胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展
干细胞诱导分化技术的研究进展与实践指导
干细胞诱导分化技术的研究进展与实践指导干细胞是一类具有自我更新能力和多潜能分化能力的细胞，能够分化成不同类型的细胞，包括神经细胞、心肌细胞、肝细胞等。
干细胞诱导分化技术是一种通过模拟胚胎发育过程，将多能性干细胞（如诱导多能性干细胞和胚胎干细胞）转化为特定细胞类型的方法。
这项技术具有巨大的临床应用潜力，可为众多疾病的治疗提供新思路。
本文将对干细胞诱导分化技术的研究进展进行介绍，并提供一些实践指导。
干细胞诱导分化技术的研究进展1. 干细胞诱导多能性的实现干细胞诱导多能性是干细胞诱导分化的第一步，常用的方法包括细胞重编程和核再规程。
细胞重编程是通过转导外源基因和小分子化合物，使成体细胞回到一种类似于胚胎干细胞的状态。
而核再规程则是将损伤的细胞核替换为健康的捐献者细胞核，以实现干细胞诱导多能性。
这两种方法都为干细胞诱导分化技术提供了坚实的基础。
2. 干细胞诱导分化的效率和稳定性提高随着技术的进步，干细胞诱导分化的效率和稳定性得到了显著改善。
近年来，研究人员通过优化转录因子组合、改进细胞培养条件和引入基因编辑技术等手段，成功地提高了干细胞诱导分化的效率和稳定性。
例如，通过使用CRISPR/Cas9技术对基因进行编辑，可以准确地调控细胞命运，并避免分化过程中可能出现的意外情况。
3. 干细胞诱导分化技术在疾病治疗中的应用干细胞诱导分化技术在疾病治疗中具有广阔的前景。
通过将干细胞诱导分化为特定的功能细胞，可以为多种疾病的治疗提供新的途径。
例如，将干细胞诱导分化为心肌细胞可以用于心脏病的治疗，将其诱导分化为神经细胞则可以治疗神经系统疾病。
此外，干细胞诱导分化技术还可以用于药物筛选和疾病模型建立，为药物研发和疾病研究提供新工具。
4. 实践指导干细胞诱导分化技术是一项复杂而有挑战性的技术，需要合理的实践指导才能取得良好的结果。
以下是一些实践指导：a. 细胞培养条件的优化：细胞培养条件对干细胞诱导分化过程至关重要。
为了保证细胞的生长和分化，应根据不同的细胞类型和诱导分化阶段，优化培养基的成分和浓度，并提供合适的生长因子和细胞外基质。
胚胎干细胞的定向诱导分化及应用前景
群， 首次成功分离 出人胚胎干细胞系。同年 ，ｈ ｍ ｂｏ 等 Ｓａ ｌｔ 以 ｔ
Ｓ Ｏ作为饲养层首次建立 了人胚胎生殖细胞 ￣ Ｇ ） Ｔ Ｅ Ｃ系。一般 情 况下 ．可将 胚胎干细胞 和胚胎生殖 细胞统 称为胚 胎干细
ｉｇｐｏｅ ， Ｒ Ｂ ） ｎ ｒｔｉ Ｃ Ａ Ｐ形成 复合物 ， ｎ 然后 复合物进 入细胞 核 内 ，
有 ｐ 磷酸甘油 、 一 维生素 ｃｖ ）地塞米松 、 （ｃ 、 维生素 Ｋ （Ｋ ） ３Ｖ ３以 及 ２ ５ 羟基维 生素 Ｄ ，－ ３等化学试剂 ．也 能诱 导 Ｅ ｓ细胞 定向 分化为特定类型细胞 。 １ 细胞 因子诱导法 ． ２ Ｅ Ｓ细胞在培养 过程 中对许多细胞 因子具 有很强 的依赖 性 。增加或撤销一种或几种细胞因子可影响 Ｅ Ｓ细胞 的增 殖
无限增殖、 自我更新和 多向分化 的特性。理论上可以诱导分化 为机体 中 ２ ０多种细胞 ， ０ 可作为细胞移植 、 组织替代， 甚至器官克 隆的细胞供体 ， 为将来治疗人类诸 多难治性疾病提供 细胞来 源。本文 简述 了胚胎 干细胞的诱导分化 方法、 定向分化 的一些 细胞
种 类 以及 应 用前 景 。
最常用的诱导方法一般包括 以下 四种 ：化学试剂诱 导法 、 细 胞因子诱导法 、 培养诱导法 以及转基因诱导法等 。 共
１１ 化学试剂诱导法 ．
发育等生理过程 。 实验证 明 Ｆ Ｆ ２处理 Ｅ 有 Ｇ一 ｓ细胞后 ， 致使核
内 ２种转录因子 （ ｋ ２ 、－ ｎ ） 达增 强 ， Ｎ ｘ ． ｄ Ｈａｄ 表 ５ 促进 Ｅ 细胞 向 ｓ
Ｓ ｉｎ ｅ＆ Ｔｅ ｈ ｏｏ ｙＶｉ ｏ ｃｅ ｃ ｃ ｎ ｌｇ ｓ ｎ ｉ
２１ ０２年 ８月第 ２ 期 ３
科 技 视 界
胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展
04
胚胎干细胞体外诱导分化的应用前景
疾病治疗与药物筛选
疾病治疗
胚胎干细胞具有多向分化潜能，可分化为特定类型的细胞，如神经细胞、心肌细 胞等，为疾病治疗提供了新的途径。例如，通过诱导胚胎干细胞分化为神经细胞 ，可以用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等神经系统疾病。
药物筛选
胚胎干细胞可在体外培养扩增，为药物筛选提供了大量的实验样本。通过比较胚 胎干细胞在药物处理前后的分化过程和表型变化，可以评估药物的疗效和副作用 ，为新药研发提供有力支持。
表观遗传修饰
表观遗传修饰可以影响胚 胎干细胞的分化，如DNA 甲基化、组蛋白乙酰化等 。
03
胚胎干细胞体外诱导分化方法
化学诱导分化方法
化学诱导分化是利用化学物质 调节胚胎干细胞的分化过程。
常用的化学物质包括细胞因子 、激素、小分子化合物等。
这些化学物质通过调节胚胎干 细胞的基因表达、信号转导等 途径，诱导细胞定向分化。
组织工程与器官移植
组织工程
胚胎干细胞具有发育成各种组织的潜力，为组织工程提供了理想的基础材料。例如，可以诱导胚胎干细胞分化 为软骨、肌肉、血管等组织，用于修复或替换受损的组织器官。
器官移植
胚胎干细胞可分化为多种器官细胞，为器官移植提供了新的来源。与传统的器官移植相比，胚胎干细胞诱导分 化的器官具有更好的组织匹配性和更少的不良反应，有望成为解决器官短缺和提高移植效果的重要途径。
研究方法
采用体外培养胚胎干细胞的方法，通过添加不同的诱导因子 或采用特殊的培养条件，观察细胞的分化过程和分化产物的 特性，同时结合分子生物学、细胞生物学等技术手段分析相 关机制。
02
胚胎干细胞特性与分化机制
胚胎干细胞特性
表观遗传修饰调控胚胎干细胞定向分化的研究进展
