有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案物质分析方法验证是确保实验室分析方法的准确性、可靠性和适用性的重要步骤。
验证方案是根据相应的法规、准则和指南来制定的，旨在提供明确的实验室管理和质量控制的标准。
以下是一个关于物质分析方法验证方案的详细描述，包括验证目标、实施步骤和结果解释。
一、验证目标1.确定分析方法是否足够准确和可靠，以满足监管机构的要求和行业标准。
2.确定分析方法的适用性，即该方法是否适用于特定样品类型和矩阵。
3.确保实验室分析设备和仪器的正确使用和性能稳定性。
二、实施步骤1.选择合适的验证样品：根据实验室所涉及的应用领域和样品类型，选择一定数量和范围的样品进行验证。
2.样品准备：对于涉及样品预处理的方法，如提取、浓缩等，按照方法要求进行样品的准备。
3.参考方法的建立：验证样品和参考方法之间的结果比较是验证方法准确性的关键步骤。
如果没有可用的参考方法，可以选择其他方法进行比较。
4.准确性评估：确定方法的准确性，包括从反应的选择性、灵敏性和偏倚等方面进行评估。
例如，可以进行内标法、标准样品法或平行样品法。
5.精密度评估：确定方法的精密度，包括重复性和中间性的评估。
例如，可以进行重复性试验和不同实验员的中间性试验。
6.确定方法的线性范围：在方法的线性范围内进行一系列稀释或浓度变化试验，确定方法的线性范围和相关系数。
7.确定方法的限值：根据参考方法或法律法规的要求，确定方法的检出限、定量限和限量限。
8.确定方法的稳定性：评估方法所需的稳定性，包括短期稳定性、中期稳定性和长期稳定性。
例如，可以进行样品在不同温度条件下的稳定性试验。
9.确认方法的适用性：根据实际应用的需求，进行方法的适用性验证，包括对样品矩阵的适应性、干扰物质的影响等。
三、结果解释1.根据验证结果，确定分析方法是否满足准确性、可靠性和适用性的要求。
如果符合要求，可进行分析实验的正式应用。
2.如果有部分验证结果不符合要求，需要进一步优化方法，重新进行验证或根据结果进行确认范围的限制。
有关物质方法验证方案
分析方法预验证方案方案名称：XXXX有关物质测定方法预验证方案方案编号：版本号：01版起草人/日期:审核人/日期:审核人/日期:批准人/日期:目录1.概述 (1)2.分析方法 (1)2.1试剂 (1)2.2对照品 (1)2.3样品 (1)2.4仪器 (1)2.5色谱条件 (2)2.6溶液的配制 (2)2.7测定方法 (3)2.8计算 (3)3.方法验证 (3)3.1验证项目、验证方法及接受标准 (3)3.2系统适用性 (5)3.3专属性 (7)3.4精密度 (11)3.5线性 (12)3.6 定量限及检测限 (15)3.7准确度 (16)3.8溶液稳定性 (18)4.版本历史 (20)1.概述本品为xxxx注射液，规格为xxxx。
本品各国药典均未收载，本方法是参照欧洲药典（EP10.4）、美国药典（USP43）、中国药典2020年版收载的xxxx原料质量标准及英国药典（BP2020）收载的xxxx注射液质量标准及xxxx注射液进口注射标准（I物质A）项下的有关物质方法，采用中国药典2020年版四部通则0512高效液相色谱法，建立了本品的有关物质方法。
本预验证实验是为了确保该分析方法能够适用于当前本品有关物质的测定。
验证参数包括：系统适用性、专属性、重复性、精密度、线性、定量限（LOQ）、检测限（LOD）、准确度和溶液稳定性。
2.分析方法2.1试剂2.2对照品2.3样品2.4仪器2.5色谱条件色谱柱：C18，250×4.6mm，5μm或效能相当的色谱柱；检测波长：XXXnm；柱温：40℃；流速：1.0ml/min；进样体积：20μl；流动相A：0.2%磷酸氢二胺（pH7.5），流动相B：甲醇-异丙醇（87:13）。
梯度洗脱条件：时间（min）流动相A（%）流动相B（%）X X XX X XX X XX X XX X X2.6溶液的配制2.6.1 流动相流动相A：取磷酸氢二胺2g，加水1000ml溶解，用磷酸调pH值至7.5，过滤，取滤液，即得；流动相B:量取甲醇1000ml，超声，即得。
药审中心：有关物质分析方法学验证的项目及可接受标准
有关物质分析方法学验证的项目及可接受标准药审中心黄晓龙药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
3．精密度1）重复性配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于15%。
2）中间精密度配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于20%。
4．专属性可接受的标准为：空白对照应无干扰，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0。
5．检测限杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。
6．定量限杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。
