2010版行标副溶血性弧菌和霍乱弧菌检验方法产品汇总
副溶血性弧菌

1范围本标准规定了食品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的检验方法。
本标准适用于食品中副溶血性弧菌的检验。
2设备和材料设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:36 ℃±1 ℃。
2.2冰箱:2 ℃~5 ℃、7 ℃~10 ℃。
2.3恒温水浴箱:36 ℃±1 ℃。
2.4均质器或无菌乳钵。
2.5天平:感量0.1 g。
2.6无菌试管:18 mm×180 mm、15 mm×100 mm。
2.7无菌吸管:1 mL(具0.01 mL刻度)、10 mL(具0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头。
2.8无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL、1000 mL。
2.9无菌培养皿:直径90 mm。
2.10全自动微生物生化鉴定系统。
2.11无菌手术剪、镊子。
3培养基和试剂3.13%氯化钠碱性蛋白胨水:见附录A中A.1。
3.2硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂:见附录A中A.2。
3.33%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂:见附录A中A.3。
3.43%氯化钠三糖铁琼脂:见附录A中A.4。
3.5嗜盐性试验培养基:见附录A中A.5。
3.63%氯化钠甘露醇试验培养基:见附录A中A.6。
3.73%氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基:见附录A中A.7。
3.83%氯化钠MR-VP培养基:见附录A中A.8。
3.93%氯化钠溶液:见附录A中A.9。
3.10我妻氏血琼脂:见附录A中A.10。
3.11氧化酶试剂:见附录A中A.11。
3.12革兰氏染色液:见附录A中A.12。
3.13ONPG试剂:见附录A中A.13。
3.14Voges-Proskauer(V-P)试剂:见附录A中A.14。
3.15弧菌显色培养基。
3.16生化鉴定试剂盒。
4检验程序副溶血性弧菌检验程序见图1。
5操作步骤5.1样品制备5.1.1非冷冻样品采集后应立即置7℃~10℃冰箱保存,尽可能及早检验;冷冻样品应在45 ℃以下不超过15 min或在2℃~5℃不超过18 h解冻。
副溶血性弧菌标准的检验方法
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副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是广泛分布于海水、海底泥沙、浮游生物和鱼贝类中的海洋性细菌,为海产食品引起急性胃肠炎的重要病原菌之一,尤其是在夏秋季节的沿海地区,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品,引起爆发性食物中毒。
在非沿海地区,因食用此菌污染的食品而引起中毒者亦时有发生。
为保障食品卫生质量和食用安全,根据副溶血性弧菌的特性,进行下列检验,以便鉴别诊断。
第一节副溶血性弧菌标准的检验方法一、检验方法(一)操作步骤1. 分离培养:首先称取样品25g,加225mL3.5%灭菌盐水,用均质器打碎或用乳钵磨碎,接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个,同时取10mL加入100mL增菌液中,放37℃8~16h培养后,涂上述平板进行分离,37℃培养18~24h取出观察,挑取可疑菌落,转种3.5%氯化钠三糖铁斜面,37℃、24h观察结果。
2. 涂片镜检:将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄(葡萄糖产酸不产气)、上层斜面不变(乳糖、蔗糖不分解)、有动力、不产生硫化氢,进行革兰氏染色镜检形态。
3. 嗜盐性试验:将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水(0%,3%,7%,10%)于37℃24h培养后观察生长情况,在无盐和10%盐的胨水中不生长,在3%和7%盐的胨水中生长良好者,继续进行下列有关试验。
