范德华引力 4、疏水作用力
一、静电引力 概念:抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和 羧基基团之间相互的引力。又称库伦引力。
研究生课程抗原抗体反应类型
(antigen – antibody reaction)
抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间
所发生的特异性结合反应。
体内:体液免疫应答的效应作用 体外:各种免疫学检测技术
包括
本章讲述的抗原抗体反应,主要是指抗 原和抗体在体外结合所表现的反应
教学内容:
第一节 抗原抗体反应的原理 第二节 抗原抗体反应的特点 第三节 影响抗原抗体反应的因素
1、电解质: (1)作用:中和抗原抗体复合物表面电荷,使 其靠拢聚集成出现大块聚集复合物。 (2)常用电解质:0.85%NaCl、各种缓冲液 2、酸碱度: 一般抗原抗体反应以pH6~9为宜,有补体参 与的反应以pH7.2~7.4为宜。 3、温度:一般抗原抗体反应以15~40℃为宜, 最适温度为37℃。
概念:两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结 构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应。
B
抗原抗体交叉反应示意图
二、可逆性(reversibility)
1、概念:是指抗原与相应抗体结合成复合物后,在
一定条逆性。 2、原因:抗原抗体的结合是分子表面的非共价键 结合,因此形成的复合物不牢固。
1、比例性是指抗原与抗体发生可见反应 遵循一定的量比关系。 2、以絮状沉淀实验为例,受抗原抗体比 例性的影响非常明显。
抗原抗体反应及应用 (2)

-NH2/-SH MBS法、SMPT法、SMBT法
佐剂的使用:佐剂与抗原按1:1比例混合乳化
信阳农业高等专科学校生物技术系
动物的选择
抗原与免疫动物的种属差异越远越好。
对蛋白质抗原,大局部动物皆适合常用的是山羊 和家兔;甾体激素免疫多用家兔;酶类免疫多用 豚鼠。
抗血清量的需要:大动物如马、骡等可获得大量 血清〔一头成年马反复采血可获得10000ml以上 的抗血清〕;但有时抗体需要是不多,选用家兔 或豚鼠即可。
HAT的RPMI1640〕
信阳农业高等专科学校生物技术系
单抗制备的技术
抗原提纯与动物免疫 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备 细胞融合 HAT法筛选杂交瘤细胞 阳性细胞的筛选、单克隆化与保存 单克隆抗体的制备与纯化
信阳农业高等专科学校生物技术系
抗原提纯与动物免疫
抗原纯度越高越好,尤其是初次免疫抗原。
信阳农业高等专科学校生物技术系
动物采血法
颈动脉放血法:这是最常用的方法,对家兔、山 羊等动物皆可采用。
心脏采血法:此法多用于豚鼠、大鼠、鸡等小动 物。此法采血技术应熟练,穿刺不准容易导致动 物急性死亡。
静脉屡次采血法:家兔可用耳中央静脉,山羊可 用颈静脉。这种放血法可隔日一次,有时可采集 多量血液。
信阳农业高等专科学校生物技术系
免疫途径
一般采用多点注射,一只动物注射总数约为 8~10点,包括足掌及肘窝淋巴结周围,背部两 侧、颌下、耳后等处皮内或皮下,免疫效果较好; 亦有肌肉、腹腔、静脉注射途径。 ➢ 腹腔、肌肉、皮内、皮下注射适合使用任何 抗原,刺激局部淋巴结发生免疫应答; ➢ 静脉注射适合可溶性抗原及分散的单细胞悬 液,不使用佐剂,免疫应答主要发生在脾脏。
信阳农业高等专科学校生物技术系
《抗原抗体反应原理》课件

免疫应答机制研究
通过研究抗原与抗体的相互作用,深 入了解免疫应答的机制和过程,为疫 苗研发、免疫治疗等提供理论基础。
自身免疫性疾病机制研究
通过对自身抗体与自身抗原的反应进 行研究,揭示自身免疫性疾病的发病 机制,为治疗提供新思路。
免疫细胞功能分析
利用抗原抗体反应检测免疫细胞表面 的抗原标志,分析免疫细胞的功能和 亚型,为免疫学研究提供有力工具。
抗体的纯化
通过一系列分离纯化技术,去除血清中的其 他成分,提高抗体的纯度,常用的方法有离 心、凝胶电泳、亲和层析、离子交换层析等 。
抗原抗体反应的检测方法
沉淀反应
抗原和抗体结合后,在一定条 件下形成肉眼可见的沉淀物, 常用的方法有单向免疫扩散、 双向免疫扩散、对流免疫电泳 等。
凝集反应
抗原和抗体结合后,引起颗粒 性抗原的凝集现象,常用的方 法有直接凝集、间接凝集等。
Байду номын сангаас
抗原抗体的分类
按作用对象分类
外源性抗原和内源性抗原。外源性抗原是指来自机体外部的抗原,如细菌、病 毒等;内源性抗原是指来自机体内部的抗原,如变性或损伤的组织细胞。
按功能分类
完全抗原和半抗原。完全抗原是指具有免疫原性和反应原性的抗原物质,能够 刺激机体产生免疫应答;半抗原是指仅有反应原性而无免疫原性的抗原物质, 不能刺激机体产生免疫应答。
影响因素
亲和力受到抗原和抗体分子间的电荷分布、空间构象、结合位点数目以及溶液环 境等多种因素的影响。
抗原抗体的特异性
特异性的含义
特异性是指抗原和抗体结合的专一性,即一种抗原只能与相 应的抗体发生特异性结合。
决定因素
抗原抗体的特异性是由其分子表面的化学基团决定的,这些 化学基团在空间构象上互补,使得抗原和抗体能精确地结合 在一起。
抗原抗体与结合反应PPT讲稿

一定条件:低pH、高浓度 盐等。
Ab1
➢三、比例性
➢比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循 一定的量比关系 ➢最适比: 沉淀物最多时的抗原抗体的浓 度比或量比 ➢等价带: 抗原与抗体分子比例合适范围 ➢前 带: 抗体过量 ➢后 带: 抗原过量
抗原抗体反应比例性示意图
最适温度为37℃或室温18-25℃ 为宜。若温度高于56℃,可导致已 结合了的抗原抗体复合物解离,甚至 分子变性。
抗原抗体反应类型
反应类型 凝集反应
沉淀反应
补体参与的 反应
实验技术 直接凝集试验 间接凝集试验 抗球蛋白试验 液相沉淀试验 免疫电泳技术 补体溶血试验
补体结合试验
结果判断 观察凝集现象
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
抗原抗体亲合力示意图
三、液相中抗原抗体的结合反应
四、阶 段 性
第一阶段:特异性结合阶段 第二阶段:反应可见阶段
➢第五节 影响抗原抗体结合反应的因 素
➢抗原抗体本身因素 ➢反应基质因素 ➢ 实验环境因素
一、抗原抗体本身因素
