微生物实验五 酵母菌的形态观察
酵母菌形态观察
微生物实验报告酵母菌的形态观察一、目的要求：1、掌握普通光学显微镜的使用方法和注意事项2、观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别3、学习鉴别死活酵母细胞的实验方法二、器材和器皿：1、酵母菌2、生理盐水、美蓝染色液、3、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种针、擦镜纸三、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
四、操作步骤：（一）显微镜的主要构造：普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
（二）显微镜的使用方法1．低倍镜的使用方法（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。
（2）调节光源（3）低倍镜观察先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼同时睁开，左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。
然后认真观察标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。
酵母菌的形态观察实验报告
酵母菌的形态观察实验报告实验目的：
通过对酵母菌的形态观察，了解其形态特征及生长繁殖形式。
实验原理：
酵母菌属于真菌门，以单细胞的形态存在。
酵母菌的生活方式非常简单，只需水分、适宜温度和营养物质，就能进行无性生殖和有性生殖，产生大量的孢子。
在孢子的形态、颜色、质量等方面均有明显差异。
实验步骤：
1. 取一定量的酵母菌液，加入蒸馏水中制成适量的悬浮液。
2. 取平底草皮片，用火烤热并消毒。
3. 用灭菌的牙签蘸取酵母菌悬浮液在草皮片上均匀涂抹。
4. 将涂有酵母菌悬浮液的草皮片放入培养皿中，加入适量的固
体培养基。
5. 放入恒温培养箱中进行培养，在适宜温度下孵育。
6. 发现酵母菌长出后，取出草皮片，用显微镜观察其形态。
实验结果：
通过实验观察，我们发现酵母菌为基于球形的单细胞菌体，颗
粒细小，染色颜色不均匀。
在液体营养平板上培养时，酵母菌形
成了一个类似于小球的珠状体，称为酵母珠。
实验结论：
酵母菌为单细胞植物，无色透明，小而细，球形或椭球形。
在
液体中生长时，形态呈现球状；在固体中生长时，呈白色且有臭味。
酵母菌的营养特别简单，只要有水分、适宜温度和营养物质，就能进行无性生殖和有性生殖，产生大量的孢子。
实验总结：
通过本次实验，我对酵母菌的形态特征及生长繁殖形式有了更
深入的了解。
同时，本次实验也让我了解了实验操作的基本要领
和注意事项。
只有正确选择实验条件并且严格按照实验步骤操作，才能获得准确可靠的实验结果。
实验五、酵母的活菌观察及活细胞计数
实验五、酵母的活菌观察及活细胞计数一、实验目的1、认识酿酒酵母的形态特征。
2、了解微生物细胞活体染色的原理，能辨别酿酒酵母的死活。
3、学校血细胞计数法的原理和方法。
二、实验原理1、血细胞计数板计数的原理：将经过适当稀释的微生物细胞或孢子悬液，加至血细胞计数板的技数室中，在显微镜下逐格计数。
由于计数室的容积是固定的（0.1mm3），故可将在显微镜下计得的菌体细胞数（或孢子数）换算成单位体积试样中的含菌量。
此法计得的数值为样品中的死菌数和活菌数的总和，故称其为总菌计数法。
2、血细胞计数板：是一块特制的精密载玻片，在载玻片上有四条长槽，将玻片中央区域分隔成3个平台，中间平台比两边的平台低0.1mm，此平台中间又有一条短槽将其分隔成2个短平台，在2个平台上各有一个相同的方格网。
它被划分为9个大格，其中央大格即为计数室。
该计数室又被精密地划分为400个小格，但计数室还有25个中格（为16小格/每中格）或16个中格（为25小格/每中格）两种，每中格的四周均有双线界限标志，以便在显微镜下区分。
因此两种中格类型计数室的总体积是一样的。
即计数室大方格的边长为1mm，故面积为1mm2,j计数室与盖玻片间的深度为0.1mm，所以计数室的体积为0.1mm3。
计数时，先计得若干中格（一般为5个）中格内的含菌数，再求得每中格菌数的平均值，然后乘上中格数（16或25），就可得出1大方格（0.1mm3）计数室中的总菌数，若再乘上104（换算成每mL的含菌量）及菌液的稀释倍数，即可算出每mL原菌液中的总菌数值。
算术计算法：菌数（个/mL）=(x1+x2+x3+x4+x5)/5 ×25(或16)×104×稀释倍数3、活体染色法：活体染色法就是用对微生物无毒性的染料（如美兰、刚果红、中性红等染料）配成一定的浓度，，再与一定量的菌液混合，经一段时间后死菌和活菌会呈现不同的颜色，这样便可以在显微镜下区分活菌数和死菌数。
酵母菌的形态观察实验报告
酵母菌的形态观察实验报告酵母菌的形态观察实验报告引言：酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体和植物表面等环境中。
酵母菌具有重要的经济和科学价值，不仅可以用于食品发酵和酿造业，还是许多生物学研究的模式生物。
本实验旨在通过对酵母菌的形态观察，了解其基本特征和结构。
材料与方法：1. 酵母菌培养基：将酵母菌培养基粉末溶解于适量的蒸馏水中，加热煮沸，冷却后倒入培养皿中。
2. 酵母菌培养物：取一小块酵母菌培养物，用无菌的棉签将其涂抹在培养基表面。
3. 显微镜：使用高倍显微镜观察酵母菌的形态。
结果与讨论：在显微镜下观察酵母菌的形态，可以发现其具有以下特征和结构。
1. 细胞形态：酵母菌的细胞形态呈椭圆形或圆形，直径约为5-10微米。
在培养基上，酵母菌会形成白色或乳白色的圆形菌落。
2. 细胞壁：酵母菌的细胞壁是由多种多糖和蛋白质组成的，具有保护细胞的作用。
