副溶血性弧菌增菌培养方法

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医学检验-粪便标本处理

医学检验-粪便标本处理

粪便标本粪便标本中常见的病原菌:革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌金黄色葡萄球菌伤寒及其他沙门氏菌厌氧链球菌种志贺菌属结核分枝杆菌致病大肠埃希氏菌产气荚膜杆菌弧菌属菌种艰辨梭菌气单胞菌种白色念珠菌邻单胞菌小肠结肠炎耶尔森菌弯曲菌沙门-志贺氏菌:接种HE及麦康凯平板,35℃、18~24小时后检查平板,有疑似菌落,接种双糖,细菌分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定后与沙门、志贺氏菌因子血清凝集,以确诊.霍乱弧菌培养:取疑似患者粪便接种于碱性蛋白胨水中,进行增菌,同时划线接种于碱性琼脂平板/双洗平板血琼脂平板,孵育.增菌培养孵育6小时后,取菌膜移种于上述平板,进行分离培养,并同时做涂片,行革兰染色和悬滴标本,检查形态和活动力.各种分离平板在孵育18-24小时。

观察菌落,挑取可疑菌落,先与生理盐水混匀,观察有无自凝现象.再用O1群霍乱多价血清作玻片凝集试验. 如发现霍乱病人,立即向当地防疫部门提供及时准确的信息.致病大肠埃希氏菌培养:引起腹泻的大肠杆菌有四种--ETEC、EPEC、EIEC、EHEC.取液体状、脓血或糊状粪便或肛拭子划线接种于麦康凯或伊红美兰及血琼脂平板上,35℃孵育18-24小时,挑选乳糖发酵菌落5个,移种于KIA和MIU孵育过夜,并同时进行细菌分纯,用细菌鉴定仪上板鉴定并进行血清学分型.副溶血弧菌培养:取粪便接种于副溶血弧菌增菌液中,6-8小时后接种于TCBS和SS琼脂平板上,35℃孵育18-24小时后,观察菌落,挑取TCBS上绿色微隆、浑浊、湿润菌落,SS上挑取无色透明、不易挑起菌落进行分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定.真菌培养:真菌性腹泻多继发于抗生素治疗后,常见于白色念珠菌、球拟酵母菌.将标本接种于含氯霉素的沙保氏琼脂及血琼脂平板,置25-30℃孵育24-48小时,根据菌落形态及涂片革兰氏染色所见结果,决定鉴定方法.菌群失调及菌交替症:根据临床提示粪便培养需选用数种培养基,包括强选择性和弱选择性肠道培养基、需氧及厌氧血琼脂平板、沙保氏琼脂等,按各类细菌分别进行培养鉴定,并观察其数量变化.3、操作流程(沙门-志贺氏菌属检查)分离培养增菌培养血清学鉴定细菌鉴定药敏试验报告4、报告方式:以分离目的菌种的结果而决定,如:目前常规以SS/HE和中国蓝或伊红美兰分离粪便中的致病菌,阳性者应报告“沙门菌或志贺氏菌”,阴性应报告“未检出沙门菌属或志贺菌属”.其他培养结果报告方式与上述原则基本相同.5、注意事项(1)人类肠道中的细菌种类繁多,数量亦多,在健康人肠道内经常寄居的大量的细菌,一旦肠道发生病理改变时,就可能侵入病变部位而引起疾病。

副溶血性弧菌标准的检验方法

副溶血性弧菌标准的检验方法

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是广泛分布于海水、海底泥沙、浮游生物和鱼贝类中的海洋性细菌,为海产食品引起急性胃肠炎的重要病原菌之一,尤其是在夏秋季节的沿海地区,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品,引起爆发性食物中毒。

