昆明山海棠免疫抑制活性成分导向分离研究

s , n=
由表 3 可见 , 昆明山海棠 总碱具 有一定 的抑制 小鼠溶血 素
2
结果
2. 1 昆明山海棠 总提 取 物 THT 对溶 血素 抗 体生 成 的影 响 结果见表 1。
抗体生成 作用 , 且 似具 有一 定量 - 效关 系 , 当 剂量 达 48m g /kg 时有显著抑制作用。 2. 4 昆 明山海 棠总碱 对小鼠 二甲苯 性耳部肿 胀的影 响 结 果见表 4。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 昆明山 海棠由专 人採 集自 四川凉 山自 治州 ,
採集时间 10~ 11 月。基于前期工作对新鲜药材样品 进行处理 , 并提取其活性总成分 ( 提取物 THT ) 。进一 步将提 取物 THT 分 离为三个部位 , 即 THT - 1、 THT - 2、 THT - 3 ; 另 直接 从昆 明山 海棠中制得两个部位 即 THK - 1、 THK - 2。应 用常规 和特殊技 术分离制备 昆 明山 海棠 总 生物 碱 和 雷藤 甲 素 , 雷 藤甲 素 含量 99% 。 阿斯匹林市售。环磷酰胺 为上海第十一制药厂产品。 上述样品均临用 配制 , 剂 量一般 折算为 原生药 量。各样品 称量后于乳钵中研 极细 , 逐渐加 入 0. 5% CM C 液 继续研 匀并配 成均一悬液 , 冰箱保存 , 使用期 一月。环 磷酰胺使用期一天。 1. 2 动物 小白鼠 , 昆明 种 , 体重 18~ 22g ; 来亨鸡 , 成 年 , 雄 性。以上动物均由四川省中药 研究所实验动物研究室提供。 1. 3 方法 1. 3 . 1 对溶血素抗体生成的影 响 小鼠随机分组 , 经口给药 或等容 CM C 液 , 于第一次给药同时 , 腹腔 注射 10% 鸡 红细胞悬 液 0. 2m l/只免疫 , 每天给药一次 , 连 续给药 5 天 , 第 6 天从小鼠 眼眶后静脉丛取 血 , 分离 血清 , 按 我组 常规 溶血 素抗 体检 测方 法 , 即徐学瑛所 述 方法 [ 3] 加以 修 改测 定 各 样品 的 半数 溶 血值 HC50。 1. 3 . 2 对二甲苯所致 小鼠耳肿胀的影 响 小鼠 随机分 组 , 灌 胃给予药物悬 液或等 容 CM C 液 , 60 分钟 后于 鼠右 耳用微 量注 射剂滴二甲苯 0. 02m ,l 待其浸 满鼠耳 , 30 分 钟后将 小鼠 拉颈处 死 , 剪下小鼠双耳 , 用 7mm 打孔器铳下左右鼠耳相同部 位耳片 , 100m g扭 力天平 称重 , 以 左右鼠 耳重 量差的 mg 数 作为 肿胀程 度。
表 3 10) 组别 对照 昆明山海棠总碱 昆明山海棠总碱 昆明山海棠总碱 昆明山海棠总碱 环磷酰胺 6 12 24 48 20 剂量 ( mg / kg) H C 50 300 269 296 214 195 146 32 59 32 56 52* 32
* * *
昆明山海棠总碱对小鼠溶血 素抗体生 成的影响 ( x
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表 4 = 10) 组别 对照 昆明山海棠总碱 昆明山海棠总碱 昆明山海棠总碱 阿斯匹林 12 24 48 250 剂量 ( mg /kg)
中药药理与临床 2007 ; 23( 3)
昆明山海棠总碱对二甲苯所致小鼠耳部肿胀的影响 ( x 肿胀度 ( m g) 27 . 95 32 . 21 21 . 15 19. 13 15 . 25 9 . 84 9 . 47 7 . 44 12 . 12
3
讨论
上世纪八十年代 初 , 我们首 次报告 了昆明 山海棠 具有显著
的免疫抑制与抗炎作 用 [ 1, 4] , 并据此研 制了火把花 根片 , 临床用 于治疗类风湿性关节 炎、 慢性肾 炎等具 有显著 疗效而 毒副作用 轻微 , 但其一直未能 建立 良好 的质 量控 制标 准 , 主要 原因 之一 就是其效毒成份不明 。 与 雷公藤 相似 , 昆 明山海 棠所 含活性 成份 十分 复杂 , 且活 性强而量微 , 主要含有多种二萜内酯、 生物碱、 三萜等活性物质。 药理研究表明昆明山海棠除 具有显 著抗炎 免疫抑 制作用 外 , 还 具有强的生殖活性。作为对 自身免 疫性疾 病的治 疗 , 其生殖活 性并非好事 ; 而作为 计生 生殖 方面 的应 用 , 其免 疫抑 制活 性也 非所期望。因此 , 阐明昆明山海 棠的主 要活性 成分及 其药理活 性特点就具有一定意 义。为 此 , 本文试 以溶血 素生成 抑制活性
* * * *
昆明山海棠各分离样品对小鼠溶血素生成的影响 ( x
s , n=
140 44* 281 59 276 231 113 66 83* 30
*
* *
由表 2 可见 , 在 昆 明山 海棠 各 分离 提取 部 位中 , THT - 1 、 THT - 2 具有显著的溶血 素抗体生成抑制 作用 , THK - 2 作用 较 弱 , 其余部位 THT - 3、 THK - 均未见有明显作用。 2. 3 昆明山海棠总碱对溶血素抗体生成的影响 结果见表 3 。
表 1 对照 THT THT THT THT 环磷酰胺 与对照组相比 * 2. 5 5 10 20 20m g /kg P< 0. 05 ,* * P< 0 . 01( 下同 ) TH T 对小鼠溶血素生成的影响 ( x 组别 剂量 ( g 生药 /kg) s , n = 10) H C 50 346 325 269 205 144 116 32 26 21* 26* 42* 28*
