中药制剂分析中供试品的制备..

中药制剂分析用样品的分离、纯化
溶剂直接萃取
萃取法
色谱法 沉淀法
离子对萃取 应用比较多
需加入沉淀试剂
待测成分具有挥发性， 结构比较明确
蒸馏法
中药制剂分析用样品的分离、纯化
沉淀法
需加入沉淀试剂
待测成分具有挥发性， 结构比较明确 溶剂直接萃取
蒸馏法
萃取法
离子对萃取 应用比较多
色谱法
二. 样品的分离净化
1.对反应要求不苛刻，且能迅速定量进行；
2.对某个样品只能生成一种衍生物，反应副产物
（包括过量的衍生化试剂）不干扰待测组分的分离 和检测； 3.化学衍生化试剂方便易得，通用性好。
二、样品的衍生化
气相色谱法衍生化 方法
1. 提高成分的挥发性 2. 增加成分的稳定性 3. 生成非对映体
1. 硅烷化 2. 酰化 3. 烷基化 4. 不对称衍生化
毒性药材
贵重药材
特点
散 剂
中药饮片
粉末入药
注意取样代表性，均匀取样很重要
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
药 物
组
成
油溶性 水溶性
栓 剂
常见的除去基质干扰的方法
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
药 物
滴丸的工艺及组成
油溶性 水溶性
滴 丸
常见的除去基质干扰的方法
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
最终抽取的供检验用样品量原则上应至 少为一次全检量的3倍。
五、取样 Sampling
取样方法 固体样品 取样方法 液体样品 取样方法
抽取样品法
样品量不大的 粉末状、小块 状及小颗粒状 样品
圆锥四分法
直接取样法（分散均匀） 分层取样法 （糖浆剂） 摇匀取样法 （混悬剂）
取样量
粉状制剂（散剂、颗粒剂）
样品处理的基本过程
样品粉碎
注意：整个过程要定量操作 （保证所取样品及测定成分全 部转移至最终的测定液中） 样品提取 如：未通过筛孔的颗粒决不能
丢弃；残留在容器壁上的无色
样品分离净化 成分需反复用溶剂洗脱转移等。
一. 样品的粉碎
样品粉碎的目的： • 保证所取样品均匀且有代表性 • 较快且完全地提取被测成分 粉碎设备： 粉碎机、研钵、食品处理机 高速匀浆机或玻璃匀浆器。
第三节 样品的提取
萃取 回流
超声 浸渍
蒸馏 SFE
PLE
提取
MAE
二、分析目的与样品提取
• 供鉴别用样品提取
定性 方法：超声、回流
• 供杂质检查用样品提取
视检查的内容而定，对于无机杂质检查， 常用到消化法
• 供含量测定用样品提取
方法设计要考虑到准确确定最终供试品溶 液的体积提取完后用容量瓶来定容最终提 取液
二. 样品的提取
超声提取法
• 适用：热稳定性的成分 • 方法：样品置适当容器中，加入提取溶剂， 放入超声振荡器中提取。 • 优点：提取效率高，提取速度快，操作简 便 • 注意：超声频率、提取时间、温度需考察
超临界流体提取法（SFE）
临界点
以超临界流体为提取溶剂的提取
方法。 超临界流体（SF）是指高于临界 压力（PC）和临界温度（Tc）时 形成的单一相态，它既不是液体，
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
提取物颗粒剂
饮片颗粒剂 种类 赋形剂 颗粒剂
糖 糊 精
提取中可能黏度大，形成不溶性板结物， 造成指标成分包裹或吸附现象
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
硬胶囊
软胶囊 种类 胶囊剂
肠溶胶囊
根据胶囊中内容物状态不同，进行合理设计 制备供试品溶液
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
软膏剂、膏药，贴膏剂
气雾剂、喷雾剂
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点 软膏剂 分析方法：
滤除基质法 提取分离法 灼 烧 法
离 心 法
第一节 定量测定样品的处理 样品处理的作用
1. 充分释放被测成分,并制成便于分析测定的稳定试样 2. 除杂纯化，提高分析方法的重现性和准确度 3. 富集浓缩或衍生化，以测定低含量被测成分。衍生 化不仅可提高检测器的灵敏度，还可以提高方法的 选择性。 4. 使样品形式、溶剂符合测定要求
二、样品的衍生化
HPLC法衍生化 衍生化方法 1. 紫外衍生化
2. 荧光衍生化 3. 非对映衍生化
1柱前衍生化
2柱后衍生化
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
固体制剂预处理的特点
丸剂 片剂 胶囊剂 滴丸 栓剂 散剂 颗粒剂 根据剂型特点
和制备工艺，
重点考虑如何
排除赋形剂的
干扰
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点
二. 样品的提取
回流提取法
