MMFSCNJ出口禽肉中拉沙里菌素残留量检验方法

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MMFSCNJ出口肉及肉制品中蝇毒磷残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中蝇毒磷残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0124出口肉肉制品蝇毒磷残留量气相色谱法内标法定量MM_FS_CNJ_0124出口肉及肉制品中蝇毒磷残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口肉和肉罐头中蝇毒磷残留量的检验。

2.原理概要本方法以乙酸乙酯提取试样中残留的蝇毒磷,经石油醚、乙腈进行液-液分配净化。

用气相色谱仪进行测定,内标法定量。

3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂乙酸乙酯:分析纯;乙腈:分析纯,用石油醚饱和;石油醚:(60~90℃):分析纯,重蒸馏,用乙腈饱和;丙酮:分析纯,重蒸馏;无水硫酸钠:分析纯,650℃灼热4h以上,贮于密闭容器中;蝇毒磷和内标物(亚胺硫磷)标准品:纯度99%以上(如果试样中存在亚胺硫磷,可选择其他内标物);蝇毒磷和内标物的标准溶液:均以丙酮为溶剂配成浓度为0.1mg/mL的标准贮备溶液;蝇毒磷和内标物(亚胺硫磷)混合标准工作溶液:蝇毒磷与亚胺硫磷按适比例,用丙酮稀释配制成适用浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器气相色谱仪并配备火焰光度检测器;组织捣碎机;旋转蒸发器及250mL、100mL蒸发瓶(24号口);微量注射器:5μL、10μL;振荡器。

4.试样的抽取与制备4.1.检验批以不超过500箱为一检验批。

同一检验批内商品应具有同一的特征,如包装、标记、产地、规格、等级等。

4.2.样本大小4.2.1.肉500箱及以下取5箱;501~1000箱取7箱;1001~3000箱取11箱;3001~4000箱取13箱;4001~5000箱取15箱。

4.2.2.罐头与(4.2.1)规定相同。

4.3.抽样工具和方法4.3.1.肉每箱取样一包,去掉塑料薄膜,从每包肉样抽取肉渣或肉块不少于25g,总样量不少于1kg,放入清洁的容器内,并填写标签,注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、抽样人,及时送交实验室。

4.3.2.罐头每箱抽一罐,填写标签,注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、抽样人,然后送交检验。

4.4.实验室试样制备4.4.1.肉将所抽取的全部样品,充分搅碎混匀,取有代表性样品总量不少于500g,装入清洁容器内,密封,冷藏。

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0110出口肉肉制品氯霉素残留量气相色谱法外标法定量MM_FS_CNJ_0110出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口猪肉中氯霉素残留量的检验。

2.原理概要用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素,然后将乙酸乙酯蒸发至干,用正已烷净化,氯霉素经硅烷化衍生后,溶解于正已烷中,用带电子俘获检测器的气相色谱仪进行测定,外标法定量。

3.主要试剂和仪器.主要试剂乙酸乙酯:重蒸馏;甲醇:重蒸馏;正已烷:重蒸馏;丙酮:重蒸馏;硅烷化试剂:3mL六甲基二硅烷(HMDS)+1mL三甲基氯硅烷(TMS)+9mL吡啶;氯化钠水溶液:1mol/L;氯霉素标准品:含量≥%;氯霉素标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用丙酮配成mL的贮备液,根据需要稀释成适当浓度的标准工作液。

.仪器气相色谱仪:配有电子俘获检测器(ECD);快速混匀器;离心机:3000r/min;多功能微量化学样品处理仪或其他相当的仪器;具塞离心管:5mL;离心管:15mL;尖嘴吸管;微量可调移液管:50μL、200μL、1000μL;微量注射器:10μL。

4.试样的抽取与制备.检验批以不超过2500件商品为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征,如:包装、标记、产地、规格和等级等。

.抽样数量批量,件最低抽样数,件1~25 126~100 5101~250 10251~500 15501~1000 171001~2500 20.抽样方法按规定的抽样件数,随机抽取,逐件开启。

从每件内取一袋作为原始样品,其总量不少于2kg,放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送交实验室。

如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者,则可用锋利刀(用酒精灭菌后)在抽出的包件中,每件割取不少于100g,混合后置于清洁容器内,作为混合原始样。