［文章编号］ 1000-4718（2010）06-1229-05 ［收稿日期］2009-02-26 ［修回日期］2009-06-02△通讯作者Tel ：020-********；E -mail ：lihh8@ 表观遗传修饰调控胚胎干细胞定向分化的研究进展罗定远， 黎洪浩△（中山大学附属第二医院血管外科，广东广州510120）Progress of embryonic stem cells during directional differentiationregulated by epigenetic modificationLUO Ding -yuan ，LI Hong -hao（Department of Vascular Surgery ，The Second Affiliated Hospital ，Sun Yat -sen University ，Guangzhou 510120，China.E -mail ：lihh 8@ ） 【ABSTRACT 】 Embryonic stem cells undergo extensive self -renewal and have the capacity to differentiate along multiple cell lineages.Research on totipotency and directional differentiation of embryonic stem cells in order to treat in⁃tractable disease ，such as cancer ，heart failure ，atherosclerosis by tissue regeneration and cell transplantation are investiga⁃ted.Epigenetic modification ，including DNA methylation ，chromatin restructure ，and non -coding RNA -mediated regu⁃latory events ，regulate the differentiation of embryonic stem cells without detectable genetic changes.These mechanisms areoften associated with starting -up and maintenance of epigenetic silence.The achievement and focuses on the molecularmechanism of embryonic stem cells during directional differentiation regulated by epigenetic modification are reviewed. ［关键词］ 表观遗传修饰；胚胎干细胞；细胞分化 ［KEY WORDS ］ Epigenetic modification ；Embryonic stem cells ；cell differentiation ［中图分类号］ R363 ［文献标识码］ A doi ：10.3969/j.issn.1000-4718.2010.06.037 胚胎干细胞（embryonic stem cells ，ES ）来源于囊胚内胚层细胞团，是一种能分化为各种组织细胞的全能细胞，它们具有自我复制并保持多向分化的潜能；基因分析显示［1］，ES 细胞有强的转录活性，其分化时伴随着不同数目不同类型的转录因子变化，一些基因转录活性上调或下调会影响其它基因的表达，进而影响其增殖分化；近年来，ES 细胞的研究主要集中在表观遗传机制对其分化的调控上。
人胚胎干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究的开题报告
人胚胎干细胞体外诱导分化为心肌细胞的实验研究的开题报告【摘要】心肌疾病是危及人类健康的一种常见疾病，目前仍缺乏有效的治疗手段。
人胚胎胚胎干细胞在医学领域被广泛应用，因其可以分化为不同细胞类型。
本实验旨在探究人胚胎胚胎干细胞体外诱导分化为心肌细胞的可行性及其分化机制。
【研究背景】心肌疾病是影响人类健康的重要因素之一，在缺血、心肌病等情况下，心肌细胞会受到损伤或者死亡，导致心脏功能下降。
目前，临床上治疗心肌疾病的方法主要是植入心脏辅助装置，心脏移植和细胞治疗等，但是这些方法若干限制和不足。
因此，开发更有效的治疗方法是医学研究领域的迫切需求。
人胚胎干细胞是一种可以分化成为各种细胞类型的细胞，可以应用于组织工程和再生医学领域。
人胚胎干细胞能够分化为心肌细胞，为心肌疾病的治疗提供了新的思路。
虽然已经有相关研究表明人胚胎干细胞能够分化成为心肌细胞，但其分化机制尚不清楚。
【研究内容】本实验将利用人胚胎干细胞体外诱导分化为心肌细胞。
首先需要确定哪些外源因素和信号通路可以促进其分化为心肌细胞；接下来，通过RNA测序和蛋白质质谱分析探究在这个过程中发挥了哪些关键作用的基因和蛋白质因子。
最后，使用电生理学方法研究体外诱导分化后的心肌细胞的心肌功能是否恢复。
【预期结果】通过本实验，有望构建一个人胚胎干细胞体外分化为心肌细胞模型，明确其分化机制，并且验证分化后的心肌细胞是否具有正常的心肌功能。
【研究意义】本实验研究将为心肌疾病的治疗提供新的思路，同时也有助于深入了解人胚胎干细胞分化的相关机制，为组织工程和再生医学领域提供理论基础。
胚胎干细胞诱导分化研究进展
胚胎干细胞诱导分化研究进展
马勇江;杨学义;窦忠英
【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2003(031)003
【摘要】哺乳动物胚胎干细胞一般可从胚胎囊胚内细胞团分离得到,具有在体外保持不分化的无限增殖能力,在合适的培养条件下,胚胎干细胞可定向诱导分化形成多种细胞类型.人们对胚胎干细胞进行体外培养与定向分化可以得到大量同源细胞,以应用于患疾病的细胞或器官移植治疗等研究.文章概述了胚胎干细胞增殖与分化的信号调节机制、诱导分化方法,国内外研究概况及展望4个方面的内容.
