维生素E检测方法研究
维生素E含量测定方法
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
含量测定方法名称：维生素E的测定—气相色谱法。
应用范围：该方法采用气相法测定维生素E的含量。
该方法适用维生素E。
方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生素E和内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。
试剂：正己烷仪器设备：仪器气相色谱仪色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅氧烷柱温：265℃检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL载气：氮气，流速5 mL/min试样制备：1、称取供试品精密称取该品20mg，放置在棕色具有塞子的瓶中。
2、对照品溶液的制备精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。
3、内标溶液的制备4、供试品溶液的制备该供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。
5、校正因子的测定另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。
“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
实验六 维生素E的含量测定-液相色谱
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。
2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。
二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。
2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。
(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。
(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。
(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。
3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。
(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。
(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。
(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。
(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。
(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。
4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。
但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。
这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。
在反向HPLC中常用的键合相有十八烷基硅烷(Ｃ18）、辛基硅烷(Ｃ8)氰基硅烷、氨基硅烷等。
维生素e的含量测定方法
维生素e的含量测定方法维生素E的含量测定方法维生素E是一种重要的脂溶性维生素，对人体的正常生理功能发挥着重要作用。
因此，了解维生素E的含量十分重要。
以下将介绍维生素E含量测定的一般步骤和方法。
1. 原理测定维生素E的含量一般采用紫外-可见分光光度法或高效液相色谱法。
紫外-可见分光光度法利用维生素E在特定波长下的吸光度来测定其含量。
高效液相色谱法则是通过将样品在色谱柱上分离，再利用检测器检测峰面积或峰高来确定维生素E的含量。
2. 实验步骤以下是测定维生素E含量的一般步骤：步骤一：样品的制备首先，将待测样品如食品、保健品等进行充分打碎或细磨，以确保样品中的维生素E能充分释放。
然后，取一定量的样品并溶解或提取维生素E。
步骤二：预处理如果样品中存在其他干扰物质，需要进行预处理。
预处理的方法包括提取、分离、净化等。
例如，可以采用萃取方法将样品中的维生素E提取至有机溶剂中，以去除其他干扰物质。
步骤三：测定方法选择根据实验条件和要求，选择合适的测定方法。
常用的方法有紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法。
这两种方法各有优缺点，需要根据实际情况进行选择。
步骤四：仪器准备和参数设置根据选择的测定方法，准备好相应的仪器设备，如紫外-可见分光光度计或高效液相色谱仪，并进行相关参数的设置。
步骤五：标准曲线的绘制为了准确测定维生素E的含量，需要首先绘制标准曲线。
标准曲线可以通过制备一系列维生素E浓度逐渐升高的标准溶液，并测定其吸光度或峰面积/峰高，然后绘制曲线。
步骤六：测定样品取一定量的样品溶液，按照所选择的测定方法进行测定。
