植物组织培养学PPT课件
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植物组织培养 PPT
5、移栽锻炼 将生根的苗从锥形瓶中移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或 塑料布保持80%以上的湿度，2-3天后打开玻璃罩逐渐降 低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度为止。
6、定植 苗健壮后移至土中培养（定植），即可长成植株并开花。
例题：右图是实验室进行植 物组织培养的一般过程。请 回答下列问题：
(3)基本过程
①愈伤组织：由离体的植物组织或细胞经 脱分化 形成的一 种 相对没有分化 的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 ②脱分化：又叫去分化，是由_高__度__分__化___的植物组织或细胞产 生_愈__伤___组__织__的过程。 ③再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成_根__或___芽__等器官的 过程。
2、下面是宁夏农林科学院进行苹果试管苗培养的一般过程:
⑴请填写a～c所表示的内容。a. 脱分化 ； b. 愈伤组织 ；c. 再分化 。
⑵实验室一般使用保存的培养基母液来制备MS固体培养基,配制母液 时, 大量元素 、 微量元素 和有机物要浓缩5～10倍。 细胞分 ⑶该过程中a、c的启动关键在于培养基中所加 生长素 和 裂素 的浓度配比。
MS培养基中各成分的作用
植物激素和人工合成的植物激素
植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天 然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成的 激素在植物中没有相应分解它的酶，所以作用和存在的时间 长，作用效果明显。
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的相互作用
诱导芽的形成 愈伤组织不分化 诱导根的形成
菊花组织培养操作步骤:
生芽 生根
消毒
无菌水
1
酒精灯火焰 封口膜
生芽
植物组织培养(PPT)
接种针 镊子 解剖刀
二、实验基本操作技术
（一）洗涤技术
1、洗涤液 的配制
2、洗涤方法
（1）玻璃器皿洗涤 A、新购买的玻璃器皿 表面常附着有游离的
碱性物质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用 自来水洗净，然后浸泡在1％～2％盐酸溶液 中过夜（不可少于四小时），再用自来水冲洗， 最后用无离子水冲洗两次，在100℃～120℃ 烘箱内烘干备用。
植物组织培养
一、实验室设置及仪器设备
（一）实验室设置 实验室是进行组培研究的主要场所，应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操作、 培养、鉴定等多方面的工作。
组织培养实验室设置的总体要求：
便于隔离 便于操作 便于灭菌 便于观察
实验室 组成
基本实验室
准备室 缓冲室 无菌操作室 培养室
细胞生物学实验室 辅助实验室 温室
4、用70－75％的酒精拭擦台面并消毒双手。 试验用具也应该用酒精消毒。点燃酒精灯，将 金属器械在其火焰上灼烧，冷却待用。 注意：所有操作应在火焰近处并经过灼烧进行。 金属器械不能过度灼烧，以防退火。移液管不 能灼烧，培养瓶口、塑料材料、橡胶材料过火 焰不能时间太长。
5、取流水冲洗（至少30min）过的外植体，用 一定的消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲洗3~4次， 放入无菌培养皿中，置于酒精灯火焰下方，用无 菌的接种器械进行分离、切割或其他处理。
皿 和 玻璃器皿
用 具
接种用具
培养基：湿热
外部细菌：用水冲洗→化学药剂处理 培
养
材 内部细菌 茎尖培养
料
加抗生素：青霉素、利福平
操作的空气：洗刷地板、95%酒精擦超净工作台 用化学试剂薰蒸
1、实验器具和材料的准备 2、用75%的酒精擦拭超净工作台，然后室内及 超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。注意： 台面上的用品不要放置太多或重叠放置，以免降 低灭菌效果。 3、关紫外灯、打开风机，过5-10min进入缓冲 间，以75%洗手和手臂，更换无菌服、帽子和口 罩。进入接种室。（注：没有特别情况，尽量不 要下工作台）
