生物化学实验内容16300
华理生物化学实验报告
华理生物化学实验报告华理生物化学实验报告一、引言生物化学实验是生物学和化学两个学科的交叉领域,通过实验手段研究生物体内的化学反应和分子结构。
本次实验旨在探究华理生物化学实验的实验内容和实验方法,并对实验结果进行分析和讨论。
二、实验目的本次实验的主要目的是掌握华理生物化学实验的相关知识和技能,了解生物体内的化学反应过程,培养实验操作能力和科学思维。
三、实验内容本次实验涉及到以下几个方面的内容:1. 蛋白质的分离与纯化:通过离心、过滤、电泳等方法,将蛋白质从混合溶液中分离出来,并进行纯化处理,以获得高纯度的蛋白质样品。
2. 酶的活性测定:通过酶促反应,测定酶的活性,了解酶在生物体内的重要作用。
常用的测定方法有比色法、荧光法和放射性同位素法等。
3. 脂类的提取与分析:通过溶剂萃取、薄层色谱等方法,提取和分析生物体内的脂类物质,了解脂类在生物体内的功能和代谢。
4. 糖类的测定和分析:通过酶促反应、比色法等方法,测定生物体内的糖类含量,并对其进行分析和研究,了解糖类在生物体内的重要作用。
四、实验方法1. 蛋白质的分离与纯化:将混合溶液经过离心分离,得到上清液,然后通过过滤、电泳等方法进行纯化处理。
2. 酶的活性测定:将酶样品与底物反应,观察反应产物的生成情况,并通过比色法、荧光法等测定酶的活性。
3. 脂类的提取与分析:将生物样品与有机溶剂进行溶剂萃取,得到脂类提取物,然后通过薄层色谱等方法进行分析。
4. 糖类的测定和分析:将生物样品与酶反应,观察反应产物的生成情况,并通过比色法等方法测定糖类的含量。
五、实验结果与讨论根据实验方法的操作步骤,我们得到了一系列实验结果。
通过对实验结果的分析和讨论,我们可以得出以下结论:1. 蛋白质的分离与纯化:通过离心、过滤、电泳等方法,我们成功地将蛋白质从混合溶液中分离出来,并获得了高纯度的蛋白质样品。
2. 酶的活性测定:通过酶促反应和比色法的测定,我们得到了酶的活性数据,并对其进行了分析和讨论。
生物化学实验报告
生物化学实验报告生物化学是一门研究生命体系中化学成分和物质转换过程的科学,其实验研究对于揭示生命的本质、改善人类生命质量具有重要意义。
本文将以实验报告的形式,介绍一次生物化学实验的设计、过程和结果。
一、实验目的本次实验的目的旨在从多个方面探究某种生物化学物质的结构、性质及功能,以及探索该物质在生命体系中的作用。
具体的实验目标包括:1. 通过化学方法及相关仪器对该化合物的分子结构进行分析和测定;2. 对该化合物的氧化还原性进行测定,并探究其可能的氧化还原反应机制;3. 通过光谱分析、酶活性测定等方法,确定该化合物在生命体系中的作用及其机制;4. 总结实验结果,探讨该化合物在生物化学领域中的应用及前景。
二、实验步骤本次实验主要包括以下步骤:1. 提取目标化合物。
选用某一生物体组织作为原料,在适当的化学反应条件下,经过酶促反应、液液抽提、柱层析等步骤,旨在获得目标化合物的高纯度样品。
2. 分析结构。
使用核磁共振(NMR)、高效液相色谱(HPLC)、紫外可见光谱(UV-vis)等现代科学仪器和技术,对提取的化合物进行结构分析和测定,以揭示化合物分子结构,及其性质和可能的反应机制。
3. 氧化还原性测定。
利用常用的氧化还原滴定法,对化合物的氧化还原性进行测定,及探究其可能的氧化还原反应机制。
4. 酶活性测定。
通过对该化合物活性酶的特定底物的催化反应,测定其反应速率及相关动力学参数,以推测该化合物在生命体系中的作用方式及机制。
5. 总结实验结果。
根据所测得的实验数据和分析结果,对该化合物的结构、性质及功能进行总结,即探讨其在生物化学领域中的应用及未来前景。
三、实验结果及分析根据实验数据和分析结果,我们可以得出以下结论:1. 通过化学反应及柱层析等步骤,我们从生物体组织中获得了目标化合物,并通过核磁共振(NMR)等技术分析,揭示了化合物的结构;2. 通过常用的氧化还原滴定法,我们测定了化合物的氧化还原性,并推测了其可能的氧化还原反应机制;3. 通过酶活性测定等方法,我们推测了该化合物在生命体系中的作用机制及性质,具体表现为一定的生物活性及催化能力;4. 综合以上实验结果,我们总结了该化合物在生物化学领域中的应用前景,并探讨了可能的发展方向及挑战。
生物化学实验(整理版)
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
2. 实验报告的要求:内容完整、条理清晰、数据准确、分析深入、讨论充分、结论明确。
五、实验拓展1. 结合实验内容,查阅相关文献,了解生物化学领域的最新研究进展。
2. 尝试设计新的实验方案,对生物化学现象进行深入探究。
3. 参加学术讲座、研讨会等活动,拓宽生物化学知识面。
生物化学实验(整理版)一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本原理和方法。
2. 掌握实验操作技能,提高实验技能。
3. 培养科学探究能力,提高分析问题和解决问题的能力。
4. 深入了解生物体的化学组成、结构、功能及其相互关系。
二、实验内容1. 氨基酸的分离与鉴定2. 蛋白质的结构与性质3. 酶的催化作用与活性测定4. 糖类的分离与鉴定5. 脂类的提取与鉴定6. 核酸的分离与鉴定7. 代谢途径的探究三、实验操作1. 实验前的准备工作:了解实验原理、实验目的、实验步骤、实验所需试剂和仪器等。
2. 实验过程中的注意事项:严格按照实验步骤进行操作,注意实验安全,保持实验环境的整洁。
四、实验报告1. 实验报告的格式:包括实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验讨论、实验结论等部分。
生物化学实验
生物化学实验讲义化学工程与技术学院基础部实验一酪蛋白的制备一、目的学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。
二、原理.牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L。
酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7。
利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。
用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。
三、器材1 、离心机2、.抽滤装置3、精密pH试纸或酸度计4、电炉5、烧杯6、温度计.四、试剂与材料1、牛奶2500mL2、95%乙醇1200mL3、无水乙醚1200mL4、0.2mol/L pH 4.7醋酸—醋酸钠缓冲液3000mL5、.乙醇—乙醚混合液2000mL五、操作1、将100mL牛奶加热至40℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH 4.7的醋酸缓冲液100 mL。