4. 生化试验:分别接种下列各类生化培养基,葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P,赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验,放37℃培养,除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外,其他均在24h观察结果。
5. 动物试验:将上述符合各类反应的副溶血性弧菌,接种3.5%氯化钠胨水,经37℃、16~18h培养后,小鼠腹腔注射0.3mL,观察2~3d,将死亡小鼠进行解剖作分离培养。
(二)检验程序图6-1 副溶血性弧菌检验程序二、结果分析判定及注意事项(一)样品处理采样时应注意首选准备好灭菌用具及容器,以无菌手续取有代表性的样品,样品必须尽快送检,不宜存放时间过长,副溶血性弧菌在适宜温度下繁殖较快,但不适于低温生存,在寒冷的情况下容易死亡,防止待检材料冷冻,以免影响检验结果。
副溶血性弧菌的快速检测技术
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3、多重PCR
结果显示,所有的V.p都扩增出tl基因,tl 基因是V.p特异的;54%的V.p扩增出tdh基因; 只有38.73%的V.p扩增出trh基因;该法灵敏度 38.73 V.p trh ; 高,能把10g牡蛎培养肉汤里10~100个V.p 检测出来。与其他常规生化方法相比,多重 PCR更快速,仅8h就能完成检测,结果更为准 确、可靠,而且还可改进成定量竞争PCR,对 标本中靶序列进行定量。
3、多重PCR
由于不是全部副溶血性弧菌都含有tdh基因 或trh基因,所以只针对tdh或trh的单一PCR, 有时会漏检。多重PCR(multiplex-PCR)能全 PCR(multiplex-PCR) 方位高效率地检测V.p。 Bej白等针对tl、tdh、trh设计不同的引物 对,在同一PCR反应体系内同时扩增tl、tdh、 trh。
总结
与传统方法相比较,PCR法更加快速、 灵敏,基本满足了快速检测的要求,但是其 技术含量较高,试剂费用都比较高,而且一 般检测时间也还是要6-8小时左右,离即时 检测的要求还有一定距离,随着分子生物学 和科技水平的不断提高,更加准确、可靠、 方便、快速、经济、安全的检测方法将是食 品安全检测的发展方向。
参考文献
• [1] 张凡非. 副溶血性弧菌及其引起的食物中毒研究进展. 中国 卫生监督杂志, 2003, 10 (1) : 8 -10. • [2] 中华人民共和国卫生部, 中国国家标准化管理委员会. GB/T4789.7—2008. 食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验. 北京: 中国标准出版社, 2008. • [3] 刘秀梅, 陈艳, 王晓英, 等. 1992-2001年食源性疾病爆发资料 分析-国家食源性疾病监测网. 卫生研究, 2004, 33 ( 6) : 725 727. • [4] 朱雪兰,陈艳. 副溶血性弧菌溶血素基因及其检测的研究进 展. 国外医学卫生学分册, 2007, 34 (4) :233-237. • [5] 程苏云,张俊彦,王赞信, 等. 海水产品副溶血性弧菌污染定 量检测分析. 中国卫生检验杂志, 2007, 17 (2) :336-338.
多重PCR方法检测食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌

多重PCR方法检测食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌江迎鸿;谭贵良;陈亚波;李向丽【摘要】通过扩增霍乱弧菌(VC)、副溶血性弧菌(VP)和单核细胞增生李斯特氏菌(LM)的特异性核酸片段,建立了VC、VP和LM的多重PCR检测方法,相应的扩增片段分别为588、450、234 bp.该方法特异性强、灵敏度高、简便、快速,可实现对上述致病菌的同时检测,在接种食品中检测灵敏度达到103 CFU/mL.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2011(038)010【总页数】4页(P135-137,150)【关键词】多重PCR;霍乱弧菌;副溶血性弧菌;单核细胞增生李斯特氏菌;食品【作者】江迎鸿;谭贵良;陈亚波;李向丽【作者单位】中山市质量计量监督检测所,广东中山528403;中山市质量计量监督检测所,广东中山528403;中山市质量计量监督检测所,广东中山528403;中山火炬职业技术学院生物医药系,广东中山528436【正文语种】中文【中图分类】TS201.6长期以来,各食品质检部门和食品企业内部大都采用培养的方式对致病菌进行检测。
