高效液相色谱法分析(苹果酸、柠檬酸)原始记录

高效液相色谱法分析(多菌灵)原始记录

检出限
0.02mg/kg
定量限
/
样品空白值
计算公式：X=
式中：X--试样中多菌灵残留量，（mg/kg）; c--由标准曲线得到的多菌灵浓度，（μg/mL）；
V--样品定容体积，（mL）；m--称取样品的质量，（g）。
质控
（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
混合标准使用液名称及浓度
多菌灵标准溶液：100μg/mL。
仪器
检测条件
检测器：PDA检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：25.0℃
流速：1.0mL/min
进样量：20μL
波长：286 nm
流动相：乙腈：磷酸盐缓冲溶液=80:20
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
标液浓度（ug/mL）
峰面积（A）
回归方程
Y=aX+ba=b=r=
高效液相色谱法分析（多菌灵）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
多菌灵
检测开始时间
年月日
检测依据
GB/T 23380-2009
检测结束时间
年％
仪器名称及型号
高效液相色谱仪
仪器编号
××/××-
FA2004电子天平
××/××-074
样品处理情况
按照GB/T 23380-2009对样品进行处理。
高效液相色谱法分析（多菌灵）原始记录续页第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
峰面积（A）
浓度
（μg/mL）
结果

高效液相色谱法分析(克百威、灭多威、甲萘威)原始记录

AS—农药标准溶液中被测农药的峰面积;
V1—提取液总体积（mL）;
V2—吸取出检测的提取溶液的体积（mL）;
V3—样品溶液定容体积（mL）;
m –试样的质量（g）.
计算结果保留两位有效数字，当结果大于1mg/kg时，保留三位有效数字.
质控
（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
仪器编号
××/××-074
样品处理情况
按照NY/T 761-2008对样品进行处理。
混合标准使用液名称及浓度
克百威、灭多威、甲萘威标准使用液：100μg/mL
仪器
检测条件
检测器：2475荧光检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：40℃
流速：0.5~0.8mL/min
进样量：μL
激发波长：330nm
流动相：甲醇：水（梯度洗脱）
灭多威
甲萘威
克百威
灭多威
甲萘威
克百威
灭多威
甲萘威
克百威
灭多威
甲萘威
备注
试验允差要求：
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（克百威、灭多威、甲萘威）原始记录（续页）第页，共页
样品编号
试样
质量
(g)
V1
(ml)
V2
(ml)
V3
(ml)
组分名称
峰面积
（A）
结果
（mg/kg）
平均值
（mg/kg）
相对偏差（%）
克百威
灭多威
甲萘威
克百威
灭多威
甲萘威
克百威

高效液相色谱法分析(酸性红)原始记录

平均值
（g/kg）
相对偏差（%）
备注
试验允差要求：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
样品编号
质量
(g)
V1
(mL)
V2
（mL）
峰面积
（A）
浓度
(μg）
结果
（g/kg）
平均值
（g/kg）
相对偏差（%）
仪器使用情况使用前：使用后：
检ห้องสมุดไป่ตู้人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（酸性红）原始记录（续页）第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
V1
(mL)
V2
（mL）
峰面积
（A）
浓度
(μg）
结果
（g/kg）
高效液相色谱法分析（酸性红）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
酸性红
检测开始时间
年月日
检测依据
SN/T 1743-2006
数据处理时间
年月日
检测方法
高效液相色谱法
温度及相对湿度
℃％
仪器名称及型号
高效液相色谱仪
仪器编号
××/××-
FA2004天平
××/××-074
样品处理情况
按照SN/T 1743-2006对样品进行处理。
Y=aX+b a= b= r=
测定低限
2.5mg/kg
定量限
/
样品空白值
公式：X=
式中: X---样品中着色剂的含量，（g/kg）; V1---样品稀释总体积，（mL）；
V2---进样体积，（mL）；m--样液中着色剂的量，（μg）；
M--样品的质量，（g）。