二、实验基本操作技术
（一）洗涤技术
1、洗涤液 的配制
2、洗涤方法
（1）玻璃器皿洗涤 A、新购买的玻璃器皿 表面常附着有游离的
碱性物质，可先用0.5％的去污剂洗刷，再用 自来水洗净，然后浸泡在1％～2％盐酸溶液 中过夜（不可少于四小时），再用自来水冲洗， 最后用无离子水冲洗两次，在100℃～120℃ 烘箱内烘干备用。
植物组织培养
一、实验室设置及仪器设备
（一）实验室设置 实验室是进行组培研究的主要场所，应能 满足清洗、培养基制备、储藏、无菌操作、 培养、鉴定等多方面的工作。
组织培养实验室设置的总体要求：
便于隔离 便于操作 便于灭菌 便于观察
实验室 组成
基本实验室
准备室 缓冲室 无菌操作室 培养室
细胞生物学实验室 辅助实验室 温室
4、用70－75％的酒精拭擦台面并消毒双手。 试验用具也应该用酒精消毒。点燃酒精灯，将 金属器械在其火焰上灼烧，冷却待用。 注意：所有操作应在火焰近处并经过灼烧进行。 金属器械不能过度灼烧，以防退火。移液管不 能灼烧，培养瓶口、塑料材料、橡胶材料过火 焰不能时间太长。
5、取流水冲洗（至少30min）过的外植体，用 一定的消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲洗3~4次， 放入无菌培养皿中，置于酒精灯火焰下方，用无 菌的接种器械进行分离、切割或其他处理。
皿 和 玻璃器皿
用 具
接种用具
培养基：湿热
外部细菌：用水冲洗→化学药剂处理 培
养
材 内部细菌 茎尖培养
料
加抗生素：青霉素、利福平
操作的空气：洗刷地板、95%酒精擦超净工作台 用化学试剂薰蒸
1、实验器具和材料的准备 2、用75%的酒精擦拭超净工作台，然后室内及 超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。注意： 台面上的用品不要放置太多或重叠放置，以免降 低灭菌效果。 3、关紫外灯、打开风机，过5-10min进入缓冲 间，以75%洗手和手臂，更换无菌服、帽子和口 罩。进入接种室。（注：没有特别情况，尽量不 要下工作台）
植物细胞组织培养(PPT)
2
06.10.2020
主要有:
➢ 原生质体（Protoplast）培养 ➢ 悬浮细胞培养 ➢ 组织（愈伤组织Callus、茎尖分生组织）培
养 ➢ 器官（胚，花药，子房，根和茎）培养
其中最常见的是愈伤组织培养。
06.10.2020
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06.10.2020
植物细胞组织培养范畴：
（广义）又叫离体培养：指从植物体分离出 符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等， 通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养 以获得再生的完整植株或生产具有经济价值 的其他产品的技术。
06.10.2020
14
三、植物组织培养的生理依据
植物生长调节物质对于植物细胞组织的分化和决定具 有关键性作用。它包括：生长素类、细胞分裂素类、 赤霉素、脱落酸、乙烯等
生长素类主要用于愈伤组织的形成，体细胞胚的产生及试管 苗的生根。常用的有2,4-D、NAA、IBA、IAA等。其作用强 弱为2,4-D>NAA>IBA>IAA。
细胞分裂素类则有促进细胞的分裂与分化，延迟组织的衰老， 促进芽的产生等作用。常用的有Zip(异戊烯腺嘌呤)、KT、6BA、ZT等作用强弱顺序为。Zip>KT>6-BA>ZT。
赤霉素则有促进已分化的芽伸长生长，打破种子休眠的作用。 常用的为GA3。
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四、植物组织培养的原理
★植物细胞全能性（Cellular totipotency）： 任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成
种子培养
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06.10.2020
3. 组织或愈伤组织培养(tissue， callus culture) ：是对植物体的各部分
组织进行培养，如茎尖分生组织、形成层、 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄 壁组织等等；或对由植物器官培养产生的愈 伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形 成植株.