混合原始样的重量不少于2kg。

加封后,标明标记,及时送交实验室。

.试样的制备从原始样品中分取出约1kg,充分绞碎混匀,装入清洁的容器内,作为试样,加封并标明标记。

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

5MM_FS_CNJ_01出口肉 肉制品 氯霉素 残留量 气相色谱法 外标法定量MM_FS_CNJ_0110 出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法1. 适用范围 本方法适用于出口猪肉中氯霉素残留量的检验。

2. 原理概要 用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素, 然后将乙酸乙酯蒸发至干, 用正已烷净化, 氯霉素经硅烷化衍生后, 溶解于正已烷中, 用带电子俘获检测器的气相色谱仪进 行测定,外标法定量。

3. 主要试剂和仪器. 主要试剂 乙酸乙酯:重蒸馏; 甲醇:重蒸馏; 正已烷:重蒸馏; 丙酮:重蒸馏;硅烷化试剂:3mL 六甲基二硅烷(HMDS 片1mL 三甲基氯硅烷(TMS )+ 9mL 比啶; 氯化钠水溶液: 1mol/L ; 氯霉素标准品:含量》%氯霉素标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用丙酮配成mL 的贮备液, 根据需要稀释成适当浓度的标准工作液。

. 仪器 气相色谱仪:配有电子俘获检测器 (ECD ); 快速混匀器; 离心机:3000r/min ; 多功能微量化学样品处理仪或其他相当的仪器; 具塞离心管: 5mL ; 离心管: 15mL ; 尖嘴吸管;微量可调移液管:50卩L 、200卩L 、1000卩L ; 微量注射器:10卩L 。

4. 试样的抽取与制备. 检验批 以不超过 2500 件商品为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征, 如:包装、标记、产地、规格和等级等。

. 抽样数量最低抽样数,件26〜 100101 〜 250 251〜500 501〜10001001〜2500批量,件 1〜251015 17 20.抽样方法按规定的抽样件数,随机抽取,逐件开启。

从每件内取一袋作为原始样品,其总量不少于2kg,放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送交实验室。

如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者,则可用锋利刀(用酒精灭菌后)在抽出的包件中,每件割取不少于100g,混合后置于清洁容器内,作为混合原始样。

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌计数检验方法

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌计数检验方法

MM_FS_CNJ_0353出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)计数检验方法MM_FS_CNJ_0353出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)计数检验方法1.适用范围本方法适用于出口肉品、蛋品等食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)的定量检验,其他食品可参照使用。

2.主要试剂和仪器2.1.主要试剂(包括培养基)配制方法和试验方法见ZB 8第5章;缓冲蛋白胨水(BP);亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC);四硫磺酸盐煌绿增菌液(TTB);亚硫酸铋琼脂(BS);胆硫乳琼脂(DHL);亚利桑那菌琼脂(SA);三糖铁琼脂(TSI);赖氨酸脱羧酶培养基(LD);尿素酶琼脂(U);V-P半固体琼脂(VP);吲哚培养基(I);氰化钾培养基(KCN);丙二酸钠培养基(M);卫矛醇半固体琼脂(D)。

2.2.仪器试管:20mm×150mm,13mm×130mm;三角瓶或广口瓶:200mL和500mL;平皿:直径90mm;吸管:1mL和10mL;剪子:16cm;镊子:16cm;试管振荡器;均质器;恒温培养箱:37℃和42℃;玻璃珠:直径5mm;天平:感量0.1g。

3.过程简述3.1.样品制备和增菌在以下方法中,一个样品为25g,增菌液为225mL,如果将数个样品混合增菌,则相应增加培养基的量,使样品和培养基之比为1∶9。

3.1.1.冻猪分割肉、冻猪下水、冻兔肉、冻牛肉、冻鸡、冻分割鸡:于45℃15min 内或2~5℃18h内解冻,在表面部位取25g剪碎后放入均质杯内,加缓冲蛋白胨水(BP)25mL,8000 r/min均质1min,用剩余的200mL BP将全部样品冲洗到500mL三角瓶中,充分混合后作为10-1的样品液,如果均质杯的容量为500mL以上,可将225mL BP一次全部加入,均质后即为10-1的样品液,继续稀释成10-2、10-3……的样品液。

分别取1mL10-1、10-2、10-3的样品液,分别加入三组试管中,每组三支;36±1℃培养4~5h后,每试管加入9mL四硫磺酸盐煌绿增菌液(TTB),于42±1℃培养22±2h。

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0110出口肉肉制品氯霉素残留量气相色谱法外标法定量MM_FS_CNJ_0110出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口猪肉中氯霉素残留量的检验。