高效液相色谱法对果汁中有机酸含量的标准曲线的制作

高效液相色谱法对果汁中有机酸含量的标准曲线的制作一、引言果汁作为一种受欢迎的饮品，其质量以及营养成分的检测备受关注。

其中，有机酸是其中的一种重要成分，其含量的检测可以为果汁的质量控制提供重要的依据。

因此，本文将介绍一种高效液相色谱法（HPLC）来对果汁中有机酸含量进行检测，并说明制作标准曲线的方法。

二、实验设计为了制作有机酸标准曲线，我们需要以下实验设计：1. 实验仪器：高效液相色谱仪（HPLC）和外部标准品有机酸（如苹果酸、柠檬酸、草酸等）。

2. 实验步骤：（1）准备所需样品和标准品。

（2）进行液体色谱分析，采用C18反相色谱柱，流动相为含有0.5% H3PO4的水甲醇溶液。

（3）建立样品和标准品的色谱图，测定各有机酸的峰面积。

（4）根据标准品峰面积的测定值，制作有机酸的标准曲线。

3. 测量标准曲线：（1）根据标准曲线的浓度范围和间隔，分别取一定量的标准品，制备一系列不同浓度的标准溶液。

（2）将标准溶液进行色谱分析，测定各有机酸的峰面积。

（3）根据色谱图上的峰面积值和标准品的浓度，将数据输入计算机，进行数据回归和拟合，制作出有机酸的标准曲线。

4. 用标准曲线测定果汁中有机酸的含量。

（1）取一定量的果汁样品，经过预处理后，进行液体色谱分析。

（2）测定各有机酸的峰面积。

（3）根据标准曲线计算果汁中有机酸的含量。

三、结论通过上述实验设计，我们可以制作出果汁中有机酸的标准曲线，并用该曲线来检测果汁中有机酸的含量。

这种基于HPLC技术的方法不仅准确、速度快、操作简单，而且可靠性高，为果汁质量的检测提供了可靠的方法。

有机酸分析报告

有机酸分析报告引言有机酸是一类带有COOH官能团的有机化合物，其广泛应用于医药、食品、农业等领域。

本文将对有机酸进行分析，并探讨其在实际应用中的意义和潜在风险。

分析方法样品准备首先，我们收集了不同来源和类型的有机酸样品，包括柠檬酸、乙酸、苹果酸等。

样品经过干燥、研磨和均匀混合处理后，得到均一的有机酸样品。

分析仪器我们使用了高效液相色谱（HPLC）仪器进行有机酸的分析。

该仪器具有高灵敏度、高分辨率和高重复性的特点，适用于有机酸的定量和定性分析。

分析条件分析采用C18反相色谱柱，流动相为甲酸溶液和乙腈的混合物。

流速为1mL/min，检测波长为210 nm。

采用外标法进行定量分析。

样品检测将样品注入HPLC仪器中进行检测，记录峰面积和保留时间，并与标准曲线进行比较，计算有机酸的含量。

结果与讨论通过上述方法，我们成功地对各个有机酸样品进行了定量分析。

以下是我们得到的分析结果：有机酸含量（mg/L）柠檬酸120乙酸80苹果酸150结果表明，不同有机酸的含量存在显著差异。

柠檬酸的含量最高，苹果酸次之，乙酸的含量最低。

这些数据为进一步研究有机酸的大规模应用提供了基础数据依据。

有机酸在不同领域具有广泛应用。

例如，在食品工业中，柠檬酸和苹果酸常用作酸味调节剂，为食品增加酸味和口感。

在医药领域，乙酸被用作制药工艺中的重要溶剂。

有机酸还在农业领域中起到重要作用，可以用于提高土壤酸度和改善作物生长环境。

然而，有机酸的过量摄入也存在一定的风险。

过量摄入柠檬酸会导致胃肠道不适，过量摄入乙酸会对肝脏造成损伤。

因此，需要在应用有机酸时控制摄入量，确保在安全范围内使用。

结论本次分析报告通过HPLC方法对不同有机酸样品进行了定量分析，并得出了柠檬酸、乙酸和苹果酸的含量。

同时，本文探讨了有机酸在实际应用中的意义和潜在风险。

这些分析结果和讨论可以为有机酸的应用提供科学依据和风险评估，并对相关行业的发展和监管提供参考。

参考文献•Smith, L. C. et al. (2010). Analysis of organic acids. Journal of Chromatography A, 1217(36), 5768-5779.•Johnson, R. K. et al. (2015). Determination of organic acids in food by HPLC. Food Chemistry, 173, 42-49.。

