尿蛋白定量留存方法

关于24小时尿蛋白定量时尿液标本的留存方法：1.送检标本为从24小时尿中取3ML送检,并在化验单上注明24小时总尿量；2.防腐剂取甲苯或者二甲苯,本法主要的防腐原理为在尿液表面形成一薄层,从而阻止与空气的接触；3.加入量为每100ML尿加防腐剂0.5ML,要随着尿液收集的增多而逐次增多,如使用敞口容器收集尿液,可一次性多放些防腐剂,但最多不得超过每100ML尿液加2ML防腐剂,送检时,需用吸管吸取防腐剂下的标本送检。

地中海贫血简介一、概述：（一）定义地中海贫血是我国南方最常见的一种遗传病，是一类由于珠蛋白基因缺失或缺陷，而使某些珠蛋白肽链合成受抑制引起的溶血性贫血，又称珠蛋白合成障碍性贫血或海洋性贫血。

地中海贫血在广东的发病率相当高，α地中海贫血发病率高达7%—8%，β地中海贫血的发病率为2%—3%.（二）人类血红蛋白的组成。

1、人类血红蛋白的组成：人类血红蛋白是由4分子血红素和4条珠蛋白肽链组成的结合蛋白质。

这4条珠蛋白肽链是由两对不同的珠蛋白肽链组成，其中一对为α链(α,ξ),共141个氨基酸；另一对为非α链(β,γ,δ,ε),共146个氨基酸。

胎儿期的主要非α链是γ链，成人的主要非α链是β链。

在接近分娩时，γ链合成逐渐减少，β链合成逐渐增多。

2、人类不同时期血红蛋白的组成：（1）胚胎期血红蛋白：Hb Gower 1 （ξ2ε2）Hb Gower 2 (α2ε2 )Hb Portland (ξ2γ2 ) 即Hb Portland 1另有少量Hb Portland 2 (ξ2β2 )，Hb Portland 3 (ξ2δ2 )（2）胎儿期主要血红蛋白：HbF （α2γ2）（3）成人主要血红蛋白：HbA （α2β2）约占血红蛋白总量96.5—97.5%，是主要的携氧血红蛋白。

HbA2(α2δ2) 约占血红蛋白总量2.5—3.5%，是诊断α地贫和β地贫较灵敏的指标。

HbF （α2γ2）约占血红蛋白总量1%以下。

二、α地贫α地中海贫血是由于α基因缺失或缺陷而引起的α珠蛋白肽链合成障碍的疾病。

（一）分子机制：1、基因缺失正常人一条16号染色体上有两个α基因，两条16号染色体上共有四个α基因，缺失型α地中海贫血患者可发生1—4个α基因缺失。

2、点突变：这类α地中海贫血又称非缺失型α地中海贫血，有时也把它们并入类地中海贫血综合征。

最常见的是Hb Constant Spring，其142位的终止密码子发生有义突变，使得α链延长为172个氨基酸。

（二）临床分类：1、Hb Bart’S 胎儿水肿综合征这是α地中海贫血中最严重者，其基因型为（——/——）。

由于4个α基因全部缺失，完全不能合成α链，不能形成HbF（α2γ2），相对过多的γ链形成γ链四聚体γ4，γ4称为Hb Bart’S，Hb Bart’S氧亲和力高，释放给组织的氧很少，胎儿由于严重缺氧，全身水肿。

胎儿患此症者大多于妊娠30—40周，平均34周时，成为死胎或早产后不久即死亡。

这种胎儿生下时，全身水肿苍白，胎盘大而易碎，可有轻度黄疸、出血点多见，脑血管常显著弯曲，肺发育不全，心脏明显肥大，胸腺缩小，肝脾肿大、腹水较多，胸腔及心包内亦常有积液，骨髓中红髓增生过多，含铁血黄素沉着明显增多（表示曾有严重溶血），肝、脾和其他器官中有髓外造血。

贫血常较重，血红蛋白30—100g/L，平均60—70g/L。

红细胞的MCV偏大，MCHC常低。

红细胞大小不匀、异形、染色嗜碱以及靶形红细胞都很明显。

网织红细胞显著增多。

末梢血中有较多有核红细胞。

电泳：大部分为Hb Bart’S，HbH可有少量或无，其余均为Hb Portland。

患儿父母均至少缺失两个α基因。

2、血红蛋白H病血红蛋白H病属于中间型α地中海贫血，其基因型为（—α/——）或为（α—/——），缺失3个α基因，仅可合成少量α链，β链相对过多，多余的β链形成β链四聚体β4，β4即HbH。