植物组织培养 PPT课件
我国第一个T-DNA 插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基 因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，由中国水稻研究所农业部 水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过 建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子 Ac-Ds 等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了 1.2 万个独立的T-DNA 插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。
植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟 了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并 且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养 物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且 可以长期保存无病毒的原种。
• <6>植物组织培养与转基因技术的应用
试管苗大规模培养
• <2>目前进展较多的大概还有胚状体形成、离体胚培养、高频 再生系 统建立、药用植物细胞培养、染色体检测、抗性研究等， 随着与其他 学科的相互渗透，植物组织培养的前景也将越来越宽广
5.植物组织培养的应用现状
• <1>植物快速繁殖和无病毒种苗生产
目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有 100 多科1000 种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界 上80% ～ 85% 的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。利用 组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒 危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。
植物组织培养
生命科学学院0802班梅定兰2008114010239
植物组织培养
1.植物组织培养技术的历史 2.植物组织培养的原理 3.植物组织培养技术的研究应用现状 4.植物组织培养技术存在的问题及对策
植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟 了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并 且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养 物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且 可以长期保存无病毒的原种。
• <6>植物组织培养与转基因技术的应用
试管苗大规模培养
• <2>目前进展较多的大概还有胚状体形成、离体胚培养、高频 再生系 统建立、药用植物细胞培养、染色体检测、抗性研究等， 随着与其他 学科的相互渗透，植物组织培养的前景也将越来越宽广
5.植物组织培养的应用现状
• <1>植物快速繁殖和无病毒种苗生产
目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有 100 多科1000 种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界 上80% ～ 85% 的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。利用 组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒 危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。
植物组织培养
生命科学学院0802班梅定兰2008114010239
植物组织培养
1.植物组织培养技术的历史 2.植物组织培养的原理 3.植物组织培养技术的研究应用现状 4.植物组织培养技术存在的问题及对策
《植物组织培养技术》课件
04 植物组织培养技术的应用实例
快速繁殖技术
快速繁殖技术是指利用植物组 织培养技术，快速、大量繁殖
植物种苗的一种方法。
该技术广泛应用于花卉、果树 、林木等植物的快速繁殖，能 够大大缩短繁殖周期，提高繁
殖系数。
快速繁殖技术还可以通过控制 培养条件，实现植物的定向繁 殖，如矮化、无病毒等。
快速繁殖技术具有高效、环保 、可重复利用等优点，是现代 农业和林业生产的重要手段之 一。
濒危植物保护与复壮是保护生 物多样性和维护生态平衡的重 要手段之一，具有深远的社会 意义和生态意义。
05 植物组织培养技术的挑战与前景
技术瓶颈与解决方案
技术瓶颈
目前植物组织培养技术面临的主要瓶颈包括培养基的优化、外植体的选择与处 理、污染控制以及基因转化效率等。
解决方案
针对这些问题，研究者们正在探索新型的培养基成分、优化外植体的选择标准 、开发新型的消毒方法以及改进基因转化技术，以期提高植物组织培养的效率 和成功率。
指任何一个植物细胞都包含该物种的 全套遗传信息，具有发育成完整个体 的潜在能力。
植物细胞全能性证明
植物细胞全能性的应用
植物组织培养技术利用植物细胞的全 能性，通过离体培养获得完整的植株 ，广泛应用于植物繁殖、品种改良、 基因工程等领域。
许多植物细胞如胡萝卜、烟草、草莓 等在适宜条件下能够发育成完整的植 株，证明了植物细胞的全能性。
技术发展趋势与展望
发展趋势
随着生物技术的不断发展，植物组织培 养技术也在不断进步和完善。未来，该 技术将更加注重与基因编辑、合成生物 学等新兴技术的结合，以实现更为精准 和高效的植物育种和种质资源保护。
VS
展望
未来，植物组织培养技术有望在农业、园 艺、林业等领域发挥更大的作用，为解决 全球粮食安全、生态恢复等问题提供有力 支持。
植物组织培养ppt课件
36
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
37