根据标准曲线，通过测定吸光度或峰面积/峰高，计算出样品中维生素E的含量。
步骤七：数据分析根据测定结果，可以计算出样品中维生素E的含量。
同时，还可以进行结果的统计分析，如平均值、标准差等。
步骤八：结果的解释及验证对于测定结果，需要进行合理解释，并与其他数据进行对比，以验证结果的准确性和可靠性。
3. 结论通过上述步骤，可以测定出样品中维生素E的含量。
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量(2015)
高效液相色谱法测定VE胶囊中α-VE的含量一、目的要求1．了解高效液相色谱仪的基本构造和工作原理。
2．掌握高效液相色谱仪的正确操作方法。
3．学习维生素E的定量分析方法。
二、实验原理色谱法的分离原理是：溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号被检测。
高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)。
按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。
液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。
RPC一般用非极性固定相（如C18、C8），在现代液相色谱中应用最为广泛，约占整个HPLC应用的80%左右。
维生素E又称生育酚，目前已经确认的有8种异构体，αβγδ生育酚和αβγδ生育三烯酚，天然存在的α-生育酚的维生素E活性最强。
α-生育酚醋酸酯是α-生育酚的酯化产品，常用在维生素胶囊中，具有很强的氧化稳定性。
样品以乙醇溶解，采用RPC法，以乙醇为流动相，C18色谱柱分离，紫外检测器284 nm 波长检测，外标法定量，测定维生素E胶囊中α-生育酚醋酸酯的含量。
三、仪器和试剂维生素E醋酸酯标准品、色谱纯乙醇、分析纯四氢呋喃、无水乙醇。
HPLC高效液相色谱仪（日本岛津，LC-10A 泵，SPD-20A 紫外双波长检测器）、KQ5002B型超声波清洗器、、紫外可见分光光度计。
四、实验条件色谱柱为Eclipse XDB-C18柱( 150 mm × 4. 6 mm，5 μm i. d. ) ; 流动相为乙醇，流速0.5 mL /min; 进样量20 μL; UV 检测器，检测波长为284 nm(通过紫外分光光度计扫描确定)。
保健食品中维生素E类成分的检测与质量评价研究
保健食品中维生素E类成分的检测与质量评价研究发布时间：2022-11-10T03:25:11.326Z 来源：《科学与技术》2022年第14期作者：刘蕊[导读] 由于维生素E本身存在着较为复杂的结构，并且存在多种同系物刘蕊谱尼测试科技（天津）有限公司 300000摘要：由于维生素E本身存在着较为复杂的结构，并且存在多种同系物，所以，在进行该成分的测定时，存在着多种方法，例如液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱法以及气相色谱法等等。
本文首先研究了采用高效液相色谱法对保健食品中维生素E类成分的进行检测的实验，包括实验材料、实验试剂、实验设备以及具体实验方法，其次对此次维生素E类成分检测试验的结果进行了分析与评价。
关键词：保健食品；维生素E类成分；检测；质量评价引言：不同个体在饮食结构上的差异将会致使机体受到较为直接的影响，不合理的饮食结构很可能会引发一些疾病。
基于此，越来越多的人选择食用保健食品，以此延缓自身疾病的进一步发展或改善身体健康。
作为一种具备较强抗氧化能力、延缓衰老能力、提升人体免疫能力等多种功能的物质，近些年来，维生素E类物质已经成为保健食品中较为常见的添加剂，对保健食品中此类物质的具体含量进行测定有着重要意义。
1保健食品中维生素E类成分的检测实验1.1实验材料与实验试剂本次实验的检测样品共有两种，分别是胶原蛋白天然维生素E片和葡萄籽维生素E软胶囊。
本次试验所使用到的实验试剂包含多种，每一种试剂的规格均选择分析纯或者是以上的类型，所使用到的水均为超纯水。
第一，α-淀粉酶，该试剂中的酶活力至少超过1.5U/mg；第二，无水硫酸钠；第三，石油醚，其沸腾温度区间为30°C～60°C；第四，强氧化钾水溶液；第五，维生素C的乙醇溶液；第六，无水乙醇；第七，100mg的对照品DL-α-维生素E生育酚。
1.2实验所用仪器设备第一，本次保健食品中维生素E类成分的检测实验选取的试验方法为高效液相色谱法，所以，实验中必不可少的一种仪器即为高效液相色谱仪，同时配有相应的DAD检测器；第二，紫外分光光度计；第三，超纯水器；第四，氮吹仪；第五，恒温磁力搅拌器；第六，旋转蒸发器；第七，恒温培养箱；第八，电子天平。
维生素E(VE)生育酚检测
维生素E（VE）/生育酚检测
维生素E（Vitamin E, VE）是一种脂溶性维生素，是最主要的抗氧化剂之一，能保护人体内不饱和脂肪酸免受自由基的破坏。
维生素E包括生育酚和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，其中，α-生育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)、生化法，可高效、精准的检测维生素E的含量变化。
此外，我们还提供其他维生素检测服务以及维生素检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。
样品制备
1）称取粉末样品20 mg；
2）加入10 mL盐酸溶液，震荡摇匀；
3）加入10 mL水，震荡摇匀；
4）将溶液定容到200 mL；
5）用0.45 μm的微孔滤膜过滤；
6）用HPLC检测。
HPLC和LC-MS测定维生素E样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 维生素E含量信息。
维生素e实验报告
维生素e实验报告维生素E实验报告维生素E是一种重要的脂溶性维生素，对人体的健康具有重要的影响。
为了深入了解维生素E的作用和效果，我们进行了一项实验，旨在探究维生素E对人体的益处以及适宜的摄入量。
实验方法：我们选取了40名参与者，将其分为两组，每组20人。
第一组作为对照组，不进行任何干预；第二组则每天补充200毫克的维生素E。
实验周期为8周，每两周进行一次检测。
实验结果：在实验结束后，我们对两组参与者进行了各项指标的比较和分析。
1. 抗氧化能力：维生素E作为一种有效的抗氧化剂，可以帮助人体清除自由基，减少氧化损伤。
实验结果显示，补充维生素E的第二组参与者的抗氧化能力明显提高，与对照组相比，其血液中的抗氧化指标明显升高。
2. 心血管健康：维生素E对心血管健康的影响备受关注。
实验结果显示，补充维生素E的参与者的血液循环状况明显改善，血液中的胆固醇水平下降，血管的弹性增加。
这些指标的改善表明维生素E的摄入有助于维持心血管系统的健康。
3. 免疫功能：维生素E对免疫系统的调节作用也是实验的重点之一。
实验结果显示，补充维生素E的参与者的免疫功能明显增强，白细胞计数和免疫球蛋白水平均有所上升。
这表明维生素E的摄入可以提高人体的免疫力，增强抵抗力。
4. 眼睛健康：维生素E对眼睛健康的影响也备受关注。
实验结果显示，补充维生素E的参与者的眼睛健康状况明显改善，眼睛疲劳感减轻，视力明显提高。
这表明维生素E的摄入对于保护眼睛健康具有积极的作用。
综合分析：通过对实验结果的综合分析，我们可以得出以下结论：1. 维生素E的摄入可以提高人体的抗氧化能力，减少氧化损伤。
2. 维生素E对心血管健康有积极的影响，可以改善血液循环和降低胆固醇水平。
3. 维生素E的摄入可以增强人体的免疫功能，提高抵抗力。
4. 维生素E有助于保护眼睛健康，减少眼睛疲劳感和改善视力。
适宜摄入量：根据实验结果以及相关研究，我们推荐成年人每天摄入15毫克的维生素E。
实验报告-高效液相色谱法测定VE含量
实验四高效液相色谱法测定VE含量1 实验目的1.1 了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2 了解高效液相色谱仪测定VE的原理。
2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
VE（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。
有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。
VE通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。
3实验器材3.1 实验样品VE样品溶液3.2 实验试剂浓度为50μg/ml的VE标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5μl；柱温：30℃。
5 实验结果与讨论5.1 实验结果本次实验采用的是单点法测定。
实验结果见表1。
表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量进样量保留时间峰面积标样5μl 3.59min 42217待测样品5μl 3.59min 17369 样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5μl×50μg/mL×17369/（5μl×42217）=20.57μg/mL5.2 实验讨论本次实验中，测定标样溶液VE含量时，在指定的保留时间内并未出峰。
讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中VE氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。
本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定VE的原理，故结合前组同学对VE含量的测定数据进行讨论与分析。
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中αVE的含量
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量一、实验目的本实验旨在采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素E胶囊中α-生育酚（α-VE）的含量，为药品质量控制提供依据。
二、实验原理高效液相色谱法是一种分离和分析技术，利用色谱柱将样品中的各组分进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行检测和定量。
本实验采用C18色谱柱，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测维生素E。
维生素E在流动相中的分配系数不同，因此各组分在色谱柱上的保留时间也不同，从而实现分离。