2.原理概要用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素,然后将乙酸乙酯蒸发至干,用正已烷净化,氯霉素经硅烷化衍生后,溶解于正已烷中,用带电子俘获检测器的气相色谱仪进行测定,外标法定量。

3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂乙酸乙酯:重蒸馏;甲醇:重蒸馏;正已烷:重蒸馏;丙酮:重蒸馏;硅烷化试剂:3mL六甲基二硅烷(HMDS)+1mL三甲基氯硅烷(TMS)+9mL吡啶;氯化钠水溶液:1mol/L;氯霉素标准品:含量≥99.5%;氯霉素标准溶液:准确称取适量的氯霉素标准品,用丙酮配成0.10mg/mL 的贮备液,根据需要稀释成适当浓度的标准工作液。

3.2.仪器气相色谱仪:配有电子俘获检测器(ECD);快速混匀器;离心机:3000r/min;多功能微量化学样品处理仪或其他相当的仪器;具塞离心管:5mL;离心管:15mL;尖嘴吸管;微量可调移液管:50μL、200μL、1000μL;微量注射器:10μL。

4.试样的抽取与制备4.1.检验批以不超过2500件商品为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征,如:包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量批量,件最低抽样数,件1~25 126~100 5101~250 10251~500 15501~1000 171001~2500 204.3.抽样方法按规定的抽样件数,随机抽取,逐件开启。

从每件内取一袋作为原始样品,其总量不少于2kg,放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送交实验室。

如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者,则可用锋利刀(用酒精灭菌后)在抽出的包件中,每件割取不少于100g,混合后置于清洁容器内,作为混合原始样。

混合原始样的重量不少于2kg。

加封后,标明标记,及时送交实验室。

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌检验方法

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌检验方法

MM_FS_CNJ_03出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验MM_FS_CNJ_0335出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法1. 适用范围本方法适用于冻猪肉、冻鸡肉、鸡蛋黄粉和冰鸡蛋白中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验。

其他食品可参照使用。

2.样品制备及增菌培养2.1. 肉类2.1.1.如为冷冻产品,应在45C以下不超过15min,或在2〜5C不超过18h解冻。

若不能及时检验,应置于-15C左右保存。

非冷冻而易腐的食品,置于4C 冰箱保存。

2.1.2.以无菌操作,称取剪碎后的瘦肉样品25g,置于灭菌均质杯内,加入25mL 缓冲胨水增菌液,以8000〜10000r/min均质1min,移入盛有200mL缓冲胨水增菌液的500mL广口瓶内,混合均匀,女口pH低于6.6,用灭菌1 mol/L氢氧化钠溶液,调pH至6.8 ± 0.2,于37 C水浴培养4h (以增菌液达到37 C时算起),进行前增菌;其后,移取10mL转种于盛有100mL四硫磺酸盐煌绿增菌液的250mL 玻璃瓶内,摇匀,于42土1C培养20± 2h,进行选择性增菌。

必要时,同时另称取25g剪碎的瘦肉样品,加入25mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液,同样进行均质。

其后,移入盛有200ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液的500mL广口瓶内,混合均匀,如pH低于6.6,用灭菌1 mol/L氢氧化钠溶液调pH至6.8 ± 0.2,于37C培养24 ± 2h,进行直接选择性增菌。

2.2.蛋品2.2.1.冰蛋品(冰鸡全蛋、冰鸡蛋白、冰鸡蛋黄)2.2.1.1.按2.1.1 解冻和保存样品。

2.2.1.2.以无菌操作称取样品25g,置于盛有225mL四硫磺酸盐煌绿增菌液的500mL广口瓶内混合均匀,女口pH低于6.6,用灭菌1mol/L氢氧化钠溶液调pH 至6.8 ±0.2,于37C培养24±2h,进行直接选择性增菌。

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌的荧光抗体筛选检验方法

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌的荧光抗体筛选检验方法

MM_FS_CNJ_0150出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌) 荧光抗体筛选检验法MM_FS_CNJ_0150出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)的荧光抗体筛选检验方法1.适用范围本标准适用于冻猪肉、冻鸡肉鸡蛋黄粉和冰鸡蛋白中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验。

其他类食品可参照使用。

2..主要试剂和仪器主要试剂L 磷酸盐-生理盐水缓冲溶液(PBS):溶解无水磷酸氢二钠,氯化钠于1 000mL蒸馏水中,使完全溶解,用酸度计测定其pH值至以上即可,必要时可用1mol/L氢氧化钠调整至左右。