1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
19
2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段（1902-1929年） 奠基阶段（1930-1960年） 迅速发展阶段（1960-1980） 生产上广泛应用阶段(1980-今）
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1. 探索阶段（1902-1929年）
Haberlandt：
贡献： 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 （6）植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织（Callus）培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中，多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• （1）诱导期：细胞准备进行分裂， 细胞大小几乎不变，
生理生化变化大，迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下，随着培养时间的延长，Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因：染色体畸变，基因突变， 生理因素（代谢产 物），细胞或组织内激素平衡的改变，细胞对外源生 长物质的敏感性改变，培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 （1）准备：外层细胞分裂逐渐减慢并停止；内部较深
19
2 、细胞分化（Cell differentiation）
①概念
（1） 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
（2）细胞分化：指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是 在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素： 从理论上讲，在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
植物组织培养 植物组织培养技术认识护理课件
该技术通过无菌操作，将植物组织或 细胞接种在人工培养基上，在适宜的 环境条件下进行培养，诱导其分裂、 分化并发育成完整的植株。
植物组织培养技术的发展历程
1902年，德国植物学家哈伯兰 特首次提出了植物细胞具有全能
性的理论。
1958年，斯图尔德成功地将胡 萝卜根部的细胞培养成完整的植 株，标志着植物组织培养技术的
THANKS
感谢观看
基因编辑与组织培养结合
利用基因编辑技术对植物进行精确改 良，提高组织培养效率。
智能化与自动化
引入智能化和自动化技术，实现植物 组织培养的精准控制和高效生产。
生物反应器应用
利用生物反应器大规模培养植物细胞 ，为药物生产、生物燃料等领域提供 原料。
06
植物组织培养技术的伦理和社会影响
植物知识产权保护问题
培养条件与观察记录
培养条件
提供适宜的光照、温度、湿度等环境 条件，以满足植物生长需求。
观察记录
定期观察植物生长情况，记录生长数 据，及时发现问题并采取相应措施。
04
植物组织培养技术的实践应用
快速繁殖与育种
快速繁殖
通过植物组织培养技术，可以在短时间内快速繁殖大量植物，提高繁殖效率，缩短生长周期。
生物多样性
植物组织培养技术可能对生物多样性产生影 响，尤其是当某些人工繁殖的植物品种取代 野生种时，可能导致某些物种的消失或濒临 灭绝。
技术应用的伦理规范和法规
要点一
伦理原则
要点二
法规监管
植物组织培养技术的应用应遵循伦理原则，尊重生命、保 护环境和生态平衡，同时保障育种者的权益。
政府应制定相关法规和监管措施，规范植物组织培养技术 的研发和应用，确保技术的可持续发展和社会效益的发挥 。
植物组织培养技术的发展历程
1902年，德国植物学家哈伯兰 特首次提出了植物细胞具有全能
性的理论。
1958年，斯图尔德成功地将胡 萝卜根部的细胞培养成完整的植 株，标志着植物组织培养技术的
THANKS
感谢观看
基因编辑与组织培养结合
利用基因编辑技术对植物进行精确改 良，提高组织培养效率。
智能化与自动化
引入智能化和自动化技术，实现植物 组织培养的精准控制和高效生产。
生物反应器应用
利用生物反应器大规模培养植物细胞 ，为药物生产、生物燃料等领域提供 原料。
06
植物组织培养技术的伦理和社会影响
植物知识产权保护问题
培养条件与观察记录
培养条件
提供适宜的光照、温度、湿度等环境 条件，以满足植物生长需求。
观察记录
定期观察植物生长情况，记录生长数 据，及时发现问题并采取相应措施。
04
植物组织培养技术的实践应用
快速繁殖与育种
快速繁殖
通过植物组织培养技术，可以在短时间内快速繁殖大量植物，提高繁殖效率，缩短生长周期。
生物多样性
植物组织培养技术可能对生物多样性产生影 响，尤其是当某些人工繁殖的植物品种取代 野生种时，可能导致某些物种的消失或濒临 灭绝。
技术应用的伦理规范和法规
要点一
伦理原则
要点二
法规监管
植物组织培养技术的应用应遵循伦理原则，尊重生命、保 护环境和生态平衡，同时保障育种者的权益。
政府应制定相关法规和监管措施，规范植物组织培养技术 的研发和应用，确保技术的可持续发展和社会效益的发挥 。
植物组织培养PPT课件
在植物体内
限制
游离
表现
植物体的任何一个细胞，都有长成完整个体的潜在能力
.
5
01
培养基
在组织细胞生长过程中提供所需的营养物质
.
6
02
组培苗的生长过程
.
7
02
组培苗的生长过程
转苗
出瓶
.
8
03
植物组织培养的意义
.
9
03
快速繁殖
稀有植物 繁殖能力低或不能用种子繁殖的植物 受地理环境及季节因素限制的植物
.
10
04
组培的实验条件
.
11
04
超净工作台
提供无菌无尘的工作环境
照明灯
紫外线灯
风机
视频介绍
.
12
04
培养室
控制光照、温度，并 保持相对的无菌环境
.
13
05
转苗操作步骤
.
14
05
操作步骤
准备工作 01
1.将操作时需要用到的物品（酒精灯、一对镊子、托盘、培养基等） 放于超净工作台台内喷洒70%酒精后开启超净台紫外灯照射消毒 30min左右 2.戴口罩，70%酒精消毒双手 3.取一对镊子于酒精灯火焰的外焰灼烧约1-2min后放置至恢复室温 备用
.
