下呼吸道感染细菌培养操作规范

Standard for Bacterial Culture Procedures 标本

European Manual Microbiology.1罗斯菌属（Rothia spp.) `

脑膜炎奈瑟菌

草绿色链球菌草绿色链球菌、奈瑟菌属嗜血杆菌属、莫拉菌属

常见引起细菌性社区感染典型肺炎病原菌：•肺炎链球菌•流感嗜血杆菌上呼吸道正常菌群•金黄色葡萄球•卡他莫拉菌

细胞内病原引起非典型肺炎：•肺炎支原体

•肺炎/鹦鹉热衣原体•嗜肺军团菌

•柯克斯体（Q 热）痰的来源？

是否被上呼吸道污染？

hospitalization.Clin.Infec.Dis.31:869-874.

9Gleckman,R.,J.DeVita,D.Hibert,C.Pelletier,and R.Martin.1988.Sputum gram stain assessment in community-acquired bacteremic pneumonia.J.Clin.Microbiol.26:846-849.

内容

特异性82%～91%，诊断价值远高于痰标本；

附录B:“适合诊断的病原及检验项目”5.下呼吸道感染细菌培养的局限性

培养结果假阴性、假阳性的原因

球菌、流感嗜血杆菌（具侵袭性）定植数量会增加；

`基础条件变化：使用免疫抑制剂、慢性肺病、广谱抗菌药物治疗或住院患者等人群中，革兰阴性杆菌的优势明显增加。

1）肺部感染的最常见机制：肺泡内吸入了口咽部定植菌；

¾吸入性肺炎患者咽部菌群种类：多侵袭性细菌或耐药细菌，如肺炎链球菌或革兰

阴性杆菌。

¾清除机制：健康宿主吸入口腔定植菌后常无临床症状，细菌

通常被粘液柱状纤维清除。

¾吸入能否引起肺部感染取决于：吸入菌的致病性及数量；

患者免疫系统；

呼吸道功能等诸方面的因素。

2）吸入气溶胶肺部感染占第二位：主因：使用了不清洁的呼吸机。

3）血液播散性肺炎占第三位：感染通常造成双肺下叶肺炎。由呼吸道感染引发

的菌血症占12%，因此对肺部感染的高热患者送

注1：肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是引起儿童和老年人肺炎的最常见致病菌；

膜炎球菌多发于: 基础病患者或病毒感染后的继发感染；金黄色葡萄球菌肺炎可引发肺脓

肿；

肺炎克雷伯菌大叶性肺炎，常合并脓肿或肺粘连，死亡率较高。

类型/免疫状态最常见病原菌少见病原菌

子诊断方法检测。

注3：暴露在特殊气溶胶环境：与飞沫有关的结核分枝杆菌、与尘暴和鸟排泄物有关的双相真菌等。

9涂片还可发现培养不能生长的细菌。

9涂片方法提高了培养方法的特异性及敏感性。间隔细胞。细胞体积大，胞质丰富，核圆形、卵圆形或肾形，略偏位，染色质细致均匀，偶见核仁，

中有巨噬细胞证明痰液标本来自下呼吸道。

4.支气管纤维镜标本定量培养的临床意义

报告菌落数大于阈值的细菌，对诊断的特异性达82%～91%，诊断价值远高于痰标本。

3.1.1咳痰

支气管炎、支气管炎和肺炎的呼吸道病毒感染；

`鼻咽拭子可用于诊断百日咳和新生儿衣原体肺炎。

病原菌。

PSB ：用无菌剪刀剪断毛刷，置于含容器中（仅供需氧培养），快速送检。

报告中说明因延误送检标本，可能对培养结果造成的影响。

注2：诱导痰标本只适用于检测卡氏肺孢子菌和结核分枝杆菌，对其他病原菌检出效果差。

痰及气管吸出物标本处理果达到满意效果。

4.1.5显微镜观察革兰染色结果

1+（偶见）2+（少量）细胞计数(低倍镜)

<1个/低倍视野

1～9个/低倍视野

10～细菌计数(油镜)<1个/油镜视野1个～5个/油镜视野6～ 4.3 连续培养并观察慢生长菌

分离并鉴定下呼吸道重要致病菌（参见附录

4.4.8鉴定丝状真菌

4.4.9涂片时可见但培养不生长的细菌

4.5质量控制

革兰染色报告

5.4 平板上无细菌生长

5.5 结果解释

不接受培养

可接受培养

提示感染

特征性

提示与感染相关

的病原菌

注意！¾>10鳞状上皮细胞/LPF——标本来

自上呼吸道弹性纤维，中性粒细胞多，鳞状上皮细胞少，有代表性的好标本

你看见多少种形态？

几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感

染。如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生

“提示吸入性肺炎”

细胞内细菌

在使用抗生素之后链球菌常形态变得特别奇怪呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌

淀粉样小体：见于迁延长时间的呼吸道疾病如慢性阻塞性肺病胖的，圆末端的，菌体两极常被染为革兰阴性的杆菌提示肠杆菌科细菌

不是肺炎。仅当其为主要所见菌时报告。奴卡氏菌、放线菌——

叉，无短链，链的末端的呈尖状，都证明是分枝状的G+b。

5.2.1 应报告的病原菌

无需进一步鉴定其他酵母样真菌，念珠菌通常不会引起肺炎，除非是肿瘤患者（如：白血病）、肺移植患者或新生儿下呼吸道分离的念珠菌。酵母菌属于口腔正常定植菌群，即使从下呼吸道标本中分离到念珠菌，除非有组织病理学证据，否则不管是什么种，都与疾病无关。处理培养物应参考涂片的结果，应根据革兰染色所见9流感嗜血杆菌，常规报告β

支气管灌洗液a. 定性培养生长的病原菌数量达到以下情况时，判断为有临床意义：

`取最高稀释度平板，分别对不同菌落形态的细菌计数，乘上稀释倍数即为菌落数。