固定液:)30mL混匀,再加入36%~38%甲醛按顺序将无水乙醇60mL、三氯甲烷(CHCl310mL,混匀即成;注:此项固定液配制后可置4 ℃贮存,但重复使用次数以不超过3次为宜。

碳酸盐-甘油缓冲溶液:溶解无水碳酸钠6g,无水碳酸氢钠37g于蒸馏水中,加至1000mL,使完全溶解,混匀,即成碳酸盐缓冲液。

以上项缓冲液1份加甘油9份混匀即成。

注:①所用甘油应选用优级纯品或分析纯品。

②配成后置4 ℃贮存,在贮存期间其pH值逐渐下降,应以每2周左右重新配制一次为宜。

沙门氏菌多价荧光抗体试剂:选用经国家进出口商品检验局指定的以FITC标记的沙门氏菌A-67全价“OH”免疫球蛋白(或沙门氏菌A-60多价“OH”免疫球蛋白),染色时应按试剂所标明的常规染色工作浓度和稀释方法进行稀释后使用。

注:①所用荧光抗体试剂应在有效期限以内。

②已稀释的荧光抗体试剂置4 ℃贮存可使用1个月左右,保持其固有的染色亮度不变,如发现其染色亮度下降,则不能继续使用。

.仪器载玻片:76mm×26mm,厚度~,事先刻好编号及8个小方格,自左至右每行4格,上下共2行(或采用供免疫荧光技术专用的多凹涂膜载玻片),用洗涤剂彻底洗净油污,擦洗干净,并经滴水检查证实无油污后,再浸于95%乙醇中保存备用。

盖玻片:22mm×22mm,厚度~,按同上方法进行去除油污处理。

MM_FS_CNJ_0132出口肉及肉制品中红霉素残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0132出口肉及肉制品中红霉素残留量检验方法

