二乙酰一肟-异丙醇-安替比林法测定游泳水中尿素

游泳池水中尿素的测定

随着人民生活水平的提高，游泳已成为人们消暑、娱乐、锻炼的一种方式，但游泳池水极易被污染，引起多种疾病的发生，因此，必须加强对游泳池水的卫生指标的监测。尿素是其中的一项卫生理化指标，游泳池水中尿素主要来自人体分泌物、排泄物，特别是汗液和尿液的污染，因而测定水中尿素是了解人为污染的重要指标。二乙酰一肟-安替比林分光光度法（GB/T 18204.29-2000）是游泳场所尿素测定的国家标准检验方法。该法虽具有标准系列线性好，灵敏度、重现性、回收率高等优点，但同时又有遇光退色，需特备棕色比色管操作，线性范围未包括卫生标准允许浓度，沸水浴时间较长等缺憾。本文选择异丙醇作显色稳定剂对游泳池水中尿素进行测定，并与标准方法作了对照试验，获得了满意的结果。

1 材料与方法

1.1仪器723A型分光光度计、水浴锅、25ml无色具塞比色管。

1.2试剂

1.2.1二乙酰一肟-异丙醇溶液称取1.0g二乙酰一肟溶于1+9乙酸溶液中，并使其总量为100ml，于此溶液中加入异丙醇50ml，混匀，棕色瓶中保存。

1.2.2安替比林溶液称取0.2g安替比林溶于1+1硫酸中，并使其总量为100ml，棕色瓶中保存。

1.2.3尿素标准贮备液称取0.1000g尿素，溶于少量水后移入1000ml容量瓶中，加0.1ml氯仿并用水定容，冷藏保存，此液1.00ml含0.100mg尿素。

1.2.4尿素标准使用液吸取尿素标准贮备液10.00ml于100ml容量瓶中，以水定容，此液1.00ml含10. 0ug尿素。

1.2.5实验用水均为去离子水。

1.3测定步骤

1.3.1吸取水样10.0ml于25ml无色具塞比色管中，另取同型比色管分别加入尿素标准使用液0、0.20、0.50、1.00、

2.00、

3.00、

4.00、

5.00ml，以水定容至25ml。1.3.2于上述各管中加入二乙酰一肟-异丙醇溶液1.50ml，混匀。再加入安替比林溶液2.00ml，混匀。

1.3.3各管加塞后同时置沸水浴中加热20min，取出，在流动的自来水中冷却2min。以水为对照，于460nm处，用1cm比色皿测定各管吸光度。

1.3.4计算标准系列直线回归方程，以水样吸光度代入方程，求出水样尿素含量。

2 结果

2.1最大吸收波长以30.0ug管作最大吸收波长测定，结果见表1。其λmax在460nm左右，与标准方法基本一致。

2.2标准系列本法标准系列测定结果见表2。尿素在0~50ug范围内与吸光度的关系符合比尔定律。直线回归方程Y＝0.013567X＋0.008，相关系数γ＝0.99969。

2.3重现性和回收率取人工游泳池水样6份，各作6次平行测定，计算重现性评价指标，并作加标回收测定，结果见表3。从表3可看出，其RSD值均＜5%，加标量在0.5~

3.0时，回收率在95.7%~10

4.1%之间。其重现性和回收率均较好。

2.4对照试验将上述水样同时以标准方法测定，取其均值与本法作对照试验，结果见表4。经作配对资料的统计学处理，结果表明：t＝1.040＜t0.05（t(5)0.05＝2.571），P＞0.05，两法测定结果差别无显著性意义。

2.5干扰试验向标准系列中加入下列浓度的干扰物（mg/L）：NH3-N 2、NO2-N 1、NO3-N 40、Cl- 400、ABS 2、Ca2+ 400、Cu2+ 2、Fe2+ 1、Mn2+ 1、Zn2+ 3、Ni2+ 3、有效氯15，对测定无干扰。大于上述浓度的NO2-有负干扰，大于上述浓度的有效氯有正干扰。

3 讨论

3.1尝试以异丙醇、异丁醇、正戊醇、丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、甲醛、正辛醇、异戊醇等十余种有机溶剂作显色稳定剂试验，结果显示：甲醛使显色无法进行；正辛醇、异戊醇水溶性差，溶液出现混浊；其余试剂均有显色稳定作

用，但以异丙醇显色后最稳定，灵敏度较高，水溶性好，且为常用试剂，无毒，易购得，故选之。异丙醇的使用，弥补了标准方法

3.2经实验，异丙醇用量在0.4~0.6ml/管时，空白值较低，灵敏度较高，稳定性好，故选其中间值（0.5ml/管），按此比例将其与二乙酰一肟试剂混合后加入，操作方便，且不影响二乙酰一肟试剂的稳定性。

3.3当二乙酰一肟溶液用量为1ml/管，其浓度为10g/L与20g/L时，灵敏度较高，且两者基本相同，而当其浓度为2g/L时，灵敏度大大降低，故选其浓度为10g/L。因其与异丙醇混合后一次加入，为达二物质最佳显色量，故该混合试剂加入量为1.5ml。

3.4当安替比林溶液用量为2ml/管，浓度为2g/L与10g/L时，对测定基本无影响，故保持标准方法中该试剂2g/L的浓度。

3.5实验表明，沸水浴时间从15~40min，随加热时间的延长，吸光度增加，标准斜率加大，继续延长加热时间，则线性变差。加热25min时，50ug管吸光度近0.8，仪器测定误差加大，故本法选用沸水浴加热20min，比标准方法的沸水浴50min时间大大缩短。因沸水浴时间不同，吸光度差别较大，故水样应与标准系列同批测定。同时，沸水浴容量应较大，避免过挤致受热不匀，使反应不均匀、完全。

3.6作标准系列及水样显色定容后立即至26h稳定性试验，实验结果显示：在显色定容后2h内呈色稳定，测定偏差小，比色测定最好在此期间完成。延长至20h间，吸光度值逐渐增大，但在此期间只要标准系列与水样为同批测定，对低、中浓度样品结果基本无影响，高浓度样品偏差稍大，但尚可接受（相对偏差＜5%）。若再延长时间则不可取。

3.7《游泳场所卫生标准》（GB9667-1996）中规定尿素应≤3.5mg/L。本法线性范围包容了上述浓度，对一般水样可直接一次测定完成，避免了标准方法测定尿素浓度在1.5~5mg/L水样时，因超出线性范围需将样品稀释后重新测定的麻烦及引入的误差。

本法从十余种有机溶剂中筛选出异丙醇作显色稳定剂，并经反复实验研究，对游泳池水中尿素测定的标准方法作了改进。与标准方法比较，有遇光不退色，可用普通无色比色管操作；线性范围扩大，一般游泳池水样可不经稀释一次完成测定；沸水浴时间大大缩短，节约时间等优点。应用于游泳池水中尿素的测定，其重现性、回收率、与标准方法的对照试验，均获得满意结果。