用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。
将上述悬浮液冷却至室温。
离心15分钟(3 000r/min)。
弃去清液,得酪蛋白粗制品。
2、用水洗沉淀3次,离心10分钟(3000r/min),弃去上清液。
3、在沉淀中加入30mL乙醇,搅拌片刻,将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。
用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。
最后用乙醚洗沉淀2次,抽干。
4、将沉淀摊开在表面皿上,风干;得酪蛋白纯晶。
5、准确称重,计算含量和得率。
含量:酪蛋白g/100mL牛乳(g%)得率:测得含量100%理论含量思考题1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么?实验二小麦萌发前后淀粉酶活力的比较一、目的1.学习分光光度计的原理和使用方法。
2.学习测定淀粉酶活力的方法。
3.了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。
二、原理种子中贮藏的糖类主要以淀粉的形式存在。
淀粉酶能使淀粉分解为麦芽糖。
2(C6H10O5)n +nH2O nC12H22O11麦芽糖有还原性,能使3,5---二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基-5-硝基水扬酸。
后者可用分光光度计测定。
OH COOH NO 2O 2N OHCOOHO 2N NH 23,5 —二硝基水杨酸还原反应(棕色)休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,酶活力逐渐增强,并随着发芽天数增加而增加。
生物化学实践报告(2篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过生物化学实验,加深对生物大分子结构和功能的理解,掌握蛋白质、核酸等生物大分子的提取、分离和鉴定方法,并学会使用相应的实验技术和仪器。
二、实验原理1. 蛋白质的提取与鉴定:蛋白质是生命活动中的重要物质,其提取和鉴定是生物化学研究的重要内容。
本实验通过蛋白质的盐析、电泳等方法,实现对蛋白质的提取和鉴定。
2. 核酸的提取与鉴定:核酸是生物遗传信息的携带者,其提取和鉴定对于研究生物遗传具有重要意义。
本实验通过酚-氯仿法提取DNA,通过比色法测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定:酶是生物体内催化反应的催化剂,其活性测定是研究酶的重要方法。
本实验通过测定酶促反应速率,计算酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 材料:新鲜动物组织、化学试剂、缓冲液、电泳凝胶等。
2. 仪器:高速离心机、电泳仪、分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 蛋白质的提取与鉴定(1)取一定量新鲜动物组织,加入适量缓冲液,研磨。
(2)将研磨液离心,取上清液即为蛋白质提取液。
(3)将蛋白质提取液加入等体积的95%乙醇,混匀,静置。
(4)取沉淀,用少量双蒸水洗涤,干燥,溶解于适量双蒸水中。
(5)将蛋白质溶液进行SDS-PAGE电泳,观察蛋白质条带。
2. 核酸的提取与鉴定(1)取一定量新鲜动物组织,加入适量缓冲液,研磨。
(2)将研磨液加入等体积的酚-氯仿,混匀,静置。
(3)取上清液,加入等体积的异丙醇,混匀,静置。
(4)取沉淀,用少量双蒸水洗涤,干燥,溶解于适量双蒸水中。
(5)用分光光度计测定DNA的浓度。
3. 酶的活性测定(1)配制底物溶液。
(2)将底物溶液加入酶溶液,记录反应速率。
(3)根据反应速率计算酶的活性。
五、实验结果与分析1. 蛋白质的提取与鉴定:通过SDS-PAGE电泳,成功分离出多条蛋白质条带,表明实验中成功提取了蛋白质。
2. 核酸的提取与鉴定:通过比色法测定,成功提取出DNA,浓度为0.5μg/μL。
生物化学实验
分离胶
缓冲液成分及pH的不连续性导致蛋白质样品浓缩效 应示意图
快离子 慢离子 蛋白质 样品
电位梯度的不连续性
E:每厘米的电压降 E=I(电流强度)/(电导率) E与电泳速度成正比
电泳开始后,由于快离子泳动 率最大,在快离子后面形成一 个离子浓度低的低电导区,产 生较高的电位梯度,使蛋白质 和慢离子加速移动,蛋白质样 品被进一步浓缩。
(2)离子交换层析
原理:将能与周围介质进行离子交换的不稳定离子固 定于惰性基质上,从而分离介质中的组分。 常用的惰性基质:人工合成树脂(单体:苯乙烯、交 联剂:二乙烯苯) 阳离子交换剂:磺酸甲基、羧甲基、磷酸基 阴离子交换剂:二乙基胺乙基、三乙基胺乙基 可交换离子:阳离子:Na+、H+ 阴离子:Cl-、OH-
浓缩胶T=2.8% C=20%;分离胶T=7% C=2.5%
B.缓冲液成分的不连续性:
凝胶缓冲液Tris-HCl,含Cl-,电极缓冲液Tris-Gly,Gly-
C.pH的不连续性:
浓缩胶pH6.7,分离胶pH8.9,电极缓冲液pH8.3
D.电位梯度的不连续性
5.盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
(2)盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的三种效应
原理:被分离物质因分子大小不同,在凝胶中向下移动的
速度不同。 物质进入凝胶柱之后有两种运动方式:垂直向下移动和无定向 的扩散运动。大分子物质直径大无法进入凝胶颗粒内,只能分 布于颗粒间隙中向下移动快,而小分子物质可扩散到凝胶颗粒 内,因此向下移动慢。
凝胶物质:马铃薯淀粉凝胶、琼脂、琼脂糖凝胶、聚丙烯
缓冲液
生物化学实验内容
生物化学实验内容生物化学实验内容一、细胞的酶促反应实验实验原理:酶是生物体内起调节和催化作用的一类蛋白质,它能够催化某些基质(叫底物)的反应,促使底物转化成产物的过程。
本实验以酵母中的酶为例,研究酵母如何利用葡萄糖进行发酵反应,以产生二氧化碳气体。
实验步骤:1. 准备酵母发酵液:先在酵母粉中加入适量的葡萄糖,加入5%的酵母悬液,搅拌均匀,然后使用减压过滤器将液体过滤,并将过滤出的发酵液倒入操作管内。