➢抗原:理化性状、表位种类和数目 ➢抗体:来源、特异性、亲和性、效价
来源
R型Ab:等价带宽, 易出现可见反应。 H型Ab:等价带窄,易出现前带或后带 McAb: 不宜用于凝集和沉淀反应。
抗原 ﹢ 抗体
(亲水胶体)
抗原抗体复合物 (疏水胶体)
电解质
可见反应
抗原抗体检测技术ppt课件

目前应用最广的是人O型红细胞和绵羊红细胞。后 者应用更广,因为其来源方便,另外,绵羊红细胞 的表面有大量糖蛋白受体,极易吸附某种抗原物质, 吸附性能好,且大小均匀一致 。
采用PP管及配件:根据给水设计图配 置好PP管及配 件,用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ,边剪 边旋转 ,以保 证切口 面的圆 度,保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集实验是一个定性检测方法,即根据凝 集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。
也可以进行半定量检测,即将标本作一系 列对倍稀释后进行反应,以出现阳性反应 的最高稀释度作为滴度。
间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载 体(carrier)。
将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过 程称为致敏(sensitization)。
吸附有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗 粒(sensitized particle)。
敏感度比直接凝集反应高2~8倍,适用于各种可 溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉 淀反应。
环境条件
电解质
抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电 解质影响。
若无电解质存在,则不出现可见反应。 但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质
沉淀,即盐析。
采用PP管及配件:根据给水设计图配 置好PP管及配 件,用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ,边剪 边旋转 ,以保 证切口 面的圆 度,保 持熔接 部位干 净无污 物
采用PP管及配件:根据给水设计图配 置好PP管及配 件,用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ,边剪 边旋转 ,以保 证切口 面的圆 度,保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集反应的类型
直接凝集反应
颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应 抗体结合出现肉眼可见的凝集现象,成为直接 凝集实验(direct agglutination test)。
采用PP管及配件:根据给水设计图配 置好PP管及配 件,用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ,边剪 边旋转 ,以保 证切口 面的圆 度,保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集实验是一个定性检测方法,即根据凝 集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。
也可以进行半定量检测,即将标本作一系 列对倍稀释后进行反应,以出现阳性反应 的最高稀释度作为滴度。
间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载 体(carrier)。
将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过 程称为致敏(sensitization)。
吸附有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗 粒(sensitized particle)。
敏感度比直接凝集反应高2~8倍,适用于各种可 溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉 淀反应。
环境条件
电解质
抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电 解质影响。
若无电解质存在,则不出现可见反应。 但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质
沉淀,即盐析。
采用PP管及配件:根据给水设计图配 置好PP管及配 件,用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ,边剪 边旋转 ,以保 证切口 面的圆 度,保 持熔接 部位干 净无污 物
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凝集反应的类型
直接凝集反应
颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应 抗体结合出现肉眼可见的凝集现象,成为直接 凝集实验(direct agglutination test)。
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注意:测试纸插入尿液深度不可超过MAX标志线
【实阳 : 阴 无性效验结果】
Experiment’s results
实验报告
test report
实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果及分析
注意:实验报告封面上各项一定填写完整 。
凝集反应 Agglutination reactions
在一定浓度的电解质环境中,颗粒性抗原(红细胞 、细菌、 乳胶颗粒等)和相应抗体反应能够产生 肉眼可见的凝集块。
直接凝集 (direct agglutination) 间接凝集(indirect agglutination) 间接凝集抑制试验 (inhibition of indirect