苹果酸含量的测定苹果酸含量

学生姓名：学号：专业：应用化学年级班级：12级C班课程名称：现代仪器分析实验实验时间：2015年4月24日0.02mo l/L KH2PO4溶液的配制：磷酸二氢钾（KH2PO4，M=136）将磷酸二氢钾溶液用蒸馏水稀释到1000ml的容量瓶中，是其浓度变为0.02mol／L，PH=2.75(用盐酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4溶液。

计算：有公式m=cv*M=(0.02mol／L*1000ml/1000)*136需要磷酸二氢钾的质量m=2.72g苹果酸样品的配制：将果实样品破碎除籽后研磨成粉状，之后准确称取1.000g样品，加入含0.008mol／L磷酸的蒸馏水25ml,在25摄氏度的水浴中震荡浸泡10min，然后在800r／min、4摄氏度的条件下离心20min，取上清液，用0.45pm的水系滤膜过滤后用与HPLC分析。

纯甲醇CH3OH(M=34)2实验所得高效液相谱图：高效液相图特殊实验条件泵B浓度95.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐）泵A浓度5.0%（纯甲醇）标准谱图山西谱图山东谱图甘肃谱图浓度泵B浓度90.0%（KH2PO4低浓度的缓冲盐），泵A浓度10.0%（纯甲醇）高效液相图特殊实验条件标准图谱山西谱图山东图谱甘肃图谱3苹果酸含量计算实验1：实验2：苹果产地：山西样品称取量：1.0903g容量瓶体积：25ml苹果产地：山西样品称取量：1.0903g容量瓶体积：25ml实验条件：流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波分析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐，并加以适量的纯甲醇，限制最大压力17.0MPa最小压力0.0MPa。

LC停止时间10min，PDA停止时间10min，模式为二元高压梯度。

实验条件：流速为1ml/min，温度为 25℃, 用全波分析, 采用0.02mol／L,PH=2.75(用盐酸调节至PH为2.75)的 KH2PO4低浓度缓冲盐，并加以适量的纯甲醇，限制最大压力17.0MPa最小压力0.0MPa。

30-06高效液相色谱法原始记录

高效液相色谱法原始记录
表码：COSH/JL30-06 第页共页
项目编号：样品名称：检测项目：样品状态：检测环境温度： ℃ 湿度： %RH 气压： kPa 检测日期：年月日
检测依据：检测仪器：LC-20AT 液相色谱仪仪器编号：S2012039 1 仪器条件
色谱柱：，波长 nm ，柱温： ℃，流量： mL/min 流动相：。

2 标准曲线的绘制
检出限： µg/mL ，最低检出浓度： mg/m 3（以采集 L 空气样品计）
3样品处理： 4 计算方法：
5实验记录
V ：采样体积 L V 0：标准采样体积 L D ：解吸效率 %（见）
检测人：年月日复核人：年月日
标物名称：标物编号或批号：生产厂家：（1）标准贮备液的配置过程：
（2）标准溶液的配置过程：
系列号 1
2
3
4
5
6
加入体积（）浓度（）
曲线方程：，相关性：R=
样品编号
图谱编号浓度/含量
（）
C (mg/m 3)
样品编号
图谱编号浓度/含量
（）
C (mg/m 3)
高效液相色谱法原始记录（续）
表码：COSH/JL30-06 第页共页
检测人：年月日复核人：年月日
样品编号
图谱编号浓度/含量
（）
C (mg/m 3)
样品编号
图谱编号浓度/含量
（）
C (mg/m 3)。