羚羊角为牛科 动物赛 加羚羊 Saiga tatar ica L . 雄 兽的 角 , 始 载于 神农本草 经 , 具 有平 肝熄 风 , 清 肝 明目 , 散 血 解毒 的功 效 , 临床上主要用于高热惊 痫 , 神 昏惊厥 , 头 痛眩晕 等证。羚羊 角临床疗效确切 , 但是其基础 研究却 很薄弱。 本文报 告羚羊角 的解热和抗惊厥作用 。
由表 可见 , THT 具 有显 著的 溶血 素生 成抑 制作 用 , 且该 作 用量 - 效关系良好 , 最低有效量为 5g( 生药 ) /kg。 2. 2 昆 明山海 棠各分 离样品 对小鼠 溶血素生 成的影 响 结 果见表 2。
表 2 10) 组别 对照 环磷酰胺 THT - 1 THT - 1 THT - 3 THK - 1 THK - 2 雷藤甲素 20m g /kg 20 20 20 20 20 0. 15m g/ kg 剂量 ( g 生药 /kg) H C 50 307 73 119 27 38* 37
* * *
我们的前期研究 表明 , 昆明 山海棠 具有很 强的免 疫抑制活 性 [ 1] , 其单味和复方制 剂用于 类风 湿性 关节 炎、 系统 性红 斑狼 疮、 慢性肾炎的治疗具有良好疗 效而毒 副反应 较轻 [ 2] 。昆明山 海棠含有多种活 性成 分 , 为研 究其 免疫 抑制 活性 主要 部位 , 我 们进行了免疫抑制作 用导向的成分分离研究。
及对垂体 - 肾上腺皮质系统功能的影响 . 中草药 , 1981; 12( 8)
羚羊角解热抗惊厥作用研究
* * 1
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卢熀兴, 李友宾 , 彭蕴茹 , 汪银银 , 段金廒 1 ( 江苏省中医药研究院, 南京 210028 ; 南京中医药大学 , 南京 摘 要
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210029)
目的 : 研究羚羊角细粉及其水提液的 解热和抗惊厥作用 。方法 : 采用酵母致大鼠发热及内毒素 、 鲜牛奶 与 2 , 4- 二
* 6. 12
s , n
为指标对 昆明山海棠主要 有效 成分 ( 部 位 ) 进行 了活性 导向 的 分离研究。 从本 文结果看 , 昆明山海棠总提取物 THT 具 有显著的溶 血 素生成抑制活性且该 作 用量 - 效 关系 良好。 从其 分离 的三 个 部位来看 , THT - 1、 THT - 2 具有相 似活性而 THT - 3 无免疫 抑 制活性 , 应当指出的是此一部 分是 THT 的 主要部 位 , 占 THT 含 量的 80% 。 THT - 1、 THT - 2 分别占 THT 的 5 . 22 % 与 11. 33% , 表明 THT 的溶血素抗体生成抑制活性部位 集中于此 , 特别集 中 于 THT - 1 。 生物 碱是昆明山海棠的主要 组分之 一 , 曾 有许多 报告认 为 生物碱是 昆明山海棠的主要有效 成分 , 本文研 究结果 表明昆 明 山海棠总生物碱确有 一定 免疫 抑制 活性 , 但抗 炎作 用 , 生物 碱 在昆明山海棠临床治疗中的作用值得进一步探讨。
1
材料与方法
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国家中医药管理局课题
* * 通讯作者
能的影响 . 中草药 , 1981 ; 2( 10 )
邓文龙 . 昆明山海棠 . 见: 王浴生 , 邓文龙 , 薛春生 , 主编 . 中药药理与
应用 . 第二版 , 人民卫生出版社 , 1999 报, 1979 ; 14 ( 7)
3 徐学瑛 . 一个改进的体 液免疫测 定方 法 443
4 邓文龙 , 聂仁吉 , 刘家玉 . 昆明 山海棠的 药理作用 研究
参考文献 1 2 邓文龙 , 聂仁吉 , 刘家玉 . 昆明山海棠的 药理作用研 究 26~ 30 688~ 696 溶 血素测 定法 . 药学 学 . 抗炎作 用 22 ~ 26 . 对免疫 功
由表 4 可见 , 随剂量增大 , 昆明山海棠总碱对 二甲苯所致小 鼠耳肿胀似有作 用增强 的趋 势 , 但在 所用剂 量下 ( 48mg /kg ) 未 见有明显的抗炎作用 。
中药药理与临床 2007 ; 23( 3)
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昆明山海棠免疫抑制活性成分导向分离研究
吴瑕 , 陈东辉 , 邓文龙 ( 四川省中药研究所 , 成都 610041) 摘 要
目的 : 探寻昆明山海棠免疫抑制活性主要部位 。 方法 : 应用鸡红 细胞免疫 所致溶血素 抗体生成 抑制进 行活性导 向
成分分离研究 。 结果 : 溶血素抗体生成抑制活性主要集中于 THT - 1 部位 , 该部位占昆明山海棠总活性部位的 5. 22% 。 昆明山海棠 总生物碱具有一定免疫抑制活 性 。结论 : 昆明山海棠免疫抑制活性主要部位为 THT - 1 , 昆明山 海棠总生 物碱也具有 一定免疫 抑制 活性 。 关键词 昆明 山海棠 ; 免疫抑制 ; 总生物碱 ; 活性导向成分分离