18
05
每瓶接7-10株
接苗深度：将根部插入培 养基，露出根茎结合部 （过深不利于苗的生长） 尽量使苗直立固定
.
19
The end 希望同学们学有所成
.
20
1.取适量的苗于托盘中后，将培养瓶盖上盖子 （盖前同样转动灼烧瓶口） 2.左右手各持一把镊子，将托盘里的苗分成一株 株同时把夹带的培养基、枯叶等杂质与苗分开
《植物组织培养》课件
《植物组织培养》PPT课 件
通过植物组织培养，我们可以在无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器 官。这种技术在农业和科学研究中具有重要的意义。
培养的定义和意义
1 定义
植物组织培养是一种无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器官的技术。
2 意义
植物组织培养可以实现植物繁殖和改良，加快育种速度，解决病虫害和环境胁迫等问题。
植物组织培养的未来发展方向
基因工程
利用植物组织培养技术进 行基因编辑和转基因繁殖， 加速育种进程。
环境修复
利用植物组织培养技术繁 殖适应环境的植物品种， 用于环境修复和产药用植物和人工合成药 物，为医疗领域带来新的 可能性。
植物组织培养的历史和研究方法
1
历史
植物组织培养起源于20世纪50年代，经过多年的发展和研究，如今已广泛应用 于植物学和农业领域。
2
研究方法
常用的植物组织培养方法包括悬浮培养、固体培养、愈伤组织培养等，每种方法 都有其适用的场景。
植物激素的作用
生长素
促进细胞分裂和分化，调 控植物生长和发育。
赤霉素
促进植物伸长和营养物质 的转运。
细胞分裂素
促进细胞分裂和植物器官 的生长。
植物花卉组织培养技术及其应用
技术
植物花卉组织培养技术包括愈伤组织培养、鲜花 切花养护、芽体分化培养等，广泛应用于花卉生 产和观赏。
应用
植物花卉组织培养应用于兰花、玫瑰等种类的繁 殖和育种，有效提高了花卉产量和改良品种。
植物细胞休眠和复苏技术
1
休眠
植物细胞休眠是植物适应环境变化而
复苏
2
进入的一种休息状态，存在于种子、 芽和各种组织中。
植物细胞在适宜的环境条件下，从休
通过植物组织培养，我们可以在无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器 官。这种技术在农业和科学研究中具有重要的意义。
培养的定义和意义
1 定义
植物组织培养是一种无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器官的技术。
2 意义
植物组织培养可以实现植物繁殖和改良，加快育种速度，解决病虫害和环境胁迫等问题。
植物组织培养的未来发展方向
基因工程
利用植物组织培养技术进 行基因编辑和转基因繁殖， 加速育种进程。
环境修复
利用植物组织培养技术繁 殖适应环境的植物品种， 用于环境修复和产药用植物和人工合成药 物，为医疗领域带来新的 可能性。
植物组织培养的历史和研究方法
1
历史
植物组织培养起源于20世纪50年代，经过多年的发展和研究，如今已广泛应用 于植物学和农业领域。
2
研究方法
常用的植物组织培养方法包括悬浮培养、固体培养、愈伤组织培养等，每种方法 都有其适用的场景。
植物激素的作用
生长素
促进细胞分裂和分化，调 控植物生长和发育。
赤霉素
促进植物伸长和营养物质 的转运。
细胞分裂素
促进细胞分裂和植物器官 的生长。
植物花卉组织培养技术及其应用
技术
植物花卉组织培养技术包括愈伤组织培养、鲜花 切花养护、芽体分化培养等，广泛应用于花卉生 产和观赏。
应用
植物花卉组织培养应用于兰花、玫瑰等种类的繁 殖和育种，有效提高了花卉产量和改良品种。
植物细胞休眠和复苏技术
1
休眠
植物细胞休眠是植物适应环境变化而
复苏
2
进入的一种休息状态，存在于种子、 芽和各种组织中。
植物细胞在适宜的环境条件下，从休
相关主题
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可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。
的现象反应了什么问题？
2021
31
激素配比模式
生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组 织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化，应除去或 降低生长素的浓度，或者调整培养基中生长素与细胞分裂 素的比例。
高 利于根和愈伤组织的形成
课题1 菊花的组织培养
2021
1
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么， 有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
2021
2
扦插
嫁接
压条
2021
3
植物组织培养简介
植物组织培养是二十世纪发展起来的 新技术，近三十年来由于组织培养基础理 论研究的深入，发展极为迅速，发表的文 献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各 个分支学科都在广泛进行组织培养。
2021
20
看录像培养基的制备并思考制备的过程要注意些什么？
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
1、分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口
2、检查封口膜是否有破损
2021
21
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
3、扎瓶口要位置适当、松紧适宜
4、保证灭菌时间和高压锅内温度
2021
22
5、接种工具用前彻底灭菌 6、工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌
②生长周期短，繁殖率高
植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要 求而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往 20—30d为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗， 但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时
提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
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4
组织培养
在人工培养基上，离体培养 植物的器官、组织、细胞和原生 质体，并使其生长、增殖、分化 以及再生植株的技术。
思考：
1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性，即生物体的 细胞，具有使后代细胞形成完整个 体的能力。
2021
5
植物组织培养过程示意图
2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
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23
试评价下列操作正确与否
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24
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25
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（四）、保证环境的清洁
1、污染瓶经高压灭菌后再清 洁
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2、接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯 照射或用臭氧灭菌和消毒
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3、定期对培养室消毒、防止高温
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植物组织培养特点
①培养条件可以人为控制