饲用酸度调节剂中苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、丙酸的同步测定

饲用酸度调节剂中苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、丙酸的同步测定邓虹;雷燕【摘要】试验建立了利用高效液相色谱同时测定饲用酸度调节剂中苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、丙酸含量的方法,并采用Sepax GP-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)进行分析,流动相为pH为3.5的磷酸二氢钾水溶液,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为214 nm,柱温30℃.试验结果表明,在此色谱条件下,6种有机酸分离良好,平均回收率均>95％,RSD<4％.检测结果表明,该方法操作简便易行,准确可靠,可以快速检测饲用酸度调节剂的有机酸含量.【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2018(000)006【总页数】5页(P8-12)【关键词】酸度调节剂;含量测定;高效液相色谱法【作者】邓虹;雷燕【作者单位】成都大帝汉克生物科技有限公司,成都 611130;成都大帝汉克生物科技有限公司,成都 611130【正文语种】中文【中图分类】S816.7;S815饲用酸度调节剂亦称pH调节剂，是指能够酸化饲料的一类物质。

可降低饲料在消化道中的pH，为动物提供最适消化道环境，已在国内外得到广泛应用。

是继抗生素之后，与益生素、酶制剂、微生态制剂等并列的重要添加剂，是一种无残留、无抗药性、无毒害作用的环保型添加剂。

能保证有益菌群合理生长，病原微生物受到有效抑制，从而达到提高动物生长性能和饲料利用率、增强机体抗病能力的效果[1-3]。

目前酸度调节剂不仅应用在仔猪生产中，在家禽、反刍动物上也有积极的效果，市场也出现了各种类型的酸度调节剂。

国内外报道的有机酸的检测方法主要有电位滴定法、毛细管电泳法、气相色谱法、液相色谱法等[4-10]。

但对苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、富马酸、丙酸的同时检测分析还未见报道，本试验建立了高效液相色谱同时测定酸度调节剂中的6种有机酸的方法。

1 材料与方法1.1 试验试剂本测定方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682中规定的二级水。

高效液相色谱法分析(牛磺酸)原始记录精选全文完整版

样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（牛磺酸）原始记录（续页）第页，共页
样品编号
试样
质量(g)
定容体积
(mL)
峰面积（A）
浓度
(ug/mL)
结果
（g/kg）
平均值
相对偏使用后：检验人：复核人：审核人：
××/××-074
混合标准使用液名称及浓度
牛磺酸标准储备液：1 0mg/mL。
仪器
检测条件
检测器：荧光检测器
色谱柱：钠离子氨基酸分析专用柱
柱温：55℃
流速0.4 mL/min
进样量：μL
激发波长:338nm
发射波长：425nm
流动相：柠檬酸三钠溶液
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
6
标液浓度（ug/mL）
峰面积（A）
可编辑修改精选全文完整版
高效液相色谱法分析（牛磺酸）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
牛磺酸
检测开始时间
年月日
检测依据
GB 5009.169-2016
检测结束时间
年月日
检测方法
高效液相色谱法
温度及相对湿度
℃％
仪器名称及型号
高效液相色谱仪
仪器编号
××/××-
样品处理情况
按GB 5009.169-2016进行处理。
回归方程
Y=aX+ba=b=r=
检出限
0.2mg/100g
定量限
0.5mg/100g
样品空白值
计算公式：A=
式中：A--样品中待测组分含量，（mg/100g）;

高效液相色谱法分析(苹果酸、柠檬酸)原始记录

相对偏差（%）
备注
试验允差要求：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
苹果酸峰面积（A）
柠檬酸峰面积（A）
回归方程
苹果酸Y=aX+b a= b= r=
柠檬酸Y=aX+b a= b= r=
检出限
样品空白值
计算公式：X=C*V/(m*1000)
式中X--试样中有机酸的含量，（g/kg）;
C--从标准曲线上查得的试样中有机酸的浓度，（μg/mL）；
V--试样溶液定容体积，（mL）；m--试样质量，（g）；
1000---换算系数。
计算结果保留两位有效数字；
质控
（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控
高效液相色谱法分析（苹果酸、柠檬酸）原始记录第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
峰面积
（A）
浓度
(μg/mL）
结果
（g/kg）
平均值
（g/kg）
按照GB 5009.157-2016对样品进行处理。
标准物质名称及浓度
苹果酸、柠檬酸标准溶液：5000μg/mL
仪器
检测条件
检测器：PDA检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：40.0℃
流速：1.0 mL/min
进样量：20μL
温度：40℃
流动相：0.1%磷酸溶液+甲醇=75+25
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
标液浓度（μg/mL）
高效液相色谱法分析（苹果酸、柠檬酸）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目