这些传统方法不仅费时、费力,而且结果假阳性较高,不能适应现代微生物快速检测发展的需要。
因此,近年来一些研究者开始采用新兴的分子生物学方法(如定量PCR和多重PCR法)对食品中致病菌进行检测。
其中多重PCR法是一种较为理想的方法,可在同一个PCR反应体系中加入两对或两对以上的引物,同时扩增出多个核酸片段,实现对多个致病菌的快速检测。
目前已有对水产品中霍乱弧菌和副溶血性弧菌、肠出血性大肠杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏菌[1-2]以及对饮用水[3]和无公害畜禽肉中[1]多种致病菌进行多重PCR检测的报道,但未见对食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌3种致病菌进行多重PCR检测的研究。
本研究采用以上3种致病菌的特异性引物,在单重PCR的基础上建立了多重PCR检测方法,实现了多种致病菌的同步快速检测。
一起副溶血性弧菌食物中毒的实验室检测

一起副溶血性弧菌食物中毒的实验室检测摘要】目的对一起食物中毒的可疑病原菌进行相关的实验室检测。
方法按照gB/T4789.-2008、GB4789-2010,对食物中毒患者肛拭子24份、酒店厨师肛拭子、手表面涂抹样各4份、厨房间餐具等涂抹样17份进行致病菌检测。
结果 24份患者肛拭子标本中检出副溶血性弧菌12株,检出率为50%,其他样本未检出致病菌。
结论综合流行病学调查、临床症状和实验室检测,证实本次食物中毒由副溶血性弧菌引起。
【关键词】副溶血性弧菌食物中毒2010年8月3日8:00本中心接报某酒店婚宴发生了一起食物中毒,经流行病学调查、实验室检测并结合临床症状,确认为副溶血性弧菌引起,结果报告如下:1 流行病学调查2010年8月2日中午连云区某酒店举办婚宴,约370人用餐,发病人数36人。
最短潜伏期为10小时,最长潜伏期为25小时,发病高峰在餐后13-15小时,有近20人发病。
主要症状为腹痛、腹泻、呕吐、头痛、头晕,腹痛多是在上腹部绞痛,腹泻次数多为7-10次/天,多为水样便。
经抗菌治疗和输液补水,患者均痊愈出院,未发生死亡病例。
喜宴菜谱中有较多海产品(海虾、海蜇丝、鱿鱼、黄鱼等)及其他炒菜,由于酒店未对该餐次食物留样,未采集到剩余食品。
2 材料和方法2.1 样品来源患者肛拭子24份、酒店厨师肛拭子、表面涂抹样各4份、厨房间餐具6份、容器5份、冷菜间刀具2份、砧板2份,共计49件检样。
上述样品保存于缓冲蛋白胨水中送样。
2.2 培养基与试剂各种增菌、分离培养基、系列生化反应管均购自杭州天和微生物试剂有限公司;科玛嘉沙门氏菌显色培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、大肠O157显色培养基、弧菌显色培养基均购自郑州博赛生物技术有限公司;药敏纸片由中国药品生物制品检定所生产;我萋氏琼脂由本实验室自制;均在效期内使用。
2.3 检验方法对所采样品按照GB/T4789-2008、GB4789-2010方法对可能引起食源性疾病的各种致病菌进行增菌及分离培养。
副溶血性弧菌检验课件
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在37℃下培养24-48小时,观察是否 有细菌生长。
分离培养
分离培养基
在SS(Salmonella Shigella)培养基上进行分离培养,副溶 血性弧菌在此培养基上呈现绿色菌落。
菌落形态
观察菌落的形状、大小、色泽等特征,以初步判断是否为副 溶血性弧菌。
生化鉴定
氧化酶试验
副溶血性弧菌为阳性结果。
基因测序
对PCR扩增产物进行测序,与副溶血性弧菌的基因序列进行比对,以确定是否 为副溶血性弧菌。
快速检测方法