在非沿海地区,因食用此菌污染的食品而引起中毒者亦时有发生。

为保障食品卫生质量和食用安全,根据副溶血性弧菌的特性,进行下列检验,以便鉴别诊断。

第一节副溶血性弧菌标准的检验方法一、检验方法(一)操作步骤1. 分离培养:首先称取样品25g,加225mL3.5%灭菌盐水,用均质器打碎或用乳钵磨碎,接种氯化钠琼脂平板和嗜盐性琼脂平板各一个,同时取10mL加入100mL增菌液中,放37℃8~16h培养后,涂上述平板进行分离,37℃培养18~24h取出观察,挑取可疑菌落,转种3.5%氯化钠三糖铁斜面,37℃、24h观察结果。

2. 涂片镜检:将三糖铁培养基上反应可疑者即底层变黄(葡萄糖产酸不产气)、上层斜面不变(乳糖、蔗糖不分解)、有动力、不产生硫化氢,进行革兰氏染色镜检形态。

3. 嗜盐性试验:将上述可疑培养物分别接种不同含量的盐胨水(0%,3%,7%,10%)于37℃24h培养后观察生长情况,在无盐和10%盐的胨水中不生长,在3%和7%盐的胨水中生长良好者,继续进行下列有关试验。

4. 生化试验:分别接种下列各类生化培养基,葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甲基红、靛基质、V-P,赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、硫化氢及溶血性试验,放37℃培养,除V-P、靛基质和甲基红试验培养48h后加试剂观察外,其他均在24h观察结果。

5. 动物试验:将上述符合各类反应的副溶血性弧菌,接种3.5%氯化钠胨水,经37℃、16~18h培养后,小鼠腹腔注射0.3mL,观察2~3d,将死亡小鼠进行解剖作分离培养。

(二)检验程序图6-1 副溶血性弧菌检验程序二、结果分析判定及注意事项(一)样品处理采样时应注意首选准备好灭菌用具及容器,以无菌手续取有代表性的样品,样品必须尽快送检,不宜存放时间过长,副溶血性弧菌在适宜温度下繁殖较快,但不适于低温生存,在寒冷的情况下容易死亡,防止待检材料冷冻,以免影响检验结果。

副溶血性弧菌检验-检验操作程序及要点-微课件

副溶血性弧菌检验-检验操作程序及要点-微课件
微生物检验技术
副溶血性弧菌检验 ——检验操作程序及要点
目录页
CONTENTS PAGE
检验操作程序及要点
— 2—
副溶血性弧菌检验—检验程序及操作要点
检验程序及操作要点-1
• • • • 流程图 增菌 分离 纯培养
— 3—
检验程序及操作要点
微生物学检验
依据GB 4789.7-2013《食品安全国家标
试述副溶血性弧菌在TCBS琼脂平板上的典型菌落特征
— 11 —
智慧职教 /portal/
校本资源库 / 参考网站: /
分离 纯培养
初步鉴定
结果与报告
确定鉴定
定性 定量
— 5—
副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
检验程序及操作要点流程图源自副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
— 6—
检验程序及操作要点
增菌
无菌操作 称量或量取 均质
液态样品,不需均质,振荡混匀即可;


鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃;
副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
— 8—
检验程序及操作要点
纯培养
挑取 3 个或以上可疑菌落
副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
— 9—
检验程序及操作要点
初步生化鉴定
确定生化鉴定
革兰氏染色试验 氧化酶试验 动力试验
三糖铁(TSI)试验 嗜盐性试验
副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
— 10 —
贝类取全部内容物,包括贝肉和体液; 甲壳类取整个动物,或者动物的中心部 分,包括肠和鳃。
选择性增菌液
及时检验 副溶血性弧菌检验—检验操作程序及要点
— 7—

副溶血性弧菌检测微生物国标检测流程

副溶血性弧菌检测微生物国标检测流程

副溶血性弧菌检测微生物国标检测流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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《医学微生物学》三大常规的微生物学检查

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断,或查找与疾病相关的微生物,以及对抗生素的敏感性,这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此,对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1.临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本,应严格按照无菌技术进行采集;对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本,虽无须严格无菌操作,但也应尽量避免杂菌混入。

2.采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签,连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远,应冷藏保存送检;对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本,送检时应35℃~37℃保温。