【总页数】6页(P25-29，34)
【作者】马勇江;杨学义;窦忠英
【作者单位】西北农林科技大学,陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西,杨
陵,712100;西北农林科技大学,陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学,陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西,杨陵,712100
【正文语种】中文
【中图分类】Q813.7
【相关文献】
1.人胚胎干细胞向肝脏样细胞诱导分化中限定性内胚层分化的研究进展 [J], 孙博
2.胚胎干细胞向内耳细胞诱导分化的研究进展 [J], 李利;赵立东;邢光前;杨仕明
3.胚胎干细胞向角膜上皮细胞诱导分化的研究进展 [J], 张菊;孙琳;吴欣怡;
4.胚胎干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的研究进展 [J], 黄家菊;陈洋;余树民
5.胚胎干细胞/诱导多能干细胞向肝细胞诱导分化的研究进展 [J], 邢谦哲
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胚胎干细胞定向成血分化研究进展
萁注 入体 内与完 整胚 胎 形 成 嵌 台 体后 ， Ｓ细 胞 可 参 与 Ｅ
形 成 此 嵌 合 体 鼠 胚 所 有 的 组 织 器 官 ， 括 生 殖 细 胞 包
样 的结 构 ， 岔有血 细胞 。 另 一 种 方 法 称 作 ＯＰ ９体 系 ， 日本 Ｎａ ａ ｏ等 是 ｋｎ 人【 建立 的 。去除饲 养层 细胞 和 ／ 培 养液 中的分 化 。 或
抑制 因子后 ， Ｅ 将 Ｓ绷 胞 与 基 质 细 胞 系 Ｏ ９细 胞 联 台 培 Ｐ
（ｅｍ ｃ ｌ） 即 Ｅ ｇ ｒ ｄ ｓ ， Ｓ细胞 具有 种 系传 递 的功能 ； Ｓ细胞 Ｅ 可在体外 进 行 遗 传 操 作 而 不 改 变 它 的以 上 三 种 特 征 ＝
人 们可 以利 用 基 因 敲 除 、 人 外 来 基 因 、 入 原 有 基 因 导 加
养 ， Ｓ细 胞 会 分 化成 中肛 层 样 的克 隆 。在 培 养 的 第 ５ Ｅ 天时将 这些 克 隆用 胰酶 消化 后 再继 续种 植 在 Ｏ ９细 胞 Ｐ
上后 会有多 潜 能 的血 细胞 克隆 出现 。在 ｌ ４天 左 右 ， 有 红 细 胞 噬 细 胞 、 细 胞 、 核 细 胞 和 Ｂ 细 胞 系 的 细 巨 粒 巨
三胚层来 源 的所有 的细胞 类 型 ， 有 发育 的 全能 性 ； 具 将
胞， 中部 为未 分化 的 Ｅ Ｓ细 胞 简单 拟 胚 体继 续 发育 ， 内部 出现囊 腔 ， 囊腔 内有 液 体发 生 ， 壁 由柱 状 的 外胚 腔
层 细胞 构 成 ， 胚 体 最 外 层 仍 为 内 胚 层 细 胞 ， 一 时 期 拟 这 的 拟 胚 体 称 为 囊 状 拟 胚 体 （ｙｉ ｍ ｒｏｄｂｄ ） 这 些 ｃｌ ｔ ｂ ｙ ｉ ｏ ｙ 。 ｓｅ 自发 分 化 形 成 的 拟 胚 体 有 着 相 似 于 鼠 胚 中 卵 黄 囊 血 岛
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。
胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。
本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。
关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是从早期胚胎(桑椹胚、囊胚)或原始生殖细胞(primordial germ cell,PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。
ES细胞具有多向分化潜能,可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞,再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为,ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育,基因表达调控,药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗,克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。
1998年,T homson和Gearhart2个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系,在国际上引起了轰动。
Science杂志将人类ES细胞研究成果评为1999年世界十大科技进展之首,美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首,并认为ES细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域,由此掀起了ES细胞研究的高潮。
1体外诱导ES细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。
在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。
从分子水平上来看，这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异。
小鼠胚胎干细胞体外诱导分化成GABA能神经元
小鼠胚胎干细胞体外诱导分化成GABA能神经元目的探讨小鼠胚胎干细胞在体外培养向GABA能神经元定向诱导分化的可能性。
方法将小鼠胚胎干细胞以“无血清”方法培养,用DMEM/F12、N2、B27及NT4作为诱导分化剂定向诱导分化,分化好的细胞利用免疫荧光技术、流式细胞技术和RT-PCR鉴定。
结果在胚胎干细胞诱导分化成神经元后期,免疫荧光显示有GABA能神经元存在;RT-PCR结果证实有GABA能神经元正确分化的重要调控基因Viaat、Gad1和Gad2基因表达;流式细胞仪计数结果显示GABA阳性细胞约占总细胞数的(11.49±6.86)%。
结论小鼠胚胎干细胞经体外培养可以定向诱导分化成GABA能神经元,可作为神经移植的新来源。