出口肉及肉制品中红霉素残留量检验方法. 适用范围本方法适用于出口禽肉中红霉素残留量地检验.. 原理概要利用被测定样液中地残留红霉素与藤黄微球菌作用,产生抑菌圈. 试样用地甲醇二甲氧基甲烷溶液提取. 提取液经离心浓缩后,溶于缓冲溶液() 中并定容,用杯碟法测定,对照红霉素标准曲线定量.. 主要试剂和仪器. 主要试剂红霉素标准品:由卫生部药品生物制品检定所提供;二甲氧基甲烷[()] :化学纯;磷酸盐缓冲液() :,称取无水磷酸氢二钾及无水磷酸二氢钾,溶于水,定容至;试验菌种:藤黄微球菌() ,菌株号;红霉素标准储备液:准确称取一定量红霉素标准品( 精确至) ,用二甲氧基甲烷溶液,使红霉素液地浓度为卩,再用磷酸盐缓冲液()稀释,使最终浓度为卩, 保存于C冰箱备用(不宜超过一周);红霉素标准工作液:取上述储备液用磷酸盐缓冲液稀释,配制成,,,,,卩地标准工作液,作为制备标准曲线地标准工作液. 需当天配制,当天使用;肉汤培养基(见附录中) ;菌种培养基( 见附录中) ;检定培养基( 见附录中).. 仪器培养皿:内径,底部平整、光滑地玻璃皿或塑料皿,具陶瓦盖;牛津杯:外径(±),内径(±),高(±)地不锈钢管;游标卡尺:测量范围〜,精度;绞碎机:电动;均质器:不低于,带均质杯() ;离心机:不低于;水浴锅:〜c±c;恒温培养箱:(± ) C;高压灭菌器;其他:玻璃器皿.. 试样地抽取与制备. 检验批以不超过件为一检验批.同一检验批地产品应具有相同地特征,如包装、标记、产地、规格和等级等. . 抽样数量批量,件最低抽样数,件. 抽样方法按规定地抽样件数随机抽取,逐件开启. 每件至少取一袋作为原始样品,抽取原始样品地总量不少于,如每件中无小包装或有小包装,但每袋小包装重量超过者,可用灭菌刀具从抽出地包件中,每件割取不少于,混合后,置于清洁容器内,作为原始试样,混合地试样总量不少于,加封后,标明标记,及时送交实验室.. 试样地制备从取回地原始样品中取出部分样品,将可食部分放入绞碎机内绞碎,充分混匀,用四分法缩分至不少于,作为试样,装入清洁容器内,加封后标明标记.. 试样保存将试样于-C以下冷冻保存• 注:在抽样及制样地操作过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量地变化.. 过程简述. 试液制备准确称取样品于均质杯内,加入甲醇二甲氧基甲烷溶液,,均质,移入离心管,离心,将上清液移入容量瓶中(视情况过滤). 试样再分别用甲醇二甲氧基甲烷如上法提取两次,将上清液合并,用甲醇二甲氧基甲烷定容至. 用移液管吸取提取液至试管中,置于C水浴,通以氮气吹干,取出试管,加磷酸盐缓冲液,溶解残渣并定容至,作为样液.. 菌液地制备将菌种接种于肉汤培养基内,置(土)C培养(土).再转种到菌种培养基斜面上,置(±) °C培养〜后,加入肉汤培养基,洗下菌苔,吸取此菌液转种至克氏瓶中菌种培养基地表面,置(±)C培养(土).用灭菌生理盐水洗下琼脂表面地菌苔,制成菌悬液,置C冰箱保存(可保存二周).. 菌液用量测定测试前应先用卩红霉素标准工作液对该菌液浓度地平板进行预测试,经培养后,其标准工作液所呈现地抑菌圈直径在以上时,则该菌液浓度即可使用,否则应调整菌液至合适地浓度.. 检定平板地制备于无菌平皿中加入融化地测试培养基,保持水平,待其凝固. 再吸取加有菌液地该培养基注入上述基层培养基上,保持水平,待其凝固后,在每个平板地表面放置个牛津杯,使牛津杯在半径为地圆面上成°角间距,所用平板需当天制备.. 标准曲线地制备以卩浓度地标准工作液作为参考浓度•每个标准工作液浓度取个检定平板为一组,在每个检定平板上地其中个牛津杯内加满参考浓度溶液,另个牛津杯内加满标准工作液,参考浓度溶液与标准工作液要间隔放置,个标准浓度共个检定平板,含量最低地标准浓度卩地个检定平板作为判断阴性结果地对照,其他个检定平板用来绘制标准曲线•这样参考浓度卩地工作液将得出个抑菌圈直径地数值,而其他地标准浓度将得出个抑菌圈地数值.将陶瓦盖盖好,置C培养(土),翻转平板,除去牛津杯,精确地测量产生地抑菌圈直径(精确到),求出每组个检定平板上卩浓度地抑菌圈直径读数与其他标准浓度地抑菌圈直径读数地平均值,再求出参考浓度卩地所有个抑菌圈直径数值地平均值,用个参考浓度抑菌圈直径地平均值与每组中个参考浓度抑菌圈直径平均值之差来校正其他各标准浓度地抑菌圈读数地平均值•将这些校正后地值,包括卩浓度地平均值在半对数坐标纸上,以抑菌圈直径为纵坐标(算术级),以卩计地浓度为横坐标(对数级),通过式()和式()地和点绘出最佳直线.二(+ + —) ...................................... ()二(+ + -) ........................................ ()式中:标准曲线上地最低浓度(卩)抑菌圈直径,;――标准曲线上地最高浓度(卩)抑菌圈直径,;――参考浓度卩地个抑菌圈直径地平均值,;、、一一分别表示标准曲线中其他标准浓度(、、卩)地抑菌圈直径经校正后地平均值,..样液地测定每份样液取个检定平板,在每个检定平板上个间隔地牛津杯内加满红霉素标准参考浓度溶液,另外个牛津杯内加满被检样液,将陶瓦盖盖好,置°C培养(土),翻转平板,除去牛津杯,如有抑菌圈产生,精确测量其直径..结果计算如样液抑菌圈地直径小于,即报告为未检出.如抑菌圈地直径大于等于,经校正后,从标准曲线上查出相应地红霉素地含量,得出结果以卩计.如果样品中红霉素含量地单位用表示时,可将卩按照式()进行换算:=—.......................... ()式中:一一样品中红霉素地含量,;――从标准曲线上查出地样液红霉素浓度,卩;――最终试液所代表地试样量,.注:如测定结果呈阳性,即所显抑菌圈地平均直径大于等于时,必要时,尚需进行确准试验(可用薄层层析法)..低限和回收率地测定.测定低限本方法地测定低限为..回收率本方法地回收率数据:红霉素添加浓度为卩,回收率为;红霉素添加浓度为卩,回收率为;红霉素添加浓度为卩,回收率为..来源:。