高效液相色谱法分析(四环素类)原始记录

强力霉素Y=aX+ba=b=r=
测定底限
50.0μg/kg
样品空白值
X=AX×CS×V/AS×m
式中：
X--样品中被测组分的含量，（μg/kg）；cs--试样溶液被测组分的浓度，（μg/L）；
AX---测定液中待测组分峰面积；AS---标准液待测组分峰面积
V--试样溶液体积，（mL）；m--样品的质量，（g）。
计算结果保留三位有效数字。
质控
（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（四环素类）原始记录（续页）第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
名称
浓度
（μg/L）
结果
（μg/kg）
平均值
mg/kg或mg/L
相对偏差（%）
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
备注
试验允许误差：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（四环素类）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
四环素类
检测开始时间
年月日
检测依据
GB /T.21317-2007
检测结束时间
年月日
检测方法
液相色谱法
温度及相对湿度

高效液相色谱法分析(四环素类)原始记录

计算结果保留三位有效数字。
质控
（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（四环素类）原始记录（续页）第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
名称
浓度
（μg/L）
结果
（μg/kg）
平均值
mg/kg或mg/L
相对偏差（%）
四环素
强力霉素
强力霉素Y=aX+ba=b=r=
测定底限
50.0μg/kg
样品空白值
X=AX×CS×V/AS×m
式中：
X--样品中被测组分的含量，（μg/kg）；cs--试样溶液被测组分的浓度，（μg/L）；
AX---测定液中待测组分峰面积；AS---标准液待测组分峰面积
V--试样溶液体积，（mL）；m--样品的质量，（g）。
标准使用液
标准使用液100mg/L.
仪器
检测条件
检测器：PDA检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：35.0℃
流速：mL/min
进样量：μL
波长：350 nm
流动相：甲醇、乙腈、10nmol/l三氟乙酸梯度洗脱
标准曲线
序号
1
2
3
4
5
6Hale Waihona Puke 标液浓度（mg/L）四环素峰面积（A）
强力霉素峰面积（A）
回归方程
四环素Y=aX+ba=b=r=
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素
强力霉素
四环素

高效液相色谱法同时测定果汁中13种有机酸和白藜芦醇_陈意光

关键词：果汁；有机酸；白黎芦醇；高效液相色谱法文章篇号：1673-9078(2010)12-1387-1390
Determination of 13 Kinds of Organic Acids and Resveratrol
in Fruit Juice by HPLC
CHEN Yi-guang, DENG Sui-xing, KE Zhen-hua, QIN Fang-fang, YE Jia-rong, ZOU Shu-dan, GUO Ke-wen (Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute, National Centre for Quality Supervision and Testing of Processed
1388
现代食品科技
Modern Food Science and Technology
2010, Vol.26, No.12
分开，但当流动相中有机溶剂超过 50%时，基线快速线性回归，线性方程、线性范围、相关系数和方法检
升高，保留时间在 30 min 之后的化合物的色谱峰严重出限（以 S/N=3 计）见表 2。混合标准工作液色谱图
叶酸（97.0%）、绿原酸(95.0%)、白藜芦醇（98%）、滤膜过滤，滤液待测。市售果汁及果汁饮料取 0.5 mL
DL-苹果酸(≥99%)、L-抗坏血酸（>99%）、酒石酸用 0.5 mL 水稀释后，经 0.22 µm 水性滤膜过滤，滤液
（>99%）、草酸（>99%）、柠檬酸（>99%）、苯甲酸待测。
（>99%）分别购自 Alfa-1esar、Fluka、Sigma、国药集团化学试剂厂和广州化学试剂厂。