2. 制备实验装置:将操作管与气体收集瓶通过U型玻璃管连接起来,用消毒酒精灯将管道消毒,然后将取样器放到气体收集瓶内。
3. 开始实验:将操作管倒置放在气体收集瓶内,然后用黄色指示移交管检测样品PH值。
等取样器内的气体达到稳定状态后,记录气体体积和温度,计算出气体的体积(记为V),并使用计算器计算气体里面的CO₂体积比例(%VCO₂=气体中CO₂体积/气体总体积)。
4. 重复实验:重复三次以上实验,计算平均值并分析实验数据。
实验结果:根据实验可得,当葡萄糖浓度越高时,发酵液中可产生的二氧化碳气体就会越多。
而当发酵液中的酵母数量增加时,发酵反应速率增快,产生的二氧化碳气体也会相应增多。
另外,当发酵温度过低或酸碱度过高,也会影响酵母的生长繁殖和发酵反应。
二、酶的催化实验实验原理:酶能够将底物转化成产物,同时不会自身发生变化,其催化作用也受到环境因素的影响。
本实验通过比较未加酶的底物和加入酶的底物的反应速率,来探究酶的催化作用。
实验步骤:1. 制备酶溶液:取适量的胰蛋白酶,加入适量的缓冲液,搅拌均匀,制成胰蛋白酶溶液。
2. 制备底物溶液:取适量的葡萄糖溶液,分成两份。
其中一份为未加酶的底物。
3. 加入酶溶液:将另一份葡萄糖溶液加入适量的酶溶液中,即为加入了酶的底物溶液。
4. 测定反应速率:分别加入两份底物溶液到不同的试管中,同时开始计时,观察反应产物生成的颜色变化,记录每个时间点的吸光度。
5. 分析实验结果:根据实验数据和曲线分析,可以得出在加入酶的情况下,底物反应速率明显比未加酶的底物快。
生物化学实验报告
生物化学实验报告实验目的:检测和分析生物体内的化学组成,探究生物体的生化特性。
实验原理:生物体的化学组成包括有机物和无机物两部分。
有机物主要包括碳水化合物、脂类、蛋白质和核酸等,而无机物主要包括无机盐和水等。
通过一系列的实验方法,可以从样品中提取不同类型的有机物和无机物,并进行定性和定量分析。
实验步骤:1. 样品准备:根据实验需求,选择适当的样品,例如植物组织、动物组织或微生物等。
将样品处理成适合实验的形态,例如研磨、切片等。
2. 碳水化合物检测:使用本实验常用的碘试剂(碘/碘化钾溶液),将其滴于样品上。
观察样品颜色的变化,从而初步判断样品中是否含有碳水化合物。
3. 脂类检测:使用苏丹红等油脂染色剂,将其滴于样品上,并进行加热处理。
观察样品的颜色和油脂染色剂的溶解情况,判断样品中是否含有脂类。
4. 蛋白质检测:使用比达氏试剂或尼氏试剂等常用蛋白质染色剂,将其滴于样品上,观察样品颜色的变化。
从颜色的深浅可以初步判断样品中蛋白质的含量。
5. 核酸检测:使用尤德试剂等核酸染色剂,将其滴于样品上。
观察样品的颜色变化,通过比较控制组和实验组的颜色深浅差异,初步判断样品中是否含有核酸。
6. 无机盐检测:使用酸碱指示剂或离子选择电极等方法,测定样品中不同离子的浓度。
通过比较实验组和对照组的浓度差异,判断样品中无机盐的含量。
实验结果:根据实验所得数据和观察结果,可以得出样品中各种化学组分的存在与否以及可能的含量范围。
将结果用表格、图形等形式展示,便于后续的数据分析和讨论。
实验讨论:在讨论部分,可以对实验结果进行深入分析和解释,探讨样品中各种化学组分的生理功能和相互关系。
同时,还可以对实验过程中可能存在的误差和改进方向进行讨论,提出相应的建议。
结论:根据实验结果和讨论,得出样品的生化特性和组成成分。
在结论中可以总结实验结果的重要发现和意义,并指出进一步研究的方向。
参考文献:通过引用相关文献,为实验过程、结果和讨论提供支持和参考。
生物化学实验内容
《生物化学实验》内容课程类型:制药工程专业必修实验总学时:32课时开设实验项目数:8个适用对象:2017制药工程1、2班实验教师:段志芳一、实验目标及基本要求生物化学实验是一门独立的实验课程,培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。
包括实验时的表现(实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等,占50%)及实验报告的完成情况和完成质量(占50%),每个实验按总分为100分为满分进行打分,共8个实验,总评取平均值。
四、要求(1)实验过程中同组人可以配合进行;(2)实验报告独立完成,同组人数据相同,不得抄袭他组数据;(3)实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做;(4)对实验结果进行简单的分析.实验一植物组织中可溶性总糖的提取一、实验目的1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。
2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。
3.掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。
二、实验原理可溶性糖是指易溶于水的糖,包括绝大部分的单糖、寡糖,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。
它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。
总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
可溶性总糖提取方法包括:热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。
其溶于热水,不溶于60%以上乙醇,所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。
本实验利用可溶性糖溶于水的特性,将植物磨碎,用热水将组织中的可溶性糖提取出来,结合实验二得到总糖浓度,已知溶液体积和原料重量,可以求出总糖含量。
三、实验用品1.仪器设备:电子天平(精确到0.0g,配称量纸若干);可控温电加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。
可共用。
2.玻璃器皿:研钵1套;100mL锥形瓶1个;25mL量筒1个;玻璃棒1根;100mL烧杯2个;胶头滴管1支;过滤装置1套(铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个);不锈钢刮勺1个;剪刀1把。
生物化学实验内容(一)
生物化学实验内容(一)引言概述:生物化学实验是在生物化学领域中进行的实验研究,主要涉及生物分子的结构和功能、生物代谢、生物反应等方面的内容。
本文将介绍生物化学实验的一些基本内容。
正文:一、生物分子结构1. 研究生物大分子(如蛋白质、核酸、多糖)的结构与功能。