MMFSCNJ出口肉及肉制品中新生霉素残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中新生霉素残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0119出口肉肉制品新生霉素残留量滤纸片法MM_FS_CNJ_0119出口肉及肉制品中新生霉素残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口鸡肉中新生霉素残留量的检验。

2.原理概要用丙酮水溶液提取试样中残留的新生霉素,提取液经离心、过滤后,取滤液进行滤纸片法测定。

利用滤液中的残留新生霉素与表皮葡萄球菌作用产生抑菌圈,根据抑菌圈大小用标准曲线法定量。

3.主要试剂和仪器.主要试剂丙酮水溶液:50%(V/V);磷酸盐缓冲液±:称取磷酸二氢钾(精确至,溶解于900mL水中,另取氢氧化钾溶解于100mL水中,二者混合均匀。

于121℃高压灭菌15min;新生霉素标准品:纯度90%,美国SIGMA化学公司产品,或相当者;试验菌种:表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis),菌号CMCC26069,由中国药品生物制品检定所提供;培养基Ⅰ(附录A中A1);培养基Ⅱ(附录A中A2);培养基Ⅲ(附录A中A3);新生霉素标准贮备液:称取一定量的新生霉素标准品(精确至,用磷酸盐缓冲液配制成浓度为500μg/mL的新生霉素标准贮备液,于5℃冰箱中保存,可使用15天;新生霉素标准工作液:吸取一定量的新生霉素标准贮备液,用磷酸盐缓冲液稀释成、、、、μg/mL浓度的标准工作液。

以上溶液均须配制后当日使用。

.仪器培养皿:内径90mm,底部平整光滑的玻璃或塑料皿,具陶瓦盖;滤纸片:直径10mm,厚,吸水量~的滤纸圆片。

日本Toyoroshikaisha,ltd.产品,或相当的产品;微量注射器:10~100μL;游标卡尺:测量范围0~200mm,精度或抑菌圈测量仪;均质器:不低于10000r/min;离心机:不低于8000r/min;恒温培养箱:(36±1)℃,隔板保持水平;绞碎机:电动。

4.试样的抽取与制备.检验批以不超过2500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌检验方法

MMFSCNJ出口食品沙门氏菌属包括亚利桑那菌检验方法

MM_FS_CNJ_0151出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌) 微生物法MM_FS_CNJ_0151出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法1.适用范围本方法适用于冻猪肉、冻鸡肉、鸡蛋黄粉和冰鸡蛋白中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验。

其他食品可参照使用。

2.培养基.营养肉汤(NB)蛋白胨;酵母膏;氯化钠;葡萄糖;蒸馏水;将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,调至±,分装试管(12mm×100mm),每管约3mL,高压灭菌121℃,15min。

.营养琼脂(NA)蛋白胨;酵母膏;氯化钠;葡萄糖;琼脂;蒸馏水;将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,调至±,分装试管(12mm×100mm),每管约3mL,高压灭菌121℃,15min。

.缓冲胨水增菌液(BP)蛋白胨;氯化钠;磷酸氢二钠(含12个结晶水) ;磷酸二氢钾;蒸馏水;将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,调至±,高压灭菌121℃,15min,临用时,以无菌操作分装灭菌玻璃瓶,每瓶200mL或225mL。

.亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)蛋白胨;乳糖;磷酸氢二钠(含12个结晶水) ;亚硒酸氢钠;L-胱氨酸;蒸馏水;除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸外,将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约10min,加热煮沸5min至完全溶解,冷至55℃以下,以无菌操作加入亚硒酸氢钠和1g/Ll-胱氨酸溶液10mL(称取胱氨酸,加1mol/L氢氧化钠溶液15mL,使溶解,再加灭菌蒸馏水至100mL即成,如为DL-胱氨酸,用量应加倍)。

摇匀,调至±,以无菌操作分装灭菌玻璃瓶内,每瓶100mL或200mL。

四硫磺酸盐煌绿增菌液(TTB)基础液蛋白胨;牛肉膏;氯化钠;碳酸钙;蒸馏水;除碳酸钙外,将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解,再加入碳酸钙,调至±,高压灭菌121℃,20min。