3.人体很多部位与外界相通,存在有正常菌群,但不致病,故在涂片检查或分离培养时,应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外,对某些无菌的部位,如血液、骨髓、脑脊液等,如检查出细菌应视为致病菌,但必须要排除采样及操作中的污染。

4.根据标本来源和可能存在的病原菌,选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板,用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖,产生毒素等,可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l.标本采集必须严格遵守无菌操作,即应去除皮肤上的细菌,又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒,用干燥的灭菌注射器抽取血液,立即注入选定的液体培养基瓶内,充分混匀以防凝固。

2.采血一般应在治疗前,并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血;化脓性脑膜炎,鼠疫应在发热1~2d内采血;亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血,且每隔1~2h采血一次,连续3~4次,可获较高的阳性率。

3.采血量应相当于培养液的1/10,通常是50ml培养液采血5ml,这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释,使之减弱或失去抑制作用。

副溶血性弧菌

副溶血性弧菌

副溶血性弧菌副溶血性弧菌是一种嗜盐性弧菌。

常存在于近海岸海水、海产品及盐渍食品中。

它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。

1.生物学特性(1)形态染色:革兰阴性菌,随培养基不同菌体形态差异较大,有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态。

两极浓染。

菌体一端有单鞭毛,运动活泼。

无芽胞、无荚膜。

(2)培养特性:需氧,营养要求不高,在普通培养基中加入适量NaCl即能生长。

NaCl最适浓度为35g/L,在无盐培养基中不生长。

本菌不耐热,不耐冷,不耐酸,对常用消毒剂抵抗力弱。

生长所需pH为7. 0~9.5,最适pH为7.7.在液体培养基表面形成菌膜。

在35g/L NaCl琼脂平板上呈蔓延生长,菌落边缘不整齐,凸起、光滑湿润,不透明;在副溶血性弧菌专用选择培养基上形成1~2.5mm,稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落;在SS平板上不生长或长出1~2mm扁平无色半透明的菌落,不易挑起,挑起时呈粘丝状。

在羊血琼脂平板上,形成2~3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落,某些菌株可形成β溶血或α溶血。

在TCBS琼脂上不发酵蔗糖,菌落绿色。

(与霍乱弧菌相区别)(3)生化反应:本菌在30g/L NaCl和 70g/L NaCl培养基中生长,在无盐或100g/L NaCl培养基中不生长。

神奈川试验是致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血,对马红细胞不溶血,称神奈川试验阳性。

2.微生物学检验1)标本采集:主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。

2)检验方法及鉴定:①增菌培养:取标本0.5~1ml接种40g/L N aCl蛋白胨水中,37℃培养,若有本菌存在,一般数小时即出现明显混浊,即可分离培养;②分离培养:将标本或增菌培养物接种副溶血弧菌选择培养基35℃培养18~24h观察结果。

菌落湿润、混浊无粘性,呈绿色;③鉴定:根据其形态、染色、多形性、活泼动力等特点,以及在选择培养基上的菌落特征,结合氧化酶试验阳性,在KIA上K/A,H2S (-)。

副溶血性弧菌

副溶血性弧菌

嗜盐性试验
确定鉴定

生化试验:取纯培养物分别接种含3%氯化钠的 甘露醇、赖氨酸、MR-VP培养基,36℃士1℃培 养24h~48h后观察结果。隔夜培养物进行ONPG 试验。
MR 试验方法
MR试验方法:取一种细菌的24h
培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培 养基中,置37C培养48~72h,取 出后加甲基红试剂3~5滴,凡培养 液呈红色者为阳性,以‘‘十”表 示;橙色者为可疑,以“±”表示; 黄色者为阴性,以“—”表示。
ONPG试验