在显微镜下观察，可以看到酵母菌细胞表面有一层透明的薄膜，即细胞壁。
3. 细胞核：酵母菌的细胞核位于细胞的中央，呈椭圆形或圆形。
细胞核内含有遗传物质DNA，控制着酵母菌的生长和繁殖。
4. 胞质：酵母菌的胞质是细胞核周围的胶状物质，其中包含了许多细胞器。
通过显微镜观察，可以看到胞质内有颗粒状的物质，这是酵母菌的细胞器。
5. 酵母菌的繁殖：酵母菌的繁殖方式有两种：无性繁殖和有性繁殖。
无性繁殖是通过酵母菌细胞的分裂和芽生产生新的酵母菌。
有性繁殖则需要两个酵母菌细胞进行配子体的形成和融合。
通过本次实验，我们对酵母菌的形态有了初步的了解。
酵母菌的单细胞结构和繁殖方式使其成为许多研究领域的理想模式生物。
酵母菌的细胞壁和细胞核等结构对其生存和功能发挥起着重要作用。
进一步的研究可以探索酵母菌在食品工业、生物制药和基因工程等领域的应用潜力。
结论：通过对酵母菌的形态观察实验，我们对酵母菌的细胞形态、细胞壁、细胞核和胞质等结构有了初步的认识。
酵母菌作为一种常见的单细胞真菌，具有重要的经济和科学价值。
实验五 微生物菌落形态观察
实验五微生物菌落形态观察1、本次实验的目的和要求（1）观察细菌、酵母菌、霉菌三大类微生物具体菌落的形态特征。
（2）总结三类微生物菌落的一般特征并能识别。
（特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。
）2、实验内容或原理菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成的肉眼可见的群体。
区分和识别各类微生物可从菌落形态（群体形态）和细胞形态（个体形态）两方面进行，菌落形态是无数细胞形态的集中反映，因此每一大类微生物都有其一定的菌落特征，可通过这些特征差异区分和识别。
特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。
细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。
酵母菌菌落特征（与细菌相似) ：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。
多呈乳白色，少数呈红色。
霉菌的菌落特征：比细菌菌落大，由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，延至整个培养基中，产色素，使菌落显色。
3、需用的仪器和试剂（1）培养基：PDA培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、YEPD培养基（2）菌落观察：（a）霉菌：黑曲霉、黑根霉、青霉、犁头霉、毛霉（b）酵母菌：酿酒酵母菌（c）细菌：大肠杆菌4、实验步骤1.细菌菌落形态观察包括：菌落大小、颜色、形状（圆形、不规则、假根形）、边缘（整齐光滑、叶状、波浪状、锯齿状、丝状）、隆起（扁平、低凸起、高凸起）、透明度（透明、半透明、不透明）、光泽（金属光泽、油脂性光泽）、质地（油脂状、膜状、粘稠状）、表面状态（光滑、褶皱、颗粒状、龟裂状）等。
2.大多数酵母菌的菌落与细菌相似，呈圆形，湿润有粘性，不透明，表面光滑，有油脂光泽。
多数为白色或乳白色，少数为红色，培养时间长了，颜色会变暗。
与培养基结合不紧，易被挑起。
质地粘稠，边缘皱褶状。
3.霉菌由分枝状菌丝组成，菌丝粗而长，形成菌落疏松，菌丝有绒毛状、棉絮状、蜘蛛网状，菌落很大是细菌的几十倍，表面蔓延，有多种颜色，菌落正反面颜色多有不同。
酵母菌形态观察及死活鉴别
酵母菌形态观察及死活鉴别
一、实验目的
1.认识并观察酵母菌的形态特征，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理
1、酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
2、本实验是通过美蓝染液浸片和碘液浸片来观察酵母的形态
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞
三、实验器材
酵母悬液、美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液、显微镜、载玻片、盖玻片
四、实训步骤
1、水-碘浸片观察
在载玻片中央滴一滴碘液，取一滴酵母悬液放在碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。
2、美蓝浸片观察
（1）在载玻片中央加一滴美蓝染色液，滴加一滴酵母菌放在染液中，混合均匀，染液不宜过多。
注：染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡。
（2）将制片放置约3min 后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。
五、实验报告
绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征
六、注意事项
1、染色液不宜过多或过少，否则在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量的气泡，影响观察。
2、盖片时斜着放不易产生气泡。
1。
酵母菌形态观察
酵母菌形态观察酵母菌形态观察微生物实验报告酵母菌的形态观察一、目的要求：1、掌握普通光学显微镜的使用方法和注意事项2、观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式，并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别3、学习鉴别死活酵母细胞的实验方法二、器材和器皿：2、生理盐水、美蓝染色液、3、显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、接种针、擦镜纸酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，而对代谢作用微弱或死细胞，无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此，不仅用此法可观察酵母细胞形态，也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
四、操作步骤：（一）显微镜的主要构造：普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
（二）显微镜的使用方法1．低倍镜的使用方法（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边1－2寸为宜，便于坐着操作。
（2）调节光源（3）低倍镜观察先将标本玻片置于载物台上，并将标本部位处于物镜的正下方，以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼同时睁开，左眼看目镜，同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮，当在视野内出现物象后，改用细调节轮，上下微微转动，直至视野内获得清晰的物象。
然后认真观察标本各部位，确定并将需进一步要观察的部位移视野中央，准备用高倍镜观察。
酵母菌形态观察
酵母菌的形态观察实验目的：掌握常见真菌的不同结构特征；熟悉普通光学显微镜低倍镜与高倍镜的使用方法；实验材料：菌种：啤酒酵母试剂：乳酸石炭酸实验内容：1.酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞的真核微生物，菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种，以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式，少数为裂殖；有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
基本原理：本实验是通过水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
基本步骤：酵母培养物→制片→镜检注意事项：（1）取菌量不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液溢出或出现大量气泡。
（2）用镊子取一块盖玻片，先将一侧与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上，盖玻片不宜平着放下，避免气泡产生。
注意事项：观察时，宜用略暗光线；先用低倍镜找到适当视野，更换高倍镜观察2.显微镜油镜的使用与保养低倍镜的使用方法：（1）取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。
（2）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。
一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。
然后，两眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。
（3）如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。
如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。
高倍镜的使用方法（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。
实验五 酵母菌的形态观察、死活细胞的鉴别及显微镜直接计数法
五、实验报告
1、绘图说明你所观察的酵母菌的形态特征 填表： 2、填表：
各中格中菌数 1 2 3 4 5 二次平均值 菌数/mlAຫໍສະໝຸດ B 5二、实验原理
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物， 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖， 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖， 有的分裂繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。 有的分裂繁殖，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。
菌种： 1、菌种：酿酒酵母 仪器或其他用品：血细胞计数板，显微镜， 2、仪器或其他用品：血细胞计数板，显微镜，盖玻 片，载玻片等 0.1%美蓝染色液等 3、0.1%美蓝染色液等
四、实验内容： 实验内容：
1、美蓝浸片观察 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液， 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液，然后用 0.1%的美蓝染色液 接种环取少量酵母菌于染液中，混合均匀； 接种环取少量酵母菌于染液中，混合均匀； 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触， 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然 后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上。 后慢慢将盖玻片放下，使其盖在菌液上。将玻片放置 约三分钟后，用显微镜观察酵母的形态和出芽情况， 约三分钟后，用显微镜观察酵母的形态和出芽情况， 并判断细胞的死活。 并判断细胞的死活。
利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片， 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构 成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半， 成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边 的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为几个大方格， 的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为几个大方格， 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1，计数室的 刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而 刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格， 25个中方格 每个中方格又分成16个小方格，另一种是一个大方格分成16 16个小方格 16个 每个中方格又分成16个小方格，另一种是一个大方格分成16个 中方格，而每个中方格又分成25个小方格， 25个小方格 中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规 格的计数板，每一个大方格中的小方格400 400个 格的计数板，每一个大方格中的小方格400个，每一个大方格 边长为1毫米，则每一个大方格的面积为1mm 盖上盖玻片后， 边长为1毫米，则每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后， 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米， 0.1毫米 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米，所以计数室的容积为 万分之一毫升）。 0.1mm3（万分之一毫升）。
实验五放线菌、霉菌及真菌的形态观察
放线菌在显微镜下一般气丝在上，基丝在 下，气丝色暗，基丝较透明。有的放线菌 只产生基丝而无气丝。 本实验采用插片法来观察放线菌的菌丝形 态。
2．酵母菌：酵母的菌落形态与细菌的相仿， 由于酵菌细胞比细菌的大，细胞内有许多分化 的细胞品，细胞间隙含水量较少，不能运动， 帮菌落较大、较厚，外观较稠和、不透明，菌 落颜色多为乳白色或矿烛色。
实验五
放线菌、霉菌及酵母菌的 形态观察
一．实验目的
学习并掌握观察放线菌、霉菌及酵母菌 形态的基本方法；
初步了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 特征。
二．实验原理
1．放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁 殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌，广泛分布 于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。
放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、不透 明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉” 的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取， 菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平 板上有变形的现象，有泥腥味。
1. 放线菌形态观察： A. 用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培 养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上。 B. 另取一洁净载玻片置火焰上微热后，盖在 菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢丝或 孢子）粘附在后一块载玻片中央，有印迹的一 面朝上，通过火焰2～3次固定。 C. 用番红染液覆盖印迹，染色约1min后水洗 D. 干后用油镜观察
3. 霉菌的形态观察： A. 先观察霉菌的菌落形态; B. 然后在载玻片上滴加一滴0.1％的美蓝染液； C. 用解剖针或镊子从霉菌菌落底部小心挑取少 量已经产孢子的霉菌菌丝； D. 放在载玻片上的染液中 E. 盖上盖玻片，置于低倍镜下观察，必要时换 高倍镜。
实验五 酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数
实验五酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数刘洋生物101 1002040120一、实验目的1、观察酵母菌的形态，掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法。
2、掌握利用显微测微尺测量酵母菌大小的方法。
3、学习利用血球计数板测定微生物细胞数量的原理和方法。
二、实验原理（一）酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞真核微生物，细胞呈圆形、椭圆形或柱状。
酵母的细胞比细菌大得多，经过特殊的染色，在高倍镜下就可以观察到。
酵母菌既可无性繁殖，又可有性繁殖。
无性繁殖有芽殖和裂殖两种，芽殖又有单出、双出和多出之分。
酵母菌的有性生殖一般能形成4~8个子囊孢子。
在一定条件下，有的酵母菌进行芽殖后，长大的子细胞不与母细胞立即分离，并继续出芽，细胞成串排列，这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。
假菌丝的各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状。
酵母菌的死活细胞可以通过美兰染色加以区分。
美兰是一种无毒性染色剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色。
由于活细胞具有较强的还原能力，可以使美兰由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。
处于代谢旺盛的细胞还原美兰的能力强，细胞为无色，为代谢缓慢的老细胞、幼嫩芽体为浅蓝色，死细胞为深蓝色。
（二）显微镜下的细胞计数本次实验采用血球计数法测定微生物细胞数。
方法是将经过适当稀释的菌体细胞或孢子悬液，加到血球计数板的计数室内，在显微镜下逐格计数。
因为计数室的容积是固定的（0.1mm3），所以可以将在显微镜下计得的菌数换算成单位体积试样中的菌数。
血球计数板使一块特制的载玻片，中部有H形的沟槽将中部分成上下两个计数室。
计数室方格的边长为3mm，每个方格分为9个大方格，正中央的大方格被分为25个中方格，而每个中方格又被分为16个小方格。
这样正中央的大方格总共分成400个小方格，每个小方格的体积为1/4000 mm3（计数室的高度为0.1mm）。
由此得到如下公式：每毫升的菌数(个)=平均每个中方格内的菌数16×稀释倍数×4000×1000（三）显微镜下细胞大小的测量用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
实训五 酵母菌的形态观察及死活细胞鉴定
实训五酵母菌的形态观察及死活细胞鉴定一、实验目的1、观察酵母细胞的形态结构及出芽繁殖；2、掌握鉴别死活酵母细胞的染色技术；3、学会水浸制片观察酵母菌。
二、实验原理酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，细胞一般呈球状、卵圆状、椭圆状、柱状或分枝状的假菌丝。
其细胞核与细胞质有明显分化，菌体较细菌大几倍甚至十几倍，在高倍显微镜下即可观察到胞内有明显的细胞核和内含物。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种。
无性繁殖大多是以出芽的方式进行，也有分裂繁殖；有性繁殖则是通过接合产生子囊孢子。
酵母菌的母细胞经过一系列的芽殖后，如长大的子细胞不与母细胞分离，就会形成藕节状的假菌丝，成为假丝酵母。
用生理盐水（或水-碘液染色液）制作水浸片可以观察酵母菌的形态和出芽繁殖方式。
用美蓝染色液制水浸片可鉴别酵母细胞的死活状态。
美蓝是一种弱氧化剂，氧化时呈蓝色，还原后呈无色。
用美蓝对酵母菌进行染色时，活酵母细胞因新陈代谢不断进行，胞内具有很强的还原能力，能将进入细胞的美蓝还原，使得细胞呈无色。
因此，具有还原能力的酵母活细胞为无色，而老化细胞还原能力弱，染色后呈淡蓝色，死细胞则失去还原能力，被染料染成蓝色。
三、实验材料1、菌种：啤酒酵母或葡萄汁酵母（制成斜面培养物或液体培养物）2、试剂：0.1%吕氏美蓝染色液、0.05%吕氏美蓝染色液、水-碘液染色液（革兰氏染液用碘液：水=1：3）、0.85%生理盐水3、仪器及其他：显微镜、擦镜纸、接种环、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、酒精灯、蒸馏水、吸水纸等四、实验时间2课时五、实验步骤（一）生理盐水浸（封）片（酵母菌的形态观察）1、在载玻片中央加1滴无菌生理盐水（不宜用无菌水制作水浸片，否则细胞易破裂），然后以无菌操作从斜面培养基上用接种环取少量啤酒酵母菌苔与生理盐水混匀，使其分散成云雾状薄层。
2、用镊子取洁净盖玻片，先将其一边与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下，避免产生气泡影响观察。
3、在显微镜下，先用低倍镜观察，再用高倍镜观察酵母菌的形态、大小及出芽情况。
酵母菌的形态观察实验报告
一、实验目的1. 观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。
2. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，其细胞结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。
酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖，即在母细胞的一端形成芽体，芽体逐渐长大并与母细胞分离，形成新的个体。
美蓝是一种无毒性的染料，其氧化型呈蓝色，还原型无色。
活细胞具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，活细胞无色，而死细胞或代谢缓慢的老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
三、实验器材1. 酿酒酵母或卡尔酵母（Saccharomyces calsbergensis）2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液3. 革兰氏染色用的碘液4. 显微镜5. 载玻片6. 盖玻片7. 接种针8. 烧杯9. 火柴四、实验步骤1. 准备酵母菌培养物：取少量酿酒酵母，接种于土豆平板培养基上，28-30℃培养3-5天。
2. 制备美蓝浸片：a. 在载玻片中央滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液。
b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在染液上。
c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与染液充分接触。
3. 制备水浸片：a. 在载玻片中央滴一滴无菌水。
b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在水中。
c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与水充分接触。
4. 显微镜观察：a. 将美蓝浸片和水浸片置于显微镜下观察。
b. 观察酵母菌的细胞形态、大小、细胞核、芽体等特征。
c. 比较美蓝浸片和水浸片中酵母菌的形态差异。
5. 死活细胞鉴别：a. 观察美蓝浸片中酵母菌的染色情况。
b. 活细胞呈无色，死细胞或代谢缓慢的老细胞呈蓝色或淡蓝色。
五、实验结果1. 酵母菌细胞形态：a. 酵母菌细胞呈椭圆形、圆形或卵圆形，大小不一。
b. 细胞核位于细胞中央，呈圆形或椭圆形，核膜清晰。
c. 细胞质均匀，无色或淡蓝色。
2. 出芽生殖方式：a. 观察到酵母菌细胞一端形成芽体，芽体逐渐长大。
b. 芽体与母细胞分离，形成新的个体。
微生物学实验-5 酵母菌装片的制作及观察;霉菌装片的制作及观察
实验目的
1. 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习并掌握 区分酵母菌死活细胞的实验方法。 2. 掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
实验原理
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大 几倍甚至十几倍。大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有性繁 殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片来观察 酵母的形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性的染料，它的氧 化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时， 由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美 蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵 母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝 色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
根霉（10×40）
根霉
毛霉（10×40）
注意事项
1. 制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长 状态。
2.制片时要挑取尽可能少的菌丝，并用解剖 针小心分散。
3.浮载剂棉兰乳酚油用量要适中，盖上盖玻 片时，应尽量避免产生气泡。
实验报告
Penicillum sp. 10×10
Aspergillus sp. 10×40
semx3220青霉的帚状枝帚状分枝小梗分生孢子分生孢子梗曲霉1040曲霉的分生孢子头分生孢子梗初生小梗次生小梗分生孢子曲霉的足细胞根霉104根霉1040毛霉1040制片时要细心尽可能保持霉菌自然生长状态
实验目的 实验原理 实验材料 实验方法 实验结果 注意事项 实验报告 思考题
微生物学实验-5
实验九 酵母菌装片的制作及观察
实验材料
➢ 菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）培 养约2天的斜面培养物、醪糟。
实验酵母菌的形态观察及ppt课件
霉菌：干燥，大而疏松或大而紧密，不透明，与培养基结合较牢 固，菌落颜色多样，菌落正反面颜色一般不同，往往有霉味
实验内容（二）四大类微生物培养特征观察
未知菌落的形态特征描述
❖ 初步鉴定
用文字描述死活细胞的区别，并分析讨论其中的原因
实验内容（二）四大类微生物培养特征观察
细菌：菌落湿润、小而凸起或大而扁平，透明或不透明，通常与 培养基不结合，菌落颜色多样，菌落正反面颜色相同，一般有臭 味
酵母菌：菌落较湿润，大而凸起，稍透明或不透明，通常与培养 基不结合，一般呈乳脂或矿烛色，少数红色或黑色，菌落正反面 颜色相同，多带酒香
孢子） 有性繁殖：子囊孢子
酵母菌简介
假菌丝 酵母菌在一定条件下培养，产生的芽体与母细胞不分离形成的特
殊形态
实验内容（一）
用水浸片法（美兰染色液）观察酵母形态结构特征（出芽生殖），区分 死活细胞，并分析讨论其中的原因。
实验要求
绘出酵母形态结构的显微镜观察结果图，标明各部分名称（液泡、 芽体和母细胞）；
❖ 最终确证：显微镜观察
实验要求
观察和描述酵母菌、细菌、放线菌、霉菌的培养特征（已知和未知 菌落）P37
请预习下一次实验
培养基配制及消毒与灭菌（实验指导书中的实验1&2）
实验六、 酵母菌的形态观察及核微生物 形态：多呈圆形，卵圆形。也有特殊形态，如柠檬形、三角形、藕节 状、腊肠形，假菌丝等 大小：宽约1～5 μm,长约5～10 μ m 。发酵培养中的细胞平均直 径4～5 μ m
酵母菌简介
繁殖方式: 无性繁殖：芽殖、裂殖、产生无性孢子（节孢子、掷孢子和厚垣
酵母菌形态的观察和显微镜直接计数法
显微镜直接计数法的优缺点
优点
操作简单、快速，适用于初步估 计样品中微生物的数量。
缺点
主观性强，误差较大，无法准确 反映样品中微生物的种类和分布 情况。
03 酵母菌的应用
酿酒工业
酿造啤酒
酵母菌是酿造啤酒的关键微生物，通 过发酵作用将麦芽中的糖分转化为酒 精和二氧化碳。
选择高倍数显微镜，以 便清晰观察酵母菌形态。
用于放置观察样本，需 干净无痕。
酵母菌培养液
选择适当的培养基，以 便培养和观察不同种类
的酵母菌。
染色剂
如美蓝或苯酚品红，用 于染色酵母菌，使其更
易于观察。
实验操作步骤
1. 制备样本
将酵母菌培养液滴在载玻片上 ，然后盖上盖玻片。
2. 染色
用染色剂对样本进行染色，使 酵母菌更容易观察。
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3. 观察
在显微镜下观察酵母菌形态， 记录其特征。
4. 计数
采用直接计数法，统计显微镜 下观察到的酵母菌数量。
实验注意事项与安全须知
样本新鲜度
确保样本新鲜，避免酵母菌死亡 或污染。
显微镜操作
正确操作显微镜，避免损坏仪器或 造成人身伤害。
安全须知
避免染色剂与皮肤、眼睛接触，如 不慎接触，应立即用大量清水冲洗。
酵母菌的分类学依据
形态学特征
根据酵母菌的形态、大小、 出芽方式等特征进行分类。
生理生化特征
根据酵母菌的生理生化反 应和代谢产物进行分类。
分子生物学特征
通过分析酵母菌的基因组 序列和分子标记进行分类。
02 显微镜直接计数法
微生物实验五 酵母菌的形态观察
实验五酵母菌的形态观察13生物基地201300140059 刘洋2014-11-08同组者：吕赞刘沛余马华峥一、实验器材1.菌种酿酒酵母2d麦芽汁斜面培养物、酿酒酵母麦氏培养基产孢培养斜面培养物。
2.溶液和试剂0.01%美蓝水溶液、5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、95%乙醇3.仪器和其他用品酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，小试管，烧杯，试管架，载玻片夹，滴管，无菌水等4.培养基麦氏培养基、酵母合成培养基二、实验目的1.学习并掌握酵母菌一般形态和与细菌的区别。
2.观察酵母菌的出芽生殖，区分死活细胞。
3.学习酵母菌子囊孢子观察方法。
4.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
三、实验原理1.美蓝染液水浸片法单细胞的酵母菌个体是常见细菌的几倍甚至几十倍，大多数采取出芽方式进行无性繁殖，液可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。
由于细胞个体大，采取涂片的方法制片有可能损伤细胞，一般通过美兰染液水浸片法或水—碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。
同时，采用美兰染液水浸片法还可以对酵母菌的死、活细胞进行鉴定。
美兰对细胞无毒，其氧化型呈蓝色，还原型无色。
由于新陈代谢，活细胞内有较强还原能力，使美兰由蓝色氧化型转变为无色的还原型，染色后活细胞呈无色。
死细胞或代谢能力微弱的衰老的细胞内还原能力弱，染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
2.出芽生殖酵母菌在出芽繁殖时会在母体上长出一个芽，芽体与母体相连，但从个体大小上讲一般比母体要小一些。
酵母菌的芽殖过程开始于母细胞的细胞质和壁向外突出，进而细胞核以有丝分裂方式分成两个子核，一个子核留在母细胞内，另一个子核转移到突出部分，然后细胞在突出部分缢缩而生出芽体。
芽体与母细胞暂时相连，并可以重复上述过程形成一个许多芽体彼此相连的群体。
当芽体长到与母细胞大小相近时，从母体上脱落下来，成为完整的新个体。
3.子囊和子囊孢子染色酵母菌是以形成子囊和子囊孢子进行有性繁殖的。
酵母形态观察实验报告
一、实验目的1. 认识酵母菌的形态结构，了解其基本特征。
2. 掌握酵母菌的观察方法，包括制片、染色、显微镜观察等。
3. 学习酵母菌的繁殖方式，如出芽生殖和有性生殖。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，具有典型的真菌特征。
在显微镜下观察，酵母菌呈卵圆形、圆形或椭圆形，细胞壁厚，细胞核明显，细胞质内有液泡和细胞器。
酵母菌的繁殖方式包括出芽生殖和有性生殖，其中出芽生殖是最常见的繁殖方式。
三、实验器材1. 酵母菌培养物2. 显微镜3. 载玻片、盖玻片4. 接种针5. 美蓝染液、中性红染液、碘液6. 无菌水、生理盐水7. 酒精灯、镊子、滴管四、实验步骤1. 制片（1）用接种针挑取少量酵母菌培养物，置于载玻片上。
（2）用无菌水将酵母菌稀释至适宜浓度。
（3）将稀释后的酵母菌滴在载玻片上，盖上盖玻片。
2. 染色（1）将制片放在染色缸中，用滴管加入适量的美蓝染液。
（2）将染色缸放入酒精灯上加热，使染液沸腾，持续约5分钟。
（3）染色结束后，用滴管加入适量的无菌水，冲洗掉多余的染液。
3. 显微镜观察（1）将染色后的制片放在显微镜下观察。
（2）先低倍镜观察酵母菌的整体形态，如大小、形状、颜色等。
（3）再换用高倍镜观察酵母菌的细胞核、液泡、细胞壁等结构。
4. 酵母菌繁殖方式观察（1）观察酵母菌的出芽生殖过程，记录芽的产生、生长、分离等情况。
（2）观察酵母菌的有性生殖过程，如接合、子囊孢子的形成等。
五、实验结果与分析1. 酵母菌的形态观察结果显示，酵母菌呈卵圆形、圆形或椭圆形，细胞壁厚，细胞核明显，细胞质内有液泡和细胞器。
2. 酵母菌的繁殖方式（1）出芽生殖：观察到酵母菌在细胞的一端产生芽，芽逐渐增大，最终与母细胞分离，形成独立的菌体。