• 适用：热稳定性的成分 • 方法：以单一溶剂或混合溶剂于水浴/电 热套加热回流提取 • 优点：提取效率比冷浸法高，提取时间短 • 缺点：提取杂质较多 不宜用于热不稳定或挥发性的成分
二. 样品的提取
连续回流提取法 （索氏提取）
• 适用：热稳定性的成分 • 方法：样品置索氏提取器中，用遇热可以 挥发的溶剂进行反复提取 • 优点：提取效率高，所需溶剂少 提取杂质少，操作简便 • 缺点：受热易分解的成分不宜使用
•澄明度好 • 前处理相对容易
酒剂
•蒸掉部分溶剂，注意被
测成分的酸碱性
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点 液体制剂预处理特点
注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液
含测相对简单，薄层供试品制备比较难
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点 液体制剂预处理特点
萃取为主，考虑被测组分的酸碱性质
第六节 不同剂型中药制剂供试品制备特点 外用制剂预处理特点
提取方式： 石英纤维直接插入试样中进行提取，适用 于气体和液体中组分的分析； 顶空提取，适用于所有基质的试样中挥发 性、半挥发性组分的分析。
第五节 样品的浓缩与衍生化
样品提取液的浓缩
水浴蒸发 自然挥散 减压蒸发 气流吹蒸法 冷冻干燥
二、样品的衍生化
●确保有检测器可以进行检测；改善分离效果
衍生化反应需要满足的条件：
一般取样100g，可从包装的上、中、下三层及周围间隔 相等部位取样若干，将所得样品混匀，按〝四分法〞从中 取出所需供试量。
液体制剂（口服液、药酒、糖浆、酊剂等）
一般取样200mL。同时须注意均匀取样
固体中成药（丸剂、片剂）
成品取样一般为100g，压片后取样200片。丸剂一般取10 丸。
取样量
第四节 样品的净化
沉淀法
需加入沉淀试剂
直接萃取;
萃取法
离子对萃取
色谱法
应用比较多
第四节 样品的净化
• 常见色谱法净化的原理和适用对象
色谱填料
硅胶 氧化铝 大孔树脂
分离原理 分离对象
注意事项
聚酰胺
离子交换树脂 硅藻土、纤维素
第四节 样品的净化
固相萃取法
原理
特点
组成
应用
第四节 样品的净化
固相萃取的一般操作程序：
• 沉淀法 ：利用某些试剂与被测成分或
杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液的 精制方法
复方益母草口服液中水苏碱的含量测定
利用雷氏盐（硫氰酸铬铵）作沉淀剂，
在酸性介质中可与大部分有机碱生成难
溶于水的配合物与其它杂质分离。
二. 样品的分离净化
• 蒸馏法 ：
利用某些被测成分具有挥发性，采用蒸馏法， 收集馏出液进行含量测定；或某些成分经蒸馏分 解成挥发性成分，利用分解产物（要求结构明确） 进行测定。 最常用：水蒸气蒸馏法 适用：挥发油，小分子生物碱 优化：蒸馏液中加入一定量无机盐（盐析作用）， 使挥发性成分更完全地蒸馏出来
HOW
• 在设计或执行某一个预处理步骤时需要考 虑的问题：
理化性质；化学组成；干扰物类型； 样品组分处理过程中稳定性； 样品在收集、储存和预处理过程中容器的污染； 适合分析仪器的样品的最终使用的溶剂； 预处理过程尽量简单，有尽可能高地精密度和准确 度；预处理的最后一步应使被测组分富集。
二、常用预处理方法
6. 已抽取的包装上，贴上已被抽样的标记 7. 《抽样记录和凭证》
一、抽样
随机抽样法
偶遇抽样法
针对性抽样
确定抽样 单元
一、抽样
（四）、抽样量 中药制剂的抽样量一般为3倍全检量，贵重药品 为2倍全检量。 制剂抽样至少应有3个最小包装。
所抽样品装入清洁、干燥、具磨口塞的容器或密封 的塑料袋中，并注明品名、批号、数量、取样日 期及取样人。
一、抽样
包装件 单元样品
最小包装
批 抽样批 抽样单元
常用术语
最终样品
均质性药品 非均质性药品 正常 异常
一、抽样
（二）抽样的一般步骤 1. 检查药品所处环境
2. 3. 4. 5. 确定抽样单元数、抽样单元及抽样量 检查抽样单元的外观情况 用适当方法拆开抽样单元的包装，观察内容物的情况； 用适宜取样工具抽取单元样品，进而制作最终样品，分 为三份，并做好标记；
柱的活化
上Байду номын сангаас样
清 洗
洗 脱
第四节 样品的净化
固相微萃取技术（ SPME）
特点： 无需柱填充物和使用溶剂解吸被测组分的前处理 ，能直接从样品中采集挥发和非挥发性的化合物 ，然后直接在ＧＣ，GC/MS,HPCE上分析，集采 集、提取、浓缩、进样于一体。
缺点：提取率低、重复性差。
第四节 样品的净化
固相微萃取技术（ SPME）
二. 样品的提取
回流 超声 冷浸
提取
SFE
二. 样品的提取
冷浸法
• 适用：热不稳定的样品 • 方法：称取一定量样品置于带塞容器内，加入 适量溶剂（样品量的10～50倍），称重，浸泡 提取，浸泡时间12～24小时。浸泡后再称重， 补足溶剂。 • 测定：部分测定法（等量法） 全部测定法（总量测定法） • 优点：操作简单 • 缺点：费时、费溶剂、不易提取完全