三、实验步骤1.试剂与仪器准备：甲醇（色谱纯）、维生素E标准品、维生素E胶囊样品、C18色谱柱、荧光检测器、高效液相色谱仪。
2.标准溶液制备：精确称取适量维生素E标准品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的标准溶液。
3.样品溶液制备：取适量维生素E胶囊样品，破碎后混合均匀，精确称取适量样品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的样品溶液。
4.色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（90:10，v/v），流速为1.0mL/min，荧光检测器激发波长为295nm，发射波长为330nm。
柱温为室温。
5.标准曲线绘制：分别精密吸取不同浓度的标准溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
6.样品测定：精密吸取样品溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
根据标准曲线计算样品中α-VE的含量。
7.数据处理与分析：将实验数据录入表格，进行数据处理与分析，得出实验结果。
四、实验结果与讨论1.实验结果：通过高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，得到如下数据：标准曲线方程：y = ax + b相关系数：r样品中α-VE的含量：X μg/粒回收率：Y%相对标准偏差（RSD）：Z%2.实验讨论：本实验采用高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，方法简便、准确、重现性好。
维生素E的含量检验方法
维生素E的含量检验方法一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。
二、依据：GB/T5009.82-2003三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。
1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
1.2.2 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾人1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
1.3 无水硫酸钠。
1.4 甲醇：重蒸后使用。
1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。
1.7 氢氧化钾溶液(1+1),1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。
1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。
用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。
临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。
1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
维生素药物分析 维生素E的含量测定
维生素E的含量测定
校正因子的计算
校正因子 f AS / mS AR / mR
式中，AS：为内标物的峰面积 AR：为对照品的峰面积
mS：为加入内标物的质量 mR：为加入对照品的质量
维生素E的含量测定
含量的计算
含量
mi
f
Ai AS / mS
式中，Ai：为供试品峰面积 mi：为供试品的含量
维生素E的含量测定
标示量的计算
标示量%
（mi
/Vi）1000 10 1/1000 取样量 标示量
平均片量
100
%
式中，平均片量、标示量均以mg为单位 mi/Vi：为1μL供试品溶液中所含维生素E的质量，μg
10：为供试品溶液的总体积，mL 1/1000：为将μg换算成mg
1000：为将1μL中的质量换算为1mL中的质量，μg
维生素E的含量测定——内标法
维生素E的含量测定
维生素E
维生素E是有8种形式的脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂。维生素E包括生育酚 和三烯生育酚两类共8种化合物，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，α-生 育酚是自然界中分布最广泛含量最丰富活性最高的维生素E形式。
维生素E的含量测定
测定原理
03
样品的测定
测定方法
取本品20粒精密称定，清出内容物混合均匀。囊壳以乙醚清洗干净，置通 风处使溶剂自然挥尽，再精密称定囊壳质量，求得平均每粒质量，精密称取内 容物适量（约相当于维生素E 20mg），置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标 溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取取1῀3μL注入气相色谱仪，计算含量。
供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸 收检测器于波长254nm处检测维生素E（C31H52O3）和内标正三十二烷的吸收 值，计算出其含量。