2. 分析生物分子的化学组成、序列和空间结构。
3. 制备和纯化生物分子样品,如蛋白质表达与纯化。
4. 应用分子生物学技术(如基因工程)对生物分子进行改造。
5. 测定生物分子在生物系统中的定位和互作关系。
二、生物代谢1. 研究生物的能量转换过程,如糖酵解、脂肪酸代谢等。
2. 测定生物体内代谢产物的生成量及速率。
3. 研究酶的活性、底物特异性及反应机制。
4. 探索代谢途径的调控机制,如信号转导通路等。
5. 应用同位素示踪技术研究代谢途径和产物的动力学变化。
三、生物反应1. 研究生物反应的动力学和热力学特性。
2. 研究酶促反应的速率与底物浓度、酶浓度等之间的关系。
3. 利用酶反应测定生物样品中特定分子的含量。
4. 研究药物与生物分子的相互作用。
5. 测定酶的抑制剂和激活剂对酶反应速率的影响。
四、生物分析技术1. 应用色谱技术对生物化学分子进行分离与分析。
2. 应用质谱技术鉴定和定量生物分子。
3. 应用光谱技术探究生物分子的结构和功能。
4. 应用电泳技术测定生物分子的大小、电荷和形态。
5. 应用生物传感器技术检测生物分子的存在和浓度。
五、生物化学实验安全与伦理1. 遵守实验室安全操作规范,保证实验人员的安全。
2. 尊重生物材料的来源和使用权益,遵守伦理规范。
3. 危险试剂的储存、处理和废物处理。
4. 生物实验的风险评估与危害控制。
5. 遵守相关法律法规,保护实验对象和环境安全与健康。
总结:生物化学实验内容涵盖了生物分子结构、生物代谢、生物反应、生物分析技术以及实验安全与伦理等方面的研究。
这些实验内容不仅促进了对生物化学领域的深入理解,还为疾病治疗、药物研发等方面的应用提供了重要的基础。
生物化学实验(食品)
电磁炉水浴锅
电子天平
需冷藏、冷冻试剂和材料放在冰柜和冰箱
注意
生物材料及试剂在冰箱中,取完放回原处。 请勿将固体物质扔进水槽,台面上有垃圾盆。 水槽上有蒸馏水管,节约使用。 用过器皿立即用水洗净。 做完实验清理台面,将实验用具清洗后放入 洗涤柜。
实验报告
一、目的
二、原理(必须写清楚!)
三、实验材料 四、实验步骤 五、结果与分析
二、pH对酶活性的影响 作。
管号 0.5%淀粉 pH 5.0 pH pH 6.8 pH 8.2 稀释唾液(滴)
取试管5支,编号, 按下表操
1 2 2 2 2 10 10 10 2 2 3 2
现象
摇匀,37℃水浴中保温。每隔l分钟从pH 6.8的管中(2 号)取出1滴于白瓷板上,加碘液1滴,观察淀粉水解的程度。 待颜色不变时,向各管中加碘液1-3滴。观察颜色,比较水 解程度,做出解释。
2、酶促反应
试管 号 1 2 1.5%琥珀酸 1%丙二酸 蒸馏水 心脏提取 液(滴) 钠(滴) 钠(滴) (滴) 5 5(煮沸) 5 5 —— —— 25 25 0.02%甲烯 现象 蓝(滴) 2 2
3 4
5 5
5 25
5 5
20 ——
2 2
加好混匀,立即在各管中加入一层(约8滴)液体石蜡油,置 37度恒温水浴保温30分,观察各管颜色变化,分析原因。然后用力 振摇1号管,观察变化记录并解释。
沉淀
醇醚混合物洗2次
沉淀
晾干,鉴定
清液
弃掉
2、酪蛋白的性质鉴定
(1)溶解度观察
溶液
H2O 10%NaCl 0.5%Na2CO3 0.1M NaOH 0.2%HCl 饱和Ca(OH)2
生物化学实验内容
二、基本要求
1.通过实验过程中的操作和观察来验证和巩固理论知识,加深学生对理论课内容的理解。
2.通过对实验现象的观察,逐步培养学生学会观察,比较,分析和综合各种现象的科学方法,培养学生独立思考和独立操作的能力。
3.通过对各类实验的操作和总结,培养学生严谨的科学态度。
4.进行本学科的基本技能的训练,使学生能够熟练各种基本实验方法和实验技术的操作。
实验二 影响酶活性的因素
【预习要求】
预习各小实验的具体实验原理和操作内容
【实验目的】
验证酶的特异性,观察影响酶促反应的一些因素,加深对酶性质的认识。
【实验内容】
淀粉酶能催化淀粉水解,生成的麦芽糖属于还原性糖,能使班氏试剂中二价铜离子还原成一价亚铜,生成砖红色的氧化亚铜。淀粉酶不能催化蔗糖水解,所以不能产生具有还原性的葡萄糖和果糖,蔗糖本身又无还原性,故不与班氏试剂产生颜色反应。
【实验内容】
(一)蛋白质的盐折
1. 原理
大量中性盐类如硫酸铵((NH4)2SO4)、硫酸钠(Na2SO4)和氯化钠(NaCl)等加入到蛋白质溶液后,可引起蛋白质颗粒因失去水化膜和电荷而沉淀。各种蛋白质分子的颗粒大小和电荷数量不同,用不同浓度中性盐可使各种蛋白质分段沉淀。例如血清中的球蛋白可在半饱和硫酸铵溶液中沉淀。当硫酸铵浓度达到饱和时血清中的白蛋白使沉淀下来。盐析沉淀蛋白质时能保持蛋白质不变性,加水稀释降低盐浓度,能使沉淀的蛋白质重新溶解,并保持其生物活性。因此,利用盐析法可达到分离提纯蛋白质的目的。
生物化学实验内容(二)
生物化学实验内容(二)引言概述:生物化学实验是生物学和化学相结合的实验,旨在探究生物体内化学过程和反应机制。
本文将介绍生物化学实验的内容,包括酶活性测定、蛋白质分离与纯化、核酸提取和分析、生物膜模型的构建以及基因克隆实验。
通过这些实验,我们可以深入了解生物体内的分子机制,为生物医学研究和药物开发提供重要的实验基础。
正文内容:1. 酶活性测定- 酶的选择和提取方法- 酶活性检测的原理和方法- 酶动力学参数的计算和分析- 酶的变性和抑制实验方法- 酶的催化机制和反应动力学的实验研究2. 蛋白质分离与纯化- 蛋白质提取和组织裂解方法- 蛋白质分离的凝胶电泳原理和方法- 蛋白质纯化的柱层析方法和技术- 蛋白质结构和功能研究的实验策略- 蛋白质鉴定和定量的质谱分析方法3. 核酸提取和分析- 核酸提取的方法和材料选择- 聚合酶链式反应(PCR)的实验原理和步骤- DNA测序和序列分析的实验技术- RNA的转录和翻译实验方法- 基因表达和调控的实验研究4. 生物膜模型的构建- 磷脂类生物膜的制备方法- 生物膜相关蛋白的定位方法- 生物膜的功能和透过性研究实验- 生物膜与药物相互作用的实验策略- 膜蛋白结构和功能分析的实验技术5. 基因克隆实验- DNA片段的扩增和限制性酶切- 载体构建和转化的实验步骤- 基因突变和基因敲除的实验方法- 基因表达和蛋白质产量的测定- 基因编辑和CRISPR-Cas9的应用总结:生物化学实验的内容涵盖了酶活性测定、蛋白质分离与纯化、核酸提取和分析、生物膜模型的构建以及基因克隆实验。
通过这些实验,我们可以深入了解生物体内的分子机制,为生物医学研究和药物开发提供重要的实验基础。
通过实验结果的进一步分析和研究,我们可以揭示生物体内的化学反应过程,并推动科学技术的进步。
生物化学实验内容
生物化学实验内容生物化学是生物学和化学的交叉学科,研究生物体内化学物质的结构、组成和功能。