此类患者临床表现变动范围很大，有的可相当严重，有的病情较轻，可无明显不适。

出生时婴儿可无贫血或只轻度贫血，肝脾亦不肿大，但红细胞形态异常已经存在。

出生后一年其临床特点可显示出来，2/3以上病例有肝脾肿大，重者可见轻度黄疸。

贫血可因感染和服用氧化性药物而加重。

胆结石为常见并发症。

血红蛋白大多在70—100g/L间，但贫血严重时，可低至30g/L。

红细胞低色素明显，靶形红细胞多见，大小不匀，异形红细胞多见，渗透脆性明显减低。

红细胞经活体培养染色后可见较多亨氏小体（Heinz body）。

电泳：成人：可见HbH ，有的患者HbH含量很少，容易漏诊，需要结合红细胞形态和亨氏小体。

HbA2：降低。

新生儿：Hb Bart’S较多，HbH少量，随着年龄的增大（γ链合成减少,β链合成增多），HbH逐渐增多，Hb Bart’S逐渐减少，到6个月时Hb Bart’S可完全消失。

3、轻型α地中海贫血轻型α地中海贫血是按临床分类所划分，轻型α地中海贫血按α基因缺失的多少又可分为标准型α地中海贫血（缺失两个α基因）和静止型α地中海贫血（缺失一个α基因）。

轻型α地中海贫血可无任何临床症状，也可以没有贫血或只轻度贫血，临床上很难做出正确的诊断。

有的患者红细胞可有轻度异常，可见到小红细胞、异形红细胞。

红细胞经活体培养染色后可找到蓝紫色较大的亨氏小体（本实验所检测的亨氏小体是一种变性珠蛋白小体，是由相对过多的β链聚合成β链四聚体沉积在红细胞膜上而形成）。

电泳：成人：Hb A2轻微降低或正常。

HbA正常。

新生儿：可见少量的Hb Bart’S，Hb Bart’S在3个月后消失。

新生儿血红蛋白电泳发现Hb Bart’S是诊断轻型α地中海贫血最有价值的方法之一。

（三）防治：1、轻型α地中海贫血：轻型α地中海贫血对患者本人并无多大不良影响，也不需治疗，但在遗传上有重要的意义。

若夫妻双方均为——/αα型地中海贫血，则有1/4可能性生下Hb Bart’S 胎儿，生下正常胎儿的可能性也仅为1/4。

若能准确地诊断出夫妻双方均为——/αα轻型α地中海贫血，则可以在妊娠期间进行B超检查、基因检查或抽取胎儿血做血红蛋白电泳，若发现为Hb Bart’S 胎儿，可考虑尽早终止妊娠。

2、血红蛋白H病：患有HbH病的患者在病情稳定的情况下，多数病人不需治疗。

当贫血加重时，首先应注意有无感染、服用药物促使贫血加重。

许多药物，特别是氧化性药物如磺胺类药，均能促使红细胞内的HbH发生沉淀而加速溶血。

如病人还有缺铁情况，应给以铁剂。

输血在病情稳定的情况下并不需要。

只有在急性溶血较严重、贫血一时不能很快纠正时，可以考虑输血。

长期较严重的贫血或巨脾患者，可考虑切除脾脏。

贫血虽然较严重，但如感染、服药或其他加重贫血的因素尚未排除，不应贸然施行脾切除术。

需要注意的是：脾切除后，患者容易感染。

3、Hb Bart’S 胎儿水肿综合征：Hb Bart’S 胎儿水肿综合征尚无有效的治疗措施，目前所能做的只能是有关婚姻和生育方面的医学指导，争取做到尽量避免、尽早发现。