Hale Waihona Puke 免疫胶体金试纸条利用抗原抗体反应的原理,将特异性抗体或抗原固定在试纸条上,当与样品中的 副溶血性弧菌抗原或抗体结合后,会出现显色反应,判断是否为副溶血性弧菌。
生物传感器
利用生物传感器技术,将副溶血性弧菌的特异性抗体或抗原固定在传感器上,当 与样品中的副溶血性弧菌结合后,会产生电信号或光信号,通过信号的强弱判断 副溶血性弧菌的浓度。
消毒处理
对接触过患者的物品和 环境进行消毒处理。
加强监测
加强食品和水质的监测 ,及时发现并控制副溶
血性弧菌的传播。
消毒与灭菌方法
高温消毒
将食品或物品加热至70度以上 ,持续一段时间进行消毒。
紫外线消毒
使用紫外线灯对空气和表面进 行消毒。
化学消毒
使用漂白粉、酒精等化学药剂 进行消毒。
煮沸消毒
将水加热至沸腾状态,持续一 段时间进行消毒。
培养特性
副溶血性弧菌为需氧或兼性厌氧菌, 在普通培养基上生长良好,适宜温度 为37°C,适宜盐浓度为2-4%。
流行病学特点
01
02
03
传染源
副溶血性弧菌主要来自海 产品,如鱼类、贝类、甲 壳类等。
副溶血性弧菌标准的检验方法

副溶血性弧菌标准的检验方法副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是广泛分布于海水、海底泥沙、浮游生物和鱼贝类中的海洋性细菌,为海产食品引起急性胃肠炎的重要病原菌之一,尤其是在夏秋季节的沿海地区,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品,引起爆发性食物中毒。
在非沿海地区,因食用此菌污染的食品而引起中毒者亦时有发生。
为保障食品卫生质量和食用安全,根据副溶血性弧菌的特性,进行下列检验,以便鉴别诊断。
第一节副溶血性弧菌标准的检验方法一、检验方法(一)操作步骤1. 分离培养:首先称取样品25g,加225mL3.5%灭菌盐水,用均质器打碎或用乳钵磨碎,接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个,同时取10mL加入100mL增菌液中,放37℃8~16h培养后,涂上述平板进行分离,37℃培养18~24h取出观察,挑取可疑菌落,转种3.5%氯化钠三糖铁斜面,37℃、24h观察结果。
2. 涂片镜检:将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄(葡萄糖产酸不产气)、上层斜面不变(乳糖、蔗糖不分解)、有动力、不产生硫化氢,进行革兰氏染色镜检形态。
3. 嗜盐性试验:将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水(0%,3%,7%,10%)于37℃24h培养后观察生长情况,在无盐和10%盐的胨水中不生长,在3%和7%盐的胨水中生长良好者,继续进行下列有关试验。
4. 生化试验:分别接种下列各类生化培养基,葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P,赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验,放37℃培养,除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外,其他均在24h观察结果。
5. 动物试验:将上述符合各类反应的副溶血性弧菌,接种3.5%氯化钠胨水,经37℃、16~18h 培养后,小鼠腹腔注射0.3mL,观察2~3d,将死亡小鼠进行解剖作分离培养。
(二)检验程序图6-1副溶血性弧菌检验程序二、结果分析判定及注意事项(一)样品处理采样时应注意首选准备好灭菌用具及容器,以无菌手续取有代表性的样品,样品必须尽快送检,不宜存放时间过长,副溶血性弧菌在适宜温度下繁殖较快,但不适于低温生存,在寒冷的情况下容易死亡,防止待检材料冷冻,以免影响检验结果。
副溶血弧菌DPO-PCR检测方法的建立