生物化学实验是在实验室中进行的一系列实验操作,旨在探索和研究生物分子的性质和功能。
本文将介绍一些常见的生物化学实验内容。
一、酶活性测定实验酶是生物体内的重要催化剂,参与体内的各种代谢过程。
酶活性测定实验通常使用底物和酶反应,通过测定产物的生成量或者底物消失量来评估酶活性。
例如,可以通过测定过氧化氢酶催化过氧化氢脱氢生成水和氧气的速率来评估过氧化氢酶的活性。
二、蛋白质定性与定量实验蛋白质是生物体内重要的生物大分子,参与体内的结构、功能和代谢过程。
蛋白质定性实验通常使用染色剂或者化学试剂与蛋白质反应,形成有色或者可见的沉淀或者出现其他特征。
例如,可以使用布鲁法试剂与蛋白质反应形成布鲁法蓝沉淀来定性蛋白质。
蛋白质定量实验常用的方法包括比色法、光谱法和比浊法等。
其中,比色法通常利用Bradford试剂与蛋白质反应生成紫色复合物,通过测定紫色复合物的吸光度来定量蛋白质的含量。
三、核酸提取与分析实验核酸是生物体内携带遗传信息的重要分子,参与遗传物质的复制和传递。
核酸提取和分析实验是研究基因组和遗传变异的重要手段。
核酸提取通常使用有机溶剂或者商用提取试剂盒进行,提取得到的核酸可以用于后续的PCR扩增、酶切、测序等实验。
四、酶电泳实验酶电泳是通过电场作用下的蛋白质的迁移速率差异来分离和鉴定酶的一种方法。
它常用于研究酶的同工酶谱、判定酶的活性、分析酶催化作用等。
常用的酶电泳方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺-SDS凝胶电泳等。
五、免疫检测实验免疫检测实验是通过体外检测抗原-抗体特异性相互作用来检测抗原或者抗体的存在和数量的一种方法。
常见的免疫检测实验包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、西方印迹、免疫荧光等。
这些实验方法广泛应用于生物医学研究、临床诊断等领域。
以上仅是生物化学实验中的一部分内容,实际的生物化学实验还包括分子生物学、细胞生物学、代谢物分析等多个领域。
生物化学实验内容3篇
生物化学实验内容实验一:糖类的定性和定量分析糖类是重要的生物分子之一,无论是在生物体内还是在工业领域都有着重要的应用。
本实验旨在通过定性和定量分析糖类的实验,让学生了解糖类的性质和分析方法。
实验一、糖类的定性实验材料:葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、碘液、硝酸银、硫酸、苯酚、NaOH、酚酞指示剂步骤:1.将葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉各取一份,用水溶解。
2.取5ml的各种糖溶液于试管中,加入2滴苯酚,再加入1ml NaOH溶液和1滴酚酞指示剂,观察是否变色。
3.将1ml的碘液加入每种糖溶液中,观察反应结果。
4.将1ml的硝酸银溶液加入每种糖溶液中,放置后观察反应结果。
结果分析:1.苯酚试剂可以检测出葡萄糖和果糖的存在,经反应产物为红褐色。
2.加入碘液后,葡萄糖和淀粉溶液会呈现出蓝色复合物;果糖溶液则无反应;麦芽糖和蔗糖溶液则会出现棕色沉淀。
3.加入硝酸银溶液后,蔗糖会产生白色沉淀,而麦芽糖和淀粉则无明显反应。
实验二、糖类的定量实验材料:葡萄糖溶液、NaOH溶液、硫酸、费林试剂步骤:1.将试样称取10mg,加入5ml的NaOH溶液,在沸水浴中加热10min,冷却后将pH值调节至7-8。
2.将所有试剂进行融合,称取0.1g的硫酸和0.5g的费林试剂,放入10ml的水中混合均匀。
3.加入数滴试样到试剂溶液中,混合均匀后沸腾2min,冷却后去除浮渣并将溶液转移到5ml容量瓶中。
4.在溶液中加入几滴酚酞指示剂,并用2.5%NaOH溶液滴加,直至出现红色,记录加滴量。
结果分析:1.根据加入NaOH溶液的体积和试样的含量,可以计算出糖类物质的浓度。
2.费林试剂可以与糖类发生反应,生成物质的深度颜色与糖的含量成正比。
实验三、酵母的发酵过程酵母是一类单细胞真菌,可以通过发酵过程产生乙醇和二氧化碳。
本实验旨在观察酵母在不同条件下的发酵过程,了解发酵原理和条件对发酵有何影响。
材料:酵母、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、发酵管、氢氧化钠溶液、氢氧化钠的饱和的饱和的水解液、试剂瓶、称瓶步骤:1.称取3g酵母溶解在50ml水中。
中医学生物化学实验报告
实验名称:中医学生物化学实验实验日期:2023年3月15日实验地点:中医学院生物化学实验室一、实验目的1. 了解生物化学实验的基本操作步骤。
2. 掌握常用生物化学实验仪器的使用方法。
3. 学习生物化学实验数据的记录与分析方法。
4. 培养中医学生物化学实验技能,为今后从事中医临床、科研工作打下基础。
二、实验原理生物化学实验是研究生物体内各种化学成分、化学反应及其相互关系的实验。
本实验旨在通过一系列生物化学实验,了解生物体内主要物质的性质、含量及代谢过程,为中医临床、科研工作提供理论依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 鸡蛋清- 牛血清白蛋白- 磷酸盐缓冲液- 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)- 氢氧化钠- 酚酞指示剂- 硫酸铜溶液- 酒精- 甲醛溶液- 硫酸铵- 碘液- 氢氧化钠溶液2. 实验仪器:- 752型紫外-可见分光光度计- 离心机- 电子天平- 恒温水浴锅- 移液器- 试管- 烧杯- 玻璃棒四、实验方法与步骤1. 蛋白质含量测定:- 称取0.1g鸡蛋清,加入5ml磷酸盐缓冲液,充分溶解。
- 加入0.5ml硫酸铜溶液,混匀。
- 加入1ml氢氧化钠溶液,混匀。
- 加入2滴酚酞指示剂,混匀。
- 加入甲醛溶液,观察颜色变化。
- 记录所需甲醛溶液的体积。
2. 碱性磷酸酶活性测定:- 称取0.1g牛血清白蛋白,加入5ml磷酸盐缓冲液,充分溶解。
- 加入0.5ml硫酸铜溶液,混匀。
- 加入1ml氢氧化钠溶液,混匀。
- 加入2滴酚酞指示剂,混匀。
- 加入碘液,观察颜色变化。
- 记录所需碘液的体积。
3. 硫酸铵沉淀实验:- 称取0.1g牛血清白蛋白,加入5ml磷酸盐缓冲液,充分溶解。
- 加入0.5ml硫酸铜溶液,混匀。
- 加入1ml氢氧化钠溶液,混匀。
- 加入2滴酚酞指示剂,混匀。
- 加入硫酸铵溶液,观察沉淀现象。
4. 氢氧化钠溶液浓度测定:- 称取0.1g氢氧化钠,加入50ml去离子水,溶解。
- 用移液器取5ml溶液,加入5ml酚酞指示剂,混匀。
生物化学实验报告
生物化学实验报告生物化学实验报告引言:生物化学实验是一种重要的科学研究方法,通过对生物体内分子结构和功能的研究,可以深入了解生物体的生理过程和疾病发生机制。