三、β地中海贫血β地中海贫血是由于β珠蛋白肽链合成减少或完全不能合成所造成的。

β链合成减少者称为β+地贫，β链完全不能合成者称为β0地贫。

（一）分子机制1、点突变绝大多数β地贫是由于β珠蛋白基因发生点突变所致，突变涉及基因功能结构各个环节。

2、β基因缺失（二）β地中海贫血的临床分类1、重型β地中海贫血重型β地中海贫血是威胁生命的严重疾病，β链几乎不能合成或合成很少。

正常情况下，成人α链和β链的合成比例是相等的，β链主要用于HbＡ的合成，如果没有β链或β链合成很少，则大量的α链呈游离状态，游离的α链很不稳定，易在RBC内生成沉淀，形成α链的包涵体，损伤细胞膜，使细胞变得僵硬，不能通过脾窦内皮间隙，而被巨噬细胞吞噬破坏。

有包涵体的无核RBC，进入血液循环后，亦因其变形性差，通过脾脏时被扣留，“摘除”包涵体，同时带走部分细胞膜而使RBC变成泪滴状，循环血液中，RBC的寿命大大缩短。

重型β地贫患者初生时与一般正常婴儿无异，因为此时的非α链主要是γ链，血红蛋白成份主要是HbF，β链合成受抑制所引起的HbA减少并不明显。

但随着γ链的合成量显著减少，出生约6个月后，患者即日渐苍白，出现黄疸，肝脾肿大，腹部膨隆，发育障碍，智力迟钝，易感染和发热，皮肤色素沉着，下肢可出现慢性溃疡。

重型β地中海贫血病人可出现“愚样型面容”，形成原因与红细胞大量破坏，骨髓必须超常制造RBC而使得骨髓腔扩大有关。

患者可发生多种并发症。

慢性溶血和长期多次输血可引起继发性血色病或铁血黄素沉着症，心肌易累及，可引起心律紊乱、传导阻滞和心力衰竭。

患者贫血常很严重。

红细胞大小不等，低色素明显，红细胞形态异常明显，红细胞渗透脆性显著减低。

电泳：HbF明显增高；HbA明显减少或消失；HbA2变动较大，但增高者并不多见。

2、中间型β地中海贫血中间型β地中海贫血是临床名称，是其临床症状、贫血程度介于重型与轻型之间的β地中海贫血。

本病一般于4—5岁时发病，呈慢性中度贫血，生长发育正常，脾中度肿大，可生存至成年，红细胞异常较多见。

电泳：HbF增高；HbA减少；HbA2可有增高。

3、轻型β地中海贫血多数患者症状较轻或无症状，只轻微贫血或无贫血，可见小红细胞、靶形红细胞和其他异形红细胞，渗透脆性可降低。

电泳：HbF正常或略微增高；HbA2增高。

HbA2是诊断轻型β地中海贫血较为特异的指标（注意：轻型β地中海贫血复合α地中海贫血时，其Hb A2也可增高）。

（三）防治：1、预防：夫妻双方均为β地中海贫血的患者，可在妊娠期间做β基因检查以确定胎儿是否患有β重型地中海贫血。

2、治疗：严重贫血患者可给予输血，对反复输血引起的铁负荷过重者可试用促进铁排泄的螯合剂；脾功能亢进者可考虑切脾，但疗效较HbH病差，且易感染。

四、δβ-地中海贫血δβ-地中海贫血的δ链和β链合成受抑制，其患者HbF常增高；纯合体病人只有HbF，故这种疾病也叫F-地中海贫血。

1、纯合体δβ-地中海贫血纯合体δβ-地中海贫血多属中间型地中海贫血，常有中等程度贫血，某些病人可有轻度黄疸或脾肿大，也有体检未见异常者。

血片：红细胞中等程度的着色不足，明显的形态异常和大小不等，并有不同数量的靶形红细胞，红细胞渗透脆性降低，根本无HbA2，只有HbF。

2、杂合体δβ-地中海贫血与轻型β-地中海贫血相似，但HbA2水平不高，HbF增高。

Hb：正常或稍低红细胞：形态同轻型β-地中海贫血，可见小红细胞和异形红细胞。

电泳：HbA2水平往往正常，HbF增高。

五、δ地中海贫血δ地中海贫血是很少见的一种地中海贫血，其特点是单纯的杂合子的HbA2减少，纯合子则HbA2完全没有。

无论杂合子或纯合子者，HbA及HbF均仍正常，红细胞形态无异常，也不发生贫血。