[Abstract] ObjectiveTo investigate the possibilities of in vitro culture and differentiation of mouse embryonic stem cell to GABAergic neurons. MethodsMouse embryonic stem cells were cultured and induced into GABAergic neurons in serum-free cultural condition. Immunofluorescence,reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and flow cytometer assay were used to identify the properties of the differentiated cells. ResultsIn the later period of differentiation of embryonic stem cells into neurons,immunofluorescence showed that GABAergic neurons existed,RT-PCR results confirmed the important regulatory genes Viaat,Gad1 and Gad2 gene expression due to the correct differentiation of GABAergic neurons and flow cytometry analysis showed the GABA-positive cells accounted for about(11.49±6.86)% of the total cell number. ConclusionMouse embryonic stem cells can be induced into GABAergic neurons in vitro in serum-free cultural condition,providing a new source of nerve graft.[Key words]Embryonic stem cell; Induce; Differentiate; GABA干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究方兴未艾,且取得了一定成果,但由于其多取材于胚脑的神经干细胞,为日后临床应用埋下了伦理道德问题之患,并且受到供体来源短缺的限制[1]。
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展
胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。
胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。
本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。
关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES 细胞)是从早期胚胎( 桑椹胚、囊胚) 或原始生殖细胞(primordial germ cell, PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。
ES 细胞具有多向分化潜能, 可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞, 再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为, ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育, 基因表达调控, 药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗, 克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。
1998 年,T homson和Gearhart2 个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系, 在国际上引起了轰动。
Science 杂志将人类ES 细胞研究成果评为1999 年世界十大科技进展之首, 美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首, 并认为ES 细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域, 由此掀起了ES细胞研究的高潮。
1体外诱导 ES 细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。
在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。
胚胎干细胞体外诱导分化为黑色素细胞的研究进展
ｓ ｅ ｆ ｔ ，Ｌ ） 。 ｔ ｌａ ｏ Ｓ Ｆ 等 ｅ ｃ ｒ ２ 胚 胎 干细 胞 诱 导分 化 为 黑 色素 细 胞
２ １ 皮 肤 黑 色素 细 胞 的体 外 诱导 分 化 ． Ｍ ｔｈ ｓ ｉ 已经 报 道 黑 色 素 细 胞 可 以从 小 鼠 Ｅ ｏｏ ａｈ 等 Ｓ细 胞
黑 色 素前 体 细 胞 在 从 Ｎ 向 皮 肤 迁 移 的过 程 中 ，先 分 化 为 Ｃ
Ｋ Ｔ＋细 胞 ， 分化 为 多 巴胺 阳性 （ Ｏ Ａ＋ 细 胞 ， 后 分 化 为 Ｉｆ ） 再 Ｄ Ｐ ） 最
成 熟 黑 色素 细胞 ［ 黑 色 素细 胞 沿 基底 膜 移 行 ， 出树 突与 角 ４ １ 。 伸
哺乳 动 物黑 色 素 细 胞 分 为 皮 肤 黑 色 素 细 胞 和 皮 肤 外 黑 色 素 细胞 。 胚胎 发 育 过 程 中 ， Ｃ 在 Ｎ Ｃ从 背 侧 神 经管 出发 ， 历 经
多 向分化 潜 能目 Ｉ 一种受 体 酪氨 酸激酶 （ｅｅ ｔ ｒｓ ｅ 。ＫＴ是 Ｒ ｃｐｏ ｔ ｏｉ ｒｙ ｎ ｋ ａｅＲ Ｋ）与 其 配 体 干 细 胞 因 子 （Ｃ ） 结 合 ． 得 酪 氨 ｉ ｓ， Ｔ ， ｎ ＳＦ 相 使