1901年发现的人类 第一个血型系统--ABO血型系统发现 者---奥地利细菌学家 Karl Landsteiner
【实验原理】
Experiment’s mechanism
血型是指红细胞的血型,是根据红细胞膜外 表面存在的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上 的糖蛋白和糖脂)来确定的,这种抗原或凝 集原是由遗传决定的
了解血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的 用途。
抗原抗体反应的基础
basis of Ab-Ag reaction
抗原抗体反应的特点
characters of Ab-Ag reaction
特异性
Specificity
抗 原可rev逆抗er性s体ibil反ity 应的特点
characters of Ab-Ag reactions
免疫标记技术
放射物标记技术
免疫酶技术
免疫荧光技术
酶联免疫吸附技术
酶免疫组化技术
双抗体夹心法
竞争法
双抗原夹心法
间接法
双位点一步法
免疫胶体金技术
免疫胶体金技术
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg)等检测。
胶 体 金 ( Colloidal gold) 是 氯 金 酸 (
HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的作 用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静
电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金标记的原理:胶体金在碱性条件下带 负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术(Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术 。
3.取无菌采血针,采血;
4.用牙签一端蘸取少量血液,置于抗A单克隆抗体搅 匀,换取另一根牙签蘸取少量血液,置于抗B单克隆 抗体搅匀;
5.轻轻转动玻片,使其充分混匀,静置数分钟后,观 察结果。
注意:两次取血的牙签一定不能混用。
【实验结果】
Experiment’s results
(单克隆抗体+被检者红细胞)
病原生物与免疫学实验
实验室规则
一.进入实验室必须穿护士服,不必需的物品不要 携带入室,严禁在实验室进食、饮水。
二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。 三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。 四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师
并登记。 五.实验后的材料要放到指定的位置。 六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强
的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟 七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好
实验记录本的登记方可离开实验室。
பைடு நூலகம்
抗原抗体反应
Ab-Ag reactions
掌握血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的 操作及结果的正确观察、判断;
实 验熟悉目血的型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的
原理;
原 【实理验原理】 Expe图riment’s mechanism
胶体金标记的鼠抗 人α—hCG抗体 抗人β—hCG抗体
抗鼠IgG抗体
hCG
【1操.待测作样步品、骤检测】试纸和其它检测材料等在室温后检测
Experiment’s Methods
2.将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中,5秒钟 后取出平放,5分钟内观察结果
agglutination)
直接凝集
direct agglutination
----ABO血型的鉴定
identification of ABO blood type
概述 overview 血 型 系 统
Blood group system
ABO血型系统的发现
Discovery of ABO blood type
+
【实验器材】
Experiment’s equipments
1:载玻片、采血针、牙签
2:抗A和抗B单克隆抗体、碘伏、 棉签。
【操作步骤】
Experiment’s Methods
1.在洁净的玻片两端用记号笔分别标上A、B,然后在 A端滴一滴抗A单克隆抗体,B端滴一滴抗B单克隆抗体 ;
2. 用碘伏消毒手指;
被检者血型
抗A
抗B
+
-
A
-
+
B
+
+
AB
-
-
O
【实验结果】
Experiment’s results
免疫标记技术
immunolabeling techniques
免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性同
简位检介素 测等标对记抗物体来或观抗察原抗进原行抗标体记反,应然 的后实再验通技过术
。
分类 classification
胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的 毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用 胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗 体。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 样品垫 (胶体金垫)质检线 吸收垫
背衬 (底板)
检测线硝酸纤维素膜
【实阳 : 阴 无性效验结果】
Experiment’s results
实验报告
test report
实验原理 实验材料 实验步骤 实验结果及分析
注意:实验报告封面上各项一定填写完整 。
凝集反应 Agglutination reactions
