实验四-甘油三酯含量测定-yql

比较准确的是二氯甲烷-硅酸-变色酸法（Van Handel-Caslson法）
乙酰丙酮法：
TG
皂化
3RCH2COOK + 甘油
氧化
+ 2HIO4
2HCHO+HCOOH 显色
HCHO+2CH3COCH2COCH3+NH4+
3, 5-二乙酰-1, 4-二氢二甲基吡啶 与同样处理的标准管进行比色，可测出甘油三酯的含 量。

色谱法 酶比色法
实验操作步骤：
1、抽提
取三只干燥小试管加入样品、TG标准液、蒸馏水， 抽提剂及硫酸，充分振荡5min； 静置5min后，吸取 上层液。 2、皂化反应 取三只大试管加入上清液各0.5ml，然后分别加入 异丙醇及皂化试剂，混匀后，放置65℃水浴5min。 3、氧化显色 加入氧化试剂过碘酸，混匀后再加入乙酰丙酮和 氨的混合液，摇匀， 65℃水浴15min，取出冷却后于 420nm处比色。
4、比色法
T = I/I0， A = - lg T
Lambert-Beer 定律（p.11）
A= KcL
标准管法：
C测 = A测/A标×C标
A测:A标= C测:C标
标准应用液1mg/ml×0.2ml
结果计算 ：
TG mg/100ml ＝A测定管/A标准管 ×1×0.2÷0.2×100 TG mmol/L ＝TGmg/dl×10÷885
＝TGmg/dl×0.011
注意事项：
1、 抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上 层液，吸取上层液时不能吸入下层液 2 、选用小试管时试管口径不能太细 3、试管使用时需要干燥，清洗需要用洗涤剂
分光光度计的使用
1、打开分光光度计，预热20-30min。
2、调节旋钮至需要的光波长。
3、检查拉杆是否在分光光度计的休息状态。 调100% ： 调0% ： Ｔ档 Ｔ档 拉杆1档 拉杆2档 拉杆3、4档 标准管，测定管 空白管
实验二十六
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
(乙酰丙酮法)
一、目的与要求
1、了解血清甘油三酯含量测定的正常值与临床
意义
2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原理及
主要技术方法
甘油三酯的生理意义

甘油三酯（TG）的化学组成 TG是体内主要的能量来源 血清中90%～95%是TG
临床意义

血清甘油三酯/三酰甘油（TG）是一项重要的 临床血脂常规测定指标 临床检测TG浓度主要用于高脂血症、胰腺炎、 肝肾疾病、动脉粥样硬化症和营养学评价 正常值：0.22~1.21mmol/L
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测定方法

化学法、酶法和色谱法
化学法： 1. 有机溶剂抽提 2. 碱水解（皂化）TG 3. 氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测甲醛
测吸光度： Ａ档
休息状态： 拉杆2档
Let’s begin ！