ｐｇ ｅｔｄｅｉ ｅｕ Ｒ Ｅ 的基 因 选 择 性 表 达 程 序 。一 旦 诱 ｉ ｎｅ ｐｔ ｌ ｍ， Ｐ ） ｍ ｈｉ 导 分 化 为某 一 特 定黑 色素 细 胞 所需 要 的信 号 整 合 被 阐 明 ， 将 为 神 经 嵴 细 胞 （ ｅ ｒ ｒｓ ｃｌ， Ｃ ） 陷 引 起 的 发 育 异 常 Ｎ ｕａ ｃｅｔ ｅ Ｎ Ｃ 缺 ｌ ｌ
胞 。 培 养第 ９天 出现 Ｋ Ｔ＋ 细 胞 并 表 达 Ｎ Ｃ表 达 的转 录 因 Ｉ （１ Ｃ
疾 病及 黑 色 素细 胞 缺 陷性 疾 病 打开 一 扇 细胞 治 疗 的 大 门 。 本
胚胎干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展
维普资讯
实用 医学杂 志 ２０ ０ ８年第 ２ ４卷第 １期
ｌ ５１
胚胎干细胞诱 导分化 为心肌细胞的研究进展
朱明霞 综述 朱 宁 审校
胚 胎 干 细 胞 （ｍｂｙｎｃ８ ｍ ｃｌ ． 小 鼠心 脏发 育早期 中涉及 的 Ｂ ｅ ｒｏ ｉ ｔ ｅｌ ｅ ｓ Ｏ ＭＰ信 号 ， 鼠 的 胚 胎 十 细 胞 经 Ｎ 处 理 后 能 促 进 向 Ｅ Ｃ） 一类源于囊胚 时期 内细胞 的特 发现 Ｂ Ｐ信 号 拮抗 剂 Ｎ ｇｉ Ｓ 是 Ｍ ｏｇ ｎ能诱 导小 心 肌细胞分 化 ， Ｏ可能 通过诱 导向心肌 Ｎ
１８ 年 小 鼠 Ｅ Ｃ的成 功分离 、 ９１ Ｓ 建系揭 开 的增 殖和 有节律地 跳动 ． 第 １ 时有 心肌 细胞 的定 向分化 。Ｅ Ｃ经 Ｄ Ｓ 在 ７天 Ｓ Ｍ Ｏ和 了干细胞 研究的序幕 …。继之 ，Ｓ Ｅ Ｃ定 向 ４ ％表 现 出 自发 的 跳 动 ．而 对 照 组 只 有 Ｒ ９ Ａ处 理后 ． Ｄ Ａ合成 受到抑 制 ． 其 Ｎ 细胞 诱导分 化研究成 为 国内外 研究 人员共 同 １％． Ｅ ５ 从 Ｂ分化 的细胞 中鉴定 到心脏 特 不 再 增 殖 ，同 时 Ｅ Ｃ 向 组 织 细 胞 的 定 向 Ｓ 关注 的热点之一 。现就 近年来 胚胎 干细 定蛋 白肌 球蛋 白和 ｃ ａｔ ｔ ｃ ｎ的表达 。 － ｉ 分化被启动 。 Ｐ ９ Ｌ 在 １Ｃ ６细胞系的定 向心
中药体外诱导干细胞定向分化的实验研究进展
导大 鼠 Ｍ Ｃ分 化为 神经细 胞 。加 入复 方丹参 注 射液 Ｓ 后 ＭＳ Ｃ开始 向神经 元 样 细 胞方 向分 化 ， 表 达神 经 并
干细胞 的表 面标 志 Ｎ ｓ ｎ和成熟 神经 元 的表 面标 志 ｅｔ ｉ
增生 、 自我复制 以及 多 分化 潜 能 的早 期 未分 化 细胞 ， 它能产 生出表 型与基 因型完全 相同 的子细胞 ， 是机 体 其他 细胞 的起 源 。如 何 诱 导 ｓ ｃ分 化 成 为 人 们 所 期 待 的组织 或 细 胞 ， 目前 干 细 胞 研 究 领 域 的 重 要 环 是 节 。目前 ， 国内外 研 究 者普 遍 采 用 生长 因子 、 氧 化 抗
芪液 能够 成 功 诱 导 Ｍ Ｃ分 化 为 神 经 元 样 细 胞 。 黄 Ｓ
邝学 媚 等首 次报 道 三 甲复 脉汤 体 外 成功 诱 导 成 年大 鼠 ＭＳ Ｃ分 化为神 经元细 胞 。国 内外 学 者一 致
洁 等报 道牛 珀至宝 微丸也 能够促进 ＭＳ Ｃ分化 为神
经元 。 目前 研究表 明牛 珀 至宝 微 丸有 较 好 的抗 氧化 作用 ， 而抗 氧化剂 能诱 导神 经 干 细胞 的生 长 和分
Ｎ Ｅ 但 不表达 神经胶 质细胞 表面 标志 Ｇ Ａ ， 明复 Ｓ， Ｆ Ｐ说 方丹参 注射 液具有诱 导大 鼠 Ｍ Ｃ分化 为神 经元 样细 Ｓ 胞 的能力 ， 不能 诱导 其 分 化 为神 经 胶质 细 胞 ， 但 而且 研究 中发现 不 同剂量 的诱 导分化 效率不 同 ， 他们 认为 １０～ ０ ｇ Ｌ为最 佳的体 外诱 导浓度 。 ０ ２０／ 黄慧 等研 究 了香 丹注射 液诱导 Ｍ Ｃ分 化 为神 Ｓ 经元样 细胞 ， 香丹 即 降香 和 丹参 ， 中丹参 的有效 成 其 分为水 溶性 的丹 参 素。他 们 在 实 验 中利用 不 同浓度 进行诱 导 ， 现 １ ～５ 香 丹 注射 液在 体 外 诱 导 ３ 发 ％ ％ 小时后 ， Ｃ出 现神经元 样 的形 态学 变化 。诱 导 ６— ＭＳ
胚胎干细胞的定向诱导分化及应用
［， ７ 黄金明， 熊
杰， 柳尧波， ２０ ． Ｍ 等． ０５ Ｌ Ｐ法鉴定奶牛早期胚胎 Ａ
性别 的效果研究 ． 家畜生态学报 ， （ ） ２ 一 ２ ２ １ ： ２ ６ Ｏ
［］ ８ 岳志芹 ， 梁成珠 ， 吕 朋 ， ２０ ． Ｍ 技术及其在水生动物 等． ０６ Ｌ Ｐ Ａ
疫病诊 断中的应用．检验检疫学 ， （ ）７ ７ ◇ １ ５： ６ ０－ ４
胞和胚 胎生殖 细胞。一般将 两者 统称 为胚 胎干 细胞 。 胚胎 干细胞具 有 多 向分化 潜能 和 自我更 新 的特性 ， 可 以分化形成人 和动 物个体 各种类 型 的细胞 ， 至 分化 甚
断方法 ， 在未来或许可 以成 为可替代 Ｐ Ｒ的基 因扩增 Ｃ 技术 ， 广泛应用 于医疗 、 品、 食 环境 、 农牧业 等适合 开展
（２） Ｅ ３ １ ：６
验设计 的要求 非常高 ， 需要设计 的引物 比一般 的 Ｐ Ｒ Ｃ 要多且 结构复 杂 ， 还要 考虑靶序 列片段 以及茎 一环 结 构等因素 ， 在检测高度变异的病原体时 ， 实验设 计上 比 较困难 ； Ｌ ＭＰ扩增 的靶序列 长度需要控 制在 ３０ ｐ ② Ａ ０ ｂ 以下【 ③ 由于 Ｌ ＭＰ法 有很 高 的灵 敏 性 和特 异性 ， 副； Ａ 因此 在实验过程 中很 容 易受 到其他 Ｄ Ａ 的污染 出现 Ｎ 假 阳性 ； Ｌ ＭＰ的扩增产 物不能够 用于 测序 、 隆和 ④ Ａ 克 表达 。（ Ｌ ＭＰ技术不 能在一次反应 中同时检测 两个 ￣ Ａ ） 或多个 病原 体 ， 这也是无 法同 Ｐ Ｒ相媲美 的。 Ｃ
细胞分化为红 系造血 细胞 、 大细胞 和粒 细胞 ， 白细 肥 而
胞介素 一６ Ｉ （Ｌ一６ 可使胚胎干细胞 向红系造 血细胞 分 ）
干细胞研究进展
干细胞研究进展干细胞是一类拥有自我复制和分化能力的细胞，能够分化成各种不同类型的细胞，包括神经细胞、心脏细胞和肌肉细胞等。
干细胞研究一直以来都备受科学界和医学界的关注，因为他们被认为具有巨大的潜力来治疗一系列疾病，并为组织和器官再生提供可能性。
随着科学技术的进步，干细胞研究也在不断取得新的突破和进展。
一、胚胎干细胞研究胚胎干细胞是最早被发现并引起广泛关注的一类干细胞。
它们来源于早期发育阶段的胚胎，并具有极强的分化潜能。
胚胎干细胞可以通过体外培养维持其增殖和自我更新的能力，同时也可以进一步诱导分化为各种细胞类型。