输日动物源性食品(肉制品)残留限量及检测技术

输日动物源性食品(肉制品)残留限量及检测技术

名称 氟苯哒唑 拉沙里菌素
氨丙啉(安宝乐)
氯羟吡啶 氯舒隆
癸氧喹酯 二硝托胺 多拉菌素 马杜霉素 硝羟碘苄腈 赛杜霉素 地克珠利
吡喹酮
中国监控 √

畜禽药物手册 √ √ √ √
√ √ √ √
制剂名
备注
氟苯诺
球安
常用药
鸡宝-20(氨丙啉+呋吗 常用药,呋吗 唑酮),安保力,球宁 唑酮为禁用
克球粉,球定,可爱丹
二嗪农
辛硫磷
双甲脒
中国监控 √ √ √

畜禽药物手册 √ √ √ √ √ √ √

√ 环丙氨嗪
制剂名
倍特
备注
蝇必净
螨净
速灭(辛硫磷+胺菊酯 *+八氯二丙醚*)
特敌克
*为一律标准 一律标准
三、对出口畜禽产品贸易影响较大的项目情况介绍 (五).其他具药理作用的药物
名称
中国监控
畜禽药物手册
制剂名
非那西丁
备注 常用药 一律标准
百球清溶液 三字球虫粉
那加诺,那加宁,拜耳 -205 锥灭定,沙莫林 贝尼耳 阿卡普林
一律标准 一律标准
一律标准
一律标准 一律标准 一律标准 一律标准
灭绦灵 别丁
一律标准 一律标准
三、对出口畜禽产品贸易影响较大的项目情况介绍 (三).杀虫驱虫药-抗原虫、蠕虫药
名称
莫能菌素 盐霉素
(二).抗生素-其他抗生素
名称 甲基盐霉素
中国监控
畜禽药物手 册

禽安
制剂名
那西肽
新生霉素

喹乙醇 奥美普林
盐霉素 硫粘菌素 替米考星
泰乐菌素

MMFSCNJ出口肉及肉制品中奥芬达唑残留量检验方法

MMFSCNJ出口肉及肉制品中奥芬达唑残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0086出口肉肉制品奥芬达唑残留量气相色谱法MM_FS_CNJ_0086出口肉及肉制品中奥芬达唑残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口猪肉中奥芬达唑残留量的检验。

2.原理概要试样经用碳酸钠碱化后,用乙酸乙酯及丙酮抽提。

蒸发提取液至干,溶解残留物于正己烷中。

正己烷溶液中的奥芬达唑经液-液分配而进入磷酸溶液中。

酸溶液经碱化后,再用乙酸乙酯提取。

将乙酸乙酯层挥发至近干,残渣溶解于二氯甲烷并加到硅胶小柱中净化,用甲醇-二氯甲烷洗脱。

洗脱液挥发后,将残渣溶解于流动相中供HPLC测定。

3.主要试剂和仪器.主要试剂乙酸乙酯:重蒸馏;丙酮:重蒸馏;正己烷:重蒸馏;甲醇:重蒸馏;二氯甲烷:重蒸馏;无水乙醇;无水硫酸钠:650℃灼烧4h,贮于密闭容器中备用;碳酸钠溶液:1mol/L。

溶解106g无水碳酸钠于1L水中;磷酸溶液:1mol/L。

将磷酸〔85%,密度(ρ)约mL〕用水稀释至1 L;氢氧化钾溶液:10mol/L。

溶解560g氢氧化钾于水中,用水稀释到1L;磷酸铵缓冲液:L,pH 。

溶解磷酸二氢铵(NH4H2PO4)于约950mL水中,用稀氨水调节pH至,并用水稀释到1L(临用时现配);HPLC流动相:甲醇-磷酸铵缓冲液(55+45);奥芬达唑标准品:纯度≥99%;奥芬达唑标准溶液:准确称取10mg奥芬达唑标准品,溶于10mL二甲基亚砜,制成浓度为mL的标准储备液。

根据需要再用甲醇稀释储备液成适当浓度的标准工作溶液。

.仪器液相色谱仪:配有紫外检测器;旋转蒸发器;均质器;离心瓶:250mL;pH计;全玻璃系统蒸馏装置;sep-Pak硅胶小柱;过滤器:μm。

4.试样的抽取与制备.检验批以不超过2500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。

.抽样数量批量,件最低抽样数,件1~25 126~100 5101~250 10251~500 15501~1000 171001~2500 20.抽样方法按规定的抽样件数,随机抽取,逐件开启。

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M M F S C N J出口禽肉中拉沙里菌素残留量检
验方法
集团标准化工作小组 [Q8QX9QT-X8QQB8Q8-NQ8QJ8-M8QMN]
MM_FS_CNJ_0077出口禽肉拉沙里菌素残留量液相色谱法
MM_FS_CNJ_0077
出口禽肉中拉沙里菌素残留量检验方法
1.适用范围
本方法适用于出口鸡肉中拉沙里菌素残留量的检验。

2.原理概要
样品中的拉沙里菌素经用乙腈提取,提取液用正己烷洗涤后,用配有荧光检测器的液相色谱仪测定,绘制标准曲线法定量。

3.主要试剂和仪器
.主要试剂
乙腈、正己烷、四氢呋喃、甲醇:重蒸馏;
浓氨水;
氮气;
流动相
A液:取四氢呋喃150mL、甲醇30mL、浓氨水10mL、正己烷810mL,在分液漏斗中充分混合,静置分层约1h,弃去下层。

B液:取四氢呋喃150mL、甲醇30mL、正己烷820mL,在量筒中充分混合。

取3份A液加1份B液,在棕色瓶中充分混合,作为流动相;
流动相饱和的水:将100mL流动相与50mL水于250mL分液漏斗中混合,用力振摇40s,静置分层,移出下层待用。

现用现配;
拉沙里菌素钠标准品:纯度≥99%;
拉沙里菌素标准溶液:准确称取拉沙里菌素,用少量四氢呋喃溶解,并用四氢呋喃稀释,配成浓度为mL的标准储备液。

用流动相分别稀释成20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL的拉沙里菌素标准工作液。

.仪器
液相色谱仪并配有荧光检测器;
自动进样器或50μL微量进样器;
全玻璃蒸馏装置;
均质器:500mL均质杯;
离心机;
离心管:30mL,50mL,具塞,带刻度;250mL。

4.试样的抽取与制备
.检验批
以不超过2500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。

.抽样数量
批量,件最低抽样数,件
1~25 1
26~100 5
101~250 10
251~500 15
501~1000 17
1001~2500 20
.抽样方法
按规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。

每件至少取一袋作为原始样品,原始样品总量不少于2kg,放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送实验室。

.试样制备
从每袋原始样品中取部分有代表性样品,将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀,充分混匀,用四分法缩分出不少于500g试样,装入洁净容器中,加封后,标明标记。

.试样保存
将试样于-18℃以下冷冻保存。

注:在抽样和制样过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述
.提取
称取约10g试样(精确至,置于500mL均质杯中,加入40mL乙腈,均质
2min,然后全部移入250mL离心管中。

在离心机上以2500r/min离心20min。

离心后,取上清液23mL于50mL离心管中,加入23mL正己烷,剧烈振摇20s。

再在离心机上以2000r/min离心20min,记录下层乙腈的体积(B)。

吸出上层正己烷弃去,取下层乙腈20mL,置于30mL离心管中,于60℃水浴中,在氮气流下吹至近干。

加用流动相饱和的水,旋摇20s。

再加入流动相,混合20s,在离心机上以2500r/min离心20min,上清液供液相色谱测定。

.测定
色谱条件
色谱柱:硅胶色谱柱(Hypersil 79916 SI,或相当者),5μm,100mm×(id);两个柱串联;
流动相:A液-B液;
流速:min;
荧光检测器:激发波长310nm,发射波长430nm;
进样量:50μL。

色谱测定
用流动相平衡至系统稳定,分别取20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、
200ng/mL浓度的标准工作液50μL,进行色谱测定。

以峰面积对应进样浓度绘制标准曲线。

取样液50μL进行色谱测定。

在上述条件下,拉沙里菌素的保留时间约为。

空白试验
除不加试样外,按上述测定步骤进行。

6.结果的计算
用色谱数据处理机或按下式计算样品中拉沙里菌素的含量:
X=A×4(B/23)
m
式中:X——试样中拉沙里菌素的含量,ng/g;
A——由标准曲线查得的样液中拉沙里菌素浓度,ng/mL;
B——加正己烷离心之后的乙腈体积,mL;
m——试样重量,g。

注:计算结果需扣除空白值。

7.测定低限、回收率
.测定低限
本方法测定低限为20ng/g。

.回收率
回收率实验数据:拉沙里菌素添加浓度在20~50ng/g范围内,回收率为%~%。

8.来源:
SN 0501—95。

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