副溶血弧菌DPO-PCR检测方法的建立李丹丹;徐义刚;王昱;邱索平;高会江;高慎阳【摘要】以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)toxR基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物,建立了DPO-PCR快速检测VP的方法.结果显示,退火温度在49~69℃都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与VP的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为121 CFU/mL.利用该检测方法对采集的550份样品进行检测,共计检出19份VP阳性样品,与行标法(SN/T 1870-2007)检测结果一致,实用性良好.该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2015(041)011【总页数】4页(P133-136)【关键词】副溶血弧菌;toxR基因;DPO-PCR【作者】李丹丹;徐义刚;王昱;邱索平;高会江;高慎阳【作者单位】海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,海南海口,570311;黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,黑龙江哈尔滨,150001;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心,重庆,404100;从化出入境检验检疫局,广东广州,510900;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,牛遗传育种研究室,北京,10019;辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州,121001【正文语种】中文副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是一种革兰氏阴性嗜盐菌,在海水养殖的牡蛎、虾和蟹等贝类、甲壳类水生动物中分布广泛,是流行程度、危害程度最高的食源性致病菌之一[1],人类进食被VP污染的食品会引起急性胃肠炎,严重者还可引起败血症[2-3],是国际公认的食物中毒病原菌,其引发的食源性疾病已成为当前全球面临的公共卫生问题之一[4]。
近年来,我国沿海地区常发生由该致病菌感染引发的食源性中毒事件,该菌也是我国进出口水产品检测的主要检测项目之一[5-6]。
中国药品检验标准操作规程2010版

99.5.2
20~25℃培养 5~7 天,使大量的孢子产生。加入 3~5ml 含 0.05%(ml/m1)聚山梨酯 80 的 0.9%无菌氯化钠溶液,用无菌玻棒或接种环轻轻将孢子洗脱。然后可用一支 l0ml 无菌 球形毛细吸管,其管口用无菌棉花或纱布包扎且能过滤菌丝的装置,吸出孢子悬液至无菌 试管内,将孢子悬液稀释至每毫升含 50~l00cfu。 9.5.4 进行验证试验时,若因没有适宜的方法消除供试品中的抑菌作用而导致微生物
9.3
结果判定对照组的菌回收率均应不低于 70%。若供试品组的菌回收率均不低于
70%,则可按该供试液制备方法和菌落计数法测定供试品的细菌、霉菌及酵母菌数;若任 一次试验中供试品组的菌回收率低于 70%,应建立新的方法,消除供试品的抑菌活性,并 重新验证。 9.4 9.5 验证试验可与供试品的细菌,霉菌及酵母菌计数同时进行。 注意事项 黑曲霉菌的菌液制备 将黑曲霉菌接种至改良马丁琼脂斜面培养基上,于
中国药品检验标准操作规程2010微生物限度检查法第22页共27页控制菌检查用培养基适用性检查项目菌株及判断指标培养基测试菌株测试特性测试指标胆盐乳糖培养基大肠埃希菌促生长能力浑浊铜绿假单胞菌浑浊金黄色葡萄球菌抑制能力未见浑浊mug培养基大肠埃希菌促生长能力浑浊大肠埃希菌指示能力366nm有荧光或麦康凯琼脂大肠埃希菌促生长能力回收率乙型副伤寒沙门菌回收率大肠埃希菌指示能力颜色形态同对照乙型副伤寒沙门菌颜色形态同对照乳糖胆盐发酵管大肠埃希菌促生长能力浑浊产气金黄色葡萄球菌抑制能力未见浑浊乳糖发酵培养基大肠埃希菌促生长能力浑浊大肠埃希菌指示能力营养肉汤乙型副伤寒沙门菌促生长能力浑浊金黄色葡萄球菌促生长能力浑浊四硫磺酸钠亮绿培养乙型副伤寒沙门菌促生长能力上清浑浊
中国药品检验标准操作规程 2010 版
副溶血性弧菌检验

•
O1- O13 共13种
• K抗原型(荚膜抗原)
•
K1- K71 共65种
• H抗原(鞭毛抗原),无特异性
三、检测程序
食品安全国家标准 副溶血性弧菌检验 4789.7 -2013