在一定浓度的电解质环境中,颗粒性抗原(红细胞 、细菌、 乳胶颗粒等)和相应抗体反应能够产生 肉眼可见的凝集块。
直接凝集 (direct agglutination) 间接凝集(indirect agglutination) 间接凝集抑制试验 (inhibition of indirect
1901年发现的人类 第一个血型系统--ABO血型系统发现 者---奥地利细菌学家 Karl Landsteiner
【实验原理】
Experiment’s mechanism
血型是指红细胞的血型,是根据红细胞膜外 表面存在的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上 的糖蛋白和糖脂)来确定的,这种抗原或凝 集原是由遗传决定的
了解血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的 用途。
抗原抗体反应的基础
basis of Ab-Ag reaction
抗原抗体反应的特点
characters of Ab-Ag reaction
特异性
Specificity
抗 原可rev逆抗er性s体ibil反ity 应的特点
characters of Ab-Ag reactions
免疫标记技术
放射物标记技术
免疫酶技术
免疫荧光技术
酶联免疫吸附技术
酶免疫组化技术
双抗体夹心法
竞争法
双抗原夹心法
间接法
双位点一步法
免疫胶体金技术
免疫胶体金技术
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原( HBsAg)等检测。
胶 体 金 ( Colloidal gold) 是 氯 金 酸 (
HAuCl4)的水溶胶,氯金酸在还原剂的作 用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静
电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金标记的原理:胶体金在碱性条件下带 负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术(Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术 。
3.取无菌采血针,采血;
4.用牙签一端蘸取少量血液,置于抗A单克隆抗体搅 匀,换取另一根牙签蘸取少量血液,置于抗B单克隆 抗体搅匀;
5.轻轻转动玻片,使其充分混匀,静置数分钟后,观 察结果。
注意:两次取血的牙签一定不能混用。
【实验结果】
Experiment’s results
(单克隆抗体+被检者红细胞)
病原生物与免疫学实验
实验室规则
一.进入实验室必须穿护士服,不必需的物品不要 携带入室,严禁在实验室进食、饮水。
二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。 三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。 四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师
并登记。 五.实验后的材料要放到指定的位置。 六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强
的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟 七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好
实验记录本的登记方可离开实验室。
பைடு நூலகம்
抗原抗体反应
Ab-Ag reactions
掌握血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的 操作及结果的正确观察、判断;
实 验熟悉目血的型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的
原理;
原 【实理验原理】 Expe图riment’s mechanism
胶体金标记的鼠抗 人α—hCG抗体 抗人β—hCG抗体
抗鼠IgG抗体
hCG
【1操.待测作样步品、骤检测】试纸和其它检测材料等在室温后检测
Experiment’s Methods
2.将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中,5秒钟 后取出平放,5分钟内观察结果
agglutination)
直接凝集
direct agglutination
----ABO血型的鉴定
identification of ABO blood type
概述 overview 血 型 系 统
Blood group system
ABO血型系统的发现
Discovery of ABO blood type
+
【实验器材】
Experiment’s equipments
1:载玻片、采血针、牙签
2:抗A和抗B单克隆抗体、碘伏、 棉签。
【操作步骤】
Experiment’s Methods
1.在洁净的玻片两端用记号笔分别标上A、B,然后在 A端滴一滴抗A单克隆抗体,B端滴一滴抗B单克隆抗体 ;
2. 用碘伏消毒手指;
被检者血型
抗A
抗B
+
-
A
-
+
B
+
+
AB
-
-
O
【实验结果】
Experiment’s results
免疫标记技术
immunolabeling techniques
免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性同
简位检介素 测等标对记抗物体来或观抗察原抗进原行抗标体记反,应然 的后实再验通技过术
。
分类 classification
胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体,利用了微孔膜的 毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用 胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗 体。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 样品垫 (胶体金垫)质检线 吸收垫
背衬 (底板)
检测线硝酸纤维素膜