这种细胞具备了重建组织和器官的潜力，因此在再生医学中具有重要的应用前景。
然而，由于胚胎干细胞的获取涉及到胚胎的破坏，引发了伦理和道德上的争议。
这一问题导致了相关研究在一定程度上的限制。
因此，随着时间的推移，科学家们开始寻找其他来源的干细胞以绕开这一争议。
二、诱导多能干细胞的发现在2006年，日本科学家山中伴行发表了一项重大突破性发现，即通过重新编程成熟的体细胞，可以使其重新获得干细胞的特性。
这种干细胞被称为诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）。
通过转录因子的重编程，研究人员可以将皮肤细胞等成熟组织细胞重新转化为具有干细胞特性的细胞。
这一发现极大地推动了干细胞研究的发展。
相比于胚胎干细胞，诱导多能干细胞的获取更加容易和无争议，也为干细胞研究提供了更多的实践和应用空间。
三、干细胞在疾病治疗中的应用干细胞研究的另一个重要方向是其在疾病治疗中的应用。
干细胞可以被诱导分化为多种细胞类型，这为疾病治疗提供了新的途径。
1. 神经系统疾病治疗：干细胞可以分化为神经细胞，因此在治疗中枢神经系统疾病方面具有潜力。
例如，在帕金森病治疗中，干细胞可以被诱导分化为多巴胺神经元，以替代受损的神经元。
2. 心脏病治疗：研究人员已经成功地将干细胞用于心脏病的治疗。
干细胞可以分化为心肌细胞，用于修复受损的心脏组织，促进心脏功能的恢复。
胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展
专题综述 ・ ３・
胚胎干细胞体 外诱 导分化 的研究进展
熊 浩 ，崔 雯
ｄ 历州大 学动物 科学 与技 术学 院 ，江苏
扬州
２ ５ ０） ２０９
摘 要 ：胚 胎 干 细胞 （ｍ ｒｏ ｉ ｔｍ ｃ ｌｓ Ｓ细胞 ） 从 附植 前 胚胎 的 内细胞 团 （ Ｍ 或 附植后 胎 Ｅ ｂ ｙｎ ＣＳ ｅ ｅ １ ，Ｅ 是 Ｉ ） ｃ
细胞 种 类 以及 目前研 究存在 的 问题 和 困难 。
关键 词 ：胚胎 干 细胞 ；诱 导 ；分 化 中图 分 类 号 ：Ｓ １ ． ８４８ 文 献 标 识 码 ：Ａ
文章 编 号 ：１ ０ — ５ ７ ２ １ ） １ ０ ０ — ３ ０ ５ ８ ６ （０ ０ Ｏ— ０ ３ ０
胚胎干细胞 （ｍ ｒ ｏ ｉ ｔ ｍ ｃ ｌ ｓＥ 细胞） Ｅ ｂｙ ｎｃｓｅ ｅ ｌ，Ｓ
细胞 的分化 ［。改变 细胞 的培养 条件 使 Ｅ ３ ］ Ｓ细 胞进
１ 体 外 诱 导 Ｅ 细胞 的 原 理 Ｓ
在 体胚胎 分化 过程 中 ，组 织 发生 和 身体构 造
行 定 向分化 的基本 策略 有三 种 ：一是 向培 养基 中 添加 生长 因子和 化 学诱 导剂等 ； 是将 Ｅ 二 Ｓ细胞 与 其它 细胞 一起进 行 培养 ；三 是将细 胞接 种在 适 当
外源 性基 因也可 使 Ｅ ｓ细胞 发生 定 向分化 。 若把在
导法 、 细胞 因子诱 导法 和外源 基 因诱导法 。 ２１ 化学试 剂 诱导 ． 一些 化 学试剂 加 入到 Ｅ Ｓ细
然后 再贴壁 培养 ，并于不 同的培养 阶段 添加 不 同 种 类和 不 同浓度 的化 学物 质 、条 件 培养 基或 细胞 因子等 诱 导条件 ， 直接 促进 Ｅ 胞 定 向分化 为某 Ｓ细
干细胞诱导分化生殖细胞的研究进展
Ｈ ｗ ｖ ｒ ｌ ｉ ｌ ｕ ｅ ｏ Ｓ ｓ ｆｃ ｓ ｔｅ ｉ ｍ ｏ ｇｅ ｌｒｊｃ ｏ 。ｏ ｃ ｇ ｎｃ ｙ ａ ｄ ｅ ｉ ｌ ｃ ｎ ｏ ｅ ｅ ｏ ｅ ｅ ，ｃｉ ｃ ｓ ｆ Ｅ Ｃ ａ ｅ ｈ ｍｎ ｎ ｌ ｉａ ｅｅ ｔ ｎ ｎ ｏ ｅ ｉｉ ｎ ｔ ｃ ｏ ｔ ｖ ｍｉ ｎ ａ ｏ ｉ ｔ ｈ ａ ｒ ｓ
垦 生 殖健鏖 ｉ划生 ２１年１月第３ 卷 期 ＪｎＲｐｄ ｅｔＦ ａ，ｏ ｍｅ２１ Ｖ１ ０Ｎ． 十 育 ０１ １ ０ 第６ ｔ ｅｏＨａ ／ ｍ ｌ Ｎｖ ｂ １ ｏ３，ｏ Ｉ ｒ ｌ ａ Ｐ ｎ ｅ ｒ０ ， ． ｈ ６
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４ ７・ ６
综 述・
干细胞诱 导分化生殖细胞 的研 究进展
Ｆｒｔ ｆ ｌ ｔ ｏｐｔｌｆＸｉ ａｇＭｅ ｉ ｌ ｎ ｅｓｙ ｒｍｑ ３ ０ ４ Ｃ ｉａ ｉ ｆ ｉｅ Ｈ ｓｉ ｉ ｄ ａ ｉ ｒｔ，Ｕｕ ｉ ０５ ， ｈｎ ｓ Ａｉ ａ ｄ ａｏ ｎ ｃ Ｕｖ ｉ ８ 【 ｓ ａ ｔ Ｓｅ ｅｌ ｅｈｂｔ ｎｑ ｅｐｏｅｔ ｓ ｉｃ ｄｎ ｅｃｐ ｃｙｏ ｌｒｎｗ ａ ｄｄｆ ｒｎｉ ｅ Ａｂｔ ｃ 】 ｔ ｃｌ ｘｉｉ ｕ ｉ ｒｐｒｅ，ｎｌ ｉｇｔ ａ ａｉ ｆ ｅ － ｅ ｎ ｉｅｅｔ ｔ ｒ ｍ ｓ ｕ ｉ ｕ ｈ ｔ ｓｆｅ ａ
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诱导多能干细胞研究进展概述
诱导多能干细胞研究进展概述多能干细胞研究是现代生物学领域的重要研究方向之一、多能干细胞，又被称为胚胎干细胞（Embryonic Stem Cells, ESCs），是具有自我更新能力和向所有体细胞类型分化潜能的细胞。
细胞分化是胚胎发育和成体维持的基础，而多能干细胞研究的目标就是揭示胚胎发育和分化的机制，并为再生医学和组织工程等应用提供理论基础和实际应用。
早在1981年，美国生理学家埃文斯托夫·马丁尼斯-迈力斯在小鼠中首次成功分离出多能干细胞，标志着多能干细胞研究的开端。
之后的几十年里，研究人员不断改进和发展细胞培养技术，以提高细胞培养的成功率和稳定性。
这些努力逐渐使得多能干细胞的分离和培养成为可能，并使得多能干细胞的研究进入了实验室阶段。
随着诱导多能干细胞技术的不断完善，越来越多的研究在多能干细胞领域取得了重要进展。
研究人员通过诱导多能干细胞技术，成功地实现了多能干细胞的定向分化，即将多能干细胞分化为各种特定功能的细胞类型，如心脏细胞、神经细胞和肝细胞等。
这些研究为再生医学、组织修复和疾病治疗等领域的应用提供了实质性的支持。
此外，诱导多能干细胞技术还为疾病的研究和治疗提供了新的途径。
利用诱导多能干细胞技术，研究人员可以将病人的成体细胞重编程为多能干细胞，再通过定向分化得到疾病相关的细胞。
这样一来，研究人员可以在实验室中研究疾病的发生机制，并寻找相应的治疗方法。
这使得疾病研究和治疗进入了一个全新的阶段。
总的来说，诱导多能干细胞研究在过去几十年里取得了巨大的进展。
该领域的研究不仅为我们揭示了胚胎发育和细胞分化的机制，也为再生医学、组织工程和疾病研究等领域提供了重要的理论和实践基础。
随着技术的不断发展和突破，诱导多能干细胞研究将继续为生命科学的进展和人类健康的改善做出重要贡献。
胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展
培养 条 件 下 ． Ｓ细胞 是 可 以分化 为 造 血细 胞 ， Ｅ 但是 这 种 条 件 中需 有 胎牛 血 清 ． 在此 血 清 中含 有一 些 因子 。 Ｅ 对 Ｓ细 胞 向造 血细 胞分 化 起着 重要 作 用 。如果 没 有 胎牛 血清 ， Ｓ细胞 向造 Ｅ 血细 胞分 化 的效 率极 低 。 有学 者 发现 Ｅ Ｓ细 胞用 Ｂ 巯 基 乙醇 一 （－ ） ３ ＭＥ 等药 物处理 ， 发育 成拟 胚 体（ Ｂ 。然后 ， 可 Ｅ） 用胰 蛋 白酶
（ 椹 胚 、 胚 ） 原 始 生 殖 细 胞 （ ｉ ｏ ｉ ｅ ｅ ，Ｇ Ｓ 桑 囊 或 ｐ ｍ ｒ ａ ｇｒ ｃｌ Ｐ Ｃ ） ｒ ｄｌ ｍ ｌ 分 离 出来 的 能在体 外 永久 培养 的 、 有 多方 向分 化 潜 能 和种 具 系嵌合 能力 的细胞 系 。 目前有 关 Ｅ Ｓ细胞 特 征 的研 究 主要 来 源 于小 鼠的实 验 。 小鼠 Ｅ 细胞 系的特征包括 ：① 能大量繁殖并保持未分 ｓ 化 状态 ； 在 一定 条 件下 具 有 向三个 胚 层 组织 和 细胞 分 化 的 ② 全 能 性 ； 能 够形 成 嵌 合 体 动 物 ， Ｅ ， ③ 即 Ｓ 细胞 具 有 种 系 传 递 功 能 ； 易于 进行 基 因改 造操 作 。 ④
新 近 大 部 分 胚 胎 干细 胞 诱 导 类 型 分 化 的 实 验都 集 中在 小 鼠实验 中 ． 鼠 胚胎 干细 胞 在体 外 分 化 的细胞 类 型 或结 构 小
主要 ｓ提 Ｓ细胞 体 外分 化 产 生红 细胞 、 细胞 和 淋 髓
维普资讯
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研究进展 ・
２７ ６第 卷 １ ０年 月 ４第８ ０ 期
胚 胎 干细 胞 体 外 诱 导 分 化 的研 究进 展
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胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究进展（姓名：李翔单位：宁夏师范学院化学与化学工程学院11级科学教育班）摘要：胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团分离培养出来的具有发育全能性或多能性的干细胞,具有多向分化潜能和自我更新的特性。
胚胎干细胞可以定向诱导分化生产组织和细胞,可为细胞移植提供无免疫原性的材料,为难以治愈的疾病的细胞移植治疗提供可能。
本文介绍了胚胎干细胞的诱导分化方法和应用。
关键词：胚胎干细胞;定向诱导分化;分化潜能;自我更新胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES 细胞)是从早期胚胎( 桑椹胚、囊胚) 或原始生殖细胞(primordial germ cell, PGCS)分离出来的能在体外永久培养的、具有多方向分化潜能和种系嵌合能力的细胞系。
ES 细胞具有多向分化潜能, 可分化形成外胚层、中胚层和内胚层细胞的谱系干细胞, 再成长为不同的神经、造血、肌肉,骨骼等各种细胞基于其特性,目前普遍认为, ES细胞对体外研究动物和人胚胎的发生发育, 基因表达调控, 药物的筛选和致畸实验及作为组织细胞移植治疗, 克隆治疗和基因治疗的细胞源及产生克隆和转基因动物等领域将产生重要的影响。
1998 年,T homson和Gearhart2 个研究组分别从人ICM和PGCS建立了人类ES细胞系, 在国际上引起了轰动。
Science 杂志将人类ES 细胞研究成果评为1999 年世界十大科技进展之首, 美国《时代》周刊将其列为20世纪末世界十大科技成就之首, 并认为ES 细胞和人类基因组将同时成为新世纪最具发展和应用前景的领域, 由此掀起了ES细胞研究的高潮。
1体外诱导 ES 细胞的原理在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造的形成具有时空顺序性和相互诱导性。
在个体发育过程中，细胞分化是程序控制的有序有规律过程，程序的运行结果表现为不同发育阶段、不同组织部位的细胞表现出不同的形态、不同的生长方式和不同的生理功能。
从分子水平上来看，这一结果取决于细胞在基因表达上的时空差异。
这种基因表达差异除由细胞内在发育程序决定外，还受细胞外环境影响和调控，且有时这种外部控制条件或环境对形成特定细胞有着决定性作用。
ES 细胞体外定向诱导分化的原理，就是选择适当的诱导剂和诱导模式，通过诱导物与细胞表面受体结合或使细胞发生轻度可逆性损伤等，使被诱导细胞按预定的细胞类型方向分化[2]，然后将这些定向分化的细胞进行分离和培养传代，从而得到人们所需要的细胞类型。
2体外诱导 ES 细胞的方法体外诱导ES 细胞的常用方法是将ES 细胞进行悬浮培养或悬滴培养，使其形成类胚体(Embry-oid Bodies,EBs)，该结构的分化过程与体内胚胎的早期发育过程相似。
首先将EBs 消化成单细胞，然后再贴壁培养，并于不同的培养阶段添加不同种类和不同浓度的化学物质、条件培养基或细胞因子等诱导条件，直接促进ES 细胞定向分化为某种特殊类型的细胞；或通过改变培养条件对某些类型的细胞分化起抑制作用，从而高效诱导目的细胞的分化。
改变细胞的培养条件使ES细胞进行定向分化的基本策略有三种：一是向培养基中添加生长因子和化学诱导剂等；二是将ES 细胞与其它细胞一起进行培养；三是将细胞接种在适当的底物上，以促使细胞中某些特定基因的表达上调或下降，从而引发细胞沿着某一特定谱系进行分化。
体外诱导胚胎干细胞的物质有化学试剂诱导法、细胞因子诱导法和外源基因诱导法。
2.1化学试剂诱导法一些化学试剂加入到ES 细胞中与其共培养后，会使得ES 细胞发生定向分化，因此有时用相关化学试剂对ES细胞进行定向诱导分化。
例如视黄酸(又称维甲酸，RA)就是一种强烈的分化诱导剂。
20纪初，人们仅仅认识到维生素A(V A)是一种重要的营养物质，特别在视循环中发挥着重要生理作用，妊娠期V A缺乏有可能导致胎儿畸形。
后来发现在胚胎发育过程中，RA沿胚轴形成浓度梯度，影响胚胎背腹部和四肢的形成，从而推测其对胚胎发育起重要的激素样调节作用。
维甲酸是体外诱导ES细胞定向分化的常用因子。
一般认为维甲酸进入细胞后，首先与细胞质中CRABP(cellular RA binding protein)形成复合物，然后复合物进入核内，维甲酸与染色质上的受体结合，从而调控一系列基因的表达，使细胞的表型发生转变。