组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件 下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影 响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
二、污染原因
2、真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限 不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3－10 天才能发现。主要是霉菌污染。
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正常苗
污染苗
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三、污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
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四、污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
生长素/细胞分裂素 适中 有利于根芽的分化
低 有利于芽的形成
生长调节物质的使用甚微，一般用mg／L表示浓度。在组 织培养中生长调节物质的使用浓度，因植物的种类、部位、
时期、内源激素等的不同而异，一般生长素浓度的使用为 0.05-5mg／L，细胞分裂素0.05—10mg／L。
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32
活性炭的应用
在培养基中加入0.3%活性炭，还可降低玻璃苗的产生 频率，对防止产生玻璃苗有良好作用。
活性炭在胚胎培养中也有一定作用，如在葡萄胚珠培 养时向培养基加入0.1%的活性炭，可减少组织变褐和 培养基变色，产生较少的愈伤组织。
但是，活性炭具有副作用，研究表示，每毫克的活性 炭能吸附l00ng左右的生长调节物质，这说明只需要极 少量的活性炭就可以完全吸附培养基中的调节物质。 大量的活性炭加入会削弱琼脂的凝固能力，因此要多 加一些琼脂。很细的活性炭也易沉淀，通常在琼脂凝 固之前，要轻轻摇动培养瓶。
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（一）防止外植体带菌
1、选择好外植体采集时期和采集部位 外植体采集以春秋为宜 优先选择地上部分作为外植体 阴雨天勿采，晴天下午采 采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋
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（一）防止外植体带菌
2、室内或无菌条件下进行预培养
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（一）防止外植体带菌
3、外植体严格灭菌 灭菌效果试验 多次灭菌和交替灭菌
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6
3、结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈怎样预防组织 培养污染？
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
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7
植物组织培养过程
离体的植物 脱分化 器官、组织、
细胞
愈 再分化 根 伤
组
织
芽
植 物 体
植物组织培养条件
含有全部营养成分的培养基、一定的温度、 空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。
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愈伤组织
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9
植物细胞全能性的表达
脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂 的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱 出来，恢复细胞的分裂活性。 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培 养条件下可有转变为各种不同细胞类型的 能力。
③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制
植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿 度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于 自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间 栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系列繁杂劳动，
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MS固体培养基成分及比例
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一、污染的定义
指在组织培养过程 中，培养容器内滋 生菌斑，使培养材 料不能正常生长发 育，从而导致培养 失败的现象。
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二、污染原因
1、细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显， 一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠 杆菌和链球菌
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的现象反应了什么问题？
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激素配比模式
生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的方向，是愈伤组 织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化，应除去或 降低生长素的浓度，或者调整培养基中生长素与细胞分裂 素的比例。
高 利于根和愈伤组织的形成
课题1 菊花的组织培养
2021
1
通过必修课的学习，我们已经了解到大 多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么， 有没有不用种子来培育植物的方法呢？
扦插
营养繁殖
嫁接
压条
组织培养
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2
扦插
嫁接
压条
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3
植物组织培养简介
植物组织培养是二十世纪发展起来的 新技术，近三十年来由于组织培养基础理 论研究的深入，发展极为迅速，发表的文 献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各 个分支学科都在广泛进行组织培养。
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20
看录像培养基的制备并思考制备的过程要注意些什么？
（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
1、分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口
2、检查封口膜是否有破损
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（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌
3、扎瓶口要位置适当、松紧适宜
4、保证灭菌时间和高压锅内温度