本实验旨在探究某种生物体内的特定分子的结构和功能,以及其在生理过程中的作用。
实验目的:本实验的目的是通过生物化学实验手段,研究某种生物体内的特定分子的结构和功能,以揭示其在生理过程中的作用。
实验材料与方法:1. 实验材料:- 某种生物体组织样本- 适量的缓冲液- 试剂盒中的相关试剂- 实验仪器:离心机、显微镜等2. 实验方法:- 样本制备:将生物体组织样本取出,并使用缓冲液进行处理,以提取目标分子。
- 分子结构分析:通过质谱、核磁共振等技术,对目标分子的结构进行分析。
- 功能实验:通过酶活性测定、反应动力学等实验手段,研究目标分子在生理过程中的功能。
实验结果与讨论:1. 分子结构分析:通过质谱和核磁共振技术,我们成功确定了目标分子的分子结构。
该分子由若干个原子组成,通过键的连接形成一个稳定的结构。
进一步的分析表明,该分子具有特定的功能基团,这些功能基团在生理过程中起到了重要的作用。
2. 功能实验:通过酶活性测定和反应动力学实验,我们研究了目标分子在生理过程中的功能。
结果显示,该分子具有催化反应的能力,可以加速特定的生化反应。
此外,我们还发现该分子在调节细胞信号传导、维持细胞内环境稳定等方面起到了重要的作用。
结论:通过本实验,我们成功研究了某种生物体内特定分子的结构和功能。
该分子具有特定的分子结构,并在生理过程中发挥重要作用。
这些研究结果对于深入了解生物体的生理过程、疾病发生机制以及开发新药物具有重要意义。
展望:本实验只是对某一种生物体内特定分子的研究,未来可以进一步拓展研究范围,探索更多生物体内分子的结构和功能。
同时,可以结合生物化学实验与其他科学领域的研究手段,开展更多有意义的实验,为生物化学领域的发展做出更大的贡献。
结语:生物化学实验是一种重要的科学研究方法,通过对生物体内分子结构和功能的研究,可以深入了解生物体的生理过程和疾病发生机制。
生物化学实验报告_2
生物化学实验报告
蛋白质的定量测定
第四组
2015.10.15
姓名: XXX
学号: XXXXXXXX
学院: XXXXXXXXXXXXX 班级: XXXXXXXXX
蛋白质的定量测定(BCA试剂盒法)
一、实验内容: 蛋白质的定量测定
二、实验目的: 求知蛋白液浓度
三、实验器材: 96孔板、微版比色仪、酶标仪、定量移液器及吸头、离心管、H2O、WR、不同浓度的BSA标准品。
四、实验步骤
配制不同浓度蛋白标准品:
1、配制工作液
(标准品6个+空白1+待测1)·平行孔2个·200ul=3200ul
取10ml离心管1个
BCA Reagent 5ml
Cu Reagent 100ul
2、预温烘箱40℃
3、40℃30min(盖盖孵育, 以免蒸发), 放至常温后, 570nm读数
4、标准曲线绘制(Excel表)
五、实验结果
溶液吸光度和浓度呈正比关系, 待测样品吸光度平均值为X=0.415, 则Y=413.40得出待测样品蛋白浓度为413.40ug/ml。
生物化学实验教学内容
生物化学实验第一节基本要求一、内容提要基础生物化学实验内容,主要以植物材料为研究对象。
实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定,既有定性又有定量。
实验内容编排不求齐全,而力求原理阐述简明扼要,通俗易懂,方法可靠,操作具体详尽,重复性好,灵敏度高。
实验方法涉及传统的滴定法以及分光光度法、层析法和电泳等现代生物化学实验技术。
本实验指导可供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的本、专科学生使用,也可供从事与生物科学有关的科研工作者阅读与参考。
在以惊人速度发展的生物科学中,生物化学是其中最活跃的分支学科之一,它已成为发展生命科学各分支学科和生物工程技术的重要基础。
作为一门研究生命活动基本规律的科学,它又是一门实验科学。
工业、农业、医药、食品、能源、环境科学等越来越多的研究领域都以生物化学理论为依据,以其实验技术为手段,生物化学已成为高等院校许多相关专业学生必修的专业基础课程。
根据高等农业院校农学类专业教学计划,基础生物化学课程是一门重要的专业基础课;并且又是实践性极强的应用学科。
只有掌握扎实而广泛的基础知识和熟练的操作技能才算真正掌握好这门应用科学。
因此,我们组织编写这本基础生物化学实验指导。
本实验指导主要是配合基础生物化学教材,供高等农业院校农学类、生物技术以及相关专业的学生使用。
实验多以植物材料为主要研究对象;以生物大分子——碳水化合物、核酸、蛋白质和酶等为主要研究内容。
实验方法涉及到分光光度法、层析、电泳等现代生物化学实验技术。
在实验内容编排上,既有定性的又有定量的;实验教材由基础生物化学实验和附录两部分组成。
实验部分列出的实验项目包括糖类、脂类、蛋白质和氨基酸、核酸、酶、维生素的测定,有些项目包括几种不同方法,每一实验方法分为目的、原理、实验材料、仪器和试剂、操作步骤、结果计算、注意事项、思考题及参考答案。
本实验指导从一定角度反映了我国生物化学研究技术目前的水平和状况,内容不求全,而力求其可靠性和方法性。
生物化学实验内容
《生物化学实验》内容课程类型:制药工程专业必修实验总学时:32课时开设实验项目数:8个适用对象:2017制药工程1、2班实验教师:段志芳一、实验目标及基本要求生物化学实验是一门独立的实验课程,培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。
包括实验时的表现(实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等,占50%)及实验报告的完成情况和完成质量(占50%),每个实验按总分为100分为满分进行打分,共8个实验,总评取平均值。
四、要求(1)实验过程中同组人可以配合进行;(2)实验报告独立完成,同组人数据相同,不得抄袭他组数据;(3)实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做;(4)对实验结果进行简单的分析.实验一植物组织中可溶性总糖的提取一、实验目的1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。
2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。
3.掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。
二、实验原理可溶性糖是指易溶于水的糖,包括绝大部分的单糖、寡糖,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。