β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)简介 (1)β-半乳糖苷酶试验原理:有的细菌可产生β-半乳糖苷 酶,能分解邻-硝基酚-β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黄色的 邻-硝基酚,在很低浓度下也可检出。 (2)试剂:0.75M ONPG溶液:取80mg溶于15ml蒸馏水 中,在加入缓冲液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸馏水中,用30% NaOH调整pH为7.0,再加水至50ml)5ml,置4℃冰箱中保存。 0NPG溶液为无色,如出现黄色,则不应再用。 (3)方法:从培养基上取菌,于0.25ml无菌生理盐水中制 成菌悬液,加入一滴甲苯并充分振摇,使酶释放。将试管置37℃ 水浴5min,加入0.25ml ONPG试剂,水浴20min~3h观察结果。 (4)结果:菌悬液呈现黄色为阳性反应,一般在20~ 30min内显色医学教|育网搜集整理。 (5)应用:迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性, 而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株 的快速鉴定。
典型的副溶血性弧菌在TCBSL呈圆形、半透明、 表而光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似 口香糖的质感,直径2mm--3 mm 。
纯培养

第七节 副溶血性弧菌

第七节 副溶血性弧菌

二、致病性
1、致病因素 ★侵袭力:活菌(105~107/g),可使人致病 . ★产生溶血毒素:内毒素,成分是脂多糖,100℃30min不 被破坏。 2、媒介食品 主要是海产品(鱼、虾、蟹、蛤等), 含盐量较高的食物亦可带菌。 3、所致疾病 食物中毒、急性胃肠炎、败血症等。
二、致病性
4、预防措施 (1)海产品加工前用消毒水冲洗干净,接触过海产品的 厨具、容器和手及水池等均要洗刷干净,以免污染食品 (2)若要吃凉拌菜应充分洗净,现在沸水中烫后,加醋, 放置10min后,再放其他调味剂 (3)严格执行生熟食品分开制度 (4)剩饭菜,在食用前要回锅热透
在固体培养基上菌落呈圆形凸起,混浊不透明,表面
光滑,较湿润,边缘不整齐。 在血平板上可见溶血环。
3、生化特性
分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖,蔗糖。 H 2 S (-)、 V-P (-)、靛基质(吲哚试验)( + )、
精氨酸(-)
甲基红(+)、赖氨酸(+)、溶血+/-
V.P反应
• 检测某种细菌分解碳水化合物产生乙酰甲 基甲醇[CH3CH(OH)COCH3]的反应。 通常把细菌培养在葡萄糖蛋白胨液体培养 基中,加入强碱可见显有红色。此反应用 于细菌的鉴别
8
4、抗原结构结构
O抗原(菌体抗原):O1~O13
H抗原(鞭毛抗原): K抗原(荚膜抗原):K1~K71
13种。
65种。
( 缺编:K2 、 K14 、K17、 K35、 K62)
血清分型:所有副溶血性弧菌的H 抗原均相同,但是O 抗
原和K 抗原存在差异,以13种O抗原及65种K抗原将其分为 13个群和845个型。
5
• 2、尿素酶(Urease,脲酶)试验

副溶血性弧菌

副溶血性弧菌
研究对象:样品中是否检出副溶血性弧菌。
02 定性检测检验原理
特点:首先将样品接种到氯化钠琼脂平板和ss琼脂平板各一个,培养18-24h观察 研究对象:根据证实为副溶血性弧菌阳性的试管管数,查MPN检索表,报告每克 (毫升)副溶血性弧菌的MPN值。
检验流程
样品25g(ml)+3%氯化钠碱性蛋白胨水
36±1℃18h
副溶血性弧菌
furongxuexinghujun
制作人:刘明路
01
生物学特性
shengwuxuetexing
02
04 06
检验原理
jianyanyuanli
目录
CONTENTS
03 05
实验材料
shiyancailiao
操作步骤
caozuobuzhou
检验结果
jianyanjieguo
注意事项
zhuyishixiang
嗜盐性试 验
将上述培养物接种无盐胨水
、7%、11%氯化钠胨水 。
检验 结果
检验结果
初步鉴定 结果
副溶血性弧菌: 氧化酶试验:阳性。 涂片镜检:G-,棒状、弧状、卵圆状等多形态,无芽胞,有鞭毛。 3%氯化钠三糖铁斜面 :底层变黄不变黑,无气泡,斜面颜色不变 或红色加深,有动力。 嗜盐性试验:分别接种于不同氯化钠浓度的胰胨水中培养,在无 氯化钠和10%氯化钠的胰胨水中不生长或微弱生长,在7%氯化钠的 胰胨水中生长旺盛。
首先将样品接种到氯化钠 琼脂平板和ss琼脂平板各 一个,培养18-24h观察。 也可增菌液直接分离。
生化试验
V-P、靛基质、甲基红试验 等
第三步 第二步
第四步
第五步
第六步
可以菌落培 养