另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%，峰面积的相对标准差应不大于5.0%。
含量及有关物质测定分析方法验证的可接受标准简介
含量测定分析方法验证的可接受标准简介20060120化药药物评价>>化药质量控制审评四部黄晓龙摘要：本文介绍了在对含量测定所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：含量测定分析方法验证可接收标准在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。
为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005年颁布了分析方法验证的指导原则。
该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。
但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。
另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。
本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。
可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于2.0%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在80％至120％的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.998，Y轴截距应在100％响应值的2％以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。
3．精密度1）重复性配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。
含量和有关物质方法学验证方案
含量和有关物质方法学验证方案一、引言在化学领域，即便我们知道一些物质的化学式和分子结构，我们仍然需要确切地知道其含量，因为不同含量的同一种物质在性质上可能会有很大的差异。
因此，快速、准确地确定物质的含量对于化学研究以及工业生产具有重要意义。
本文将介绍一种常用的含量测定方法：滴定法，并给出详细的验证方案。
二、滴定法原理滴定法是一种准确测定溶液中其中一种物质含量的方法。
其基本原理是通过向待测液体中加入一种已知浓度溶液的滴定液，当已知浓度溶液与待测液体反应完全时，通过滴定液与待测液体的反应量来确定待测物质的含量。
三、滴定法验证方案1.实验目的本实验旨在验证滴定法测定溶液中其中一种物质含量的方法的准确性和可靠性。
2.实验材料及设备滴定管、滴定架、比色皿、移液器、烧杯、乙醇溶液、酸性钾高氯酸溶液、甲基橙指示剂。
3.实验步骤(1)准备滴定液：称取一定质量的酸性钾高氯酸溶液，稀释至适宜的体积。
(2)准备待测液：取一定体积的待测液，如乙醇溶液。
(3)加入指示剂：向待测液中加入少量的甲基橙指示剂，使待测液呈橙色。
(4)滴定测定：将滴定液从滴定管中滴入待测液中，同时轻轻搅拌。
当待测液的颜色由橙色转变为淡黄色时停止滴定。
(5)计算含量：根据滴定液的体积和浓度，计算出待测液中物质的含量。
4.实验验证(1)准确性验证：通过多次重复实验，计算出待测液中物质的平均含量，并计算其标准偏差。
如果平均含量接近理论值，并且标准偏差较小，则说明滴定法测定物质含量的准确性较高。
(2)精密度验证：通过多次重复实验，计算出待测液中物质含量的相对标准偏差。
如果相对标准偏差较小，则说明滴定法测定物质含量的精密度较高。
(3)选择适当指示剂：在实验中，如果选择的指示剂与待测液中物质反应后出现显著颜色变化，则说明该指示剂适用于该滴定反应。
(4)确定滴定液的浓度：滴定液的浓度需要根据滴定反应的化学方程式和已知反应物质的浓度进行计算。
在实验中应当使用已知浓度的标准物质进行验证滴定液的浓度。
有关物质方法验证
有关物质方法验证（以HPLC法为例）（1）系统适用性试验系统适应性试验主要是考察主成分与杂质的分离情况以及主峰参数信息，如理论塔板数、拖尾因子、分离度等，均应符合测定要求。
空白溶液、自身对照溶液、供试品溶液各进1针。
系统精密度自身对照溶液连续进样6次，峰面积RSD不大于2%，保留时间RSD不大于1% 。
（2）专属性专属性系指在其它成分可能共存的情况下，采用的方法能准确测定出被测杂质的特性。
对于原料药，可根据其合成工艺，采用各步反应的中间体（尤其是后3步反应的中间体）、非对映异构体、特定杂质、粗品等作为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的分离度是否符合要求，从而验证分析方法对工艺杂质的分离能力。
对于制剂，重点控制降解杂质。
专属性试验（用二极管阵列检测器）1、原料药溶剂自身对照供试品起始原料合成中间体特定杂质（可能会与起始原料和合成中间体重复）混合样：将起始原料、合成中间体、特定杂质加到供试品溶液中。
特定杂质的浓度一般同限度浓度，起始原料和合成中间体的浓度一般同自身对照的浓度（如果浓度过高，可能会有杂质峰干扰）。
以上样品各进一针，主要考察色谱条件能不能有效检出杂质，以及各个峰之间的分离情况，特别是主峰和特定杂质峰与相邻杂质峰的分离情况。
注：在现有标准的色谱条件下，如果有的起始原料和合成中间体的峰与主峰的分离度不符合要求或者保留时间过长，只要起始原料和合成中间体不是降解产物，可以用其它合适的色谱条件单独控制，如果粗品中未检出，以后可以不在控制。
破坏试验酸、碱、高温、光照、氧化、金属离子（选做。
一般用铁离子，因为最有可能接触到）。
为了便于比较，同时进未破坏的样品。
空白：酸碱空白、氧化空白，处理过程与样品的最终破坏条件相同。
热破坏：一般将样品溶液水浴加热或固体样品高温放置。
光照破坏：如果已经做过影响因素试验，可用光照10天的图谱代替。
氧化破坏：双氧水由于响应值较强，一般浓度不必太高，一般用几滴即可，必要时可以加热。
邻溴碘苯有关物质分析方法的验证
限度：未知单杂≤0.1%；对溴碘苯≤0.01%、间溴碘苯、邻溴硝基苯、溴苯、邻溴苯胺均≤0.1%；总杂≤1.0%。
2 有关物质分析方法验证过程
2.1 仪器与试剂
仪器：气相色谱仪、电子分析天平。
试剂试药：甲醇（色谱纯）、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、溴苯、邻溴苯胺、邻溴碘苯，详细信息见下表。
进样口温度：250℃ 检测器温度：250℃ 分流比：3:1
色谱柱流量：0.54ml/min 载气：N2
色谱柱升温程序：
溶液配制：
空白溶剂：甲醇
系统适用性溶液：称取邻溴碘苯约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，再加入溴苯、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、邻溴苯胺适量，使成每ml含邻溴碘苯10mg，溴苯、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、邻溴苯胺10ug的溶液作为系统适用性溶液。
1 绪 论
任何药品都有其相应的质量标准，其内容主要包含药品自身的性质、来源与制备工艺等。想要确保药品的安全性和有效性，就要严格控制药品的质量标准，而药品中的有关物质在药品药品的质量判断中有着举足轻重的地位，因此，对药品中的有关物质的分析方法的验证就显得尤为重要。本文主要是针对邻溴碘苯的有关物质分析方法的验证。
邻溴碘苯，又称1-溴-2-碘苯，分子式为C6H4BrI，分子量为282.91，熔点 9-10°C，沸点120-121 ºC (15 MMHG)，密度 2.203。邻溴碘苯为淡黄色至红色液体，用于氢溴酸沃替西汀等药品的有机合成，结构式如下：
测定方法：取系统适用性溶液1μl注入液相色谱仪，杂质之间分离度≥1.0，主峰与杂质之间分离度≥1.5，已知杂质按外标法计算含量，未知杂质按面积归一化法计算。
结果：
由以上数据可知，间溴碘苯和对溴碘苯保留时间一致，两个峰重合，此方法不适合用于本品检测。间溴碘苯、对溴碘苯、邻溴碘苯属位置异构体，沸点相近，考虑换用极性较强的色谱柱将以上杂质分离；由于对溴碘苯属于非遗传毒性杂质，限度较低，因此将分流比提高至3:1。
有关物质分析方法验证的可接受标准简介
有关物质分析方法验证的可接受标准简介药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
由于这些有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是我们在药品审评中一直重点关注的要点之一。
而要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，这就涉及到分析方法的筛选与验证。
从现有的申报资料看，药品研发单位已基本上意识到分析方法验证的重要性，但是对验证时各具体指标是否可行尚没有一个明确的可接受标准，从而难以对验证结果进行评判。
为解决这一问题，本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1． 准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2． 线性 线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
3．精密度1）重复性配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于15%。
有关物质分析方法验证方案
8***原料有关物质分析方法验证方案20**年**月验证方案的起草与审批方案实施日期：目录1.验证目的 (4)2.方法简介与确认范围 (4)3.标准品、供试品 (4)4.风险评估 (4)5.验证的可接受标准 (5)6.验证步骤 (6)6.1系统适应性 (6)6.2专属性 (6)6.3检测限与定量限 (8)6.4线性 (9)6.5准确度 (9)6.6精密度 (10)6.6范围 (10)6.7耐用性 (10)6.8样品测定 (11)7.偏差 (11)8.风险的接收与评审 (11)9.再验证 (11)10.确认结果评审和结论 (11)11.更改历史 (12)12. 附录 (12)1.验证目的根据法规的要求，采用非药典或其它法规未收载的分析方法应进行验证，证明采用的方法适合于相应的检测要求。
这个验证方案的目的是为验证提供具体方法参数、可接受标准和研究步骤。
2.方法简介与确认范围***原料有关物质检测方法为自行开发的液相室色谱方法。
为确保方法的准确性和可行性，为日常检测方法提供依据，现对该方法进行验证。
方法验证必须按照验证方案进行，此次验证方案提供***原料含量分析方法验证验证，包括：专属性、精密度、线性、范围、准确度、检测限&定量限、耐用性。
3.标准品、供试品3.1标准品3.2供试品4.风险评估按照《质量风险管理规程》，质量控制部和质量管理部共同对分析方法进行了风险评估，确定了需进行方法确认的项目。
具体见下表：风险评估人：评估日期：5.验证的可接受标准6.验证步骤6.1系统适应性分离度测试液：取***产品分离度标准品5mg，置于一比色管中，加稀释液10ml溶解，在95℃下水浴加热30分钟，放冷。
标准液：取***产品标准品25mg，精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解，然后用稀释液溶解并稀释至刻度；精密移取1ml，置于一100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度。
取分离度测试液进样，记录色谱图，***产品与***Δ-3异构体之间的分离度应不小于2.0。
分析方法的验证
01
准确度-原料药含量测定
01
方法1：可向原料药加入已知量杂质进行测定。
02
方法2：如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过验证的方法
准确度-杂质定量测定
精密度系指在规定的测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。
精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示
方法1：在杂质可获得的情况下，可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质与共存物质能得到分离和检出（考察测定结果是否受干扰 ）
方法2：在杂质或降解产物不能获得的情况下，专属性可通过测定含有杂质或降解产物的试样，与另一个已验证的方法或药典方法比较结果。 或对试样用强光照射，高温，高湿，酸（碱）水解或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径，并比对破坏前后检出的杂质个数。必要时进行峰纯度检查。
01
03
02
哪些检验项目需要方法验证？
方法验证内容有哪些？
验证项目
鉴别
杂质定性
杂质定量
含量测定
专属性
+
+
+
+
线性
-
-
+
+
范围
-
-
+
+
准确度
-
-
+
+
精密度-重复性
-
-
+
+
精密度-中间精密度
-
-
+
+
检测限
-
+
-
-
定量限
-
-
+
双甲脒有关物质气相分析方法验证方案
双甲脒有关物质气相分析方法验证方案方案批准目录1. 概述 (3)1.1 验证目的 (3)1.2 验证项目 (3)2. 参考资料 (4)3. 色谱条件和分析过程 (4)3.1 色谱条件 (4)3.2 分析过程 (4)4. 器材和试剂 (5)4.1 器材 (5)4.2试剂 (6)5. 验证内容 (6)5.1 系统适用性 (6)5.2 专属性 (7)5.3 检测限、定量限 (8)5.4 线性和范围 (10)5.5 准确度 (13)5.6 精密度 (16)5.7 方法耐用性 (19)5.8 溶液稳定性 (21)6. 结论 (21)7. 审核和批准 (22)8. 文件变更历史 (22)1.概述1.1 验证目的通过验证确定该方法适用于双甲脒有关物质的检测。
1.2 验证项目本方法属于杂质定量检测方法，所以需要验证的项目有：系统适用性，专属性，系统精密度，检测限和定量限，线性及范围，准确度（回收率），方法耐用性，溶液稳定性。
具体参数以及标准参考下表：2.参考资料ICH Q2(R1);EP <467>;USP <20424>.3.色谱条件和分析过程3.1 色谱条件仪器：GC，型号：检测器：UV，波长：nm色谱柱：石英毛细管柱(规格10m×0.53mm)，柱壁涂布5μm的聚硅氧烷[95%甲基，5%苯基]固定相（毛细管柱Chrompack CP-SiL 8 CB可用）柱温：起始柱温125℃，保持在125℃5分钟，然后开始以5℃每分钟的速度线性上升到270℃，然后保持270℃15分钟,进一步升温至230℃。
进样口温度：230°C检测温度：300°C载气：N2流速：12mL/min进样量：1μL3.2 分析过程溶液配制杂质a(2,4-二甲基苯胺 )贮备液：精密称取2,4-二甲基苯胺250mg于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %(W/V)。
(注意闭光冷藏保存)。
分析验证方案及要求
分析验证⽅案及要求分析⽅法验证⽅案及要求⽬的：各项⽬验证⽅案相对同⼀，并达到相应要求。
适⽤范围：适⽤于起始原料、原料药和制剂的有关物质、异构体、含量、溶出度和残留溶剂的⽅法验证。
1.参考标准及参考⽂献参考标准：USP/BP/EP/JP/CP 国标部标/进⼝注册标准符合说明/其他参考标准/参考⽂献等，并分析判断。
资料中结果和⽅案尽量以表格形式列出。
⼩数位数：所有有关物质百分含量计算过程中保留⼩数后3位，最终结果保留⼩数后2位。
如果样品特别纯，最⼤杂质也在0.01%以下，则最终结果保留⼩数后3位。
（四舍五⼊保留双）*每个项⽬各⾃始终重点保留好已知杂质（包括起始原料和中间体）、异构体、购买对照品（包括包装说明书空瓶）、⾃制对照品和粗品等。
2.1优化⽅法UV扫描（杂质可⽤DAD），确定波长、优化流动相、柱温、样品配制溶剂及浓度和进样量等。
粗品估计样品浓度（限度：限度浓度的对照溶液逢⾼⾄少⼤于LOQ两倍以上）。
模⽅法及⽅法波长不能完全确定时，可以选择双波长进⾏。
要求：优化流动相跟他每⼀个条件重复进样两针，写所有试验详细记录，注意问题讨论和结论。
图谱性能报告按有关物质放⼤⽐例打印。
最后资料体现⼏个代表性的优化过程及附图。
（⼏个参考⽅法列表，你⽐较优劣，如⽅法是在USP等法定或别的基础上优化的，则需有实验和图谱证明等同性或优越性。
并做1-n批的对⽐测试，证明结果相当）*原料和制剂报告限度、鉴定限和控制限的算法。
原料制剂中降解的未知组分超过鉴定限和控制限应该排除分析上的问题后着⼿从⼯艺、原辅料质量和贮存条件等上下功夫解决。
2.2耐⽤性有专家说考察系统适应性溶液的耐⽤性即可。
建议在专属性前优化⽅法时就做（破坏试验之前），以更好的了解⽅法本⾝；建议⽤粗品做：为兼顾到含量的系统适应性溶液的配制，可以设计系统适应性溶液为“活性成分含量的浓度+有关物质限度的浓度”。
分别考察流动相的⽐例变化按相对⽐例±5%（注意梯度计算⽅法）、流动相缓冲盐的浓度按摩尔浓度的±10%，流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5°C、检测波长变化±5nm（如UV图半峰宽）⽐较⼩则±2nm）、流速相对值变化±20%（时间和分离度达不到则减⼩）以及采⽤三根柱⼦不同批号或不同品牌的⾊谱柱（最好是在精密度时做）进⾏测定时，仪器⾊谱⾏为的变化，每个条件下按⽅法的系统适⽤性溶液（研究时按已知杂质加样品）测试两次（有关物质耐⽤性：空⽩+系统适⽤性溶液2针）共6个数据；含量耐⽤性：除系统适⽤性溶液连续进样5针，计算RSD，最后总的RSD。
含量及有关物质分析方法验证的可接受标准
溶出介质体积的选择
漏槽条件即做溶出的最佳条件，是指药物 所处释放介质的浓度远小于其饱和浓度，生理 学解释为药物在体内被迅速吸收，制剂的体外 包括释放度等测定需要模仿体内生理条件的， 满足药物溶解-吸收的过程，漏槽条件起到了 修正作用，一般释放介质的体积为药物饱和溶 液所需介质体积的3～5倍。
（3）转篮法与桨法的选择
含量及有关物质 分析方法验证的可接受标准
文章来源：药审中心 审评二部 黄晓龙
本文介绍了在对含量及有关物质测定所用的 分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接 受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
内容包括：准确度、线性、精密度、专属性、 检测限、定量限、耐用性和系统适应性 。
1.准确度
含量： 该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般 要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供 试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值 与理论值比较，计算回收率。 可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均 应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相 对标准差（RSD）应不大于2.0%。
3.精密度
含量： 1）重复性 配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析 人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供 试液含量的相对标准差应不大于2.0%。 2）中间精密度 配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个 分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得 12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。
化学药品溶出度方法研究
文章来源：审评二部 唐素芳
化学药品普通口服固体制剂 溶出度方法验证易忽视的几个问题
文章来源：审评四部审评八室 郑国钢
溶出度研究试验主要包括以下内容：
（1）溶出介质的选择 （2）溶出介质体积的选择 （3）溶出方法（转篮法与桨法）的选择 （4）转速的选择 （5）溶出度测定方法的验证 （6）溶出度均一性试验（批内） （7）重现性试验（批间）
含量和有关物质方法学验证方案
含量和有关物质方法学验证方案含量是指其中一种物质在一个给定的样品中的数量。
在实际应用中，我们常常需要确定其中一种物质的含量以及对其进行定量分析。
为了验证含量和有关物质的方法学，下面提出一种验证方案。
本文将介绍验证含量和有关物质方法学的目的、步骤和主要内容，以实现准确测定和分析物质含量的目的。
一、验证目的验证含量和有关物质方法学的主要目的是确定分析方法的准确性、可靠性和精确性，确保其能够满足要求，以得到准确的含量测定结果。
此外，还要验证该方法是否适用于不同样品的分析，并且能够满足法规和标准的要求。
二、验证步骤1.确定目标物质和参考物质：根据需要分析的样品和要求，选择目标物质和参考物质。
2.准备样品和标准溶液：将样品制备成适当的溶液，并制备一系列浓度不同的标准溶液。
3.确定分析条件和方法：确定分析条件，例如所需的仪器、设备和试剂，以及分析方法的操作步骤。
4.进行实验：按照所制定的方法，对样品和标准溶液进行实验分析。
5.数据处理：根据实验数据，使用合适的统计方法计算出含量的平均值和标准差，并进行相关性分析。
6.结果解释和讨论：根据实验结果，对分析方法进行评估和解释，并与已有的方法进行比较和讨论。
三、主要内容在验证含量和有关物质方法学时，主要进行以下几个方面的验证：1.线性范围：通过分析一系列标准溶液，确定分析方法的线性范围，即物质的浓度与测定结果之间的线性关系。
2.精确度：通过重复测定一组样品，确定方法的重复性和精确性。
计算相对标准偏差(RSD)或相对误差(RE)，以评价方法的准确性。
3.灵敏度：通过测定不同浓度的样品，确定方法的灵敏度。
计算灵敏度限(SL)或检出限(LOD)和检测限(LOQ)，判断方法的灵敏程度。
4.特异性：通过对样品进行干扰试验，确定方法对于目标物质的特异性。
确保方法只能测定目标物质，而不受其他物质的干扰。
5.稳定性：通过测定同一样品在不同条件下的含量，如不同温度，不同储存时间等，确定方法的稳定性。
有关物质分析方法验证方案模板
LGOG公司名称编号：XXXX有关物质分析方法验证方案XXX医药科技有限公司目录1. 验证目的 (2)2. 方法简介与验证范围 (2)3. 验证小组成员 (2)4. 验证条件 (2)5. 分析方法 (3)6. 系统适用性 (4)7. 专属性(强制降解试验) (5)8. 检测限和定量限 (6)9. 线性与范围 (7)10. 杂质的相对校正因子 (7)11. 精密度 (8)12. 精密度 (8)13. 准确度 (9)14. 溶液稳定性 (9)15. 耐用性 (10)16. 变更记载................................................................................. 错误!未定义书签。
1. 验证目的通过对XXXX有关物质分析方法进行验证，确定该测定方法在指定的测定系统下可以用于产品的放行以及稳定性检测，保证XXXX有关物质检验数据的准确性，并对每个验证参数设立可接受标准。
2. 方法简介与验证范围XXXX有关物质分析方法为高效液相色谱法，方法验证的内容包括：系统适用性、专属性（强制降解试验）、检测限和定量限、线性与范围、精密度（重复性和中间精密度）、准确度、溶液稳定性、方法耐用性。
3. 验证小组成员4. 验证条件4.1 仪器设备4.2 试剂4.3 供试品和对照品5. 分析方法5.1 分离度溶液的配制精密称定XXXX、杂质A、杂质B对照品各适量，加稀释剂[乙腈-甲醇-水(50：350：600)]溶解并稀释制成每1ml中含XXXX约0.xmg，以及各杂质约0.6µg的溶液，作为分离度溶液。
5.2供试品溶液和对照溶液的配制取本品，加稀释剂溶解并稀释制成每1ml中含XXXX约0.xmg，溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为贮备液，再精密移取贮备液2ml，置20ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
含量和有关物质方法学验证
含量和有关物质方法学验证（HPLC法）系统适用性试验的配制方法：在100％浓度的主成分溶液中加入1%浓度的杂质对照品，以模拟样品中有可能存在的状态。
介绍配制方法——先配制杂质贮备液，再用供试品溶液（或浓的对照品溶液）来稀释，简便、易行！检测波长的确定涉及到各被检测物质在该波长下的响应因子是否相同，即所谓重量校正因子的问题。
（f=A杂质/A被测成分）选取主成分与各杂质具有相同紫外吸收的波长（f=1.0）。
选取各杂质紫外吸收大于主成分紫外吸收的波长（f>1.0），这样可更加严格控制杂质的限度。
如选取各杂质紫外吸收小于主成分紫外吸收的波长，应必须加入重量校正因子（f<1.0），否则将得到错误的判断。
最小峰面积的设定●其设定，不是绝对值，而是相对值。
●英国药典中有明确的说明：凡有关物质的检测采用HPLC法测定时，均规定舍弃对照溶液主峰面积几分之几的峰面积。
普通样品测定时，通常为1/10~ 1/20（即相当于样品测定浓度的0.1%~0.05%）。
如规定杂质限度为1.0%，对照溶液峰面积为10000，那么，最小峰面积可考虑设定为1000~500左右。
新药稳定性考核时，可设定到0.01%的最小峰面积。
●原料药销售与购买的合同中，为确保双方达成一致意见，此点应予以重视。
检测限（将被测物溶液不断稀释后进样测定，直至被测物峰面积无法检出为止，此时的浓度即为最低检出浓度）：●信噪比的三倍——纯属“纸上谈兵”，实际测定中根本用不上。
●是相对值，不是绝对值。
是相对于供试品溶液浓度的多少分之一而言，一般至少要在5000倍以上。
供试品溶液浓度则应是最低检出浓度的2000～5000倍。
同时还应考虑仪器、色谱柱等因素对最低检出浓度和最大进样浓度的影响(即耐用性因素)，所以供试品溶液的浓度应在保证小于最大进样量的情况下，适当设定得高些，以保证该浓度在任何试验条件下，均有足够的检测灵敏度。
表1为最低检出浓度、最大进样量、供试品溶液和对照溶液间的比例关系(进样量10μl，规定杂质限度1.0％)。
HPLC有关物质分析方法验证
数据要求：需报告平均值，RSD。
6、精密性
• 报告数据：
• 1、回收率、 • 2、平均回收率、 • 3、RSD
• 评价：
• 1、回收率应为90%~110% • 2、RSD不得不小于10%
7、溶液稳定性
• 供试溶液与对照溶液分别放在室温和冷 藏下保存，分别在不同步间测定HPLC
RSD S 100% x
6、精密性
1. 反复性:
A、在相同条件下，由同一种分析人员测定所得成果旳精密度； 在要求旳范围内，至少用9次测定成果评价，如制备三个不同 浓度样品各测三次或 （回收率法） B、把被测物浓度看成100%，至少测6次进行评价。 （样品测定法）
6、精密性
2. 中间精密度 同一试验室，不同步间 由不同分析人员用不同设备所得成果旳精密 度。
如不能测得杂质旳相对响应因子，可在线测定杂 质旳有关数据，如采用二极管阵列检测器测定紫外光 谱，当杂质旳光谱与主成份旳光谱相同，则可采用原 料药旳响应因子近似计算杂质含量（本身对照法）。
5、响应因子
已知杂质相对与主成份在HPLC上旳响应比值
计算措施：
(1)可直接用主成份对照品及杂质对照品进行测定。
2、敏捷度
LOD试验措施
•空白溶剂 •系统合用性溶液5针 •杂质对照品溶液进1针 •根据上一针杂质对照品旳S/N值进行稀释进样 •直到S/N为约3时，平行进样3针。 •系统合用性溶液1针 •图谱打印： •杂质对照溶液及其稀释液均要以performance+noise格式打印。 系统合用必至少有一针用extend performance格式打印
1、专属性 报告数据：
有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案引言物质分析方法验证是确保实验室分析方法的准确性、可靠性和适用性的关键步骤。
验证过程通过实验数据和统计分析，评估分析方法在特定条件下的性能指标。
本文将介绍物质分析方法验证的目的、步骤和关键要素。
目的物质分析方法验证的主要目的是确认分析方法是否能够准确、可靠地测定目标物质的含量。
验证过程应该能够提供实验室和其他利益相关方对分析方法的性能有充分的了解。
此外，验证也有助于确定分析方法出现问题的原因并进行改进。
步骤物质分析方法的验证通常包括以下步骤：1. 确定验证计划验证计划应明确验证的目标、时间表和责任人。
在制定验证计划时，应考虑实验室内部的资源和技术要求。
2. 确定验证样品验证样品应具有代表性，并包含目标物质的不同浓度水平。
样品的制备应严格按照标准操作程序进行，以确保样品的一致性和可重复性。
3. 进行实验测试按照分析方法的操作步骤，进行实验测试。
在测试过程中，需要记录所有使用的试剂、仪器和操作条件等信息。
测试应在预定的条件下进行，并重复多次以获得可靠的结果。
4. 数据处理和统计分析对实验数据进行处理和统计分析，评估分析方法的性能指标。
常见的性能指标包括准确度、精密度、线性范围、检测限和选择性等。
统计方法如方差分析、回归分析和假设检验等可以应用于数据分析。
5. 结果的解释和报告根据验证结果，解释分析方法的准确性、可靠性和适用性。
结论应根据实验数据和统计分析结果进行支持。
验证报告应包含验证目的、步骤、结果和结论等内容，并根据需要提供必要的附表和图表。
6. 评估验证结果并持续改进评估验证结果的有效性，并采取必要的措施进行持续改进。
如果验证结果不符合预期，可能需要进行分析方法的修改、仪器的更换或操作程序的调整等。
关键要素物质分析方法验证的关键要素包括以下几点：•样品制备：确保验证样品的一致性和可重复性，并按照标准操作程序进行制备。
•试剂和仪器：确认试剂和仪器的质量和性能满足验证要求，并按照标准操作程序进行校准和使用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1.
验证目的
2.
方法简介与确认范围
3.
标准品、供试品
4.
风险评估
5.
验证的可接受标准
6.
验证步骤
6.1系统适应性
6.2专属性
6.3检测限与定量限
6.4线性
6.5准确度
6.6精密度
6.6范围
6.7耐用性
6.8样品测定
7.偏差
8.风险的接收与评审
9.再验证
10.确认结果评审和结论
11.更改历史
***原料有关物质分析方法验证方案
20**年**月
验证方案的起草与审批
验证小组成员
部门
人员
职责
验证小组组长
部门
人员
职责
负责组织起草验证方案并按批准方案组织实 施；督促验证人员做好记录；负责各阶段验证 结果汇总及评价、组织起草验证报告；组织相 关培训
方案审核
审核
签名及日期
验证委员会
方案批准
批准人
批准日期
度。主峰峰纯度应不小于0.990。
d）杂质2定位溶液：取杂质2约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解, 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
e）杂质3定位溶液：取杂质3约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解, 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
精密度
重复性RSD%10.0%
中间精密度RSD%10.0%
精密度：两组数据平均检测结果的相对偏差 <28%
范围
应至少为指标的80%~120%
耐用性
评估柱温、流速、色谱柱、缓冲盐pH、有机相比例、 流动相比例、溶液放置时间对检测结果的影响
6.验证步骤
6.1系统适应性
分离度测试液：取***产品分离度标准品5mg置于一比色管中，加稀释液10ml溶解, 在95C下水浴加热30分钟，放冷。
标准液：取***产品标准品25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解，然 后用稀释液溶解并稀释至刻度；精密移取1ml,置于一■100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度。
取分离度测试液进样，记录色谱图，***产品与***△-3异构体之间的分离度应不小于2.0。
取标准液进样，记录色谱图，***产品主峰拖尾因子应不大于2.0，理论塔板数应不低 于3000；标准液连续进样6次，主峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%，保留时间的相 对标准偏差应不大于1.0%。
j）杂质6定位溶液：取杂质6约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解， 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
k）杂质7定位溶液：取杂质7约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解, 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
风险 因素
风险
可能影响效应
现有控制措 施
S
P
D
RPN
风险 级别
建议采取措施
专属性
不具有
专属性
分离度不好，影
响杂质定量
每次试验测试
分离度
3
3
3
27
中
首次使用前，对 专属性进行验 证
疋量限
疋量限
小的杂质不能
无
3
3
3
27
中
对该方法的定
与检测
限
高
被检出
量限进行验证。
精密度
精密度
差
不同时间或人
员测定的结果
不一致
6.2专属性
a）溶剂空白：取空白进样，记录色谱图，溶剂对测定应无干扰。
b）样品液：取本品25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解，然后用稀 释液溶解并稀释至刻度。进样分析，主峰与相邻杂质之间的分离度应不小于1.5，主峰峰纯
度应不小于0.990。
c）杂质1定位溶液：取杂质1约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中ห้องสมุดไป่ตู้用乙腈5ml溶解, 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻
l）杂质8定位溶液：取杂质8约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解， 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
2.方法简介与确认范围
***原料有关物质检测方法为自行开发的液相室色谱方法。为确保方法的准确性和可 行性，为日常检测方法提供依据，现对该方法进行验证。方法验证必须按照验证方案进行, 此次验证方案提供***原料含量分析方法验证验证，包括：专属性、精密度、线性、范围、
4.风险评估
按照《质量风险管理规程》，质量控制部和质量管理部共同对分析方法进行了风险评 估，确定了需进行方法确认的项目。具体见下表：
耐用性
差
参数微小变化 对结果影响很 大
无
3
3
3
27
中
首次使用前，对 耐用性进行验 证
风险评估人:
评估日期:
5.验证的可接受标准
项目
可接受标准
专属性
空白无干扰，主峰与相邻峰之间的分离度不小于
1.5，峰纯度应不小于0.990.
检测限与定量限
<0.05%
线性
R>0.999
准确度
回收率在0.05%~质量指标的140%范围内
每次测试前进 行系统适用性 测试
3
3
3
27
中
首次使用前，对 精密度进行验 证
准确度
回收率
低
杂质结果不准 确
无
3
3
3
27
中
首次使用前，对 准确度进行验 证
线性
线性不
好
杂质结果不准 确
无
3
3
3
27
中
首次使用前，对
线性进行验证
范围
范围窄
浓度超过范围
后结果不准确
无
3
3
3
27
中
首次使用前，对
范围进行验证
耐用性
f）杂质4定位溶液：取杂质4约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解, 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
i）杂质5定位溶液：取杂质5约25mg精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解， 然后用稀释液溶解并稀释至刻度。移取5.0ml至25ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻 度。主峰峰纯度应不小于0.990。
12.附录
4..
.4..
.4.
4..
5...
6
.6...
6
.8...
9
9
1..0..
1..0..
1..0..
11
11
11
11
11
.1..2..
1..2..
1.验证目的
根据法规的要求，采用非药典或其它法规未收载的分析方法应进行验证，证明采用的 方法适合于相应的检测要求。
这个验证方案的目的是为验证提供具体方法参数、可接受标准和研究步骤。