采用HPLC法测定维生素EC片中维生素E的含量
采用HPLC法测定维生素EC片中维生素E的含量维生素EC片用于预防、治疗维生素E和维生素C缺乏引起的疾病。
在处方中，维生素C参与体内抗体、胶原形成和组织修补，以及碳水化合物、脂肪、蛋白质的代谢，保持血管完整性；维生素E亦参与体内一些代谢反应，能对抗自由基的过氧化作用，保护皮肤以及防止流产等作用。
维生素E与维生素C合用可发挥协同抗氧化作用。
维生素E又称生育酚，是一种脂溶性物质。
目前其含量测定主要分析方法有氧化还原滴定（铈量法）、GC法[1]、UV法[2]、化学发光抑制法[3]、荧光法[4]和HPLC法[5]等。
在这些方法中，化学发光法仪器要求特殊，荧光法和UV法容易受到辅料和处方中其它成分的干扰应用较少，GC 法被《中国药典》2010年版采用作为维生素E原料及相关制剂含量测定的主要方法，但试验表明其与维生素C的分离度较差，并不适合用于维生素EC片复方制剂的含量测定。
氧化还原滴定也曾作为维生素E含量测定的常规方法，但因其存在处理繁琐、耗时、结果重现性差等问题而必然被其它方法所取代。
本文作者采用反相高效液相法进行了维生素E的含量测定的相关研究。
1 仪器与试药1.1 实验仪器Agilent 1260（VWD）高效液相色谱仪（安捷伦科技）；TG332A微量分析天平（湘仪仪器厂）；METTLERAB-204E分析天平（梅特勒公司）。
1.2 试药维生素E对照品（中国药品生物制品检定所）、维生素EC片（西南药业股份有限公司）；甲醇（色谱纯，上海国药试剂集团）、无水甲醇（分析纯，重庆川东化工厂）。
2 方法2.1 检测波长的选择取维生素E对照品适量，加无水甲醇制成对照溶液，置紫外分光光度计中进行全波长扫面，结果显示，在波长为285nm处有最大吸收，且该区间吸收峰平缓，溶剂干扰小，因此选择285nm作为检测波长。
2.2 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18柱（150×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇；流速：1.0mL·min-1；检测波长：285nm；柱温40℃；进样体积10μl；理论塔板数按维生素E峰计算应不低于3000。
维生素E的含量测定(GC)
维生素E的含量测定（GC）一、目的要求1、掌握GC内标法测定药物含量的方法和计算。
2、熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法。
二、主要仪器与药品岛津GC－14B气相色谱仪，DB-5毛细管柱；维生素E对照品、维生素E样品、正三十二烷、正己烷。
三、实验方法色谱条件与系统适应性实验：柱温为295℃，进样室温度300℃，检测器温度310℃；理论板数按维生素E峰计算应不低于5000，维生素E峰与内标物质峰的分离度应大于2，拖尾因子0.95～1.05。
校正因子测定：取三十二烷0.0025g，加正己烷溶解并稀释成每1ml中含1.0mg的溶液，摇匀，作为内标溶液。
另取维生素E对照品0.0253g，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（维生素E对照品溶液浓度2.53mg/ml），取1µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算校正因子。
样品测定：取维生素E0.0236g，置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞，振摇使溶解（维生素E样品溶液浓度2.36mg/ml），取1µL注入气相色谱仪，记录色谱图及各参数，重复进样3次，计算含量。
计算方法：校正因子（f）=(A内标×C对照) /(A对照×C内标)C样品＝f×C内标×A样品/ A内标Ve含量＝C样品/C样品配制浓度×100％RSD=SD/平均值A—峰面积，C—浓度四、实验结果与讨论溶剂定位：t＝1.745min；内标定位：9.420min；维生素E定位：t＝9.765min。
保留时间（min）峰面积R 理论板数拖尾因子① 9.432 22618.1 7.273 58649 0.9759.823 58987.2 2.391 51721 0.774对照品 ② 9.415 4683.5 2.339 62936 1.0459.782 11103.1 2.339 56726 0.962③ 9.415 2947.4 83.508 60627 1.1279.790 6712.6 2.309 51371 0.941① 9.432 5146.5 2.306 65612 1.0099.790 11280.4 2.306 56823 1.033样品 ② 9.423 1773.6 83.598 63048 1.0279.782 3951.1 2.328 60850 1.032③ 9.446 9574.9 2.225 60949 0.9839.760 21759.5 2.225 53188 1.006计算结果：对照品①f＝0.970②f=1.067③f=1.111平均f＝1.049，RSD=6.88％样品①Ve含量＝97.4％②Ve含量＝99.0％③Ve含量＝101.0％Ve平均含量＝99.1％，RSD=1.82％Ve含量符合规定（90.0％～110.0％）。
维生素E的测定
维生素E的测定(一)原理试样中的维生素E经皂化提取处理后，将其从不行皂化部分提取至有机溶剂中。