而Forester 的实验结果表明，维甲酸不但能拮抗DIA 对ES 细胞的分化抑制作用(这提示有共同作用环节存在的可能)，而且也可影响分化程序和方向的选择。
除了视黄酸之外，还有维生素C(VC)、维生素K3(VK3)、过氧化氢、β- 磷酸甘油、地塞米松和2，5- 羟基维生素D3，二甲基亚砜（DMSO）等化学试剂也能诱导胚胎干细胞定向分化成为一些特种类型细胞。
2.2细胞因子诱导法细胞因子能显著改变ES细胞的发育途径。
ES-D3 细胞与骨髓基质细胞RPO.10 共培养时，单独添加重组白细胞介素-6(rIL-6)可诱导ES细胞分化为F4/80+星形巨噬细胞和成纤维细胞，不形成Thy-1+、B-220+、Joro75+淋巴祖细胞。
SCF、TPO和胚胎条件培养液协同作用可诱导ESs细胞分化为造血干/ 祖细胞；神经生长因子(NGF)可促进EBs 中神经元样细胞的形成，成纤维细胞生长因子-2(FGF2)能使ES细胞分化的神经祖细胞进一步分化为功能性神经元；FGF2、EGF、血小板源生长因子(PDGF)与神经前体细胞条件培养基可协同诱导ES 细胞分化为寡树突胶质细胞；巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)可抑制造血细胞发育和诱导巨噬细胞分化；粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)则使ES细胞分化为树状细胞(DC)，且经IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和ant-CD40mAb(LPS)刺激后可转化为成熟的树状细胞。
2.3外源基因诱导 ES 细胞的定向分化法导入外源性基因也可使ES 细胞发生定向分化。
若把在特定发育阶段中起决定作用的基因导入ES 细胞基因组中，将会使细胞准确地分化为某一特定类型的细胞。
但在应用这一方法时，首先必须确定决定细胞向不同方向分化的关键基因，其次还要保证在适当的时候将该基因导入ES 细胞基因组的正确位置上。
目前已经有报道表明用这种方法可使ES 细胞定向分化为神经细胞、肌细胞、胰腺细胞等。
2.4转基因诱导法转基因诱导法主要是利用基因转染技术将某些信号转导成分的基因转入胚胎干细胞中，使某个促分化基因在胚胎干细胞中过表达，从而有效地诱导胚胎干细胞发生特异性分化。
沈干等将外源TGF - B基因转染小鼠胚胎干细胞，杂交实验证实转化生长因子B(TGF - B基因)整合到胚胎干细胞基因组，并表达外源TGF- B的mRNA，然后以悬滴法培养胚胎干细胞，7d后发现胚胎干细胞被诱导为具有内皮细胞特征的细胞，作者同时发现，外源rhTGF- B在培养基中对胚胎干细胞分化有明显促进作用，这种方法诱导胚胎干细胞分化的效率高，得到的分化细胞的纯度也较高，具有应用前景。
3胚胎干细胞的定向诱导分化研究对小鼠胚胎干细胞的研究证明，胚胎干细胞可在体外诱导分化为起源于外胚层的神经细胞、上皮细胞和表皮样干细胞，起源于中胚层的心肌细胞、造血细胞和内皮细胞，起源于内胚层的肝细胞和胰岛细胞等。
目前胚胎干细胞的定向分化研究主要关注于培养方法的改进和分化诱导剂的针对性选择。
3.1由胚胎干细胞向神经细胞的诱导分化人胚胎干细胞可以在体外诱导生成神经干细胞、成熟神经元和神经胶质细胞, 且易于在体外培养和扩增，能无限增殖。
因此，人胚胎干细胞是将来神经系统细胞替代治疗的最佳“种子”细胞。
目前, 各种诱导生成神经细胞的方法层出不穷, 但相关实验表明失去了分化潜能的终末细胞移植入受体后难以成功整合到受体脑组织,并会很快死亡。
因而诱导分化得到的神经干细胞移植仍然是治疗的重要途径。
冯树梅等采用无血清、低密度快速诱导胚胎干细胞向神经前体细胞分化的方法,在短期内得到了大量可用于移植的细胞。
免疫细胞化学和RT- PCR分析表明，所得到的细胞为高纯度的神经前体细胞, 其分化率接近100%。
但高纯度前体细胞仍有致瘤性，可能该细胞的发育学地位更加接近于胚胎干细胞, 对其发育学表型的进一步探讨，将为胚胎干细胞来源的神经前体细胞的研究奠定基础。
最近,李晓丰等利用采用序贯诱导法，模仿体内胚胎细胞的生长、分化环境，按胚胎干细胞生长阶段逐步改变血清浓度和培养液成分，逐步添加生长因子、神经营养因子等，最终诱导胚胎干细胞高比率定向分化为神经元样细胞。
3.2向造血细胞的定向分化造血细胞包括造血干细胞、造血祖细胞、谱系定型前体细胞以及各种成熟血细胞。
自20世纪80年代初小鼠的胚胎干细胞建立细胞系以来，人们就开始了从胚胎干细胞向造血系统分化的研究。
习佳飞等利用形成拟胚体的方法诱导人胚胎干细胞分化为造血干/祖细胞和更早期的血液血管干细胞。
同时以脐带血来源的造血干细胞作为起始细胞高效特异地诱导其向红系祖细胞分化, 获得了在体外能够大规模扩增的红系祖细胞，并最终用24周胎龄的人胎肝基质细胞与红系祖细胞共培养实现了红系祖细胞的高效脱核生成成熟红细胞，为人胚胎干细胞体外诱导分化为成熟红细胞奠定了实验基础。
人胚胎干细胞体外分化为造血细胞不仅具有应用前景，而且对于研究造血发育研究具有重要的意义。
3.3向心肌细胞定向分化自从Doestschman等发现胚胎干细胞在一定条件下可以分化形成心肌细胞后,胚胎干细胞便成为研究心脏基因表达和功能的有用工具。
Kehat等在体外将人的胚胎干细胞成功诱导分化成心肌细胞，这些细胞中有8.1%可自发收缩，收缩时间最长可持续5周。
Chen 的研究结果显示, 给心肌梗死鼠注入胚胎干细胞不仅可使病鼠的存活率提高，而且注入的干细胞可以分化成心肌细胞，但是分化作用不具有选择性。
3.4向内皮细胞的定向分化内皮细胞对组织修复、再生和组织工程移植物内皮化或再血管化有重要作用, 但是成熟内皮细胞体外增殖能力有限，很难满足再血管化的需要。
张斌等应用简单贴壁培养法, 单纯采用血管内皮生长因子(VEGF)诱导，使胚胎干细胞贴壁分化、生长，通过传代、换液去除非贴壁细胞，得到较纯化的内皮样细胞。
H irashmi a等的研究发现诱导胚胎干细胞生成的内皮细胞比例与VEGF 梯度浓度成正相关，表明VEGF对血管内皮发育呈剂量依赖性。
3.5向上皮细胞的定向分化胚胎干细胞可被直接诱导分化为视网膜细胞和视网膜色素上皮, 诱导分化的视网膜细胞移植后能整合进视网膜，并表达光感受器细胞标记。
2008年2月日本京都大学的Takahashi等在体外成功诱导人胚胎干细胞高效分化为多角形视网膜色素上皮，同时向培养液中添加成纤维细胞生长因子( bFGF)、牛磺酸和维生素A 酸，产生了大量的视锥细胞和视杆细胞。