它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。
总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
可溶性总糖提取方法包括:热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。
其溶于热水,不溶于60%以上乙醇,所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。
本实验利用可溶性糖溶于水的特性,将植物磨碎,用热水将组织中的可溶性糖提取出来,结合实验二得到总糖浓度,已知溶液体积和原料重量,可以求出总糖含量。
三、实验用品1.仪器设备:电子天平(精确到0.0g,配称量纸若干);可控温电加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。
可共用。
2.玻璃器皿:研钵1套;100mL锥形瓶1个;25mL量筒1个;玻璃棒1根;100mL烧杯2个;胶头滴管1支;过滤装置1套(铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个);不锈钢刮勺1个;剪刀1把。
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《生物化学实验》内容课程类型:制药工程专业必修实验总学时:32课时开设实验项目数:8个适用对象:2017制药工程1、2班实验教师:段志芳一、实验目标及基本要求生物化学实验是一门独立的实验课程,培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。
二、实验内容三、成绩包括实验时的表现(实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等,占50%)及实验报告的完成情况和完成质量(占50%),每个实验按总分为100分为满分进行打分,共8个实验,总评取平均值。
四、要求(1)实验过程中同组人可以配合进行;(2)实验报告独立完成,同组人数据相同,不得抄袭他组数据;(3)实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做;(4)对实验结果进行简单的分析.实验一植物组织中可溶性总糖的提取一、实验目的1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。
2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。
3.掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。
二、实验原理可溶性糖是指易溶于水的糖,包括绝大部分的单糖、寡糖,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。
它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。
总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。
可溶性总糖提取方法包括:热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。
其溶于热水,不溶于60%以上乙醇,所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。
本实验利用可溶性糖溶于水的特性,将植物磨碎,用热水将组织中的可溶性糖提取出来,结合实验二得到总糖浓度,已知溶液体积和原料重量,可以求出总糖含量。
三、实验用品1.仪器设备:电子天平(精确到0.0g,配称量纸若干);可控温电加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。
可共用。
2.玻璃器皿:研钵1套;100mL锥形瓶1个;25mL量筒1个;玻璃棒1根;100mL烧杯2个;胶头滴管1支;过滤装置1套(铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个);不锈钢刮勺1个;剪刀1把。
此部分为每组所用,集中到小框里,放置各实验台上。
3.药品试剂:新鲜植物叶片;蒸馏水。
4.其他:9cm滤纸若干(与玻璃漏斗配套);纸巾若干;标签纸若干。
每个洗手池常规配置烧杯刷、毛巾、洗手液。
四、实验操作取新鲜植物叶片,洗净表面污物,用滤纸吸去表面水分。
称取0.5g,剪碎,加入5~10ml蒸馏水,在研钵中磨成均浆,转入锥形瓶中,用蒸馏水少量多次冲洗研钵,洗出液也转入锥形瓶中,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min,提取液冷却后过滤到100ml容量瓶中,同法残渣再提取2~3次,将提取液合并至容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。
贴好标签,保存至冰箱中,用于实验二。
五、实验结果与讨论1、观察产品颜色是否与理论相符,若不符合,分析原因。
2、结合实验二结果计算含量六、实验注意事项(1)若有干扰,可滴加饱和中性醋酸铅以除去溶液中的蛋白质,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质,若色素较多可脱脂。
(2)加热时应小心,避免灼伤皮肤。
七、思考题1、可溶性糖在植物物质代谢中的作用。
2、用水提取的糖类有哪些?实验二蒽酮比色法测定可溶性总糖含量一、实验目的1、掌握蒽酮比色法测定可溶性总糖的原理和方法2、掌握标准曲线的绘制3、掌握分光光度计的使用方法二、实验原理糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量测定。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖含量,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应),所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为620 nm ,故在此波长下进行比色。
三、实验材料、试剂与仪器设备1、仪器分光光度计(配玻璃比色皿、擦镜纸、注明废液回收的具塞广口瓶、洗瓶);电子天平(配称量纸);离心机(配离心管),恒温水浴锅。
2、玻璃器皿0.5mL、1 mL、5 mL刻度吸管各2支(配合适大小吸耳球);10 mL具塞具刻度试管10支(应干净干燥,放到试管架上);100 mL烧杯2个;10 mL量筒1个;玻璃棒1根;长胶头滴管1根。
