氨基酸的薄层层析实验报告
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生物化学实验报告
姓名:XXX
学号:XXXXXX
专业年级:临床八年制
⑥层析缸;⑦烤箱;⑧天平;⑨药匙。
1.3实验步骤
1.3.1实验流程
132实验操作步骤
层-显色剂的层析缸及烤箱等。
图一层析板图二实验后的结果
2.3实验原始数据
实验数据即为各氨基酸色斑中心至样品原点中心距离和溶液前缘至样品原点中心的距离记录,如下表:表一原始数据记录表
说明:由于溶剂前沿并不是一条直线,故我们选取了各斑点垂直的实验数据,以提高实
验的准确率,减少实验误差
6.5OCm 6.4OCm
3.60Cm
3.05Cm
3.50Cm
2.10Cm 2.01Cm
三、结果与讨论
3.1结果处理
利用原始数据,根据实验原理中的计算方式计算
Rf 值:
根据Rf 值,我们可以测定并粗略地得到结果: 在一定的系统误差和实验误差的允许条件下,混合的氨基酸溶液中,存在有精氨酸和丙 氨酸两种氨基酸。
3.2讨论 321
结果上的误差原因
在实验的结果中,我们可以发现混合点1(精氨酸)Rf =0.314 = 0.328 =测定的标准值 混合点
2 (丙氨酸)Rf = 0.554 = 0.547 =测定的标准值。原因可能有:
① 在整个实验过程中,层析板的制作是基础,硅胶分布的均匀与否直接影响了实际 的实验。而从溶剂前沿的弯曲可以知道,实验所用的层析板质量不是很好,一定程度上 影响了实验的数据测定,导致实验的误差。
②
人为误差的存在,在判定斑点前沿和测量距离时,存在一定的误差,导致了结果 上的不一
致性,但这类影响较小
原点到层析斑点中心的距离 原点到斑点对应前沿的距离
可得表二如下:
③操作过程中存在一定的误差,如层析时间不足等都有可能导致。
322对实践的指导与应用价值
①学习制作层析板的技巧,多做多练,在练好基础技能的前提下,可以提高实验的准确率和成功率。
②提高并严格按照各项操作的标准做实验,在此基础上对实验结果进行讨论和分析
3.3结论
薄层层析法操作简单,在实验的结果上也比较的精确,能有效地分离出样品各组分<运用在本实验,效果也较好。最终可以得到结果:混合的氨基酸溶液中,存在有精氨酸和丙氨酸两种氨基酸。
3.4思考题
3.4.1硅胶的吸附力与含水量的问题
答:硅胶属于极性吸附剂,根据活性级别越大,吸附能力越小的关系
即硅胶的吸附能力与含水量呈负相关,含水量高,活度级数高,吸附力弱,反之亦然。
3.4.2吸附实验中吸附剂的选择根据
答:吸附剂的选择一般需要根据实验来确定。所选的吸附剂应有以下几个特点:
最大的表面积和足够的吸附能力
对待不同的分离组分应有不同的吸附能力
与溶剂和样品成分不会发生化学反应颗粒均分,不会碎裂。
般的选择标准可有:
343氨基酸纸层析,两者有何区别
答:两者的区别见下表: