谷胱甘肽过氧化物酶
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谷胱甘肽过氧化物酶
开放分类:医学植物生理学
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谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力大小可以反映机体硒水平。硒是GSH-Px酶系的组成成分,它能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。NADPH的减少量则和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。GSH-Px主要包括4种:分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
编辑摘要
谷胱甘肽过氧化物酶- 简介
谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的组成成分,它能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,同时促进H2 O2的分解,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力大小可以反映机体硒水平。
谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG,而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH,通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤,因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
谷胱甘肽过氧化物酶- GSH-Px酶系
主要包括4种不同的GSH-Px,分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
胞浆GSH-Px
由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体,每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸,广泛存在于机体内各个组织,以肝脏红细胞为最多。它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应,清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基,从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。
血浆GSH-Px
构成与胞浆GSH-Px相同,主要分布于血浆中,其功能目前还不是很清楚,但已经证实与清除细胞外的过氧化氢和参与GSH的运输有关。
磷脂过氧化氢GSH-Px
是分子量为20kDa的单体,含有1个分子硒半胱氨酸。最初从猪的心脏和肝脏中分离得到,主要存在于睾丸中,其它组织中也有少量分布。其生物学功能是可抑制膜磷脂过氧化。
胃肠道专属性GSH-Px
是由4个分子量为22kDa的亚基构成的四聚体,只存在于啮齿类动物的胃肠道中,其功能是保护动物免受摄入脂质过氧化物的损害。谷胱甘肽过氧化物酶- 正常值
(1)酶速率法(37℃):2.96~83U/g•Hb
(2)比色法:127.64±12.68U/L
谷胱甘肽过氧化物酶- 结构与分类
谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)分子质量为76 ku~95 ku,为水溶性四聚体蛋白,4个亚基相同或极为类似,每个亚基有1个硒原子。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力大小可以反映机体硒水平。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GS H-Px酶系主要包括4种不同的GSH-Px,分别为:胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。第一种:胞浆GSH-Px由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体,每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸,广泛存在于机体内各个组织,以肝脏红细胞为最多。它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应,清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基,从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。第二种:血浆G SH-Px的构成与胞浆GSH-Px相同,主要分布于血浆中,其功能目前还不是很清楚,但已经证实与清除细胞外的过氧化氢和参与GSH 的运输有关。第三种:磷脂过氧化氢GSH-Px是分子量为20kDa的单体,含有1个分子硒半胱氨酸。最初从猪的心脏和肝脏中分离得到,
主要存在于睾丸中,其它组织中也有少量分布。其生物学功能是可抑制膜磷脂过氧化。第四种:胃肠道专属性GSH-Px是由4个分子量为22kDa的亚基构成的四聚体,只存在于啮齿类动物的胃肠道中,其功能是保护动物免受摄入脂质过氧化物的损害。
谷胱甘肽过氧化物酶- 化学性质
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)能催化GSH变为GSSG,使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物,同时促进H2O2的分解,从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。几乎所有的有机氢过氧化物(ROOH)都可以在GSH-Px的作用下还原为ROH。大概反应如下:2GSH +H2O2→GSSH+ 2H2O,2GSH +ROOH→GSSH + 2ROH。
GSH-Px虽然可以催化许多巯基化合物氧化,但催化效率相对很低,在所有的巯基化合物中以γ-谷胱甘肽的催化效率最高。GSH-Px愈纯,其性质愈不稳定,纯酶置冰箱中贮存,活力会降低。GSH-Px的最适pH为8~9,在pH 6及其以下,GSH-Px无活性。氰化物与叠氮化物都不能抑制GSH-Px的活性。GSH-Px的吸收光谱在400 n m~420 nm范围内。
测定牛乳中GSH-Px的活性及热稳定性,发现温度升至75 ℃加热1 5 s,GSH-Px活力大致降到原有的20%;95 ℃煮沸1 min后活性全部丧失。热稳定性较低。
谷胱甘肽过氧化物酶- 作用机制
谷胱甘肽过氧化物酶的检测
GSH-Px催化还原型谷胱甘肽氧化(GSH)与过氧化氢(H2O2)还原反应 ,从而阻断超氧化阴离子细胞类脂过氧化而损害组织细胞;还
能阻断由脂氢过氧化物(LOOH) 引发自由基的二级反应 ,从而减少L OOH对生物体的损害。而自由基是机体生化反应中产生的性质活泼、具有极强氧化能力的物质。体内抗自由基体系主要包括酶类(超氧化物歧化酶、GSH-Px、过氧化氢酶等)阻止自由基形成和通过非酶促抗氧化剂(还原型谷胱甘肽、维生素 E等)捕获不成对的电子使自由基失活。过氧化脂质 (LPO) 是自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化作用的最终产物 ,其含量的多少反映组织细胞的脂质过氧化速率或强度。机体存在阻止过氧化作用的防御体系 ,GSH-Px是细胞内抗脂质过氧化作用的酶性保护系统的主要成分 ,可催化LPO分解生成相应的醇 ,防止LPO均裂和引发脂质过氧化作用的链式支链反应 ,减少L PO的生成以保护机体免受损害。
而无论是ROOH还是H2O2都是与GSH-Px中的活性中心硒半胱氨酸作用:
E-CysSe-+ H++ ROOH(H2O2)→E-CysSeOH + ROH (H2O) E-CysSeOH +GSH→E-CysSe-SG + H2O
E-Cys-Se-SG +GSH→E-CysSe-+ GSSG + H+