1型糖尿病大鼠模型的建立及观察_张巨彪

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摘要：目的探讨链脲佐菌素（STZ）建成可靠、稳定的1型大鼠糖尿病模型情况。方法选取SDF级雄性Wistar大鼠70只，分成3个实验组，各20只和对照组10只，实验组大鼠一次性腹腔注射STZ30、65、100mg/kg，对照组10只大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液，用拜安易血糖仪检测血糖，7d后血糖＞16．65mmol/L判定为1型糖尿病动物模型。观察大鼠的血糖、体质量、饮水量、胰岛素和C肽等指标。结果大鼠注射STZ65mg/kg7d后，大部分血糖值达到成模标准，并出现糖尿病表现，持续观察7周，有18只大鼠成模，未见糖尿病转复，糖尿病症状明显。结论腹腔一次性注射STZ 65mg/kg剂量可成功制备1型糖尿病大鼠模型。

关键词：链尿佐菌素；1型糖尿病模型；大鼠

Establishment and Observation of Type I Diabetic Rat Models ZHANG Ju-biao1，SU Xiu-lan2，OUY-ANG Xiao-hui1．（1．Department of Tumor Surger，Inner Mongolia Autonomous Region People's Hospital，Hohhot010010，China；2．Central Lab of Inner Mongolia Medical University，Hohhot010010，China）Abstract：Objective To establish type I diabetic rat models by intraperitoneal injection of streptozoto-cin and observe the stability of diabetic changes in rats．Methods70male Wistar rats were divided into3 experiment groups of20rats each and1control group of10rats．The experiment groups were intraperitoneally injected by30mg/kg，65mg/kg，and100mg/kg STZ respectively，while the control group was injected cit-rate buffer．Bayer blood glucose meter was adopted to test the blood glucose，setting＞16．65mmol/L after 7d as the type1diabetic animal model．The fasting blood glucose level，body weight，water intake，insulin and C-peptide of the rats at different time points were observed/measured．Results In the group of injection by65mg/kg STZ，after7days most rats reached the model blood glucose standard and had diabetic manifes-tation，after continuous observation of7weeks，18rats were qualified as the model with obvious symptoms and without conversion．Conclusion With the dose of65mg/kg of STZ through one intraperitoneal injection，type1diabetic rat models can successfully established．

Key words：Streptozotocin；Type1diabetic models；Rat

糖尿病已成为严重威胁人类身体健康和生命的

疾病。它是一种以持续性高血糖为特征的内分泌障

碍疾病，可导致全身性代谢紊乱并继发眼、肾、神经

和心血管等器官的慢性进行性病变，最终引起功能

损伤及衰竭。1型糖尿病及其并发症的病因、发病机

制尚未完全阐明，预防和治疗仍不完善，干细胞

（stem cells）是体内存在的一类特殊细胞，有自我更

新和不断增生的能力，又具有多向分化的潜能，只要

掌握了胰腺干细胞的特异标志、转化调控机制、培养

及分离技术，就可以体外操纵干细胞，进行大量扩增

和定向诱导分化，最后将得到能分泌胰岛素的胰岛

样细胞［1-2］，用于治疗1型糖尿病。因此，建立较理

想的动物模型研究该病的发病机制和治疗具有重要

意义。目前，国内外普遍使用STZ制备糖尿病大鼠

动物模型。该项实验根据吴清洪报道的方法［3］，采

用简单的腹腔一次注射的方法制备稳定并且可靠的

动物模型。

1材料与方法

1．1实验动物的选择和喂养SDF级成熟Wistar 雄性大鼠70只（体质量220 280g），购自内蒙古大学实验动物中心，饲养室内氨浓度＜20g/L，相对湿度40% 70%，室温18 25℃，保证良好的通风，避免增加造模后大鼠的感染概率，普通饲料喂养，饮水自由。

1．2主要仪器和试剂拜安易血糖检测仪及试纸（美国Bayer公司）；STZ（美国Sigma公司）；胰岛素、C肽放射免疫分析药盒（均购自内蒙古泽生耗材）。

1．3主要实验试剂的配制STZ液称取STZ粉剂0．2g，溶于pH4．5，浓度为0．1mmol/L

的枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液20mL中，制成1%溶液，经0．22μm滤器过滤除菌，要求5min内配制完成，配好后，10min内用完，STZ和枸橼酸缓冲溶液低温保存，新鲜配制。

1．4实验分组和大鼠糖尿病模型的制备采取国内外普遍使用的STZ制备糖尿病大鼠模型，根据徐华等［4］报道，雄性大鼠易于成模，且成模后血糖稳定性好，故选取成熟雄性大鼠用于实验。将所有大鼠（70只）使用代谢笼单只喂养，适应性喂养1周，1周内注意观察大鼠的饮食情况、体质量等健康状况，1周后，选取空腹血糖介于2．92 6．92mmol/L的大鼠为实验对象。将空腹血糖介于2．92 6．92mmol/L 的大鼠随机分为4组，实验组（60只）分别接受STZ 液一次性腹腔注射，剂量为30、65、100mg/kg，对照组（10只）注射枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液。实验前大鼠禁食、水12h。分别于注射后3、7、14、28d采用剪尾法采集血样，用拜安易血糖仪检测空腹血糖，7d 后空腹血糖＞16．65mmol/L，出现多饮、多食、多尿