用液相色谱C18反相柱分别维生素E，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。
(二)仪器与主要试剂高效液相色谱仪带紫外分光检测器；紫外分光光度计；旋转蒸发器；高速离心机。
不含有过氧化物的无水乙醚，检查办法：用5mL乙醚加1mL10％碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0．5％淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后用法。
去除过氧化物的办法：重蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许。
弃去10％初馏液和10％残馏液。
无水乙醇：不得含有醛类物质。
检查办法：取2mL银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入氢氧化钠溶液加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
脱醛办法：取2g硝酸银溶于少量水中，取4g氢氧化钠溶于温乙醇中，将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处2天(时常摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50moL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增强。
甲醇：重蒸后用法。
重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
抗坏血酸溶液(100g/L)：临用前配制。
银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(50g／L)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
维生素E标准液：a-生育酚(纯度95％)，γ生育酚(95％) ，δ沪生育酚(纯度95％)。
用脱醛乙醇分离溶解以上3种维生素E标准品，使其质量浓度大约为1mL相当于1mg。
临用前用紫外分光光度计分离标定此3种维生素E溶液的精确质量浓度。
内标溶液：称取苯并[e]芘(纯度98％)，用脱醛乙醇配制成1mL相当于10μg苯并[e]芘的内标溶液。
(三)测定精确称取1～10g试样(含维生素E各异构体约为40μg)于皂化瓶中，加30mL无水乙醇搅拌到颗粒物簇拥匀称为止；加5mL 10％抗坏血酸、苯并[e]芘标准液2.00mL，混匀。
维生素e的含量测定方法 -回复
维生素e的含量测定方法-回复维生素E（Vitamin E）是一种重要的脂溶性维生素，对人体健康有许多益处。
它具有较强的抗氧化性能，能够保护细胞免受自由基的损害，从而减缓衰老的过程，维护血管、肌肤以及眼睛的健康。
要正确测定维生素E的含量，有许多可行的方法。
在此，我们将介绍一种常用的方法高效液相色谱法（HPLC），以及步骤和要点。
步骤一: 样品准备首先，我们需要准备样品。
这可以是食物中提取的维生素E，或者是维生素E补充剂。
将样品粉碎，以获得更好的分散性。
根据样品资料，选择合适的样品量，常规情况下为0.2~0.5克。
然后，将样品置于适当的容器中，并密封以防止维生素E的挥发或氧化。
步骤二: 提取过程接下来，我们需要进行维生素E的提取。
这是一种溶剂萃取的方法。
加入适量的萃取溶剂，常见的有乙醇、醚类、氯仿等。
注意，选择合适的萃取溶剂不仅要考虑溶解度，还要考虑其在分析过程中对仪器设备的影响。
样品和溶剂的比例一般为1:10。
然后，利用涡旋振荡器或超声波清洗机将样品与溶剂充分混合，进行提取过程。
提取时间一般为15~30分钟，提取温度可以控制在10~30摄氏度之间。
步骤三: 净化过程提取得到的提取液中可能还包含一些杂质，需要进行净化处理。
通常，我们会利用固相萃取柱（SPE）来进行净化。
选择合适的SPE柱根据维生素E的物理性质和样品特点。
将样品溶液转移至SPE柱中，注意控制流速以保证良好的净化效果。
一般来说，首先使用无极性固相材料进行预洗，然后再使用高极性固相材料进行后处理。
此过程可有效去除大部分杂质。
步骤四: 色谱分析在样品处理完成后，我们就可以进行色谱分析了。
将经过净化的样品溶液注入色谱柱中。
常见的色谱柱是正相色谱柱，填充物可以是矽胶或其他材料。
在色谱分析中，通常会选择适当的流动相，如正己烷/乙酸乙酯/异丙醇。
根据维生素E的特征峰，设置合适的检测波长，通常为280纳米。
然后，利用高效液相色谱仪（HPLC）进行分离和定性分析。
高效液相色谱法测定人血清中维生素E
高效液相色谱法测定人血清中维生素E实验目的：1.了解高效液相色谱的结构、原理及其应用范围。
2. 掌握仪器分析的研究方法和基本操作实验耗材与仪器：实验仪器：Agilent高效液相色谱仪1260系列实验设备：MX-F漩涡混合器、TGL-16G高速离心机，BF2000氮气吹干仪实验试剂：无水乙醇（分析纯）、正己烷（色谱纯）、甲醇（色谱纯）超净水、异丙醇（分析纯）实验步骤：一、样品前处理：1. 准确吸取血清0.1mL于2mL朔料离心管中，加入1μg/mL内标液（δ-VE）0.2mL。
2. 加入无水乙醇0.3mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。