4789.7-2013
1、样品制备
• 食品样品
•
鱼类:表面组织、肠、鳃
•
贝类:全部内容物(贝肉和体液)
•
甲壳类:动物的中心部分,包括肠、
状、弧状、球状、卵圆形等)排列不规则
• 液体培养基生长单鞭毛,固体培养基常有 周生鞭毛(侧毛)
二、生物学特性 培养特性
• 需氧兼性厌氧 • 在含 3-4%的培养基中生长良好 • 无盐和 10%的培养基中均不生长 • 最适培养温度为:3037℃ • 最适范围:7.48.2
• 在固体培养基上,菌落通常隆起,圆形半 透明,表面光滑、湿润、一般不产生色素。
科玛嘉弧菌显色平板紫色菌落
4、纯培养 挑取3个或以上的可疑菌落,划线3%氯
化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板,36℃±1 ℃培养18 h~24h。 5、初步鉴定 氧化酶试验
涂片镜检
3%氯化钠三糖铁 嗜盐性试验
• 底层变黄不变黑,无气泡, 斜面颜色不变,有动力
6、确定鉴定
• 甘露醇发酵试验含3%氯化钠的培养基
• 分类:属弧菌科(),弧菌属。
• 分布:主要存在于近海岸的海水、海底 沉积物和鱼类、虾类、贝类、牡蛎等海
产品中。
•
人多因食用被本菌污染而又未煮
熟的海产品和其他食品而引起中毒。
•
流行病学
• 季节分布:8-9月为高峰期 • 中毒食品:主要为海产品、其次为水产制
品、淹制品、咸菜及污染食品 • 地区分布:沿海地区居多 • 临床症状:主要有腹痛、腹泻、恶心、呕
食品中副溶血性弧菌的检验

食品中副溶血性弧菌的检验
一、概况 媒介食品 副溶广泛存在于海岸和海水中,海生动
植物常会受到污染而带菌。海鱼、虾、蟹、蛤等海 产品带菌率极高;被海水污染的食物、某些地区的 淡水产品如鲫鱼、鲤鱼等及被污染其他含盐量较高 的食物如咸菜、咸肉、咸蛋亦可带菌,也可因受到 污染而引起中毒。带用少量该菌的食物,在适宜的 温度下,经3~4小时细菌可急剧增加至中毒数量。 进食肉类或蔬菜而致病者,多因食物容器或砧板污 染所引起。
无粘性,(绿)兰色,直径2—4mm 嗜盐选择性平板:直径2.5mm,圆整或不
齐,隆起混浊,无粘性,无色,湿润。 4、选择性培养
取上述可疑菌落接种于3.5% Nacl-TSI 培养37℃ 24小时 5、镜检:取上述可疑菌落镜检,应为革兰氏 阴性,无芽胞多形态,两端浓染。
食品中副溶血性弧菌的检验
副溶血性弧菌在海博 弧菌显色培养基上典 型特征。典型 副溶
7、生化试验
• 分别接种各类生化培养基,置37 ℃恒温培 养。除V-P、靛基质、甲基红试验培养48小 时后加试剂观察外,其他均可在24小时观 察。试验结果判定参照下表。
食品中副溶血性弧菌的检验
生化特性
葡萄糖产 酸 葡萄糖产 气 蔗糖 乳糖 甘露醇 硫化氢 甲基红
7、生化试验
副溶血性弧菌的生化性状表
血性弧菌显蓝色至蓝 绿色 , 霍乱弧菌和 其它弧菌显无色。
副溶血弧菌在蔗糖琼脂(tcbs)平 板上的菌落
食品中副溶血性弧菌的检验
6、嗜盐性试验
将可疑培养物接种于不同盐浓度的盐胨水 中,37℃ 24小时,观查生长情况。盐含量 0、3、7、9、11% , 在3-7 %生长良好。
0 3 7 9 11
食品中副溶血性弧菌的检验
农产品微生物检验技术W4501-1-副溶血性弧菌检验-副溶血性弧菌与检验方法概述-微设计

副溶血性弧菌检验意义
副溶血性弧菌特征鉴别
副溶血性弧菌中毒预防与治疗措施
GB 4789.7-2013解读
设计思路
教学步骤
呈现形式与素材
时长(min)
副溶血性弧菌概述(定义、生物学特性、流行病学、致病性、中毒预防、治疗措施)(知识点1)(技能点1、2)
ppt、图片、视频
6.5
副溶血性弧菌微生物学检验(知识点2)(技能点3)
ppt、图片
0.5
副溶血性弧菌检验意义(知识点3)
ppt、图片
2
小计
8
PBL讨论
简述副溶血性弧菌的生物学特征及检验意义。
设计者
黄涵年,应用工程系
版本号
20150820
《农产品/食品微生物检验》课程来自微设计微课名称副溶血性弧菌检验-副溶血性弧菌与检验方法概述
关键词
副溶血性弧菌;检验方法
微课类型
讲授型
微课形式
PPT动画式
画中画式
教学设计模式
讲授法
教学目标
掌握副溶血性弧菌的特征与生物学特性
了解副溶血性弧菌国标检验方法
教学内容
知识点
技能点
副溶血性弧菌概述(定义、生物学特性、流行病学、致病性、中毒预防、治疗措施)