（2）有性生殖：观察到酵母菌通过接合产生子囊孢子，子囊孢子在适宜条件下萌发，形成新的酵母菌。
六、实验结论1. 通过本次实验，我们成功观察到了酵母菌的形态结构，了解了其基本特征。
2. 掌握了酵母菌的观察方法，包括制片、染色、显微镜观察等。
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实验五酵母菌的形态观察
13生物基地201300140059 刘洋2014-11-08
同组者：吕赞刘沛余马华峥
一、实验器材
1.菌种
酿酒酵母2d麦芽汁斜面培养物、酿酒酵母麦氏培养基产孢培养斜面培养物。
2.溶液和试剂
0.01%美蓝水溶液、5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液、95%乙醇
3.仪器和其他用品
酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，小试管，烧杯，试管架，载玻片夹，滴管，无菌水等
4.培养基
麦氏培养基、酵母合成培养基
二、实验目的
1.学习并掌握酵母菌一般形态和与细菌的区别。
2.观察酵母菌的出芽生殖，区分死活细胞。
3.学习酵母菌子囊孢子观察方法。
4.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
三、实验原理
1.美蓝染液水浸片法
单细胞的酵母菌个体是常见细菌的几倍甚至几十倍，大多数采取出芽方式进行无性繁殖，液可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。
由于细胞个体大，采取涂片的方法
制片有可能损伤细胞，一般通过美兰染液水浸片法或水—碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。
同时，采用美兰染液水浸片法还可以对酵母菌的死、活细胞进行鉴定。
美兰对细胞无毒，其氧化型呈蓝色，还原型无色。
由于新陈代谢，活细胞内有较强还原能力，使美兰由蓝色氧化型转变为无色的还原型，染色后活细胞呈无色。
死细胞或代谢能力微弱的衰老的细胞内还原能力弱，染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
2.出芽生殖
酵母菌在出芽繁殖时会在母体上长出一个芽，芽体与母体相连，但从个体大小上讲一般比母体要小一些。
酵母菌的芽殖过程开始于母细胞的细胞质和壁向外突出，进而细胞核以有丝分裂方式分成两个子核，一个子核留在母细胞内，另一个子核转移到突出部分，然后细胞在突出部分缢缩而生出芽体。
芽体与母细胞暂时相连，并可以重复上述过程形成一个许多芽体彼此相连的群体。
当芽体长到与母细胞大小相近时，从母体上脱落下来，成为完整的新个体。
3.子囊和子囊孢子染色
酵母菌是以形成子囊和子囊孢子进行有性繁殖的。
两个临近的酵母细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、融合，并形成一个通道，两个细胞核在此通道内结合，形成双倍体细胞核，然后进行减数分裂，形成4个或8个细胞核。
每一子核与其周围的原生质形成孢子，即为子囊孢子，形成子囊孢子的细胞称为子囊。
经染色后子囊孢子呈绿色、菌体和子囊呈粉红色。
四、实验步骤
1.美蓝染液水浸片法
1)滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央，无菌操作用接种环由酿酒酵母麦
芽汁斜面培养物挑取少许菌体置于染液中，混合均匀。
2)用镊子取一块盖玻片，将盖玻片一边与菌液接触，缓慢将盖玻片倾斜并覆盖在菌液
上。
3)将制片放置3min后，用低倍镜及高倍镜观察酵母菌形态和出芽情况，并根据细胞
颜色区分死活细胞。
4)染色后每隔一段时间再次观察，注意死活细胞比例是否发生变化。
2.子囊孢子染色
1)取一块载玻片，滴一小滴生理盐水于两个区域中央；用接种环无菌操作分别由枯草
芽胞杆菌营养琼脂斜面和金黄色葡萄球菌营养琼脂斜面挑取适量菌苔，将沾有菌苔
的接种环置于载玻片上的生理盐水中涂抹，使菌悬液在载玻片上形成均匀薄膜。
2)涂菌面朝上，通过酒精灯火焰，直至形成一层肉眼可见的干燥菌膜。
在用酒精灯烘
干时，应随时用手背接触载玻片，以控制其温度适中。
3)滴加孔雀绿染液覆盖1-2min，之后水洗。
4)滴加95%乙醇覆盖30sec，之后水洗。
5)滴加番红染液覆盖1min，之后水洗。
6)自然干燥并镜检。
五、注意事项
1.用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
2.滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过多会溢出，过少会产生大量气泡。
3.盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。
六、实验结果
美蓝染色后的酵母菌活体，其中蓝色的为已死亡酵母菌，可观察到出芽生殖。
出芽生殖
酵母菌子囊孢子染色，红色的为菌体，绿色的为子囊孢子
七、结果分析
1.酵母菌为单细胞微生物，其出芽生殖一次可生出多个芽体。
2.通过实验观察，时间越长酵母菌死活细胞的比例越大。
3.酵母菌子囊孢子的数目是偶数个。
八、思考题
1.根据你的观察结果，吕氏碱性美蓝染液浓度及作用时间与酿酒酵母死活
细胞比例变化是否有关系？试分析原因。
虽然美蓝染液无毒，但是如果美蓝染色液作用时间过长或浓度过高，会造成酵母细胞脱水死亡，使得死活比升高。
2.酿酒酵母除了通过出芽方式进行无性生殖外，还可以形成子囊孢子进行
有性生殖，你在实验中是否观察到酿酒酵母的子囊孢子？若未观察到，试分析原因。
观察到了，如果为观察到，可能是培养基条件不适宜。
九、附录
麦氏培养基配方（113℃灭菌30min）
酵母合成培养基配方（113℃灭菌30min，接种量10%）。