《动物毒理学》课件：第七章 安全性毒理学评价

二、安全性毒理学评价程序的内容
试验前的准备工作
文献调研了解受试物的基本资料
• 产品概述 化学结构、理化性质、定量分析方法、
成分和杂质、原料和中间体
• 使用情况 剂量、途径、效益、健康影响 • 受试样品 选用人畜实际接触和应用的固定产品，
不用纯品，以反映实际接触的情况
• 实验动物 多用大鼠
安全性毒理学评价程序的阶段划分
细胞染色体畸变分析任选一项
• DNA修复合成试验
备选遗传毒性试验
果蝇伴性隐性致死试验 体外细胞转化试验 小鼠淋巴瘤试验 DNA合成抑制试验 姐妹染色单体互换实验
结果判定
▪ 3项为阳性 无论蓄积毒性如何，表示可能 致癌性 一般应放弃
▪ 2项为阳性 强蓄积性 应放弃 弱蓄积性 专家评议，权衡利弊
第一阶段 急性毒性试验 第二阶段 蓄积毒性和致突变试验 第三阶段 亚慢性毒性试验和代谢试验 第四阶段 慢性毒性试验和致癌试验
第一阶段 急性毒性试验
▪ 目的
➢了解受试物毒性强度、性质和可能的靶器
官
➢为选择进一步毒性试验的剂量和毒性判定
指标提供依据
试验项目
• 测定经口LD50
➢7 d 喂养试验 ➢动物皮肤、粘膜试验 ➢吸入、刺激阈浓度试验 ➢联合急性毒性试验
▪ 第一阶段 急性毒性试验 ▪ 第二阶段 蓄积毒性和致突变试验 ▪ 第三阶段 亚慢性毒性试验和代谢试验 ▪ 第四阶段 慢性毒性和致癌试验
三、安全性评价中应注意的问题
▪ 实验设计的科学性
▪ 试验方法标准化
良好实验室规范(GLP)
标准操作程序(SOP)
▪ 熟悉毒理学试验方法的特点 ➢毒理学实验的数据
结果判定
▪ 1项为阳性 选择2项备选致突变试验 2项备选为阳性 无论蓄积性如何 应放弃 1项备选为阳性 强蓄积性 应放弃 弱蓄积性 进入第三阶段
▪ 3项均为阴性 无论蓄积性如何进入第三阶段
短期喂养试验（30d喂养试验）
▪ 目的 进一步了解毒性作用 初步估计无作用剂量(NOEL)
▪ 结果判定 未发现明显毒性作用，综合其他试验作 出初步评价 有明显毒性作用，且有剂量-反应关系， 应作进一步的毒性试验
进行安全性评价
传统致畸试验
▪ 目的 了解受试物对胎仔是否具有致畸作用
▪ 结果判定 根据最敏感指标的NOEL评价
代谢试验
▪ 目的 ➢了解受试物在体内的吸收、分布和排泄的 速度及蓄积性 ➢了解有无毒性代谢产物形成 ➢寻找可能的靶器官 ➢为选择慢性毒性试验的动物种系提供依据
第四阶段 慢性毒性试验 和致癌试验
积，放弃 ➢ 1/2 LD50有死亡，其他组无死亡为弱蓄积
致突变试验
➢目的 对受试物的遗传毒性和是否具有潜在的致
癌性进行筛选
➢项目 （四选三） • 细菌诱变试验 Ames试验为首选，其它有枯
草杆菌试验、大肠杆菌试验
• 小鼠骨髓微核试验或骨髓细胞染色体畸变分析 • 显性致死试验、小鼠精子畸形试验和睾丸生殖
第三阶段 亚慢性毒性试验 和代谢试验
▪ 目的
➢观察较长时间以不同剂量水平喂养后的毒性作用性
质和靶器官
➢初步确定最大无作用剂量(NOEL, No Observed
Effect Level )
➢了解受试物对动物繁殖及对子代的致畸作用 ➢为慢性毒性和致癌试验的剂量选择提供依据 ➢为评价受试物能否用于食品提供依据
▪ 目的
➢了解长期接触受试物后的毒性作用性质、靶器官
和中毒机制，尤其是进行性或不可逆的毒性作用。
➢了解是否有致癌作用。 ➢确定最大无作用剂量，为制定每日容许摄入量
(ADI: Acceptable Daily Intake), 最终评价受试物能 否用于食品提供依据。
第一节 概述
一、基本概念 二、毒理学安全性评价程序的内容 三、安全性评价中应注意的问题
一、基本概念
▪ 安全(safety) 指一种化学物在规定的使用方式和用量
条件下，对人畜不产生任何损害，即不引起 急性、慢性中毒，也不至于对接触者及后代 产生潜在的危害。
安全性毒理学评价
▪ 安全性毒理学评价 (toxicological safety evaluation) 指对人畜所使用化学物质的安全性作 出评价的研究过程。 即通过对实验动物和人畜的观察，阐 明某种物质的毒性及其潜在的危害，对该 物质能否投入市场作出取舍的决定，或提 出人畜安全的接触条件。
第七章 安全性毒理学评价
本章提纲
▪ 第一节 概述 ▪ 一、基本概念 ▪ 二、毒理学安全性评价程序的内容 ▪ 三、安全性评价中应注意的问题 ▪ 第二节 化学物安全性毒理学评价程序 ▪ 一、食品安全性毒理学评价程序 ▪ 第一阶段 急性毒性试验 ▪ 第二阶段 蓄积毒性和致突变试验 ▪ 第三阶段 亚慢性毒性试验和代谢试验 ▪ 第四阶段 慢性毒性试验和致癌试验 ▪ 二、兽药安全性毒理学评价程序
▪ 亚慢性毒性试验项目
• 90 d 亚慢性毒性试验 • 喂养致畸试验
同批动物
• 喂养繁殖试验
• 传统致畸试验
▪ 代谢试验（毒物动力学试验）
▪ 结果判定
以上述试验中任何一项最敏感指标的NOEL与 人的可能摄入量比较：
• ≤100倍
表示毒性较强 应放弃
• 100倍~300倍 进行慢性毒性试验
• ≥300倍
▪ 评价结论的高度综合性
➢社会效益 ➢经济效益
➢对环境质量和自然资
源的影响
第二节 化学物安全性毒理学评价程序
一、食品安全性毒理学评价程序 第一阶段 急性毒性试验 第二阶段 蓄积毒性和致突变试验 第三阶段 亚慢性毒性试验和代谢试验 第四阶段 慢性毒性试验和致癌试验
二、兽药安全性毒理学评价程序
一、食品安全性毒理学评价程序
▪ 蓄积毒性试验 性试验
• 目的 了解受试化学物是否具有蓄积毒性 • 项目 蓄积系数法 20 d 试验法 • 凡急性毒性实验LD50>每千克体重10 g 的，可不
进行蓄积毒性试验
• 结果判定
➢ k＜3 强蓄积 k≥3 弱蓄积 ➢ 1/20 LD50有死亡，且有剂量-反应关系为强蓄
结果判定
▪ 如剂量达每千克体重10 g仍不引起动物死亡，则 不必继续测定
▪ 以LD50或7 d 喂养试验的最小有作用剂量（MEL） 与人的可能摄入量比较： • ＜10倍 应放弃，不允许用于食品 • ＞10倍 进入下一阶段毒理学试验 • 10倍左右 应进行重复试验，或用另一方法验证
第二阶段 蓄积毒性和致突变试验