此部分为每组所用,放置各实验台上。
3、试剂:(1)~(3)由实验员配制,贴好标签(1)80 %乙醇(2)葡萄糖标准溶液( 100 μg/mL ):准确称取100 mg 分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至1000 mL。
(3)蒽酮试剂:称取1.0 g 蒽酮,溶于80% 浓硫酸(将98% 浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中) 1000 mL中,冷却至室温,贮于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用2 ~ 3 周。
(4)样品贮备液:学生实验一所得可溶性总糖提取物水溶液。
四、实验步骤1、标准曲线制作取6支试管,从0 ~ 5分别编号,按下表加入各试剂:将各管快速摇动混匀后在沸水浴中煮10 min,取出冷却,在620 nm 波长下用空白调零测定光密度,以光密度为纵坐标,含葡萄糖量( μg )为横坐标绘制标准曲线。
2、样品测定将样品贮备液用蒸馏水稀释到合适范围,取该溶液1.0 mL 加蒽酮试剂5 mL,同以上操作显色测定光密度。
重复3 次。
按照下式计算可溶性总糖的含量:w=n m1/ m2100%式中:w---表示总糖含量n---稀释倍数m1-----从标准曲线查得糖量, μg .m2------样品重( g ).v1------提取物总体积(ml)v2------测定时样品体积(ml)五、结果与讨论:1.绘制出标准曲线2.含量的计算六、实验注意事项(1)加浓H2SO4时应缓慢加入,以免产生大量热量而爆沸,灼伤皮肤,如出现上述情况,应迅速用自来水冲洗。
(2)水浴加热时应打开试管塞。
七、思考题1、植物组织中糖的测定方法还有哪些?举例说明其原理和优缺点?2、制作标准曲线时应注意哪些问题?实验三卵磷脂的提取与鉴定一、实验目的1、掌握磷脂类物质的结构和性质。
2、掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
3、掌握乙醇做溶剂提取的操作技术。
二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。
卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。
新提取的卵磷脂为白色,当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热,可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。
这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三、仪器和试剂1、仪器设备电子天平(精确到0.00g,配9cm称量纸);减压蒸馏装置(旋转蒸发仪+水循环真空泵+相应橡胶管,用前由实验员检查是否正常;配500mL24#磨口蒸馏和接收圆底烧瓶,2500mL磨口具塞广口瓶上标注回收乙醇,与仪器同台放置,提取时重复使用)。
此部分共用。
2、玻璃器皿回流装置一套(500mL 恒温磁力搅拌电热套(配2cm磁子)1台+250mL24#磨口圆底烧瓶1个+24#磨口球形冷凝管1根+橡胶管2根+铁架台1个+铁夹2个);过滤装置一套(铁架台1个+铁圈1个+玻璃漏斗1个+250 mL24#具塞磨口锥形瓶1个+18cm定性滤纸若干);100 mL量筒各一个;100 mL烧杯一个;玻璃棒1根;长胶头滴管1个;长药勺1个;试管2支;蒸发皿1个。
此部分为每组所用,放置各实验台上。
3、药品试剂(3)由实验员配制,贴好标签。
(1)鸡蛋黄(2)95%乙醇(3)10%氢氧化钠溶液4、其它:红色石蕊试纸若干;剪刀2把;一次性手套若干;纸巾若干;标签纸若干。
每个洗手池常规配置烧杯刷、毛巾、洗手液。
四、操作步骤1、卵磷脂的提取取250 mL24#磨口圆底烧瓶,放入2cm的磁力搅拌子,加入蛋黄20 g和95%乙醇60 mL,搅拌加热,稍冷后过滤到250 mL具塞磨口锥形瓶中,盖好塞子,滤渣同法提取2~3次,合并提取液,如滤液仍然混浊,可重新过滤直至完全透明。
提取液减压蒸馏至少量,回收乙醇(放入回收瓶中),将剩余物用长胶头滴管转移置于蒸发皿内,水浴锅中蒸干,所得干物即为卵磷脂。
称重并计算得率。
2、卵磷脂的鉴定取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5mL 氢氧化钠溶液,放入水浴中加热15min,在管口放一片红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其气味。
五、结果与分析1、观察产品的颜色外观2、计算产率3、鉴定结果六、思考题:1、卵磷脂的生物学功能有哪些?2、卵磷脂提取过程中,加入95%乙醇的作用是什么?实验四脂肪皂化价的测定一、目的1、掌握油脂的主要理化性质2、掌握油脂皂化价的测定原理和方法。
3、掌握滴定分析法的操作二、原理脂肪的碱水解称皂化作用。
皂化1g 脂肪所需的KOH 的毫克数称为皂化价。
脂肪的皂化价与相对分子质量成反比,由皂化价的数值可知混合脂肪的平均相对分子质量。
三、仪器、试剂和材料1、仪器设备:电子天平(精确到0.000g,配5 ml称量瓶)。
2、玻璃器皿:回流装置一套(500mL 恒温磁力搅拌电热套(配2cm磁子)1台+250 mL24#磨口圆底烧瓶1个+24#磨口球形冷凝管1根+橡胶管2根+铁架台1个+铁夹2个);酸碱滴定管1支;50ml量筒1个;磨口具塞锥形瓶2只;100ml烧杯1只;玻棒1根。
此部分为每组所用,放置各实验台上。
3、药品试剂:(2)~(5)由实验员配制,贴好标签。
(1)豆油(2)0.100mol/L 氢氧化钠乙醇溶液:以0.100mol/L标准盐酸溶液标定。
(3)0.100mol/L标准盐酸溶液:取浓盐酸8.5ml ,加蒸馏水稀释至1000ml, 然后对此溶液进行标定。
(4)70%乙醇:取95%乙醇70 ml,加蒸馏水稀释至95ml。
(5)1%酚酞指示剂:称取酚酞1g,溶于100ml 95%乙醇。
四、操作步骤1. 在天平上称取脂肪0.5g 左右,置于250ml 圆底烧瓶中,加入0.1mol/LNaOH 乙醇液50ml。
装上冷凝管回流30-60min,至瓶内的脂肪完全皂化止(此时瓶内液体澄清并无油珠出现,若乙醇被蒸发,可酌情补充适量70%乙醇。
2. 皂化完毕,冷至室温,加1%酚酞指示剂2滴,以0.1mol/LHCl液滴定剩余的碱(HCl 用量少可用微量滴定管),记录盐酸用量。