3. 加入正己烷0.6mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。
4. 样品取出后立即离心（3000r/min，5mim），去上层（正己烷层）于另外的朔料管中（一定不要取下层）。
5. 对下层溶液重复提取2次。
6. 氮气吹干正己烷7. 立刻加入200μL无水乙醇，用漩涡器充分混合，使提取物完全溶解于无水乙醇中。
取溶解物100μL至带内衬管的进样瓶中待测。
二、标准曲线配置1.分别取γ-VE10μg/mL、α-VE20μg/mL、和内标δ-VE10μg/mL的标准工作液，用无水乙醇配置成1μg/mL的单标工作液。
2. 用α、γ-VE标准工作液配制工作曲线，使每个混合标准液中含有内标（δ-VE）1μg/mL，并用无水乙醇补足至1mL。
见下表1标准曲线配置工作表（直接配置于进样瓶）表1 标准曲线配置浓度与取样量三、用高效液相色谱法测定vit-E1. 过滤流动相2. 上机测定a)测定δ、γ、α-VE、和内标单标，保留时间定性b）测定α、γ-VE标准曲线，用他们与δ-VE内标的峰高比或面积比定量。
c）测定未知样品3. 仪器分析条件色谱柱：ZORBAX SB-Aa 5μm250*4.6mm流动相：甲醇：水=90：10流速：1.0μg/mL紫外线检测波长：295nm荧光激发波长：295nm，发射波长350nm进样量：20μL柱温：35℃实验结果与数据分析1. 定性保留时间见表2。
维生素E检测方法研究
液相色谱法检测的生育酚方法报告一、生育酚简介又称维生素E，是一种脂溶性维生素，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感。
维生素E为微带粘性的淡黄色油状物，在无氧条件下较为稳定，甚至加热至200℃以上也不被破坏。
但在空气中维生素E极易被氧化，颜色变深。
维生素E易于氧化，故能保护其他易被氧化的物质（如维生素A及不饱和脂肪酸等）不被破坏。
维生素E的化学名称为(1)-2、5、7、8-四甲基2-(-4、8、12-三甲基十三烷基)-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯，分子式为C31H52O3，结构式为：根据其化学结构可分为生育酚及生育三烯酚两类。
生育酚主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。
其中，α-生育酚：R1，R2=CH3；β-生育酚：R1=H，R2=CH3；γ-生育酚：R1=CH3，R2=H；δ-生育酚：R1，R2=H。
维生素E以α-生育酚生理活性最高，β-及γ-生育酚仅为α-生育酚的40%和8%。
二、色谱方法的选择现行标准中维生素E的检测仅有两个标准——《食品中维生素A和维生素E的测定》（GB/T 5009.82-2003）和《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》（NY/T 1598-2008），其中前者介绍了液相色谱法和比色法两种方法。
目前有的文献[1]中指出，气相色谱法虽能正确定量维生素E，但是对不同型分离困难，为了使α-维生素E与β-维生素E及γ-维生素E分离，预先要将试样进行三甲基硅烷化或酯化，同时胆同醇等硬脂类对测定有干扰。
另外，如果前期样品处理不好，很容易对毛细管柱造成污染。
故建议使用液相色谱法。
三、内标法和外标法的选择1、两种方法的区别：内标法外标法内标物与待测物相似，且均出峰不需要标准曲线需要，可两点需要，需多点优点定量准确操作简便缺点不容易选择内标物；操作精度高与标准品严格相同的操作条件2、在《食品中维生素A和维生素E的测定》中采用了内标法，内标物为苯并[a]芘，另外文献中也有使用正三十二烷及十六酸十六醇酯等。
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液相色谱法检测的生育酚方法报告
一、生育酚简介
又称维生素E，是一种脂溶性维生素，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感。
维生素E为微带粘性的淡黄色油状物，在无氧条件下较为稳定，甚至加热至200℃以上也不被破坏。
但在空气中维生素E极易被氧化，颜色变深。
维生素E易于氧化，故能保护其他易被氧化的物质（如维生素A及不饱和脂肪酸等）不被破坏。
维生素E的化学名称为(1)-2、5、7、8-四甲基2-(-4、8、12-三甲基十三烷基)-6-苯并二氢吡喃醇醋酸酯，分子式为C31H52O3，结构式为：
根据其化学结构可分为生育酚及生育三烯酚两类。
生育酚主要有四种衍生物，按甲基位置分为α、β、γ和δ四种。
其中，α-生育酚：R1，R2=CH3；β-生育酚：R1=H，R2=CH3；γ-生育酚：R1=CH3，R2=H；δ-生育酚：R1，R2=H。
维生素E以α-生育酚生理活性最高，β-及γ-生育酚仅为α-生育酚的40%和8%。
二、色谱方法的选择
现行标准中维生素E的检测仅有两个标准——《食品中维生素A和维生素E的测定》（GB/T 5009.82-2003）和《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》（NY/T 1598-2008），其中前者介绍了液相色谱法和比色法两种方法。
目前有的文献[1]中指出，气相色谱法虽能正确定量维生素E，但是对不同型分离困难，为了使α-维生素E与β-维生素E及γ-维生素E分离，预先要将试样进行三甲基硅烷化或酯化，同时胆同醇等硬脂类对测定有干扰。