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CM402 CM403 P-36B K06A K06B ESM009 CM406 CM423 CM424 CM408
氯化钠营养琼脂 糖类分解试验用培养基基础 氯化钠三糖铁 Sodium Chloride Triple Sugar Iron Agar 3%NaCl 三糖铁 革兰氏染色液试剂盒 无盐胰胨水 3%NaCl 胰胨水
S013
副溶血性弧菌生化鉴定套装
14 种×10 套
-2-
2、SN/T 1022-2010 进出口食品中霍乱弧菌检验方法
产品编号 产品名称 碱性蛋白胨水(APW) Alkaline Peptone Water TCBS 琼脂 Thiosulfate Citrate Bile Salts K06A K06B ESM009 CM423 CM408 M083 CM1001 M156 M157 M158 M159 M160 CM1002 M016c M018 M130 弧菌显色培养基 弧菌显色培养基 弧菌显色培养基(VA) Vibrio Chromogenic Agar 氯化钠营养琼脂 氯化钠三糖铁 Sodium Chloride Triple Sugar Iron Agar 3%NaCl 三糖铁 革兰氏染色液试剂盒 赖氨酸脱羧酶氯化钠肉汤 鸟氨酸脱羧酶氯化钠肉汤 精氨酸双水解酶氯化钠肉汤 氨基酸脱羧酶氯化钠肉汤对照 色氨酸氯化钠肉汤 Kovacs 氏靛基质试剂 ONPG(副弧用) 无盐胰胨水 2%NaCl 胰胨水 4%NaCl 胰胨水 6%NaCl 胰胨水 20 支 10mL×4 20 支 20 支 20 支 20 支 20 支 10mL×1 10 支×2 20 支 20 支 45.00 40.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 25.00 15.00 15.00 套装中有 用于吲哚(靛基质)试验 用于细菌革兰氏染色 新增产品 新增产品 新增产品 新增产品 新增产品 1000 mL 5000 mL 1000mL 250 250 1000.00 4500.00 700.00 110.00 90.00 规格(g) 价格 产品说明及用途 用于霍乱弧菌和副溶血性弧菌等致 250 80.00 病性弧菌的选择性增菌培养(FDA BAM) 用于致病性弧菌的选择性分离(FDA BAM、 GB 标准) 用于致病性弧菌的选择性分离 用于致病性弧菌的选择性分离 用于致病性弧菌的选择性分离 用于弧菌的纯培养 用于副溶血性弧菌的生化试验(GB 标准) 推荐使用 新增产品 标准配方有 误, 建议使用 备注
10%NaCl 胰胨水 氧化酶试纸 赖氨酸脱羧酶氯化钠肉汤 鸟氨酸脱羧酶氯化钠肉汤 精氨酸双水解酶氯化钠肉汤 氨基酸脱羧酶氯化钠肉汤对照 色氨酸氯化钠肉汤 Kovacs 氏靛基质试剂 3%NaCl V-P 半固体 V-P 甲、乙液试剂盒 ONPG(副弧用) OF(弧菌用) 42℃生长试验 3%NaCl 蔗糖
CM409
-4-
M083 CM1001 M018 M019
-1-
产品编号 6%NaCl 胰胨水 8%NaCl 胰胨水
产品名称
规格(g) 20 支 20 支 20 支 10 片 20 支 20 支 20 支 20 支 20 支 10mL×1 20 支 10mL×4 10 支×2 20 支 20 支 20 支
价格
产品说明及用途
备注
M130 M131 M021 M050 M156 M157 M158 M159 M160 CM1002 M026 CM1004A M016c M041 M138 M024a
15.00 15.00 15.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 15.00 40.00 25.00 25.00 20.00 15.00 用于副溶血性弧菌的生化鉴定 (SN/T 0173-2010) ,包括氯化钠三糖铁、无 注意套装中 盐胨水、3%NaCl 胰胨水、6% NaCl 不包括氧化 胰胨水、8%NaCl 胰胨水、10%NaCl 酶试纸、 革兰 200.00 胰胨水、赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、 氏染色液和 氨基酸对照、3%NaCl V-P 半固体、 扩大生化鉴 ONPG、色氨酸共 14 种生化鉴定产 别的 3 种生 品和配套试剂(无菌液体石蜡、VP 甲乙液和靛基质试剂) 化试验 用于扩大生化鉴别,套装中不含这 3 种生化试验 用于 V-P 试验(包含 V-P 甲液 3 支、 乙液 1 支) 用于吲哚(靛基质)试验 新增产品 新增产品 新增产品 新增产品 新增产品