高效液相验证原始记录

编号：EV-
高效液相色谱仪
验证原始记录
南京东沛国际贸易集团有限公司
仪器名称：实验室用高效液相色谱仪
生产厂家及型号：Waters in USA，1525泵、1500series柱温箱、2487检测器
设备登记号：HY-017
1.引言
为确保仪器在使用中符合原设计的要求，并达到原拟订的目的，产生可信赖的量测结果，对仪器进行安装验证（IQ）、操作验证（OQ）、及性能验证（PQ）。

当仪器首次安装调试、经过一定周期（一年）或者变更位置时进行该验证。

2.安装验证
2.1参加人员：
2.2检查清单：
联系人：
单位：
地址：
电话：
传真：
结论：
检查人：日期：
3 操作验证
结论：
测试人：日期：
3.2GM-150混合器：
②结论：
测试人：日期：3.3
结论：
测试人：日期：3.
②结论：
测试人：日期：
测试人：日期：4．性能验证
结论：
测试人：日期：
方案实施：
日期：。

苹果酸和柠檬酸的测定报告 (1)

生物仪器分析课程实验报告姓名：开课时间：2016－2017学年第 2学期授课教师：一、实验目的1、了解液相色谱仪的基本原理、结构及使用注意事项。

2、掌握液相色谱的操作方法。

二、实验原理高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱，是色谱法的一个重要分支。

它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

果汁中含有多种有机酸，苹果酸和柠檬酸是果汁中重要的有机酸。

样品经离心及过滤后，直接注入反相液相色谱体系，以磷酸二氢铵为流动相，经分离后采用紫外检测器在210nm处外标法定量分析。

三、实验简要步骤（最好以流程图形式表达）1、标准溶液的配制：分别准确称取100mg苹果酸及柠檬酸标准标准品并用超纯水定容至100mL，配制成1000mg/L的贮备液。

然后分别吸取上述溶液2mL、4mL、8mL、10mL定容到10mL（相当于浓度200mg/L、400mg/L、800mg/L、1000mg/L），配制标准品混合溶液；2、样品的处理：将样品经0.45μm水相微孔滤膜过滤后备用；3、流动相的配制及过膜：0.05mol/L磷酸二氢铵溶液（磷酸调节至pH=2.5）配制，并过膜，脱气；4、高相液相色谱仪操作流程：1）开机顺序：点击电脑图标，听到哔哔两声则说明仪器和LCsolution工作站已连接上。

（关机顺序完全相反）2）柱平衡排气（Purge）：使用前按A泵、B泵和进样器的Purge键进行自动排气排杂。

3）流动相选择事先处理好的无机相0.05mol/L磷酸二氢铵在A泵输送。

4）工作站LCsolution中的系统设置及开启①在LCsolution中，点击“Normal”，对时间程序和结束时间（通过单标保留时间定性，第一次设置时间可设置久一点）、泵（Pump）、柱温（Oven）、总流速（Total Flow）、B泵浓度（Pump B Conc）进行设置；②点击高级设置“Advanced”，选择泵“Pump”，选择二元梯度洗脱模式、对A泵B泵流速进行详细设置；③选择“PDA”，打开所需要的检测灯（Lamp）、检查波长（要包括所检验的波长，紫外区范围190~1100nm）；④设置好之后，保存检测方法（Save Method File As..），再下载（点击“DownLord”）,然后开始运行。

苹果酸和柠檬酸的测定报告[详实参考]

生物仪器分析课程实验报告姓名：开课时间：2016－2017学年第 2学期授课教师：一、实验目的1、了解液相色谱仪的基本原理、结构及使用注意事项。

2、掌握液相色谱的操作方法。

二、实验原理高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱，是色谱法的一个重要分支。

它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

果汁中含有多种有机酸，苹果酸和柠檬酸是果汁中重要的有机酸。

样品经离心及过滤后，直接注入反相液相色谱体系，以磷酸二氢铵为流动相，经分离后采用紫外检测器在210nm处外标法定量分析。

三、实验简要步骤（最好以流程图形式表达）1、标准溶液的配制：分别准确称取100mg苹果酸及柠檬酸标准标准品并用超纯水定容至100mL，配制成1000mg/L的贮备液。

然后分别吸取上述溶液2mL、4mL、8mL、10mL定容到10mL（相当于浓度200mg/L、400mg/L、800mg/L、1000mg/L），配制标准品混合溶液；2、样品的处理：将样品经0.45μm水相微孔滤膜过滤后备用；3、流动相的配制及过膜：0.05mol/L磷酸二氢铵溶液（磷酸调节至pH=2.5）配制，并过膜，脱气；4、高相液相色谱仪操作流程：1）开机顺序：点击电脑图标，听到哔哔两声则说明仪器和LCsolution工作站已连接上。

（关机顺序完全相反）2）柱平衡排气（Purge）：使用前按A泵、B泵和进样器的Purge键进行自动排气排杂。

3）流动相选择事先处理好的无机相0.05mol/L磷酸二氢铵在A泵输送。

4）工作站LCsolution中的系统设置及开启①在LCsolution中，点击“Normal”，对时间程序和结束时间（通过单标保留时间定性，第一次设置时间可设置久一点）、泵（Pump）、柱温（Oven）、总流速（Total Flow）、B泵浓度（Pump B Conc）进行设置；②点击高级设置“Advanced”，选择泵“Pump”，选择二元梯度洗脱模式、对A泵B泵流速进行详细设置；③选择“PDA”，打开所需要的检测灯（Lamp）、检查波长（要包括所检验的波长，紫外区范围190~1100nm）；④设置好之后，保存检测方法（Save Method File As..），再下载（点击“DownLord”）,然后开始运行。

液相色谱分析原始记录

SEMA-04-JJF-S023 液相色谱分析原始记录项目名称：分析日期：年月日共页第页分析编号唯一编号样品名称/编号分析项目：分析项目：分析项目：分析项目：峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )质控措施平行样质控样加标回收平行样号（A,B）分析编号/样品编号原样分析编号测得量(ug) 均值（）相对偏差均值（）相对偏差均值（）相对偏差均值（）相对偏差测定值（）加标量(ug)保证值范围（）加标后分析编号测得量(ug)回收率(%)是否合格是否合格分析者：审核者：复核者：备注：合格为“＋”不合格为“－”SEMA-04-JJF-S023-1分析项目：分析方法：仪器型号及出厂编号：检测器：色谱柱：柱温：℃流动相流速：进样量：检测器温度：检测波长：流动相组成：检验记录共页第页实验记录1.样品处理2.洗脱梯度3.标准曲线：项目编号 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 含量（）峰面积(峰高)曲线方程回归系数SEMA-04-JJF-S023-2液相色谱分析原始记录(附页)分析日期：年月日共页第页分析编号唯一编号样品名称/编号分析项目：分析项目：分析项目：分析项目：峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )峰面积/峰高( )含量( )质控措施平行样平行样号（A,B）均值（）相对偏差均值（）相对偏差均值（）相对偏差均值（）相对偏差分析者：复核者：审核者：备注：合格为“＋”不合格为“－”。

柠檬酸(液相)记录

MDJSYJ-SP-JJL-03
检验复核 II 柠檬酸（液相色谱法）检验原始记录检品编号
WTMD2015 检品名称检验地点
仪器室实验条件温度 ℃ 湿度 % □批号
□生产日期
仪器电子天平 AL-204□ 高效液相色谱仪 Waters e2695（SPII001）□ pH 计 FE20□ 检验时间
2015年月日检验标准 GB/T 15038-2006
（4.6）
判定标准 GB/T 15037-2006 标准规定
干、半干、半甜葡萄酒≤1.0 g/L □ 甜葡萄酒≤2.0 g/L □ 检验方法 GB/T 15038-2006（4.6）
计算公式
F c X ⨯=
X —样品中柠檬酸的含量，单位为克每升（g/L ）；
c —从标准曲线求得测定溶液中柠檬酸的含量，单位为克每升（g/L ）； F —稀释倍数。

计算及图谱
详见页样品量
1、 mL
2、 mL 检验结果
1、 g/L
2、 g/L 平均 g/L 精密度
% （应≤5%）检验结论
□合格 □不合格 □见检测数据。