植物生理学实验

本科学生综合性实验报告

光合色素的提取、理化性质

分离、吸收光谱及含量的测定

学号：134120171 姓名：王晓莲

学院：生命科学学院专业、班级13生物科学C班实验课程名称：植物生理学实验

教师及职称：李忠光

开课学期：2015 至2016 学年下学期

填报时间：2016 年 4 月 2 日

云南师范大学教务处编印

mg/dm2

方法二: 分光光度计法

色素提取：将上述植物叶片洗净并用滤纸吸干，准确称取已知Φ的叶圆片0.05g左右，加入少许CaCO3和石英砂及80%丙酮2ml，充分研磨，转入离心管中（离心机使用），再用5ml 80%丙酮洗研钵，转入离心管中，平衡，5000rpm离心10min, 记录上清液体积，取1ml稀释到4ml。

测定：以1cm比色皿分别测定A663、A645。使A控制在0.1 ~ 0.8之间。

5．实验结果及分析

Ⅰ光合色素的提取与理化性质

一层：浅黄绿色

(1)皂化反应：溶液分为三层二层：浅绿色

三层：深绿色

轻轻摇晃过程中：第一层由浅绿色逐渐变为黄绿色

第二三层逐渐变为一层，深绿色

在第一层下面出现一层油滴层

原因:叶绿素是一种由叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，故可与碱起皂化反应而生成甲醇和叶绿醇及叶绿酸盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开

(2)荧光现象的观察

用肉眼可以观察到叶绿素提取液在直射光照射下，反射光为蓝绿色，透射光为深红色

原因：叶绿素吸收光量子而转变成激发态，激发态的叶绿素分子很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生荧光；反射光呈蓝绿色是因为叶绿素对蓝绿色光的吸收很少，而对于其他颜色光的吸收很多，所以会呈现出蓝绿色的反射光

II 光合色素的分离与吸收光谱