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5、接种工具用前彻底灭菌 6、工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌
②生长周期短，繁殖率高
植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要 求而提供不同的培养条件，因此生长较快。另外，植株也比较小，往往 20—30d为一个周期。所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗， 但由于植物材料能按几何级数繁殖生产，故总体来说成本低廉，且能及时
提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
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组织培养
在人工培养基上，离体培养 植物的器官、组织、细胞和原生 质体，并使其生长、增殖、分化 以及再生植株的技术。
思考：
1、植物组织培养的原理是什么？
植物细胞具有全能性，即生物体的 细胞，具有使后代细胞形成完整个 体的能力。
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植物组织培养过程示意图
2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
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试评价下列操作正确与否
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（四）、保证环境的清洁
1、污染瓶经高压灭菌后再清 洁
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2、接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯 照射或用臭氧灭菌和消毒
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3、定期对培养室消毒、防止高温
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植物组织培养特点
①培养条件可以人为控制
组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基质和小气候环境条件 下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影 响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
二、污染原因
2、真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限 不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3－10 天才能发现。主要是霉菌污染。
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正常苗
污染苗
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三、污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
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四、污染的预防措施
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
生长素/细胞分裂素 适中 有利于根芽的分化
低 有利于芽的形成
生长调节物质的使用甚微，一般用mg／L表示浓度。在组 织培养中生长调节物质的使用浓度，因植物的种类、部位、
时期、内源激素等的不同而异，一般生长素浓度的使用为 0.05-5mg／L，细胞分裂素0.05—10mg／L。
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活性炭的应用
在培养基中加入0.3%活性炭，还可降低玻璃苗的产生 频率，对防止产生玻璃苗有良好作用。
活性炭在胚胎培养中也有一定作用，如在葡萄胚珠培 养时向培养基加入0.1%的活性炭，可减少组织变褐和 培养基变色，产生较少的愈伤组织。
但是，活性炭具有副作用，研究表示，每毫克的活性 炭能吸附l00ng左右的生长调节物质，这说明只需要极 少量的活性炭就可以完全吸附培养基中的调节物质。 大量的活性炭加入会削弱琼脂的凝固能力，因此要多 加一些琼脂。很细的活性炭也易沉淀，通常在琼脂凝 固之前，要轻轻摇动培养瓶。
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（一）防止外植体带菌
1、选择好外植体采集时期和采集部位 外植体采集以春秋为宜 优先选择地上部分作为外植体 阴雨天勿采，晴天下午采 采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋
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（一）防止外植体带菌
2、室内或无菌条件下进行预培养
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（一）防止外植体带菌
3、外植体严格灭菌 灭菌效果试验 多次灭菌和交替灭菌
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3、结合录像外植体灭菌与接种操作，谈谈怎样预防组织 培养污染？
（一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁
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植物组织培养过程
离体的植物 脱分化 器官、组织、
细胞
愈 再分化 根 伤
组
织
芽
植 物 体
植物组织培养条件
含有全部营养成分的培养基、一定的温度、 空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。
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愈伤组织
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植物细胞全能性的表达
脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂 的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱 出来，恢复细胞的分裂活性。 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培 养条件下可有转变为各种不同细胞类型的 能力。
③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制
植物组织培养是在一定的场所和环境下，人为提供一定的温度、光照、湿 度、营养、激素等条件，既利于高度集约化和高密度工厂化生产，也利于 自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间 栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫害等一系列繁杂劳动，
2021
10
MS固体培养基成分及比例
2021
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一、污染的定义
指在组织培养过程 中，培养容器内滋 生菌斑，使培养材 料不能正常生长发 育，从而导致培养 失败的现象。
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二、污染原因
1、细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显， 一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠 杆菌和链球菌
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