1、SN/T 0173-2010 进出口食品中副溶血性弧菌检验方法
产品编号 产品名称 规格(g) 价格 产品说明及用途 用于霍乱弧菌和副溶血性弧菌等致 250 80.00 病性弧菌的选择性增菌培养(FDA BAM) 250 250 2.5 万 IU/支×5 1000 mL 5000 mL 1000mL 250 250 250 250 20 支 10mL×4 20 支 20 支 100.00 95.00 25.00 1000.00 4500.00 700.00 105.00 110.00 60.00 90.00 45.00 40.00 15.00 15.00 用于细菌革兰氏染色 用于致病性弧菌的选择性分离(FDA BAM、 GB 标准) 用于副溶血性弧菌选择性增菌培养, 用前应无菌加入多粘菌素 B 每支添加于 100mL CM403 基础中 用于致病性弧菌的选择性分离 用于致病性弧菌的选择性分离 用于致病性弧菌的选择性分离 SN 用于神奈川现象试验 (GB、 标准) 用于弧菌的纯培养 用于弧菌的各种糖发酵试验 (根据需 要,另外添加各种糖) 用于副溶血性弧菌的生化试验(GB 标准) 新增产品 新增产品 标准配方有 误, 建议使用 推荐使用 备注
CM401
CM402
250
100.00
-3-
产品编号 M131 M021 8%NaCl 胰胨水
产品名称
规格(g) 20 支 20 支
价格 15.00 15.00
产品说明及用途
备注
10%NaCl 胰胨水
用 于 霍 乱 弧 菌 的 生 化 鉴 定 ( SN/T 1022-2010) ,包括氯化钠三糖铁、赖 氨酸、 鸟氨酸、 精氨酸、 氨基酸对照、 注意套装中 S015 霍乱弧菌生化鉴定套装 14 种×10 套 180.00 ONPG、色氨酸、无盐胨水、2%NaCl 不包括氧化 胰胨水、4%NaCl 胰胨、6% NaCl 胰 酶试纸和革 胨水、8%NaCl 胰胨水、10%NaCl 胰 兰氏染色液 胨水共 14 种生化鉴定产品和配套试 剂(靛基质试剂和无菌液体石蜡) O/129 药敏片 O/129 药敏片 O1 群霍乱弧菌诊断血清 O139 群霍乱弧菌诊断血清 用于霍乱弧菌的血清学凝集试验 霍乱弧菌小川型单价诊断血清 霍乱弧菌稻叶型单价诊断血清 胰胨大豆琼脂斜面(含 3% NaCl) Trypcasein Soy Agar (With 3% NaCl) 多粘菌素 B 纸片(直径 6mm) M001 CM1004 MR-VP 肉汤 V-P 甲、乙液试剂 用于副溶血性弧菌的培养及细胞色 250 95.00 素氧化酶试验, 也可用于霍乱弧菌的 多粘菌素 B 敏感试验。 50 单位 20 支 10mL×2 15.00 20.00 用于霍乱弧菌的多粘菌素 B 敏感试 O1 群霍乱弧 验 菌生物分型 用于霍乱弧菌的 V-P 试验 用于 V-P 试验 (包含 V-P 甲液和乙液 各 1 支) 10μg 150μg 用于 O/129 敏感试验 用于 O/129 敏感试验
CM401
碱性蛋白胨水(APW) Alkaline Peptone Water TCBS 琼脂 Thiosulfate Citrate Bile Salts 氯化钠多粘菌素 B 肉汤基础(SCPB) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 多粘菌素 B(B) 弧菌显色培养基 弧菌显色培养基 弧菌显色培养基(VA) Vibrio Chromogenic Agar 我妻氏培养基基础 Wagstsuma Agar Base
SN/T 0173-2010 进出口食品中副溶血性弧菌检验方法和 SN/T 1022-2010 进出口食品中霍乱弧菌检验方法涉及产品汇总 进出口食品中霍乱弧菌检验方法涉及品汇总
SN/T 0173-2010 进出口食品中副溶血性弧菌检验方法和 SN/T 1022-2010 进出口食品中霍乱弧菌检验方法已于 2010 年 7 月 16 日实施,标准中涉及到的新产品有 13 种,现将标准中涉及到的产品汇总如下: