干化学技术及优势的项目

比色/速率法干片结构
支持层
扩散层 试剂层
• 提供反应支持基垫
• 允许光路自由通过
指示剂层 支持层
反射光的测定
干扰物质
反光背景 成色层
滤光片
光源 生成纯净的反射光
接收器
透射与反射
接收器 接收器
光线经过干扰物质 受影响
光线不经过干扰物质 不受影响
优异的抗干扰能力
尿酸
• MicroSlide多层涂膜技术可以针对不同 检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到 最佳的检测结果
BuBc干片
• • • • 由Eastman Kodak在 1980s早期开发。 使用染媒剂，不是试剂。 染媒剂是什么？ 染媒剂可以区分结合胆红素和游离胆红素的最 大反射差。 • 在技术上的一个机遇。
BuBc干片技术原理
• 实线为Bu, 虚线为Bc. • 反射最大峰: Bu 460, Bc 420 nm. • 在 400 (二者反射强 度相同) 和 460 nm (最大反射差)阅读。
PM
电极法 干片
免疫速率 法干片
地高辛 苯巴比妥 卡马西平 苯妥因 C反应蛋白
IR
肌酸激酶同工酶 尿素氮 肌酐 乳酸 磷 尿酸 铁、总铁结合力 锂
通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度
扩散层
试剂层
指示剂层
支持层
比色/速率法干片结构
扩散层 试剂层 指示剂层 支持层
• 多孔结构，允许标本通过
• 均匀分布标本



国内长期来，误解了结合胆红素参与反应非常快，整个反 应只要1分钟，被称为“1分钟胆红素”。 结合胆红素参与反应的影响因素很多。例如：反应时使用 的重氮试剂的浓度、pH、反应时间等。结合胆红素的重氮 反应的初期确实很快，但是，要使所有结合胆红素完全参 与反应，需要30分钟以上。 目前推荐10分钟的方法。目前任何一个在自动分析仪上的 直接胆红素测定都是不完全的（如：反应时间太短）。
•干化学技术
ຫໍສະໝຸດ Baidu
•优势项目
Ortho Clinical Diagnostics
临床实验室类产品（生化）：
DT60, V350/250, V950,Fusion5.1
Vitros Fusion5.1
Vitros 950
DT 60II
Vitros 350
MicroSlide － 多涂层薄膜干片技术
MicroSlide多涂层薄膜干片技术：将所需试剂预固相在多层薄膜和邮 票大小的透明支持基垫之上。当血浆，血清，尿液或脑脊液与这些 已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。
–某些干片中有清道夫层（如尿酸） ：去除维他命C 和钙的干扰
尿素氮
– 某些干片试剂层下有半透膜层 （如尿素氮）：去除药物干扰
半 透 膜
优异的抗干扰能力
能有效排除标本中
－溶血 －血脂 －胆红素等
对检测结果造成的影响
优势项目——胆红素
HPLC分离的胆红素各组分
巨细胞肝炎婴儿血清 a = 游离胆红素 b = 单葡萄糖醛酸酯 结合胆红素 g = 双葡萄糖醛酸酯 结合胆红素 d = 和白蛋白共价结 合胆红素
传统胆红素检测方法
• 具有加速剂的偶氮反应 = 总胆红素。 • 不加加速剂的偶氮反应= “直接反应胆红素” (van den Bergh) 或简称为直接胆红素。 • 间接胆红素为总胆红素减去直接胆红素。
Vitros 胆红素检测方法
• 现今已广泛应用 (2003年的CAP调查中在4964个 实验室中，有1191个使用该法）。 • 总胆红素干片还是传统的偶氮方法。 • BuBc干片 (游离胆红素Bu、结合胆红素Bc）为 非传统方法。


血清中的少量游离胆红素也会参与直接反应。因为血清中有 尿素、尿酸等，早期的研究已经肯定，这些物质的存在，具 有促使游离胆红素打开氢键、参与直接反应的可能。 按照胆红素的代谢途径，在健康人的血清中，只有由白蛋白 携带的游离胆红素；被肝脏处理过的结合胆红素经胆管进入 肠道，不会进入血液。所以健康人的血清内不应该有结合胆 红素。
From Wu T-W, Dappen GM, Spayd RW et al, Clinical Chemistry 1984; 30.8: 1304-9.
HPLC PEAK HPLC 峰 Bilirubin Species 胆红素类别
ALPHA α峰
BETA β峰
GAMMA γ峰
DELTA δ峰
Unconjugated 未结合型胆红素
• 过滤大分子（蛋白质，脂肪等） • 去除干扰物质（溶血，黄疸等） • 提供反射测定的背景
比色/速率法干片结构
试剂层
扩散层 试剂层 指示剂层
葡萄糖干片
支持层
• 包含检测反应所需的酶，缓冲液，催化剂等 • 多层试剂，控制反应顺序
比色/速率法干片结构
指示剂层
扩散层
试剂层
指示剂层
支持层
•试剂层产物与指示剂层中的染 料结合时，形成有色复合物，其 与分析物浓度成正比。
传统的胆红素检测方法
• 偶氮方法 (Ehrlich 1883). • 由 van den Bergh and Muller (1916)应用于胆红素 检测。 • 直接胆红素反应快速。 • 间接胆红素反应缓慢或不反应（分子折叠，不 溶性）。 • 需要某些物质的存在，才会打开游离胆红素， 使溶解在水，并和偶氮试剂反应。
Figure 1, Ostrea EM, Ongtengco EA, Tolia VA, Apostol E. J Pediatr Gastroenterol Nutr 1988; 7: 511-516.
△胆红素
• 在血液循环中结合胆红素和白蛋白形成的。 • 白蛋白缓慢地非酶作用置换了原葡萄糖醛酸酯。 类似于糖化血红蛋白。 • 在长期的高结合胆红素血症后，才能检测出来。 • 在血液循环中的清除缓慢。半衰期和白蛋白一 样，2～3周。 • 因为胆红素不存在氢键的影响，所以胆红素 可以与重氮直接胆红素反应。
标本
扩散层 试剂层 指示剂层 支持层
干 片 分 类
干片(MicroSlide)
CM/RT
比色/速率 法干片
胆固醇 总蛋白 高密度酯蛋白 尿蛋白 谷丙转氨酶 碱性磷酸酶 乳酸脱氢酶 甘油三酯 白蛋白 脂肪酶 脑脊液蛋白 谷氨酸转移酶 r谷氨酰转酞酶 肌酸激酶 淀粉酶 胆碱脂酶 总胆红素 结合/非结合胆红素 血氨 乙醇 水杨酸 茶碱 醋氨酚 镁 二氧化碳 钠 钾 氯