另外，如果前期样品处理不好，很容易对毛细管柱造成污染。
故建议使用液相色谱法。
三、内标法和外标法的选择
1、两种方法的区别：
内标法外标法内标物与待测物相似，且均出峰不需要
标准曲线需要，可两点需要，需多点
优点定量准确操作简便
缺点不容易选择内标物；操作精度高与标准品严格相同的操作条件
2、在《食品中维生素A和维生素E的测定》中采用了内标法，内标物为苯并[a]芘，另外
文献中也有使用正三十二烷及十六酸十六醇酯等。
《食用植物油中维生素E组分和含量的测定高效液相色谱法》中使用的外标法，国内大多数检测维生素E的文献中都用的是外标法。
根据我部门的实际情况，维生素E的检测一般用于豆油脂肪酸的日常检测和协助营销部门的发货定价，故精度要求不是非常高，而内标法每次检测需用到内标物，而内标物的成本通常偏高，因此，外标法可以满足我部门日常检测的需求。
3、外标曲线
有文献报道[2]，随着甲醇浓度的升高，α-维生素E峰形越尖锐，100％甲醇和98：2流动相得到谱图相似，并能与其它杂质峰很好地分离。
这是因为对反相柱来说，甲醇是强洗脱剂，其含量越高，流动相的极性越小，洗脱能力越强，α-维生素E越易被洗脱，而其它杂质却被保留；随着水含量的增加，流动相极性增强，对α-维生素E洗脱能力减弱。
综合考虑，最终选择98：2的甲醇为流动相。
柱温对保留时间是有影响的，柱温升高，保留时间会减小，对定性造成影响，因此必须设定柱温。
紫外检测器波长一般在290-296nm之间选择。
有文献[3]称，β-维生素E的峰被γ-维生素E峰掩盖，而通过检测，也证实是这样的。
因此，利用现有的α-、γ-、δ-维生素E标准品配制成六个浓度点，绘制标准曲线，各曲线拟合度均在0.9999以上。
（1）色谱条件
流动相：甲醇+水（V/V）=98+2，混匀，临用前脱气。
柱温：30℃。
色谱柱：Eclipse XDB-C18反相柱，4.6×150mm。
检测波长：294nm。
进样量：10μL
（2）α-维生素E
四、 样品前期处理的选择
目前，国内和AOCS 方法中对维生素E 检测的前期处理均用到皂化法，上述两标准中的方法也均为皂化法。
但已有一些文献[2]中出现了超声波法，该方法简单易行，节省溶剂，减少损失。
我们对两种方法进行几组对比实验。
实验发现，超声波提取法几乎对维生素E 没有损失，而皂化法由于步骤繁多，且维生素E 活性高，出现了一定量的损失。
本实验中，超声波法：取1g 样品于50mL 容量瓶中，加30mL 左右无水乙醇，超声震
荡15min 后，稀释至刻度，注入10μL 于液相色谱分析。
计算公式为：
%10010
1000150)/(%⨯⨯⨯⨯=
g mL
mL g C VE μ
皂化法：取1g 样品于皂化瓶中，加入30mL 无水乙醇溶解，加入5mL 抗坏血酸（100g/L ），加入20mLKOH 溶液（1g/L ），加热回流30min 后，冷却，倒入分液漏斗，先后用50mL 蒸馏水50mL 乙醚洗皂化瓶，并入分液漏斗，洗三次，收集乙醚相过无水硫酸钠于100mL 容量瓶中，稀释至刻度，取10mL 与烧瓶中，于烘箱中蒸干乙醚，用1mL 无水乙醇溶解，注入10μL 于液相色谱。
计算公式为：
%10010
10001110)/(%⨯⨯⨯⨯⨯=
g mL
mL g C VE μ
其中，C 为色谱图中直接读出的含量。
五、
实验结果与讨论
保留时间的差别：同一色谱条件下，皂化法的保留时间基本上比超声波法的保留时间稍长，但差别不大，可以看做基本相同。
维生素E含量的差别：两方法检测所得VE含量差别较大。
对豆油脂肪酸来说，这是我们需要日常检测的样品，也涉及到我公司销售定价的检测项目，由于皂化法前处理经过加热、洗涤、蒸干等多个步骤，其损失量在15-25%范围内，而客户与国标均采用了此方法，故在日常维生素E的检测中，为了保持一致，建议使用皂化法处理样品，进行检测。
对于棕榈油脂肪酸，其出峰多而杂，保留时间普遍增大，超声波法检测出的结果也偏低，可以初步判定其本身维生素E含量较低。
值得注意的是，超声波法可检测出棕榈油脂肪酸中γ-VE的含量，而皂化法并未检测出，这也证明了超声波法比皂化法损失小的优点。
对于低维生素E 含量的样品，影响波动增大，皂化法检测含量损失在30-50%。
见表1。
对于大豆油和棕榈油，保留时间比脂肪酸大，峰形多而杂。
其维生素E含量很低，皂化法比超声波法损失均超过50%。
见表2。
另外，处理棕榈油样品时，由于棕榈油不易溶于无水乙醇，因此处理上极为困难，这也是需要改进溶剂的一个方面。
表2 植物油中维生素E检测结果的对比
六、关于回收率实验
本实验对α-、γ-、δ-维生素E分别进行了回收率的空白实验，以验证皂化法的回收率。
即取已知含量的三种维生素E分别进行皂化法处理，得到回收率分别为：71.3%、11.8%、
58.7%。
这也说明了皂化法存在着一定的损失。
γ-维生素E有待再次验证。
七、结论
对于维生素E检测方法来说，超声波法处理方便，检测快速，损失小，是一种理想的检测维生素E含量的方法。
但对于日常检测及销售上，为了与客户及第三方检测一致，避免纠纷，我们建议采用国标中的皂化法来进行检测。
参考文献
[1] 马为民，林小虎，马卫东，周印富，色谱法在国内维生素E测定中的应用研究进展，科技情报开发与经济，2009，19（4）：157-160。
[2] 寇立娟，李兰晓，王明林，反相高效液相色谱法快速测定植物油中的维生素E，中国食物与营养，2006，12：42-43。
[3] 黄宏南，刘伟，张文舟，植物油中天然维生素E特征与高效液相指纹图谱的应用研究，海峡预防医学杂志，2001，7（3）：10-13。