副溶血性弧菌两种增菌方法的比较

副溶血性弧菌两种增菌方法的比较

副溶血性弧菌两种增菌方法的比较摘要】目的比较普通增菌法和摇床培养增菌法对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)的增菌效果。

方法采用测量吸光度值和菌落计数检测Vp数量,直接分离法和PCR法测定方法灵敏度。

结果普通培养增菌法可使菌量在3h增加200倍,摇床培养法可增加2000倍。

1.3×102cfu/ml的Vp在普通增菌3h后可直接分离培养,3.8×101cfu/ml培养3h后可用PCR法检出;5×101cfu/ml的Vp在摇床增菌3h后可直接分离培养,2.5×100cfu/ml增菌3h后可用PCR法检出。

结论摇床培养在短时间内快速增菌效果比普通增菌法好。

【关键词】副溶血性弧菌摇床培养增菌副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是一种嗜盐性细菌,主要存在于近海岸的海水、海底沉积物和鱼类、虾类、贝类、牡蛎等海产品中,具有致病性的菌株能引起人类食物中毒,是我国沿海地区夏秋季节最常见的一种食物中毒[1]。

人可因食用被本菌污染而未煮熟的海产品而引起中毒,在细菌性食物中毒中占了很大的比例[2]。

近年来世界发病率呈上升的趋势[3],我省舟山、象山地区每年都有副溶血性弧菌引起食物中毒的报道[4,5]。

因此,副溶血性弧菌的快速检测对于食品卫生监督和出入境检验检疫均具有非常重要的意义。

副溶血性弧菌传统的分离鉴定方法主要是生化表型鉴定法,不仅耗时长,操作复杂,而且灵敏度有限,易受环境差异影响[6]。

对于含该菌较少的海产品,通过传统鉴定方法很难在短时间内检出。

因此,对样品进行快速有效增菌,可提高副溶血性弧菌检出率。

本实验对普通培养法和摇床培养法增菌效果进行比较,结果报告如下。

1 材料与方法1.1 实验菌株副溶血性弧菌ATCC 178021.2 主要试剂与仪器振荡培养箱,哈尔滨东联电子技术开发有限公司;722型紫外分光光度计,上海欣茂仪器有限公司;碱性蛋白胨水、TCBS、M-H培养基,购自杭州天和微生物试剂有限公司;DNA提取试剂盒(GK1071)购自上海捷瑞生物工程有限公司。

副溶血性弧菌使用说明

副溶血性弧菌使用说明

副溶血性弧菌编号 名称北京华越洋生物NRR00440 副溶血性弧菌基本信息:名称:副溶血性弧菌规格:300ul甘油菌储存温度:-­‐80℃基因组:副溶血性弧菌简介:副溶血性弧菌(Vibrio Parahemolyticus,VP),为革兰氏阴性杆菌,呈弧状、杆状、丝状等多种形状,无芽孢。

副溶血性弧菌是一种嗜盐性细菌,主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。

此菌对酸敏感,在普通食醋中5分钟即可杀死,对热的抵抗力较弱,对常用消毒剂抵抗力很弱,可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。

在对该菌进行培养的最适宜的培养基:温度为30℃—37℃,含盐2.5%—3%(若盐浓度低于0.5%则不生长),pH 值为8.0—8.5。

操作说明:1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。

2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

冷冻管开封:用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

菌株复溶:无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml 左右复溶液,加入到冷冻管中。

轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。

菌株复壮:用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。

做好标识,在适宜温度下培养。

细菌在30-­‐35℃培养箱中培养24-­‐48h,真菌在23-­‐28℃培养箱中培养24-­‐72h (必要时,可适当延长培养时间)。

菌株传代:将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。

注意事项:1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会导致菌种衰退;2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行;3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能正常生长;4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来电询问;5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态;培养过程中亦要保持厌氧状态;6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-­‐10%CO2 促进生长;7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。

3%氯化钠碱性蛋白胨水

3%氯化钠碱性蛋白胨水

3%氯化钠碱性蛋白胨水
3%氯化钠碱性蛋白胨水(3%NaclAlkalinePeptoneWater)
用途:
用于副溶血性弧菌增菌培养。

(GB/T4789.7-2008)
原理:
蛋白胨提供碳源、氮源、维生素、生长因子;高含量氯化钠和高pH值可以抑制非弧菌类细菌生长,不影响副溶血性弧菌生长。

配方(每升):
蛋白胨10g
氯化钠30g
最终pH8.5±0.2
使用方法
1.称取本品40g,加入蒸馏水或去离子水1L,分装三角瓶,每瓶225ml,或分装试管,每管9ml,121℃高压灭菌10min,备用。

2.定性检测将25g样品加入三角瓶,于36℃±1℃培养8h;定量检测则取上述稀释液1ml加入试管中,依次制备10倍递增稀释液,于36℃±1℃培养8h~18h。

3.观察结果。

质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃培养8h结果如下:
菌名菌号生长状况
副溶血性弧菌ATCC17802 生长良好
大肠埃希氏菌ATCC25922 增菌很少或没有
贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

规格:250g
参考文献:
1.GB/T4789.7—2008食品卫生微生物学检验标准副溶血性弧菌检验。

副溶血性弧菌检测方法

副溶血性弧菌检测方法

副溶血性弧菌检测方法
副溶血性弧菌检测方法主要有以下几种:
1. 细菌培养:将样品(如血液、粪便等)在适当的培养基上进行培养,副溶血性弧菌会在适宜条件下生长繁殖,通过观察菌落形态和生理生化特性来鉴定是否存在副溶血性弧菌。

2. PCR检测:利用聚合酶链反应(PCR)方法,通过扩增副溶血性弧菌特异性基因片段,进行定性和定量检测。

这种方法具有高度的灵敏度和特异性。

3. 免疫学检测:利用副溶血性弧菌的特异性抗原与抗体的结合反应来进行检测。

常见的方法有免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。

4. 纳米粒子检测:利用特定的纳米粒子与副溶血性弧菌的抗原或DNA结合,形成可见颜色或光信号,通过肉眼观察或仪器读取来检测副溶血性弧菌。

需要注意的是,不同检测方法的适用场景和准确性有所差异,因此在实际应用中需要根据具体情况选择合适的检测方法。

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质量控制:
下列质控菌株接种后于36℃±1℃培养18~24h结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征
副溶血性弧菌 ATCC17802 良好 肉汤浑浊
大肠埃希氏菌 ห้องสมุดไป่ตู้TCC25922 部分抑制 ----
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
实验图:
培养基配方(每升):
蛋白胨10
氯化钠60
最终pH 7.2±0.2
使用方法
1、称取本培养基70g,加入蒸馏水或去离子水1L,分装试管,每管10ml,121℃高压灭菌15min,备用。
2、选择3个连续适宜的稀释度,各吸取1mL稀释液,加入10mL培养基中,每一稀释度接种3管,于36℃±1℃培养18~24h。
名称:氯化钠蛋白胨水(60g/L)
用 途:用于副溶血性弧菌增菌培养。
副溶血性弧菌,进食含有该菌的食物致可食物中毒,也称嗜盐菌食物中毒。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。副溶血性弧菌是一种海洋细菌,主要来源于鱼、虾、蟹、贝类和海藻等海产品。
原 理:蛋白胨和提供碳源、氮源、维生素、生长因子;高氯化钠含量可以抑制非弧菌类细菌生长。
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